钙磷含量占机体总灰分的70%以上,对畜禽骨骼发育发挥着重要作用[1]。钙磷不能满足畜禽正常需要会导致生长发育迟缓[2-3]、骨骼发育不良[4]、蛋品质降低[5]。常见的玉米-豆粕型饲粮中有60%~90%的磷以植酸磷(植酸在pH为3.5~10.0时可与磷结合形成稳定的络合物)形式存在,不能被单胃动物利用[6-7]。植酸酶可水解植酸,解除抗营养作用,产生能被机体利用的磷、铁、铜、锌、锰等微量矿物质[8-10],改善生产性能[11-13], 提高胫骨钙磷沉积[14], 提高蛋品质[15], 减轻环境污染[16-17]。目前植酸酶的常规使用方法为在畜禽配合饲粮中添加500 FTU/kg植酸酶[18],相对保守。研究表明,超量添加植酸酶(4倍甚至更多)可将植酸充分降解,获得更好的生产性能[19]。但植酸酶的超量添加并不是无限制的,韩进诚等[20]研究表明,植酸酶添加量为4 000 FTU/kg,生长性能及其他生理指标最佳,超出4 000 FTU/kg并无显著差异。黄羽肉鸡作为地方品种鸡,在植酸酶超量添加方面的研究较少。为此,本试验研究低钙磷饲粮中添加高剂量植酸酶(2 000、4 000 FTU/kg)对1~21日龄黄羽肉鸡生长性能、胫骨性能、血清生化指标和钙磷代谢关键基因表达量的影响,为植酸酶的超量添加在黄羽肉鸡生产中的应用提供科学依据。
1 材料与方法 1.1 试验动物及设计试验在广东省农业科学院动物科学研究所试验场进行。选用1 080只健康状况良好的1日龄岭南黄羽肉公雏,初始体重为35.83 g,根据体重一致原则随机分为6个组(每组6个重复,每个重复30只鸡):对照(PC)组(正常的磷酸氢钙添加水平,非植酸磷水平达到标准要求)、中非植酸磷(MP)组(PC组降低50%磷酸氢钙添加水平,非植酸磷水平减少1/3)、MP+2 000组(MP组+2 000 FTU/kg植酸酶)、MP+4 000组(MP组+4 000 FTU/kg植酸酶)、低非植酸磷(LP)+2 000组[PC组不添加磷酸氢钙,非植酸磷水平减少2/3+2 000 FTU/kg植酸酶)、LP+4 000组(PC组不添加磷酸氢钙,非植酸磷水平减少2/3+4 000 FTU/kg植酸酶),各组饲粮钙磷比保持在1.4 : 1.0左右(实际测得各组饲粮钙磷比为1.41 :1.00、1.40 : 1.00、1.39 : 1.00、1.42 : 1.00、1.44 : 1.00、1.45 : 1.00)。试验期21 d。
1.2 试验饲粮试验采用玉米-豆粕型饲粮,根据《中国饲料成分及营养价值表(15版)》设计饲粮配方,营养水平参考《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004),其组成及营养水平见表 1。各组饲粮除钙磷水平外,其他营养成分水平均保持一致。在配制饲粮时,植酸酶按照不同添加水平等重量替代预混料的载体玉米芯粉。本试验所需耐热性植酸酶由挑战公司友情提供,植酸酶为颗粒性,酶活性为10 000 FTU/kg,70 ℃制粒,留存率大于40%。制粒后各组饲粮样品植酸酶活性检测结果分别为0、0、2 119、4 051、2 247、4 245 FTU/kg。
试验鸡饲养于封闭式鸡舍,采用地面平养,地面铺放木屑,各组饲养管理和环境条件一致,试验鸡采食颗粒料,自由采食、饮水,按照常规饲养操作规程和免疫程序进行饲养和免疫。
1.4 样品的采集与制备试验期结束当日上午,每个重复选取接近平均体重的2只鸡称活重,翅静脉采血5 mL,室温静置1 h,离心(3 500 r/min,10 min)制备血清,置于-20 ℃冰箱保存,备测血清生化指标。采血后试验鸡颈部放血屠宰,剖取肾脏并用磷酸盐缓冲液清洗,分装于1.5 mL离心管,做好标记,立即置于液氮中,样品采集完后转移至-80 ℃冰箱保存,备测关键基因表达量。取两侧胫骨,去除胫骨表面肌肉、筋膜组织,并编号,右侧胫骨于采样当天测胫骨折断力,左侧胫骨置于-20 ℃冰箱保存,备测其他胫骨指标。
