2. 国家肉牛产业技术体系高安试验站, 高安 330800
2. National Beef Cattle Industrial Technology System of Gaoan Test Station, Gaoan 330800, China
随着我国经济不断发展和居民生活水平不断提高,牛肉市场的需求也在逐年扩大。近年来,由于肉牛生产性能和集约化程度的提高,生产中已开始广泛使用高能量饲粮,以提高其生产性能和经济效益。但是,研究表明过高能量的饲粮会造成瘤胃上皮损伤以及瘤胃微生物群落结构的改变,引发酸中毒等影响其消化代谢,从而降低生产性能[1-2]。因此,在肉牛生产中采用适宜的饲粮能量水平尤为重要。
目前,已有学者就饲粮能量水平对肉牛瘤胃代谢、血液及激素指标进行过报道。霍路曼[3]研究低(Ⅰ组)、中(Ⅱ组)、高(Ⅲ组)饲粮能量水平对荷斯坦牛的瘤胃发酵的影响,结果表明3组间试验牛瘤胃液pH差异不显著,但Ⅱ组瘤胃液氨态氮(NH3-N)含量最低,因此Ⅱ组(5.94 MJ/kg)较其他2组有更好的能氮平衡度,可促进菌体蛋白(MCP)的合成和氮的利用。刘爽[4]研究4组不同能量水平[4.83 (A组)、5.03(B组)、5.23(C组)和5.43 MJ/kg (D组)]的饲粮对肉牛血清生化指标的影响,结果表明B、C、D组血清中高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)含量较A组显著升高,说明随着肉牛摄入能量的提高,其糖代谢和脂类代谢均增强。虽然近年来国内外已有学者对肉牛最适能量水平进行过研究,但对我国地方品种及各个生产阶段所需的肉牛最适能量水平鲜有报道,饲粮能量水平对地方肉牛品种的研究仍不够系统和深入。因此,本文以育肥前期锦江牛为对象,旨在研究该阶段肉牛最适饲粮能量水平及其代谢规律,以期为舍饲育肥期锦江牛饲粮配方的优化及健康养殖提供科学依据。
1 材料与方法 1.1 试验动物与设计本研究饲养试验于2017年1—5月在高安裕丰农牧有限公司育肥场进行。试验选取50头初始体重为(301.7±30.1) kg、体型接近、健康状况良好的锦江阉牛。采用单因素完全随机设计,将50头牛随机分为5组,即A、B、C、D和E组,每组10头牛。
1.2 试验饲粮参照《肉牛饲养标准》(NY/T 815—2004)中300 kg肉牛日增重1.2 kg所需的综合净能配制基础饲粮。A组饲喂基础饲粮,B、C、D、E组饲粮综合净能在A组基础上依次提高6%、12%、18%、24%,这5组饲粮综合净能水平分别为6.02、6.38、6.74、7.10、7.46 MJ/kg,粗蛋白质水平一致(干物质基础)。试验饲粮组成及营养水平见表 1。
试验牛采用舍饲散养的方式,饲养在同一栋牛舍的不同栏圈中,日喂2次(06:00及16:00),先喂精料后喂粗料,自由饮水,其他饲养管理按照牛场的常规程序进行。预试期10 d,正试期116 d。
1.4 消化代谢试验饲养试验结束后,每组从对应重复的栏中随机选取3头体重相近试验牛进行消化代谢试验。消化代谢试验预试期2 d,正试期3 d,每头试验牛单栏饲养,其他试验条件与饲养试验一致。试验采用全收粪法。
1.5 样品采集及测定指标 1.5.1 粪样的处理及采集每组选取体重长势相近的3头牛,采用全收粪法,每天收集每头牛全部粪便,每6 h收粪1次,将每天收集的粪样混匀、称重,取每头牛鲜粪总重的10%,再取鲜粪样500 g加20 mL 10%稀硫酸,混匀。将采集好的粪样置于烘箱中65 ℃烘干至恒重。试验结束后,将粪样粉碎后过40目筛,保存备测。
1.5.2 生长性能指标测定平均干物质采食量(ADMI):饲养试验阶段,每天准确称量与记录每个栏舍中试验牛的采食量和剩料量,最后计算试验牛的总采食量。
平均日增重(ADG):正式试验开始前,连续2 d在07:00对试验牛进行空腹称重,取平均值作为初始体重;整个试验结束后连续2 d在07:00对试验牛进行空腹称重,取平均值作为终末体重;依据2次称重平均值结合试验天数计算ADG和料重比(F/G)。
饲粮和粪样的能量分别以饲喂状态形式和风干物形式采用上海昌吉地质仪器有限公司生产的XRY-1B型氧弹热量计进行测定。饲粮和粪便中营养成分测定方法如下:
饲粮与粪样中干物质(DM)含量参照GB/T 6435—2006中烘箱干燥法测定;总能值参照ISO 9831—1998的方法,使用氧弹热量计测定;粗蛋白质(CP)含量参照GB/T 6432—1994中凯氏定氮法,使用KDY-9820凯氏定氮仪测定;中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)含量参照Van Soest等[5]方法测定;粗灰分含量参照GB/T 6438—2007中高温灼烧法测定。将饲粮样品置于550~600 ℃高温炉中,所有有机物质全部氧化后剩余残渣(粗灰分),通过原重量减去粗灰分含量, 即可得出有机物(OM)含量。
