2. 中牧股份成都华罗生物科技有限公司, 成都 610052
2. Chengdu Hualuo Sheng Technology Co. Ltd., Chengdu 610052, China
随着集约化养殖速度推进,仔猪早期断奶和超早期断奶技术的使用有效地提高了生产中母猪利用率,给生猪养殖带来了收益。但仔猪过早断奶,其断奶后1~2周内,易因诸多应激(主要为断奶应激)导致仔猪早期断奶综合征。抗生素的发现与使用,有效地缓解了这一突出性问题。相关研究表明,7~35日龄断奶仔猪饲粮添加不同组分抗生素,均有保障仔猪健康,降低腹泻及促生长的功效[1]。但随着抗生素的大量使用,宿主菌群紊乱、细菌耐药性、药物残留等相关问题变得越发突出。因此,寻找更加安全、稳定、有效的抗生素替代物成为当前最主要的工作任务之一。
植物精油(plant essential oils, PEO)是一类从植被中所提炼出的挥发性芳香物质,其成分复杂,具有广泛的生物学活性,如抗菌、抗炎、抗氧化、抗癌、杀虫等[2]。现今精油已在食品、医疗、农业等领域广泛使用。Gabriella等[3]研究发现,精油能影响瘤胃产甲烷菌活性,降低甲烷(CH4)、氨的排放,且对饲料消化及瘤胃发酵未产生不利影响;黄国清等[4]研究发现,饲粮添加牛至油能提高肉鸡生长性能,增加肠道乳酸杆菌及双歧杆菌数量,其机体抗病能力也有所提升;刁慧等[5]研究表明,饲粮添加一定剂量百里香酚混合物有增强仔猪消化道部分酶活性、加强机体消化能力及抗氧化能力、改善仔猪生长性能的功效;方秋红等[6]报道指出,断奶仔猪饲粮添加50 mg/kg肉桂油,有提高机体抗氧化能力、改善断奶仔猪营养状况的作用;Zhong等[7]研究发现,繁殖母猪饲粮添加200 mg/kg百里香酚+肉桂醛复合精油能够增强机体免疫力水平,提高母猪繁殖性能。但目前国内外有关百里香酚和肉桂醛复合精油在断奶仔猪上的应用却鲜有报道。因此,本试验旨在通过研究饲粮中添加不同水平PEO对“杜×长×大”断奶仔猪生长性能、血液指标及免疫能力的影响,以评估其是否具有缓解断奶应激、促生长的功效,为现代化生猪养殖提供参考。
1 材料与方法 1.1 试验材料硫酸黏杆菌素(colistin sulfate, CS)制剂,CS含量为10%;PEO,主要有效成分为13.5%百里香酚和4.5%肉桂醛,载体为糊精粉;CS和PEO均为中牧股份成都华罗生物科技有限公司提供。主要仪器及试剂包括化学发光仪、酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(北京诚林生物科技有限公司)、酶标仪。
1.2 试验设计及饲粮试验采用单因子设计,选用24头体况接近的“杜×长×大”断奶仔猪(30日龄),随机分为4组,每组6个重复,每个重复1头猪,单笼饲喂。各组分别饲喂在基础饲粮中添加50 mg/kg硫酸黏杆菌素制剂(CS组)及50(Ⅰ组)、100(Ⅱ组)和200 mg/kg PEO(Ⅲ组)的试验饲粮。预试期6 d,正试期14 d。基础饲粮参照NRC(2012) 断奶仔猪营养需求进行设计,基础饲粮组成及营养水平见表 1。
试验于四川农业大学雅安校区科研园进行,试验前对猪舍进行彻底清洗,并消毒。试验期间,仔猪自由采食与饮水,每日饲喂4次(08:00、12:00、16:00和20:00)。舍内温度维持在24~26 ℃,相对湿度75%~85%;每天定时打扫圈舍,试验期不对任何猪仔使用药物。
1.4 测定指标 1.4.1 生长性能于试验第1和15天08:00对仔猪空腹称重,记录猪仔体重,计算增重(DG)和平均日增重(ADG)。准确记录每天每头仔猪采食量,并计算总采食量(TFI)和平均日采食量(ADFI)。根据仔猪ADFI和ADG计算料重比(F/G)。
1.4.2 养分消化率试验第11~14天,以盐酸不溶灰分(AIA)作为内源指示剂,进行消化试验。饲料及粪便中盐酸不溶灰分、干物质(DM)、粗蛋白质(CP)、粗脂肪(EE)、粗灰分(Ash)含量及能量的测定均参照刁慧等[5]的方法进行。