1.5 指标测定与方法 1.5.1 生长性能试验开始和结束前1天22:00断料供水,次日08:00以重复为单位称试验鸡空腹重、结料,准确记录给料量和剩料量,计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)、料重比(F/G)。试验全期每日观察鸡只健康状况和精神状态,一旦出现死鸡,立即称重和计算耗料量,以消除死鸡对整个试验结果的影响。
1.5.2 胫骨性能右侧胫骨样品采用嫩度仪(INSTRON-441型,Instron公司,美国)测胫骨折断力。左侧胫骨外送暨南大学附属第一医院核医学科测胫骨密度。测骨密度后的胫骨高温蒸煮6 min后剥离所有软组织,105 ℃烘干24 h脱水后用纯度为99.5%的乙醚浸泡96 h,65 ℃烘干4 h至恒重,称脱水脱脂重。称重后的胫骨粉碎过40目筛,混合均匀后在550 ℃马弗炉中灰化24 h,称重并计算灰分含量。灰分含量依据GB/T 6438—92的方法测定,灰分中钙含量采用乙二胺四乙酸(EDTA)直接容量法(GB/T 6436—92)测定,磷含量采用钒钼酸铵法(GB/T 6437—92)测定。
1.5.3 血清生化指标取制备好的血清测定钙(Ca)、磷(P)含量及碱性磷酸酶(AKP)活性。血清生化指标均在多功能酶标仪(Spectra Max M-5,Molecular Devices公司,美国)上测定,相关试剂盒由南京建成生物工程研究所提供,具体检测方法和结果计算参照试剂盒说明书。
1.5.4 钙磷代谢关键基因表达量称取肾脏样品80 mg,加入1 mL Trizol试剂(TaKaRa,日本)提取总RNA。按照反转录试剂盒(TaKaRa,日本)说明书将提取的RNA(1 μg)反转录为cDNA。根据GenBank中鸡的基因序列,使用Primer premier 3.0软件设计引物(表 2)。实时荧光定量PCR反应体系(20 μL):2 μL cDNA,10 μL SYBR Green 2×Mix,上、下游引物各1 μL(100 nmol/L)工作液,6 μL的ddH2O。体系反应条件:95 ℃预变性3 min;95 ℃变性15 s,退火30 s,72 ℃延伸30 s,40个循环。以表达稳定的β-肌动蛋白(β-actin)作为实时荧光定量PCR的内参基因。基因表达量采用2-ΔΔCt法计算。
试验数据采用SPSS 17.0软件中的ANOVA过程进行单因素方差分析,当处理效应差异显著时进行Duncan氏多重比较。统计显著性水平为P < 0.05,表中各组试验数据均以平均值±标准误(means±SE)表示。
2 结果 2.1 植酸酶对1~21日龄黄羽肉鸡生长性能的影响由表 3可知,与PC组相比,MP组肉鸡终末体重、ADG、ADFI降低,但差异不显著(P>0.05);MP+4 000、LP+4 000组肉鸡终末体重、ADG显著提高(P < 0.05);各植酸酶添加组肉鸡ADFI显著提高(P < 0.05)。与MP组相比,各植酸酶添加组肉鸡终末体重、ADG、ADFI均显著提高(P < 0.05),F/G有降低的趋势(P=0.088)。
由表 4可知,与PC组相比,MP组胫骨折断力降低,但差异不显著(P>0.05),MP+4 000、LP+4 000组胫骨折断力显著提高(P < 0.05);MP组胫骨脱水脱脂重、灰分和磷含量显著降低(P < 0.05)。与MP组相比,各植酸酶添加组胫骨折断力显著提高(P < 0.05);MP+4 000组胫骨脱水脱脂重显著提高(P < 0.05);MP+4 000、LP+4 000组胫骨灰分、磷含量显著提高(P < 0.05),但与PC组相比差异不显著(P>0.05);植酸酶的添加有升高胫骨钙含量的趋势(P=0.055)。
由表 5可知,与PC组相比,MP组血清磷含量显著降低(P < 0.05)。与MP组相比,MP+2000、MP+4 000、LP+4 000组血清磷含量显著升高(P < 0.05),但与PC组相比差异不显著(P>0.05);各植酸酶添加组血清钙含量有升高的趋势(P=0.054),血清AKP活性有降低的趋势(P=0.089)。