1.5.3 瘤胃液的采集及指标测定每组选取体重长势相近的3头牛,共计15头进行屠宰。屠宰前称肉牛活体重后,颈静脉放血致死。迅速打开腹腔,采集瘤胃内容物:1)取瘤胃液到50 mL离心管中直接测定pH。2)取瘤胃液到1 000 mL烧杯中,混匀,用4层纱布过滤瘤胃液到另1个500 mL烧杯中,分装入3个10 mL EP管中,每管装7~8 mL,-20 ℃保存,用于MCP和NH3-N含量的测定。3)取80 mL瘤胃液与20 mL 25%的偏磷酸混匀,分装入2个10 mL EP管中,每管装7~8 mL,-20 ℃保存,用于挥发性脂肪酸(VFA)含量测定。瘤胃液pH采用pH计(上海雷磁,pHS-3D型)测定;瘤胃液VFA含量采用CP-3800气相色谱仪测定;瘤胃液NH3-N含量参照冯宗慈等[6]方法测定;瘤胃液MCP含量采用Makkar等[7]方法测定。
1.5.4 血样的采集与检测在饲养试验结束前第3天,于晨饲前空腹采集血样,分别使用抗凝采血管(1管)、真空不抗凝采血管(4管)采集血液,使用低速离心机以1 369×g离心10 min,用微量移液器吸取离心后的上清液分装于0.5 mL的EP管中,-20 ℃冷冻保存。采用意大利YZB/ITA 0951 Fully(富利)全自动生化分析仪测定血清中GLU、TG、总胆固醇(TC)、HDL、LDL、尿素氮(UN)含量及谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性,用于测定以上指标的试剂盒均购自南京建成生物工程研究所,具体测定方法详见试剂盒说明书。采用酶联免疫吸附法测定血清中乳酸、游离脂肪酸(FFA)、极低密度脂蛋白(VLDL)及血浆中生长激素、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、胰岛素以及胰岛素样生长因子-1的含量,试剂盒购自上海笃玛生物科技有限公司,使用美国Molecular Devices公司酶标仪(Spectra Max M5)测定。
1.6 数据统计分析试验数据先采用Excel 2007进行初步处理,再用SPSS 20.0软件进行统计分析,试验结果以平均值和标准误表示。差异显著性检验采用单因子方差分析(one-way ANOVA)和Duncan氏法多重比较,P < 0.05表示差异显著。
2 结果与分析 2.1 饲粮能量水平对育肥前期锦江牛生长性能的影响由表 2可知,各组间ADG差异不显著(P > 0.05),但随着饲粮能量水平的提高而呈逐渐增加的趋势;各组ADMI随着能量水平提高呈逐渐降低趋势,但差异均不显著(P > 0.05);饲粮能量水平对各组F/G影响显著,C、D、E组F/G均显著低于A组(P < 0.05)。
由表 3可知,各组间养分表观消化率均没有显著差异(P > 0.05)。饲粮DM表观消化率随着饲粮能量水平增加而增加,其中E组的DM表观消化率最高;对于OM、CP、NDF、ADF表观消化率均呈先增加后降低的趋势。
由表 4可知,随着饲粮能量水平的提高,瘤胃液pH呈逐渐递减的趋势;瘤胃液中乙酸含量逐渐升高,丙酸含量逐渐下降,其中C、D、E组乙酸/丙酸显著低于A组(P < 0.05),而瘤胃液总挥发性脂肪酸(TVFA)含量随着饲粮能量水平的提高呈现上升趋势;C组瘤胃液NH3-N含量显著低于其余各组(P < 0.05),而瘤胃液MCP含量显著高于A组(P < 0.05)。
由表 5可知,随着饲粮能量水平的提高,血清GLU含量呈递增趋势;C和E组血清UN含量较A组分别显著降低了18.91%和20.97%(P < 0.05),C和E组血清HDL含量较A组分别显著升高了5.85%和10.53%(P < 0.05);血清乳酸、TC、TG、FFA含量及AST、ALT活性各组间差异均不显著(P > 0.05)。
由表 6可知,随着饲粮能量水平的提高,E组血浆中生长激素含量显著高于A、B、C组(P < 0.05),E组血浆胰岛素含量显著高于A组(P < 0.05)。血浆T3、T4及胰岛素样生长因子-1含量各组间均无显著性差异(P > 0.05)。
育肥前期亦为生长育肥期,主要是指肉牛生长到4~6个月或者11~18个月,此阶段肉牛生长发育最快,相对生长强度大,是肉牛育肥的关键时期[8]。李义书等[9]在研究不同能量水平的精料对15月龄日本和牛与雷琼牛杂交牛的生长性能的影响时发现,提高饲粮能量水平可显著提高该阶段肉牛育肥增重效果。这说明肉牛在育肥前期,饲粮能量水平与其日增重呈正相关,能量水平越高,日增重越快,这也与前人研究结果[10-12]一致。本次研究结果表明,随着饲粮能量水平的提高,育肥前期锦江牛各组间ADG差异不显著,但有升高的趋势。而较高能量组C、D、E组F/G显著低于A组,基本符合上述研究结果。本次试验结果中,育肥前期锦江牛随饲粮能量水平升高,各组间ADG差异不显著,可能与锦江牛是小型地方肉牛品种有关,其生长速度较慢,一定程度上影响了试验分析。而C、D、E组F/G显著低于A组,在一定程度上说明了在育肥前期提高饲粮能量水平有助于改善锦江牛的饲粮转化率。