1.4.3 血液指标于试验第15天07:00,采用前腔静脉采血法,采集每头仔猪新鲜血液各5 mL于乙二胺四乙酸(EDTA)管中,并送于雅安市人民医院进行血常规测定;另采集10 mL血液于普通抗凝管,常温下静置0.5 h、3 500 r/min离心10 min,取上清液装于EP管中,-20 ℃保存,采用生化发光仪进行血清生化分析。
血清中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)含量均采用猪ELISA试剂盒进行测定。
1.5 数据统计与分析试验数据采用Excel 2010进行统计,SPSS 21.0进行单因素方差分析,Duncan氏法进行多重比较,结果以平均值±标准差表示,P < 0.05为差异显著,0.05≤P < 0.10为有显著性趋势。
2 结果 2.1 PEO对断奶仔猪生长性能的影响由表 2可见,Ⅲ组断奶仔猪ADG显著高于CS组(P < 0.05),且较Ⅰ、Ⅱ组有增加的趋势(P=0.05、P=0.06);与CS组和Ⅰ相比,Ⅱ组、Ⅲ组断奶仔猪F/G均有所降低,但各组间差异不显著(P > 0.05)。
由表 3可见,Ⅰ组DM消化率显著低于其他各组(P < 0.05)。与CS组和Ⅱ组相比,Ⅲ组CP消化率有所提高(P > 0.05),且Ⅲ组较Ⅰ组有增加的趋势(P=0.07)。另外,Ⅲ组EE、能量、Ash消化率均高于其他组,但差异不显著(P > 0.05)。
由表 4可见,Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组血液白细胞计数均高于CS组,但各组间差异不显著(P>0.05);与CS组相比,Ⅰ组、Ⅲ组血液红细胞计数显著提高(P < 0.05);Ⅱ组血液平均红细胞体积显著低于Ⅰ组和CS组(P < 0.05);与Ⅱ组相比,Ⅰ组血液平均血红蛋白含量显著增加(P < 0.05);与CS组相比,Ⅱ组血液平均血红蛋白浓度显著增加(P < 0.05)。
由表 5可见,Ⅲ组血清葡萄糖含量高于其他组,但差异不显著(P > 0.05);Ⅰ组、Ⅲ组血清甘油三酯含量显著低于CS组(P < 0.05),且Ⅱ组血清甘油三酯含量较CS组有下降的趋势(P=0.05);与Ⅰ组相比,CS组和Ⅲ组血清总胆固醇含量显著降低(P < 0.05),Ⅱ组血清总胆固醇含量较Ⅰ组有下降的趋势(P=0.71);另外,Ⅲ组血清白蛋白含量显著高于其他各组(P < 0.05)。
由表 6可见,Ⅲ组血清IgG含量显著高于CS组和Ⅰ组(P < 0.05),Ⅱ组血清IgG含量较CS组和Ⅰ组也有增加,但未达到显著水平(P > 0.05);Ⅲ组血清IgA含量较CS组有上升趋势(P=0.05),且显著高于Ⅰ组(P < 0.05)。
仔猪断奶后健康是影响生猪养殖业可持续发展的重要因素。早期甚至超早期断奶技术的使用,有效地提高了繁殖母猪利用率,给养殖带来了极大利益。但仔猪过早断奶,其自身发育条件尚不完善,再加上饲养环境改变及一些管理措施不当等因素,极易诱发仔猪断奶综合征。抗生素的发现与使用,缓解了这一突出性问题。而近年来,抗生素滥用所导致的问题,如宿主菌群紊乱、细菌耐药性、药物残留等变得越发突出。此外,王瑞等[8]和阮存鑫[9]报道指出,养殖领域中抗生素使用剂量已大大超出了动物适应水平,其未能吸收与利用部分绝多数以原药和代谢产物形式排出体外,严重威胁到环境健康。目前诸多研究表明,PEO具有潜在的替代抗生素功效[4, 10-11];机体摄入PEO,可经胃肠壁完全吸收,参与代谢调控,并以安全产物形式排出体外,对机体未有损伤,且对环境也无任何危害[12-13]。