由表 6可知,与PC相比,MP组肾脏克洛索蛋白、Fgfr1基因表达量显著下调(P < 0.05),MP组肾脏1α-羟化酶基因表达量下调,但差异不显著(P>0.05)。与MP组相比,MP+4 000组肾脏克洛索蛋白、Fgfr1基因表达量显著上调(P < 0.05),但与PC组相比差异不显著(P>0.05);添加植酸酶对肾脏1α-羟化酶基因表达量影响不显著(P>0.05)。
植酸酶可降解植酸,解除植酸对微量元素、蛋白质、淀粉和脂肪的抗营养作用,产生肌醇和正磷酸,促进机体对营养物质的吸收利用,从而改善生长性能[21]。张现玲等[22]研究表明,低磷饲粮添加植酸酶可提高肉仔鸡ADG,降低F/G。Denbow等[23]研究表明,饲粮中添加植酸酶可提高肉鸡ADG,且增重效果和植酸酶的添加量呈正比。陈冠华等[24]研究表明,低非植酸磷饲粮中添加植酸酶可提高肉鸡体重、ADFI。本试验结果表明,低钙磷饲粮中分别添加2 000、4 000 FTU/kg植酸酶有降低1~21日龄黄羽肉鸡F/G的趋势,可显著提高终末体重、ADG、ADFI,且4 000 FTU/kg植酸酶的添加效果优于2 000 FTU/kg植酸酶和正常钙磷水平。这可能因为植酸酶添加量越多,植酸水解越充分,磷酸基团被释放的越完全,产生的肌醇量越多,越能促进能量代谢和养分的消化利用[25-26]。郭文文[27]研究表明,中非植酸磷加植酸酶组和低非植酸磷加植酸酶组相比,生长性能差异不显著,分析原因可能是植酸酶在低磷情况下提高养分消化率的效果更显著。本试验中低非植酸磷组优于中非植酸磷组,说明在低钙磷饲粮中添加高剂量植酸酶可改善1~21日龄黄羽肉鸡的生长性能,且剂量越高改善效果越明显。
3.2 植酸酶对21日龄黄羽肉鸡胫骨性能的影响钙磷是畜禽骨骼形成和代谢的重要矿质元素[28]。胫骨灰分、钙、磷含量及折断力、脱水脱脂重已成为评价家禽钙磷需要量的关键指标[29]。研究表明,饲粮钙磷缺乏会引起骨质疏松[30]。陈冠华等[31]研究表明,低磷饲粮中添加植酸酶可提高肉鸡股骨强度。Shirley等[32]研究表明,饲粮中添加植酸酶可提高肉鸡胫骨灰分含量。徐晓娜等[33]研究表明,低磷饲粮中添加植酸酶可提高胫骨脱水脱脂重和磷含量。王永嘉等[34]研究表明,低磷饲粮添加植酸酶可显著提高肉鸡胫骨灰分、钙、磷含量。本试验结果表明,低钙磷饲粮中添加2 000、4 000 FTU/kg植酸酶均可提高1~21日龄黄羽肉鸡胫骨折断力、脱水脱脂重、灰分和钙、磷含量,且4 000 FTU/kg植酸酶的添加效果优于2 000 FTU/kg植酸酶添加效果,但与正常钙磷添加效果相比差异不显著。这说明在肉鸡生长前期,低钙磷饲粮中添加高剂量的植酸酶可提高胫骨中钙磷的沉积量,降低钙磷缺乏对骨骼产生的影响,但植酸酶的添加也只是满足了1~21日龄黄羽肉鸡正常的胫骨生长需要。与中非植酸磷加植酸酶组相比,低非植酸磷加植酸酶组胫骨折断力和脱水脱脂重降低,分析原因可能是饲粮钙磷水平过低,添加高剂量植酸酶也无法发挥胫骨最佳性能。
3.3 植酸酶对21日龄黄羽肉鸡血清生化指标的影响血磷含量与骨骼中的磷酸盐以及组织中的含磷化合物处于动态平衡,饲粮中可利用磷缺乏时,血磷含量降低[35]。血磷含量降低,破骨细胞活动增强,骨盐降解释放入血,同时肾脏对磷的重吸收增强,血中游离钙和磷含量均升高,导致成骨细胞活动增强,AKP释放增加[36]。张现玲等[22]研究表明,低磷饲粮中添加植酸酶可升高血清磷含量,降低血清AKP活性。孙宏选等[37]研究表明,低磷饲粮中添加植酸酶可显著升高血清磷含量,且随植酸酶的增加而升高。张芹等[36]研究表明,低磷饲粮添加植酸酶,血清中钙、磷含量升高,AKP活性降低。本试验结果表明,低钙磷饲粮中添加2 000、4 000 FTU/kg植酸酶可提高1~21日龄黄羽肉鸡血清中磷含量,对血清钙含量有升高的趋势,对AKP活性有降低的趋势,与前人研究结果一致。这说明低钙磷饲粮添加高剂量植酸酶可维持1~21日龄黄羽肉鸡钙磷代谢平衡。与中非植酸磷加植酸酶组相比,低非植酸磷加植酸酶组血清钙、磷含量、AKP活性无显著差异,分析原因可能是机体自身通过多种途径调节钙磷代谢平衡,在未加植酸酶之前,不同磷水平对血清钙、磷含量、AKP活性影响本身差异不大。
