2. 宁夏回族自治区水产加护推广站, 银川 750001;
3. 吴忠市红寺堡区天源良种羊繁育养殖有限公司, 吴忠 751900;
4. 宁夏回族自治区畜牧工作站, 银川 750001;
5. 赢创德固赛(中国)投资有限公司, 北京 100600
2. Ningxia Hui Autonomous Region Aquatic Products Extension Station, Yinchuan 750001, China;
3. Hongsipu District Tianyuan Well-Bred Sheep Breeding Co., Ltd., Wuzhong 751900, China;
4. Ningxia Hui Autonomous Region Husbandry Workstation, Yinchuan 750001, China;
5. Evonik Degussa(China) Co., Ltd., Beijing 100600, China
饲粮蛋氨酸(Met)与家畜机体平衡状态和生产性能密切相关，能够显著提高营养物质消化率，参与机体蛋白质合成，促进细胞增殖和动物生长[1-2]。Met作为甲基供体参与机体关键代谢反应，影响脂质代谢和肉质氧化状态并参与肌酸形成，促进肌肉构建和能量生成[3-5]。Weiss[6]研究发现，饲粮添加瘤胃保护性蛋氨酸(RP-Met)可提高牛奶蛋白质含量。Zhou等[7]研究发现，奶牛饲粮中添加RP-Met可增加过渡期干物质采食量并改善血清生化指标。李雪玲等[1]研究表明，饲粮中添加Met会显著影响羔羊氮沉积量、氮利用效率和氮的生物学价值。由于在瘤胃微生物的作用下Met会被大量降解，DL-Met在瘤胃中只能稳定3~4 h[8]，导致到达小肠的Met较少，限制了反刍动物对Met的利用。目前随着瘤胃保护技术的提高和成熟，RP-Met在反刍动物生产中的应用越来越广泛。
滩羊作为宁夏地方良种，主要分布在宁夏中部干旱荒漠带，其肉质细嫩，营养丰富，久负盛名。近年来，为保护生态环境，滩羊生产方式转变为以舍饲为主，对其生长性能和胴体品质带来了一定负面影响，舍饲滩羊生产亟待提质增效。因此，本试验旨在探讨饲粮添加RP-Met对舍饲滩羔羊的生长、消化、血清生化指标及胴体品质的影响，以期为舍饲滩羊生产提质增效提供依据和参考。
1 材料与方法 1.1 试验动物与饲粮试验选择遗传背景一致、平均体重为(19.06±0.46) kg的健康去势公滩羔羊64只，随机分成4组，分别饲喂在基础饲粮中添加0(对照)、0.03%、0.06%和0.09% RP-Met的饲粮，每组4个重复(栏)，每个重复4只，单栏饲喂。预试期7 d，正试期85 d。基础饲粮参考NRC(2007)营养需要配制，其组成及营养水平见表 1。RP-Met由赢创德固赛(中国)投资有限公司馈赠，为白色颗粒状，DL-蛋氨酸含量为80%，过瘤胃率为85%，小肠消化率为90%。
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表 1 基础饲粮组成及营养水平(干物质基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (DM basis) |
试验羊编号，饲养在半开放式羊舍内，通风良好，预试期7 d后开始正式试验，每天08:00和16:00分2次饲喂，自由饮水。每天根据前1天剩余料情况，调整饲喂量，为保证羊的增重及饱食，应保证饲粮有少量剩余，且剩余量应 < 5%。按羊场常规程序进行消毒、驱虫和免疫。
1.3 检测指标与方法 1.3.1 饲粮成分测定饲粮干物质、粗蛋白质、钙、磷含量分别参照中华人民共和国国家标准GB/T 6435—1986、GB/T 6432—1994、GB/T 6436—2002和GB/T 6437—2002推荐方法测定，中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量参照张丽英[9]编著的《饲料分析及饲料质量检测技术》中方法进行测定。
1.3.2 生长性能指标测定于试验开始和结束时，早晨空腹个体称重，计算平均日增重(ADG)；每天饲喂前清理料槽并对剩料进行称重记录，计算平均日采食量(ADFI)；根据平均日采食量和平均日增重计算饲料转化效率(FCR)。