饲粮养分表观消化率是反映饲粮组成是否合理以及各种养分是否均衡的重要指标。本次试验中,各组锦江牛的养分表观消化率随饲粮能量水平的提高均没有显著变化,推测其养分消化利用情况可能受试验动物、采食量、饲粮组成及加工方式等诸多因素的影响。武婷婷等[13]在研究用玉米替代象草增加饲粮能量水平对育肥期肉牛消化率影响时发现,各组采食量及干物质表观消化率均为高能组 > 中能组 > 低能组。本次试验中,饲粮DM表观消化率随着饲粮能量水平增加而增加,其中最高能量E组(7.46 MJ/kg)的DM消化率最高,也印证了这一说法。这说明在育肥前期,适量提高饲粮能量水平有助于提高养分消化率。
3.2 饲粮能量水平对育肥前期锦江牛瘤胃发酵的影响研究表明,瘤胃pH主要取决于饲粮中非结构性的碳水化合物的含量及瘤胃中有机酸积累和吸收率的大小。Rabelo等[14]研究发现,提高奶牛干奶期饲粮的能量水平降低了瘤胃pH, 原因是瘤胃中TVFA的快速积累。本次试验中,随着饲粮能量水平的增加,育肥前期锦江牛瘤胃液pH呈逐渐递减的趋势,而瘤胃液TVFA含量随着饲粮能量水平的提高呈现上升趋势。这与上述报道结果相一致。本次试验还发现,随着饲粮能量水平的提高,瘤胃液中乙酸含量呈下降趋势,而丙酸含量呈递增趋势。这说明适当提高饲粮能量水平,瘤胃内发酵产生的乙酸更少,丙酸更多。而丙酸是反刍动物主要的生糖物质,由于丙酸合成与瘤胃产甲烷菌需要共同的底物,二者在瘤胃发酵中存在竞争关系。因此,丙酸合成量的提高不仅有利于提高动物生产性能,而且还能降低瘤胃发酵中甲烷的产量[15]。本次试验中C、D、E组乙酸/丙酸显著低于A组,说明在适当提高饲粮能量水平后,育肥前期锦江牛瘤胃发酵趋于丙酸发酵,是最有利于提高锦江牛生长性能的发酵类型。Tas等[16]试验表明,肉牛中有超过半数的蛋白质来源于瘤胃合成的MCP。所以提高瘤胃MCP的合成是实现肉牛的精准饲养及提高饲粮利用率的关键。饲粮中的能量和蛋白质是瘤胃MCP合成的主要营养物质,当蛋白质含量一定时,能量则成为MCP的主要限制因素[17-18]。本次试验中,C组瘤胃液NH3-N含量最低,显著低于其余各组,而MCP含量最高,显著高于A组。这说明当饲粮综合净能水平为6.74 MJ/kg(C组)时,锦江牛有更好的利用NH3-N合成MCP的能力。
3.3 饲粮能量水平对育肥前期锦江牛血清生化指标的影响血液在生物体内环境的组成上有着重要的作用,动物体内机体原料和产物的代谢均是通过血液的运输来实现,血液的各项指标可以反映动物的生长性能和营养水平的高低[19]。血糖水平是动物体内能量平衡的重要指标。本次试验中,随着饲粮能量水平的提高,育肥前期锦江牛血清GLU含量呈递增趋势。推测在育肥前期,适当提高饲粮能量水平,能够增强锦江牛机体糖代谢,增加其生长速度。这一结果也与瘤胃中TVFA含量的结果相一致,因为反刍动物体内代谢的GLU大多是以瘤胃壁吸收的VFA为原料。本试验中,各组血清AST活性在正常范围内(33.89~81.32 U/L)波动,说明各组试验牛氨基酸代谢和心脏、肝脏等脏器功能处于正常状态。各组血清ALT活性也均处于正常范围内(7~32 U/L),说明动物体内肝脏代谢处于正常状态,并未增加肝脏的负担,且有利于维持动物机体内环境的稳定,利于动物生产[20]。本次试验中,C和E组血清UN含量较其余各组显著降低。研究表明,UN含量与蛋白质的利用率之间呈显著的负相关,而与饲粮蛋白质含量呈正相关。本次试验中,饲粮蛋白质水平保持一致,故可推测C和E组锦江牛较其余组有更好的蛋白质利用率。HDL能够将动物肠道中的TC和TG转移到肝脏、肾上腺和脂肪组织,并能减少TG的沉积,血液中的HDL和LDL含量的高低与体脂沉积有密切的关系[19]。本次试验中,C、E组血清HDL含量显著高于其余各组,说明动物摄入的能量水平上升,有利于锦江牛脂肪代谢的增强。
3.4 饲粮能量水平对育肥前期锦江牛血浆内源激素指标的影响生长激素是调节动物生长最主要的激素之一。Purchas等[21]研究表明,荷斯坦公牛的生长速率和日增重与血液中的生长激素含量呈正相关。本次试验结果表明,随着饲粮能量水平的提高,E组生长激素含量显著高于A、B、C组。结合育肥前期锦江牛生长性能等指标(随着饲粮能量水平的提高,育肥前期各组锦江牛ADG呈逐渐增加的趋势),这一研究结果与上述报道相一致。研究表明,胰岛素除了经典的调节血糖作用之外,还具有重要的促生长作用,胰岛素含量的升高能调节肝脏中生长素受体,并通过影响肝脏中促生长因子生成量,作用于生长激素[22]。本次试验结果中,E组血浆中胰岛素含量显著高于A组,其与对应的生长激素含量均为最高,这与上述研究机理相符。
4 结论① 本次试验结果表明,适宜的饲粮能量水平有助于育肥前期锦江牛瘤胃内环境的改善,饲粮综合净能水平为6.74 MJ/kg时,锦江牛较其余组有更好的利用NH3-N合成MCP的能力。