3.4 植酸酶对21日龄黄羽肉鸡钙磷代谢关键基因表达量的影响克洛索蛋白是一种与衰老等疾病有关的基因,主要在肾脏和脑中表达[38]。抑制其表达后,小鼠表现出生长迟缓、骨质疏松等症状[39]。克洛索蛋白作为成纤维细胞生长因子23抗体(Fgf23)的主要协同受体,通过激活Fgf23信号通路来进一步调控肾脏对钙磷的代谢[40]。Fgf23不但需要克洛索蛋白辅助,而且需要与其受体(Fgfrs)结合才能发挥生理功能。Fgfr1存在于肾脏中,且为Fgf23的主要受体[41]。研究表明,肾脏对骨组织的影响主要表现在1α-羟化酶的活性及肾脏对钙磷代谢的调控上,1α-羟化酶活性降低,则引起骨代谢紊乱,导致骨矿化不良[42-43]。朱飞鹏等[44]研究表明,补肾中药可提高肾损伤大鼠1α-羟化酶活性,提高骨生物指标。李福兵[45]研究表明,Fgfr1缺乏可导致股骨机械性能下降,成骨细胞成骨能力异常。本研试验结果表明,低钙磷饲粮中添加2 000、4 000 FTU/kg植酸酶可提高1~21日龄黄羽肉鸡肾脏磷代谢关键基因克洛索蛋白、Fgfr1的表达,降低高磷情况下肾脏对磷的重吸收。这说明植酸酶替代磷酸氢钙可维持1~21日龄黄羽肉鸡磷代谢平衡。植酸酶的添加对肾脏1α-羟化酶基因的表达量无显著影响。这与1α-羟化酶调节钙代谢有关,本试验低钙磷饲粮添加高剂量植酸酶对胫骨钙含量和血清钙含量影响差异不显著,前后结果一致。
4 结论① 综合试验结果,低钙磷饲粮添加高剂量植酸酶可提高1~21日龄黄羽肉鸡生长性能;促进矿物元素在胫骨的沉积,改善胫骨性能;调节血液和肾脏钙磷代谢,维持机体钙磷平衡。
② 仅考虑生长性能和胫骨性能,实际生产中可选择4 000 FTU/kg植酸酶部分替代或者完全替代磷酸氢钙添加在1~21日龄玉米-豆粕型饲粮中,以达到节约成本、增加经济效益的目的。
[1] |
王子轼, 刘海霞, 顾建红, 等. 钙缺乏对蛋鸭血清骨代谢指标的影响[J]. 畜牧与兽医, 2008, 40(12): 31-34. |
[2] |
刘开武, 戴红安, 邢建成. 矿物质缺乏对家禽生理功能的影响[J]. 湖北畜牧兽医, 2008(1): 14-15. DOI:10.3969/j.issn.1007-273X.2008.01.007 |
[3] |
JIANG S, JIANG Z, ZHOU G, et al. Non-phytate phosphorus requirements and efficacy of a genetically engineered yeast phytase in male Lingnan yellow broilers from 1 to 21 days of age[J]. Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition, 2011, 95(1): 47-55. DOI:10.1111/jpn.2011.95.issue-1 |
[4] |
SHAPIRO R, HEANEY R P. Co-dependence of calcium and phosphorus for growth and bone development under conditions of varying deficiency[J]. Bone, 2003, 32(5): 532-540. DOI:10.1016/S8756-3282(03)00060-7 |
[5] |
齐红霞. 不同钙磷水平及比例对蛋鸡生产性能和蛋品质的影响[J]. 当代畜禽养殖业, 2014(6): 10-11. DOI:10.3969/j.issn.1005-5959.2014.06.004 |
[6] |
GREINER R, LIM B L, CHENG C W, et al. Pathway of phytate dephosphorylation by β-propeller phytases of different origins[J]. Canadian Journal of Microbiology, 2007, 53(4): 488-495. DOI:10.1139/W07-015 |