1.3.3 养分表观消化率测定试验第50天，每重复随机选取2只试验滩羊进行消化代谢试验，采用消化代谢笼全收粪法进行，适应3 d后连续收粪4 d，每12 h收集1次鲜粪并称重，按照粪重的10%加入10%稀硫酸固氮，-20 ℃保存，最后将4 d的样品混合后烘干粉碎，测定收集粪样的干物质、粗蛋白质、有机物、中性洗涤纤维及酸性洗涤纤维含量，测定方法参照张丽英[9]主编《饲料分析及饲料质量检测技术》。养分表观消化率计算公式：
某养分表观消化率(%)=100×(该养分的食入量-粪中该养分含量)/该养分的食入量。
1.3.4 血清生化指标测定试验第85天，禁食12 h后，颈静脉采血5 mL，置于离心管中，1 980×g、4 ℃离心15 min，收集血清，置于-20 ℃冰箱保存。采用全自动生化分析仪(TBA-40FR，日本东芝公司)，通过比色法测定血清尿素氮(UN)、葡萄糖(GLU)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、总胆固醇(TC)的含量，试剂盒购自南京建成生物工程研究所，按照说明书要求进行操作。
1.3.5 屠宰性能指标测定试验期第85天，采血后屠宰，滩羊宰杀放血后，剥去毛皮，除去头、内脏及前肢膝关节和后肢趾关节以下部分，静置30 min后称重为胴体重；计算胴体重与宰前活体重的比值，为屠宰率；分别计算净肉重和骨头重占胴体重的比值，为GR值，即第12和13根肋骨间距脊椎中轴线11 cm处皮下组织的厚度。
1.4 统计方法采用SAS 8.2的一般线性模型(GLM)统计分析，组间差异利用Duncan氏法进行多重比较，P < 0.05作为差异显著判断标准。利用线性和二次曲线多项式评估RP-Met对滩羊生长性能、胴体品质、饲粮养分表观消化率和血清生化指标的影响。
2 结果与分析 2.1 瘤胃保护性蛋氨酸对滩羔羊生长性能的影响由表 2可知，与对照组相比，饲粮添加RP-Met对滩羊平均日采食量无显著影响(P>0.05)，但饲粮添加0.06%或0.09% RP-Met显著提高了平均日增重和终末体重(P < 0.05)，显著改善了饲料转化效率(P < 0.05)。
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表 2 瘤胃保护性蛋氨酸对滩羔羊生长性能的影响 Table 2 Effects of RP-Met on growth performance of Tan lambs |
由表 3可知，与对照组相比，饲粮添加RP-Met对酸性洗涤纤维表观消化率无显著影响(P> 0.05)；随饲粮RP-Met添加量的增加，饲粮中干物质、粗蛋白质、有机物、中性洗涤纤维表观消化率呈线性增加(P < 0.05)。
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表 3 瘤胃保护性蛋氨酸对滩羊饲粮养分表观消化率的影响 Table 3 Effects of RP-Met on dietary nutrient apparent digestibility of Tan lambs |
由表 4可知，不同组间血清GLU、GLB和TC含量差异不显著(P>0.05)；与对照组相比，饲粮中添加0.06% RP-Met后血清中TP和ALB含量显著上升(P < 0.05)，UN含量显著降低(P < 0.05)。
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表 4 瘤胃保护性蛋氨酸对滩羊血清生化指标的影响 Table 4 Effects of RP-Met on serum biochemical parameters of Tan lambs |
由表 5可知，与对照组相比，饲粮添加0.06%和0.09% RP-Met显著提高了滩羊的屠宰率(P < 0.05)；饲粮添加0.06%和0.09% RP-Met显著提高了净肉重/胴体重(P < 0.05)，饲粮中添加0.03% RP-Met对净肉重/胴体重无显著影响(P>0.05)；饲粮添加RP-Met对胴体骨重/胴体重无显著影响(P>0.05)。
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表 5 瘤胃保护性蛋氨酸对滩羔羊胴体品质的影响 Table 5 Effects of RP-Met on carcass quality of Tan lambs |