另有报道指出,PEO能够刺激机体,增加唾液、胆汁及消化道酶分泌,提高消化道酶活性[14-15],并加速成熟的肠上皮细胞更新,刺激肠绒毛发育,增加小肠消化吸收面积[16]。Huang等[17]研究表明,饲粮添加0.1% PEO(含0.3%苯甲酸)能显著提高1~14日龄断奶仔猪ADG及DM、能量表观消化率,但对ADFI、F/G无显著影响。本试验研究表明,断奶仔猪基础饲粮中添加200 mg/kg PEO,其ADG较CS组显著提高,且较Ⅰ组、Ⅱ组有增加的趋势,这与张强等[18]研究结果相似;方热军等[19]报道,饲粮添加100 mg/kg PEO能够有效地改善断奶仔猪健康,降低F/G。本试验显示,仔猪饲粮添加100、200 mg/kg PEO均可降低仔猪F/G;此外,Ⅲ组DM消化率较CS组有显著提高,CP、Ash消化率较CS组也所增加,这与Li等[20]、Zeng等[21]研究结果相似。但也有部分研究结果表明,饲粮添加PEO断奶仔猪生长性能没有显著影响[22-23]。上述结果的差异,可能与动物饲喂环境的不同、PEO组分及添加剂量的差异有关。
血液是机体内部循环流动的不透明红色液体,其有效成分可作为反映机体新陈代谢机能、组织及细胞通透性、机体健康状况的重要性指标[24]。研究表明,仔猪过早断奶,其血液成分会发生明显变化,其总蛋白、白蛋白、葡萄糖、血红蛋白含量及平均红细胞体积均较断奶前有下降,但平均红细胞血红蛋白浓度却有上升[25]。本试验结果表明,仔猪饲粮添加200 mg/kg PEO可在一定程度上提高血液中红细胞压积和血红蛋白含量,Rahimi等[26]研究也得到类似的结果。此外,Huang等[17]报道指出,饲粮添加0.1% PEO能显著提高仔猪血液中红细胞数(RBS)及淋巴细胞计数;本试验同样发现,饲粮添加50、100和200 mg/kg PEO均能有效地增加红细胞计数,但对淋巴细胞计数未产生显著影响;Ⅱ组、Ⅲ组平均血红蛋白浓度较CS组和Ⅰ组有所增加,而平均红细胞体积均低于CS组和Ⅰ组。而相关报道也表明,PEO在一定程度上能够影响机体血液,且具有加强机体对氧、营养物质及细胞代谢产物运输的作用[12]。由此可见,饲粮中添加一定水平PEO能够影响血液中有效成分含量,进而影响机体代谢水平。
方秋红等[6]研究发现,断奶仔猪饲粮添加50 mg/kg肉桂油能显著增加仔猪血清中总蛋白、白蛋白含量;刁慧等[5]研究发现,100 mg/kg百里香酚配合苯甲酸添加到断奶仔猪饲粮,显著增加了断奶仔猪第14和42天血清白蛋白含量,同时降低了血清尿素和甘油三酯含量。本试验结果表明,饲粮添加不同水平PEO,其血清总蛋白含量均不同程度高于CS组;Ⅲ组血清白蛋白含量较其他各组有显著增加,而血清甘油三酯含量显著降低于CS组,这与Rahimi等[26]和刘猛[27]研究的结果相似。另有研究表明,断奶仔猪饲粮添加0.1% PEO,显著提高了血清葡萄糖、胆固醇含量,且显著降低了血清尿素氮含量[24]。本试验结果表明,饲粮添加100、200 mg/kg PEO,血清葡萄糖含量均有所上升,血清总胆固醇含量有一定程度下降,但对血清尿素含量未产生影响。张强等[18]通过在仔猪饲粮添加PEO,研究发现PEO具有加强机体免疫球蛋白的分泌,增加血清IgG、IgA含量的作用,但对血清IgM含量没有显著影响。本试验结果表明,Ⅲ组血清IgG含量显著高于CS组和Ⅰ组,这与Li等[20]报道结果相似,但与Huang等[17]研究的结果相反,这可能与PEO添加水平及组分不同有关。本试验结果表明,饲粮添加200 mg/kg PEO对断奶仔猪血清IgA含量趋势性高于CS组,同时显著高于Ⅰ组,这与刘猛[27]报道结果相似。由此可见,饲粮添加200 mg/kg PEO(百里香酚+肉桂醛),能够影响断奶仔猪血液有效成分含量,加强机体新陈代谢代谢,提高机体免疫能力。
4 结论综上所述,饲粮添加200 mg/kg PEO具有改善血常规、增强免疫力、缓解断奶应激、促进生长性能的功效。因此,PEO在断奶仔猪上具有潜在的利用价值。
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