[7] |
孙朋朋, 宋春阳. 植酸酶的生物学功能及其在动物生产中的应用[J]. 饲料工业, 2014, 35(8): 16-19. |
[8] |
张胜燕. 植酸酶在动物生产中应用的研究进展[J]. 家畜生态学报, 2015, 36(2): 84-86. DOI:10.3969/j.issn.1673-1182.2015.02.016 |
[9] |
田冬冬, 江书忠, 刘志强, 等. 植酸酶在畜禽生产中的应用研究进展[J]. 饲料博览, 2016(11): 11-14. DOI:10.3969/j.issn.1001-0084.2016.11.003 |
[10] |
侯爽, 王昕陟. 植酸酶对畜禽微量元素利用影响的研究进展[J]. 黑龙江畜牧兽医, 2018(1): 74-76. |
[11] |
王志恒, 杨维仁, 郭宝林, 等. 不同无机磷水平日粮添加植酸酶对保育猪生长性能、血清生化指标及养分表观消化率的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2015, 46(10): 1891-1898. |
[12] |
VIVEROS A, BRENES A, ARIJA I, et al. Effects of microbial phytase supplementation on mineral utilization and serum enzyme activities in broiler chicks fed different levels of phosphorus[J]. Poultry Science, 2002, 81(8): 1172-1183. DOI:10.1093/ps/81.8.1172 |
[13] |
王晶, 季海峰, 王四新, 等. 低磷饲粮添加植酸酶对生长猪生长性能、营养物质表观消化率和排泄量的影响[J]. 中国畜牧杂志, 2017, 53(4): 70-75. |
[14] |
王德海, 杨维仁, 郭宝林, 等. 不同无机磷水平饲粮添加植酸酶对断奶仔猪骨骼钙磷代谢的影响[J]. 动物营养学报, 2016, 28(6): 1850-1858. DOI:10.3969/j.issn.1006-267x.2016.06.028 |
[15] |
李燕, 张罕星, 林映才, 等. 低磷饲粮添加植酸酶对蛋鸭产蛋性能、蛋品质和胫骨指标的影响[J]. 中国家禽, 2015, 37(14): 30-34. |
[16] |
朱金清. 饲粮中添加植酸酶减少磷酸氢钙对肥育猪生长性能的影响[J]. 养猪, 2018(1): 51-54. DOI:10.3969/j.issn.1002-1957.2018.01.019 |
[17] |
闫民朝. 植酸酶对岭南黄肉鸡饲粮粗蛋白质利用率的影响[J]. 河南畜牧兽医(综合版), 2015, 36(2): 6-7. DOI:10.3969/j.issn.1004-5090.2015.02.002 |
[18] |
郝甜甜, 杜红方. 植酸酶在饲粮中超量添加的研究进展[J]. 动物营养学报, 2017, 29(2): 382-388. DOI:10.3969/j.issn.1006-267x.2017.02.003 |
[19] |
乔伟. 植酸酶超量添加理论和应用效果[J]. 饲料工业, 2016, 37(12): 59-62. |
[20] |
韩进诚, 杨晓丹, 杨凤霞, 等. 微生物植酸酶与1-21日龄肉鸡饲粮无机磷当量模型研究[J]. 畜牧兽医学报, 2008, 39(7): 907-914. DOI:10.3321/j.issn:0366-6964.2008.07.011 |
[21] |
于明, 边连全, 程波. 低磷日粮中添加植酸酶对生长猪生产性能及饲料中磷、钙和蛋白质表观消化率的影响[J]. 畜牧与兽医, 2013, 45(2): 32-36. |
[22] |