Met作为动物生长过程中蛋白质合成的主要限制性氨基酸，对提高动物生长性能、饲粮中蛋白质利用和降低氮排放方面具有重要意义[10]。直接在反刍动物饲粮中添加Met会被瘤胃微生物吞噬、降解，降低Met生物学利用效率。RP-Met可以避免氨基酸被瘤胃微生物降解，进而通过瘤胃进入小肠被吸收。反刍动物饲粮中添加RP-Met可以提高蛋白质的合成和氮的利用率[11]。动物生长性能提高时，如果小肠氨基酸转运、吸收和利用及微生物蛋白产量受到限制，特别是限制性氨基酸的需求量[11]。反刍动物饲粮中添加RP-Met可以提高蛋白质的合成和氮的利用率[12]。此外，Met具有广泛调控细胞信号通路的功能，Met缺乏很容易诱发机体组织的氧化应激和炎症，进而影响机体的关键代谢[13]。RP-Met还可代谢生成聚胺促进机体细胞增殖，增加生长激素(GH)含量，进而促进动物生长发育[14]。因此，充足的Met供给对维持机体代谢途径的正常运转具有重要意义。本试验在滩羔羊饲粮中添加RP-Met，发现对滩羊平均日采食量影响不显著，但可显著改善平均日增重和饲料转化率，说明添加RP-Met可以增加小肠氨基酸转运、吸收和利用，从而提高滩羊的生长性能和蛋白质的利用率。张乃锋等[15]研究发现，RP-Met能够提升羔羊的生长性能，特别是在平均日增重和饲料转化效率上氨基酸的添加作用明显。王萌等[8]发现饲粮中添加0.40% RP-Met可以提高滩羊平均日增重和生长性能。
干物质作为饲粮中营养物质的主要载体，其表观消化率是评价动物对饲粮营养物质消化吸收的重要指标[16]。饲粮中适宜的氨基酸水平可促进营养物质的最大吸收。Met作为反刍动物限制性氨基酸，能够调节氨基酸协同和平衡性[17]。Met作为酶合成的必需氨基酸，可增加瘤胃内氨态氮含量，促进瘤胃微生物合成，影响消化酶的成分和活性，最终增强饲粮的反刍降解[10, 18]，从而增强营养物质的消化吸收。本试验发现，随着饲粮RP-Met添加量的增加，饲粮养分中干物质、粗蛋白质、有机物和中性洗涤纤维表观消化率显著增加。郝薪云等[19]研究发现，饲粮添加0.32% Met可显著提高母羊驼粗蛋白质、酸性洗涤纤维、中性洗涤纤维和粗纤维表观消化率。王杰等[10]研究发现，低Met含量会降低湖羊的养分表观消化率，与本试验结果相似。
3.2 瘤胃保护性蛋氨酸对舍饲滩羊血清生化指标的影响血清生化指标可直观反映出机体对营养物质吸收利用及健康状况[20]。根据研究，低Met可显著降低血清中胰岛素(ISN)的含量，ISN可促进GLU进入细胞，促进糖原的合成，提高糖的利用率和蛋白质的合成[14]。RP-Met可促进肝细胞脂蛋白组装，并增强糖异生[21]。但在本试验滩羊血清中GLU含量组间差异不显著；血清UN是由机体肝脏对非蛋白氮及蛋白质分解代谢、大肠对氮的吸收及氨基酸脱氨合成，是评价机体蛋白质利用率与氮平衡的重要指标。机体氨基酸平衡时，UN含量下降[16]。本试验发现，血清UN含量在饲粮添加0.06% RP-Met时最低，表明在饲粮中添加0.06% RP-Met，滩羊体内氨基酸处于相对平衡状态；动物血清中ALB和TP可反映机体蛋白质消化利用状态和免疫功能，机体氨基酸含量不足或吸收障碍时，直接表现为血清ALB和TP含量下降[1, 22]。血清ALB含量主要表现在维持血浆胶体渗透压，可形成结合蛋白参与物质运输。张成喜等[23]研究发现，饲粮中补饲RP-Met可以提高奶牛血清中TP和ALB含量, 降低GLU和UN含量。本试验结果表明，随着饲粮RP-Met添加量的增加，血清中ALB和TP含量显著上升且在添加0.06% RP-Met时含量最高，说明饲粮添加0.06% RP-Met在一定程度上可促进滩羊对蛋白质的消化吸收，提高免疫能力。
3.3 瘤胃保护性蛋氨酸对舍饲滩羊胴体品质的影响胴体品质是衡量动物生产性能和测定羔羊不同阶段生长发育状况的重要指标[24]。本试验研究发现，饲粮添加RP-Met显著提高了羔羊屠宰率和净肉重/胴体重。Met是蛋白质中主要的含硫氨基酸，对脂肪和重金属的分解起着关键作用。Met作为甲基供体参与机体肝脏糖脂代谢相关通路，RP-Met可增加肝脏三酰甘油输出并因此减少脂质沉积，GR值直接反映胴体脂肪含量[7, 14, 25]，说明在饲粮中添加0.06% RP-Met可促进脂肪分解, 降低滩羊脂肪沉积。周玉香等[25]研究发现，饲粮中添加6.0 g/(d·只)RP-Met可增加GR值和胴体脂肪重，与本试验结果不一致，可能是因为饲粮添加Met过量造成多余蛋白质转化为能量，导致体脂沉积。高岩等[26]研究发现，RP-Met可增加荷斯坦奶公牛屠宰率、净肉重、胴体重和肉骨比。
4 结论在舍饲滩羊的饲粮中添加RP-Met对滩羊生长、消化、血清生化指标及胴体品质具有积极调控作用，添加量以0.06%为宜。
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