马齿苋又称五行草，分布广，繁殖力强，有清热解毒，凉血消肿的功效，被誉为“植物杀菌剂”，2013年已被国家作为饲料原料列入《饲料原料目录》^[1]。高定付^[2]研究发现，在哺乳仔猪饲粮中添加适量的马齿苋能促进其生长发育，以添加200 g剂量效果最佳，平均日增重(ADG)提高了18.52%，料重比(F/G)降低了9.47%。施仁波等^[3]研究发现在基础饲粮中添加3%马齿苋干粉后，试验组仔猪成活率和平均每窝日增重分别比对照组高出20.4%和1.41 kg，有效预防仔猪黄白痢、下痢效果。蒋明琴等^[4]研究也表明，在基础饲粮中添加1%、3%、5%、8%马齿苋均可显著降低断奶仔猪腹泻率，促进仔猪生长，提高饲料利用率，其中以5%添加剂量效果最佳。由此可见，马齿苋是一种潜在的绿色饲料添加剂，但目前的大多数研究主要是集中在探究马齿苋添加剂量对断奶动物生长性能的作用效果，至于马齿苋中何种活性物质发挥了作用及作用机制还鲜见报道。

马齿苋多糖(POP)是马齿苋的主要活性成分之一，有抗氧化^[5]、抗衰老^[6]、抑菌及抗病毒^[7-8]、免疫调节^[9]和抗肿瘤^[10]等活性。近年来，将马齿苋多糖用作饲料添加剂的研究表明，其能提高畜禽生产性能，改善畜禽健康，李进杰等^[11]研究发现，在基础饲粮中分别添加0.05%、0.10%和0.20%马齿苋多糖可不同程度地改善断奶仔猪的生长性能，降低腹泻率，其中以0.10%添加剂量效果最佳。葛剑等^[12]对28日龄雏鸡灌胃0.5 mL质量浓度分别为2、20和40 mg/mL马齿苋多糖的研究发现，与对照组相比，不同质量浓度的马齿苋多糖均能不同程度地提高日增重、降低耗料量和料重比，结果表明马齿苋多糖可能通过调控血液激素水平提高雏鸡的生长性能和饲料转化率。从有限的研究可见，马齿苋多糖是马齿苋促进幼龄动物生长发育的活性物质，但作用效果不一，作用机制尚不明确，需进一步探究。因此, 本试验拟通过研究马齿苋多糖对早期断奶大鼠生长性能、血清生化指标和肠道形态的影响，探索马齿苋多糖调节断奶动物机体健康的效果与可能机制，为马齿苋多糖在动物生产中的应用提供参考。

1 材料与方法 1.1 材料与仪器

无特定病原体(SPF)级SD雄性断奶大鼠30只，(21±1)日龄，购买于湖南斯莱克景达试验动物有限公司[许可证号：SCXK(湘)2016-0002]；马齿苋多糖，纯度≥50%(批号:20180123)，兰州沃特莱斯生物科技有限公司产品；总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、尿素氮(UN)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)、谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、碱性磷酸酶(AKP)测定试剂盒为美国西门子医学诊断股份有限公司产品。

SC-3614台式离心机，科大创新股份有限公司中佳分公司；Dimension RxL Max型全自动生化分析仪，美国西门子公司；RM2235切片机，德国莱卡公司；EG1150包埋机，德国莱卡公司；Olympus IX53倒置显微镜，日本奥林巴斯株式会社。

1.2 动物分组及饲养

将大鼠随机分成3个组，每组10只，单笼饲养。Ⅰ组(对照组)大鼠灌胃2 mL生理盐水，Ⅱ和Ⅲ组(试验组)大鼠分别按照100、200 mg/kg BW的剂量灌胃马齿苋多糖(溶于2 mL生理盐水)，每日上午1次，连续28 d。各组大鼠均给予普通饲粮(参照GB 14924.2—2001、GB 14924.3—2010配制，由玉米、豆粕、鱼粉、草粉、磷酸氢钙、草酸钙，多种维生素和多种矿物质等组成，营养水平如下：粗蛋白质≥20%、粗脂肪≥4%、粗纤维≤5%、粗灰粉≤8%、水分≤10%、钙1.0%~1.8%、磷0.6%~1.2%、赖氨酸≥1.32%、蛋氨酸+半胱氨酸≥0.78%)，自由饮水。正式试验前，动物适应性饲养3 d。养殖试验在井冈山大学医学部动物饲养中心进行，温度维持(23±1) ℃，相对湿度约为40%，12 h白天与12 h黑夜模式。