张现玲, 梁陈冲, 于会民, 等. 新型耐热植酸酶对肉仔鸡生长性能及血清生理生化指标的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2013, 44(4): 570-576. |
[23] |
DENBOW D M, RAVINDRAN V, KORNEGAY E T, et al. Improving phosphorus availability in soybean meal for broilers by supplemental phytase[J]. Poultry Science, 1995, 74(11): 1831-1842. DOI:10.3382/ps.0741831 |
[24] |
陈冠华, 张金龙, 张宁, 等. 日粮中高剂量植酸酶对肉鸡生长性能、骨骼矿化和钙磷沉积的影响[J]. 饲料工业, 2017, 38(16): 22-29. |
[25] |
WALK C L, SANTOS T T, BEDFORD M R. Influence of superdoses of a novel microbial phytase on growth performance, tibia ash, and gizzard phytate and inositol in young broilers[J]. Poultry Science, 2014, 93(5): 1172-1177. DOI:10.3382/ps.2013-03571 |
[26] |
何忠武. 家禽饲料中的植酸[J]. 粮食与饲料工业, 2014(1): 54-57, 64. |
[27] |
郭文文.饲粮不同磷水平和钙磷比添加植酸酶对母猪和仔猪钙磷代谢的影响[D].硕士学位论文.泰安: 山东农业大学, 2015: 3-35. http://cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-10434-1015308532.htm
|
[28] |
邹磊, 冀红芹, 刘禹含, 等. 日粮钙水平对仔猪成骨细胞活性和胫骨性能的影响[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2015, 43(6): 21-27. |
[29] |
赵玉振, 王润莲, 张锐, 等. 饲粮钙水平对麒麟鸡胫骨性能和免疫器官发育的影响[J]. 西南农业学报, 2016, 29(1): 185-189. |
[30] |
FLEMING R H, MCCORMACK H A, MCTEIR L, et al. Digitised fluoroscopy (DF) predicts breaking strength in osteoporoticavian bone in vivo[J]. British Poultry Science, 1998, 39(1): 49-51. |
[31] |
陈冠华, 张金龙, 王建国, 等. 含25-羟基维生素D3日粮中植酸酶对21-42日龄肉鸡生长性能、骨骼矿化和钙磷利用的影响[J]. 中国饲料, 2016(9): 26-30. |
[32] |
SHIRLEY R B, EDWARDS H M, J r. Graded levels of phytase past industry standards improves broiler performance[J]. Poultry Science, 2003, 82(4): 671-680. DOI:10.1093/ps/82.4.671 |
[33] |
徐晓娜, 王宝维, 葛文华, 等. 植酸酶对五龙鹅屠宰性能及胫骨指标的影响[J]. 中国畜牧杂志, 2014, 50(1): 30-34. DOI:10.3969/j.issn.0258-7033.2014.01.007 |
[34] |
王永嘉, 沈益梓, 丘彩影, 等. 不同植酸酶对肉鸡生产性能和胫骨发育的影响[J]. 黑龙江畜牧兽医, 2016(14): 65-67. |
