2. 河北科技师范学院动物科技学院, 秦皇岛 066004
2. Hebei Normal University of Science and Technology, Qinghuangdao 066004, China
维生素B2(核黄素)作为机体代谢所必需的水溶性维生素,在体内主要以黄素单核苷酸(FMN)和黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)2种形式存在,维生素B2活性成分FMN和FAD作为黄素酶类的辅基,广泛参与体内糖、脂质和蛋白质的吸收与利用,促进营养物质的消化吸收,影响动物的生长发育[1-2],促进机体免疫器官的发育及免疫细胞的增值、分化和成熟,提高机体抗氧化能力[3-7]。维生素B2缺乏会导致怀孕母貂出现死胎现象,但对公貂生育能力影响较小;维生素B2水平不足时机体生长缓慢,血红蛋白内容物减少,下层绒毛出现灰色或者白色症状[8]。维生素B2水平过高时会随尿液排出体外,一般不会引起中毒症状,过低则会出现各种缺乏症。目前,维生素B2在猪、禽上研究较为广泛。张建海等[9]研究得出,在饲粮中添加14.4 mg/kg的维生素B2,能显著提高肉鸡的平均日增重,降低料重比,促进肉鸡的生长发育。丹麦毛皮育种协会推荐的饲粮维生素B2添加水平为2.0~3.5 mg/kg[10];NRC (1982)[11]推荐的饲粮维生素B2添加水平为1.5 mg/kg,该添加水平是确保水貂不出现维生素B2缺乏症状的最低需要量。因国内外水貂品种不同,饲料组成及结构等均有差异,该推荐添加水平并不适用于我国养殖的水貂品种。因此,本试验旨在通过研究饲粮维生素B2添加水平对水貂生长性能、营养物质消化率和氮代谢的影响,以期筛选出水貂饲粮中维生素B2适宜添加水平,为我国水貂饲养行业维生素营养需要提供理论依据。
1 材料与方法 1.1 试验动物与试验设计选取(65±5)日龄、体重[(1 213.38±72.72) g]相近的健康雄性短毛黑水貂96只，随机分成6组，保证同一窝出生的水貂不在同一组内，以消除遗传因素给试验带来的误差，每组16个重复，每个重复1只。试验采用单因素随机试验设计，设置6个维生素B2添加水平梯度，分别为0(Ⅰ组，对照组)、2.5(Ⅱ组)、5.0(Ⅲ组)、10.0(Ⅳ组)、20.0(Ⅴ组)、40.0 mg/kg(Ⅵ组)。预试期为7 d，正试期为58 d。动物饲养试验在农业部长白山野生生物资源重点野外科学观测站开展。
1.2 试验饲粮与试验材料以鱼粉、鸡肉粉、肉粉、膨化玉米、玉米蛋白粉、豆粕等为主要原料，同时添加水貂生长发育所需的矿物质和维生素(不含维生素B2)，根据NRC(1982)[11]和相关文献[12-13]中关于水貂营养需要配制成育成期水貂基础饲粮，其组成及营养水平见表 1。试验所用维生素B2购自于浙江新和成股份有限公司，有效成分含量≥82.8%。
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表 1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) |
试验开始前，对水貂笼舍、水盒和饭盆进行消毒，并给水貂接种相关疫苗，每只单笼饲养。由饲养场经验丰富的饲养员于每天07:00、14:00各饲喂1次，保证自由采食和充足饮水。
1.4 测试指标与方法 1.4.1 生长性能指标试验期间每天记录给料量和剩料量，试验开始和结束时对水貂进行称重，并计算水貂的平均日采食量、平均日增重和料重比。
1.4.2 消化代谢试验于2017年8月15日到2017年8月17日进行消化代谢试验，共计3 d，采用全收粪法。采集尿液前向收集桶内注入10%的硫酸20 mL用于固氮，后期测定尿中氮含量。每天收集的粪便称重后按鲜重的5%加入10%硫酸溶液，并加少量甲苯防腐，保存于-20 ℃备用。将3 d的尿液和粪便分别混合均匀后取样，其中粪便先在80 ℃下杀菌2 h，然后降到65 ℃烘干至恒重，磨碎过40目筛，制成风干样本，以备实验室分析。