1.3 测定指标及方法 1.3.1 生长性能测定

试验第0(试验开始前)、7、14、21、28天称重大鼠体重，试验期间每天记录大鼠的采食量，计算各组的平均初重(AIBW)、平均末重(AFBW)、平均日增重、平均日采食量(ADFI)及料重比。

1.3.2 血清生化指标测定

试验至第28天时，禁食12 h，将大鼠麻醉后心脏取血，抗凝管收集，4 ℃冰箱过夜，4 000 r/min离心10 min，分离血清于1.5 mL EP管中，置于-80 ℃冰箱保存备用。采用相应试剂盒，在Dimension RxL Max型全自动生化仪上测定血清生化指标。

1.3.3 肠道形态观察及测定

取大鼠回肠末端、结肠前端各一段，去除脂肪组织，置于10%中性甲醛固定液中，固定24 h以上。固定组织经过脱水、二甲苯透明、包埋、切片、贴片及干燥后，制作组织切片，组织切片经过脱蜡、水化、苏木精-伊红(HE)染色、脱水、透明封固后，在光学显微镜下观察并照相，图像处理系统采集图片后，采用Olympus Cellsens Entry软件测量绒毛高度和隐窝深度，计算绒毛高度/隐窝深度。

1.4 数据处理与分析

数据经Excel 2007整理后采用SPSS 19.0软件进行方差分析，有显著差异时，采用Tukey’s HSD进行多重比较。结果用“平均值±标准误”表示，P < 0.05为差异显著，P < 0.01为差异极显著。

2 结果 2.1 马齿苋多糖对早期断奶大鼠生长性能及不同时间体重的影响

由表 1和图 1可知，马齿苋多糖对断奶大鼠不同时间体重、平均日增重和平均日采食量均无显著影响(P>0.05)。与Ⅰ组相比，Ⅲ组断奶大鼠料重比降低了6.10%，差异达到显著水平(P < 0.05)，Ⅱ组和Ⅲ组之间没有显著差异(P>0.05)。

2.2 马齿苋多糖对早期断奶大鼠血清中蛋白质组分的影响

由表 2可知，马齿苋多糖极显著影响断奶大鼠血清中总蛋白、白蛋白及球蛋白含量(P < 0.01)，其中Ⅲ组提高效果尤为明显。与Ⅰ组相比，Ⅲ组血清中总蛋白、白蛋白、球蛋白含量分别提高了20.82%(P < 0.01)、25.21%(P < 0.01)、19.38%(P < 0.01)；与Ⅱ组相比，血清中总蛋白、白蛋白、球蛋白含量分别提高了10.77%(P < 0.01)、14.94%(P < 0.01)、9.40%(P < 0.05)。马齿苋多糖对断奶大鼠血清尿素氮含量无显著影响(P>0.05)。

2.3 马齿苋多糖对早期断奶大鼠血清中脂质组分和葡萄糖含量的影响

由表 3可知，马齿苋多糖极显著影响断奶大鼠血清中总胆固醇、高密度脂蛋白和葡萄糖含量(P < 0.01)。与Ⅰ组相比，Ⅲ组血清中总胆固醇、高密度脂蛋白、葡萄糖含量分别提高了23.91%(P < 0.01)、22.67%(P < 0.01)、40.30%(P < 0.01)，Ⅱ组分别提高了11.59%(P>0.05)、18.67%(P < 0.05)、45.00%(P < 0.01)，上述指标Ⅱ组和Ⅲ组之间没有显著差异(P>0.05)。马齿苋多糖对断奶大鼠血清中甘油三酯和低密度脂蛋白含量没有显著影响(P>0.05)。