[35] |
冯定远, CAMARA C, 颜惜玲.低磷日粮中添加植酸酶对肉鸡骨骼质量的影响[M]//冯定远.酶制剂在饲料工业中的应用.北京: 中国农业科学技术出版社, 2005: 348-353.
|
[36] |
张芹, 曾福海, 邹增丁, 等. 耐热植酸酶对肉鸡生产性能、血液及骨骼钙磷含量的影响[J]. 中国饲料, 2010(3): 33-36, 41. DOI:10.3969/j.issn.1004-3314.2010.03.010 |
[37] |
孙宏选, 高秀华, 杨禄良. 玉米-豆粕型日粮中添加高剂量植酸酶对肉鸡生长性能和血清生化指标的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2011, 38(4): 11-15. |
[38] |
孙昕, 陈林, 董晓慧, 等. Klotho蛋白与疾病的研究进展[J]. 中国药理学通报, 2014, 30(2): 153-155. DOI:10.3969/j.issn.1001-1978.2014.02.002 |
[39] |
KURO-O M, MATSUMURA Y, AIZAWA H, et al. Mutation of the mouse klotho gene leads to a syndrome resembling ageing[J]. Nature, 1997, 390(6655): 45-51. DOI:10.1038/36285 |
[40] |
管旭, 赵景宏. Klotho与FGF信号通路关系的研究进展[J]. 解放军医药杂志, 2014, 26(10): 109-113. DOI:10.3969/j.issn.2095-140X.2014.10.030 |
[41] |
NAKATANI T, SARRAJ B, OHNISHI M, et al. In vivo genetic evidence for klotho-dependent, fibroblast growth factor 23(Fgf23)-mediated regulation of systemic phosphate homeostasis[J]. The FASEB Journal, 2009, 23(2): 433-441. DOI:10.1096/fj.08-114397 |
[42] |
GOBE G C, HARMON B, LEIGHTON J, et al. Radiation-induced apoptosis and gene expression in neonatal kidney and testis with and without protein synthesis inhibition[J]. International Journal of Radiation Biology, 1999, 75(8): 973-983. DOI:10.1080/095530099139737 |
[43] |
黄昶荃, 陈建梅. 老龄2型糖尿病大鼠肾1-α羟化酶与骨密度变化的研究[J]. 中国骨质疏松杂志, 2006, 12(1): 33-35. DOI:10.3969/j.issn.1006-7108.2006.01.009 |
[44] |
朱飞鹏, 王洪复, 高林峰. 补肾中药对肾脏1α羟化酶作用的探讨[J]. 上海中医药杂志, 2003, 37(12): 42-44. DOI:10.3969/j.issn.1007-1334.2003.12.021 |
[45] |
李福兵.FGFR1信号通路在小鼠骨骼发育和重建中的作用[D].博士学位论文.重庆: 第三军医大学, 2008: 8-25. http://cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-90025-2009253834.htm
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