1.4.3 测定方法及计算公式饲料及粪便干物质含量采用105 ℃烘干法，参照GB/T 6435—2006；粗脂肪含量采用索氏抽提法测定，参照GB/T 6435—2006；饲料、粪便及尿液中粗蛋白质含量采用凯氏定氮法测定，参照GB/T 6435—1994；基础饲粮中维生素B2含量在农业部特种经济动植物及产品质量监督检验测试中心采用高效液相色谱法检测。
营养物质消化率及氮代谢相关指标计算公式如下：
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结果以“平均值±标准差”表示，数据用Excel 2013进行整理并用SAS 9.4软件中的GLM程序进行单因素方差分析，采用Duncan氏法进行多重比较，P<0.05为差异显著，P < 0.01为差异极显著。
2 结果 2.1 饲粮维生素B2添加水平对育成期水貂生长性能的影响由表 2可知，饲粮维生素B2添加水平极显著影响水貂的平均日增重(P＜0.01)，显著影响水貂的末重和料重比(P＜0.05)，以Ⅴ组末重、平均日增重最大，料重比最小。Ⅴ组平均日增重极显著高于Ⅰ组(P＜0.01)，显著高于Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组(P＜0.05)，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组之间差异不显著(P＞0.05)。Ⅴ组料重比极显著低于Ⅰ组(P＜0.01)，Ⅵ组显著低于Ⅰ组(P＜0.05)，Ⅴ和Ⅵ组之间差异不显著(P＞0.05)。Ⅴ、Ⅵ组末重显著高于Ⅰ组(P＜0.05)。
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表 2 饲粮维生素B2添加水平对育成期水貂生长性能的影响 Table 2 Effects of dietary vitamin B2 level on growth performance of growing minks |
由表 3可知，饲粮维生素B2添加水平极显著影响水貂粗蛋白质消化率和粗脂肪消化率(P＜0.01)，对干物质采食量、干物质排出量和干物质消化率影响不显著(P＞0.05)。饲粮维生素B2添加水平在10.0~40.0 mg/kg时，粗脂肪消化率随着饲粮维生素B2添加水平的升高呈上升趋势；Ⅵ组粗脂肪消化率最高，Ⅰ组最低，Ⅰ组极显著低于Ⅱ、Ⅴ和Ⅵ组(P＜0.01)，与Ⅳ组差异不显著(P＞0.05)。Ⅴ组粗蛋白质消化率最高，极显著高于Ⅰ组(P＜0.01)；饲粮维生素B2添加水平在5.0~20.0 mg/kg时，粗蛋白质消化率随着维生素B2添加水平的升高而呈现上升趋势。
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表 3 饲粮维生素B2添加水平对育成期水貂营养物质消化率的影响 Table 3 Effects of dietary vitamin B2 level on nutrient digestibilities of growing minks |
由表 4可知，饲粮维生素B2添加水平显著影响育成期水貂氮沉积、净蛋白质利用率和蛋白质生物学价值(P＜0.05)，对食入氮、粪氮和尿氮影响不显著(P＞0.05)。随着维生素B2添加水平增加，氮沉积呈升高趋势，以Ⅵ组最高，Ⅰ组最低；Ⅰ组氮沉积显著低于Ⅴ和Ⅵ组(P＜0.05)，与Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组差异不显著(P＞0.05)。Ⅴ组净蛋白利用率最高，显著高于Ⅰ和Ⅱ组(P＜0.05)，与Ⅲ、Ⅳ和Ⅵ组差异不显著(P＞0.05)。饲粮维生素B2添加水平在0~20.0 mg/kg时，蛋白质生物学价值随着饲粮维生素B2添加水平的升高呈上升趋势，以Ⅴ组最高，Ⅴ和Ⅵ组显著高于Ⅰ组(P＜0.05)，与Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组差异不显著(P＞0.05)。