2.4 马齿苋多糖对早期断奶大鼠血清代谢酶活性的影响

由表 4可知，马齿苋多糖极显著影响断奶大鼠血清谷草转氨酶及碱性磷酸酶活性(P < 0.01)。与Ⅰ组相比，Ⅱ、Ⅲ组血清中谷草转氨酶活性分别提高了21.56%(P < 0.05)和25.67%(P < 0.01)，碱性磷酸酶活性分别提高了4.80%(P>0.05)和32.20%(P < 0.01)；与Ⅱ组相比，Ⅲ组血清中碱性磷酸酶活性提高了26.16%(P < 0.01)。马齿苋多糖对血清中谷丙转氨酶活性无显著影响(P>0.05)。

2.5 马齿苋多糖对早期断奶大鼠肠道形态的影响

光学显微镜观察显示，Ⅱ、Ⅲ组回肠末端、结肠前端绒毛发育的较好，绒毛数量相对较多(图 2)。由表 5可知，与Ⅰ组相比，Ⅱ、Ⅲ组回肠绒毛高度均有所增加，但差异未达显著水平(P>0.05)；Ⅲ组回肠隐窝深度极显著降低(P < 0.01)；Ⅱ、Ⅲ组回肠绒毛高度/隐窝深度显著或极显著增加(P < 0.05或P < 0.01)。相对于Ⅰ组，Ⅱ、Ⅲ组结肠绒毛高度显著或极显著增加(P < 0.05或P < 0.01)，结肠长度则无显著变化(P>0.05)。

3 讨论 3.1 马齿苋多糖对断奶大鼠生长性能的影响

饮食、环境及断奶等因素是导致断奶动物生长性能下降的主要诱因，影响动物的健康，最终影响养殖业的经济效益。马齿苋是卫生部划定的78种药食同源野生资源之一，分布广，利用历史悠久，除了人食用外，常用作家畜饲料。蒋明琴等^[4]用鲜马齿苋饲喂断奶仔猪后发现，马齿苋能节省饲粮，并能促进仔猪生长。李进杰等^[11]研究表明，马齿苋多糖能降低断奶仔猪的腹泻率，改善生长性能。本试验结果发现，相对于对照组，200 mg/kg BW的马齿苋多糖可显著降低料重比，100和200 mg/kg BW的马齿苋多糖分别可使断奶大鼠平均日增重增加1.27%和1.97%，表明马齿苋多糖可起到节省饲粮的效果，但改善断奶大鼠生长性能的作用不明显，可能需要延长饲喂时间。

3.2 马齿苋多糖对断奶大鼠血清中蛋白质、脂质组分和葡萄糖含量的影响

血清总蛋白受蛋白质合成速度、损耗、摄入量与代谢速度等多种因素影响，其含量可间接反映饮食结构及机体对蛋白质合成代谢情况^[13]。白蛋白由肝脏合成，对于代谢旺盛的生长期动物，白蛋白是运输机体组织合成原料及代谢废物主要载体。球蛋白由免疫器官产生，与机体免疫力有关，血清中免疫球蛋白有抗体活性，可抗菌、抗病毒、增强细胞吞噬功能，是体液免疫的重要物质^[14]。本试验结果表明，200 mg/kg BW的马齿苋多糖可极显著提高断奶大鼠血清中总蛋白、白蛋白和球蛋白的含量，暗示马齿苋多糖能提升断奶大鼠机体蛋白质合成能力，增强机体免疫力功能。尿素氮是氨基酸、蛋白质的代谢终产物，是反映机体内蛋白质代谢与氨基酸之间的平衡状况，本试验结果可见马齿苋多糖未显著影响断奶大鼠机体蛋白质代谢与氨基酸的平衡。