② 随着饲粮能量水平的提高,各组育肥前期锦江牛的机体代谢处于正常状态,通过代谢指标结果可推测,适宜的饲粮能量水平有助于提高育肥前期锦江牛的糖类和脂类代谢水平,增强蛋白质的利用率。
③ 综上所述,结合瘤胃发酵、血液生化指标等结果得出,适于育肥前期锦江牛生产的饲粮综合净能水平为6.74 MJ/kg。
[1] |
YE H M, LIU J H, FENG P F, et al. Grain-rich diets altered the colonic fermentation and mucosa-associated bacterial communities and induced mucosal injuries in goats[J]. Scientific Reports, 2016, 6: 20329. DOI:10.1038/srep20329 |
[2] |
HERNÁNDEZ J, BENEDITO J L, ABUELO A, et al. Ruminal acidosis in feedlot:from aetiology to prevention[J]. The Scientific World Journal, 2014, 2014: 702572. |
[3] |
霍路曼.饲粮能量水平对荷斯坦育成牛生长性能、瘤胃发酵及肝脏能量代谢基因表达的影响[D].硕士学位论文.保定: 河北农业大学, 2018. http://cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-10086-1018842458.htm
|
[4] |
刘爽.日粮能量、蛋白水平对架子牛生产性能和血液指标的影响[D].硕士学位论文.哈尔滨: 东北农业大学, 2016. http://cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-10224-1016106705.htm
|
[5] |
VAN SOEST P J, ROBERTSON J B, LEWIS B A. Carbohydrate methodology, metabolism, and nutritional implications in dairy cattle.Methods for dietary fiber, neutral detergent fiber, and non-starch polysaccharides in relation to animal nutrition[J]. Journal of Dairy Science, 1991, 74: 3583-3597. DOI:10.3168/jds.S0022-0302(91)78551-2 |
[6] |
冯宗慈, 高民. 通过比色测定瘤胃液氨氮含量方法的改进[J]. 畜牧与饲料科学, 2010, 31(6/7): 37. |
[7] |
MAKKAR H P, BECKER K. Purine quantification in digesta from ruminants by spectrophotometric and HPLC methods[J]. British Journal of Nutrition, 1999, 81(2): 107-112. DOI:10.1017/S0007114599000227 |
[8] |
盛英霞. 肉牛育肥的主要技术[J]. 农技服务, 2017, 34(24): 120. DOI:10.3969/j.issn.1004-8421.2017.24.105 |
[9] |
李义书, 侯冠彧, 刘诚, 等. 不同能量水平精料对日本和牛与雷琼牛杂交牛生长性能和血浆生化指标的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2018, 45(5): 1219-1225. |
[10] |
王鸿泽.日粮能量水平对舍饲育肥牦牛生产性能、瘤胃发酵及肌内脂肪代谢的影响[D].硕士学位论文.雅安: 四川农业大学, 2015. http://cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-10626-1016049266.htm
|
[11] |
李红波.不同营养水平对新疆褐牛日增重和血清生化指标、激素水平变化规律的研究[D].硕士学位论文.乌鲁木齐: 新疆农业大学, 2011. http://cdmd.cnki.com.cn/article/cdmd-10758-1011176208.htm
|
[12] |
杨玉能, 夏先林. 不同能量蛋白比日粮对肉牛育肥效果的影响[J]. 中国草食动物科学, 2015, 35(4): 43-46. DOI:10.3969/j.issn.2095-3887.2015.04.013 |