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表 4 饲粮维生素B2水平对育成期水貂氮代谢的影响 Table 4 Effects of dietary vitamin B2 level on nitrogen metabolism of growing minks |
维生素B2作为一种具有重要调节功能的微量物质，能促进动物的生长发育[14]。王艳辉等[15]研究表明，随着饲粮维生素B2添加水平的升高，可显著提高笼养蛋雏鸭的平均日增重，提高生长性能，降低料重比。张建海等[9]和唐淑珍[16]研究发现，饲粮中添加维生素B2能显著提高肉鸡的平均日增重，降低料重比。李绍钰[17]研究发现，饲喂含10.5 mg/kg维生素B2的饲粮能显著提高高温环境下肉鸡体重，改善饲料利用率。本试验结果表明，随着维生素B2添加水平的增加，育成期水貂末重、平均日增重呈增加趋势，料重比呈降低趋势，其中以维生素B2添加水平20.0 mg/kg组(Ⅴ组)末重、平均日增重最大，料重比最低，这与上述文献报道相一致，说明适宜的维生素B2添加水平对水貂的生长发育具有促进作用。
3.2 饲粮维生素B2添加水平对育成期水貂营养物质消化率的影响研究表明，饲粮维生素B2添加水平对12月龄伊犁马[18]、生长獭兔[19]的平均日采食量均无显著影响，但对1~14日龄北京鸭平均日采食量有显著影响[20]。Barile等[21]研究表明，维生素B2主要吸收部位在小肠，部分在大肠，当食入蛋白质水解变性后，维生素从肠上皮的刷状缘状细胞膜上释放出来，进一步参加相应的生理过程。本试验结果显示，饲粮维生素B2添加水平对育成期水貂粗蛋白质消化率、粗脂肪消化率有极显著影响，整体随着添加水平的升高而呈增大趋势，这可能与维生素B2的活性成分FAD参与脂肪酸的β-氧化，促进脂质在线粒体内的氧化分解，进而提高粗脂肪消化率有关；粗蛋白质消化率的升高可能是由于机体进行生理活动时，ATP随即水解成腺苷二磷酸(ADP)，此时受到细胞能荷影响的氨基酸氧化脱氨过程中谷氨酸脱氢酶活性大大提高，进而加速氨基酸的氧化降解[2]，具体营养消化机制有待于进一步探究。在本试验条件下，饲粮维生素B2添加水平在20.0 mg/kg时水貂可获得较佳的营养物质消化率。
3.3 饲粮维生素B2添加水平对育成期水貂氮代谢的影响氮代谢指标反映动物机体对饲粮中蛋白质消化利用的情况，机体摄入含氮饲粮，在体内分解利用和吸收，一部分氮用于合成相关蛋白质储存在体内，一部分则未被吸收利用，转变成粪氮排出体外，维持体内氮代谢的平衡。有关单胃动物氮代谢指标随饲粮维生素B2添加水平变化的报道较少。周小秋[22]指出，随着饲粮维生素B2添加水平的提高，蛋白质沉积率呈增加趋势。在本试验中，随着饲粮维生素B2添加水平的增加，氮沉积随之增加，净蛋白质利用率和蛋白质生物学价值呈现先增加后降低的趋势，这与粗蛋白质消化率的趋势一致，说明维生素B2能促进机体对于蛋白质的吸收利用，后期降低可能原因是维生素B2在一定的范围内具有促进氮代谢的作用，超过这个范围会抑制蛋白质吸收利用。
4 结论综合各项指标，饲粮维生素B2添加水平为20.0 mg/kg(饲粮中维生素B2水平为23.35 mg/kg)时，育成期水貂可以获得较好的生长性能及较高的营养物质消化率、氮利用率。
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