总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白及低密度脂蛋白含量是反映机体脂类代谢水平重要指标，血清甘油三酯含量反映脂肪组织发育和脂肪积累情况，血清甘油三酯含量降低与脂肪沉积减少有关。胆固醇是机体必需的营养成分，是构成细胞的重要成分，也是固醇类激素、维生素D₃及胆汁酸合成的前体物，有促进骨骼发育和脂肪消化、提高体液免疫能力、促进血管壁修复等生理功能，但血液中胆固醇含量过高则是心血管疾病的风险因子^[15]。高密度脂蛋白和低密度脂蛋白是胆固醇在血液中结合的主要转运体，低密度脂蛋白把肝脏内合成的内源性胆固醇转运到肝外细胞，是血脂升高的主要原因，是“坏”的胆固醇；高密度脂蛋白促进胆固醇的逆向转运，是“好”的胆固醇^[16]。葡萄糖是机体内主要的能量物质，细胞重要的组成部分，是合成还原性辅酶(NADH)、还原型辅酶Ⅱ(NADPH)、乳糖及乳脂的前提物。本试验结果表明，200 mg/kg BW的马齿苋多糖能极显著提高断奶大鼠血清中总胆固醇、高密度脂蛋白及葡萄糖含量，对甘油三酯及低密度脂蛋白含量无显著影响，暗示马齿苋多糖能促进断奶大鼠机体脂类、糖类代谢，为机体细胞提供必需物质。

3.3 马齿苋多糖对断奶大鼠血清中代谢酶活性的影响

谷丙转氨酶和谷草转氨酶是肝细胞参与氨基酸转移的主要酶，在正常范围内，血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性提升有利于蛋白质的合成^[17]。杨华等^[18]试验发现，谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性的变化影响生猪断奶质量、日增质量和日瘦肉量等生产性能指标。本研究结果显示，100和200 mg/kg BW的马齿苋多糖使对断奶大鼠血清中谷草转氨酶活性显著或极显著升高，对血清谷丙转氨酶活性未产生显著影响，这与颜陶等^[19]在肉仔鸡饲粮中添加葫芦巴粉所得结果类似，暗示马齿苋多糖有促使肝脏中谷草转氨酶合成提升断奶大鼠机体蛋白质和氨基酸代谢水平的作用，且不会对肝细胞产生明显损伤。碱性磷酸酶是消化代谢的关键酶，可加速物质的摄取和转运，为二磷酸腺苷(ADP)转化为三磷酸腺苷(ATP)提供必需的无机磷酸，血清中碱性磷酸酶的活性可反映动物机体对蛋白质和脂类的代谢效率，进而反映动物的生长速度和生长性能^[20-21]。本试验结果可见，与对照组相比，Ⅲ组血清碱性磷酸酶活性极显著升高，表明马齿苋多糖能提高断奶大鼠机体蛋白质和脂类的代谢效率，促进生长，且效果在剂量上存在差异。

3.4 马齿苋多糖对断奶大鼠肠道形态的影响

肠道是机体营养物质消化和吸收的主要场所，同时肠道还有重要的屏障功能。研究表明，早期断奶易引起肠道屏障功能受损，出现小肠绒毛高度萎缩、隐窝加深等现象^[22]。绒毛高度、隐窝深度及绒毛高度/隐窝深度是衡量小肠消化能力的重要指标，隐窝内未分化细胞弥补绒毛上皮细胞的正常衰老、脱落，隐窝深度减少表明上皮细胞成熟率增加，绒毛表面积增大，吸收能力增强。李旋亮等^[23]认为小肠绒毛高度/隐窝深度下降意味着黏膜损伤、消化吸收能力降低、生长缓慢等，反之，意味着黏膜改善、消化吸收功能增强等。本试验结果可见，马齿苋多糖有增加回肠绒毛高度的趋势；相对于对照组和Ⅱ组，Ⅲ组断奶大鼠回肠隐窝深度显著或极显著降低；马齿苋多糖能显著或极显著增加回肠绒毛高度/隐窝深度及结肠绒毛高度，对结肠长度无显著影响。上述结果暗示马齿苋多糖可能被结肠微生物利用促进结肠绒毛发育，马齿苋多糖是否是通过影响肠道菌群来改善断奶动物肠道结构和功能需进一步探究。

4 结论

综上所述，给予200 mg/kg BW的马齿苋多糖可显著降低断奶大鼠的料重比、促进肠道发育，增加血清中蛋白质、胆固醇及葡萄糖的含量，增强血清中谷草转氨酶、碱性磷酸酶的活性，促进机体蛋白质、胆固醇及葡萄糖的代谢合成，从而有益断奶大鼠健康；同时，结果暗示延长饲喂马齿苋多糖时间可能对促进断奶大鼠生长发育的效果会更明显。