[13] |
武婷婷, 王敏, 郭辉, 等. 不同能量水平的象草饲粮对肉牛生长、消化及血清生化指标的影响[J]. 动物营养学报, 2018, 30(3): 1178-1184. DOI:10.3969/j.issn.1006-267x.2018.03.044 |
[14] |
RABELO E, REZENDE R L, BERTICS S J, et al. Effects of transition diets varying in dietary energy density on lactation performance and ruminal parameters of dairy cows[J]. Journal of Dairy Science, 2003, 86(3): 916-925. DOI:10.3168/jds.S0022-0302(03)73674-1 |
[15] |
崔安, 李振, 曹阳春, 等. 不同精粗比日粮对秦川肉牛甲烷产量和瘤胃发酵的影响[J]. 家畜生态学报, 2016, 37(9): 35-40. DOI:10.3969/j.issn.1673-1182.2016.09.007 |
[16] |
TAS B M, SUSENBETH A. Urinary purine derivates excretion as an indicator of in vivo microbial N flow in cattle:a review[J]. Livestock Science, 2007, 111(3): 181-192. DOI:10.1016/j.livsci.2007.05.010 |
[17] |
TAZZOLI M, TROCINO A, BIROLO M, et al. Optimizing feed efficiency and nitrogen excretion in growing rabbits by increasing dietary energy with high-starch, high-soluble fibre, low-insoluble fibre supply at low protein levels[J]. Livestock Science, 2015, 172: 59-68. DOI:10.1016/j.livsci.2014.12.006 |
[18] |
BELANCHE A, DOREAU M, EDWARDS J E, et al. Shifts in the rumen microbiota due to the type of carbohydrate and level of protein ingested by dairy cattle are associated with changes in rumen fermentation[J]. The Journal of Nutrition, 2012, 142(9): 1684-1692. DOI:10.3945/jn.112.159574 |
[19] |
潘军, 曹玉凤, 吕超, 等. 菌糠对肉牛生长性能和血液生理生化指标的影响[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2011, 39(1): 21-28. |
[20] |
刘莹莹.补饲水平对放牧杂交肉牛生产性能和血液生化指标的影响[D].硕士学位论文.长沙: 湖南农业大学, 2008. http://cdmd.cnki.com.cn/article/cdmd-10537-2009091051.htm
|
[21] |
PURCHAS R W, MACMILLAN K L, HAFS H D. Pituitary and plasma growth hormone levels in bulls from birth to one year of age[J]. Journal of Animal Science, 1970, 31(2): 358-363. DOI:10.2527/jas1970.312358x |
[22] |
LEE C Y, HUNT D W, GRAY S L, et al. Secretory patterns of growth hormone and insulin-like growth factor-Ⅰ during peripubertal period in intact and castrate male cattle[J]. Domestic Animal Endocrinology, 1991, 8(4): 481-489. DOI:10.1016/0739-7240(91)90017-E |