2. 兰陵县畜牧发展促进中心, 临沂 277700
2. Animal husbandry development promotion center in Lanling County, Linyi 277700, China
硒作为动物生长必需的一种微量元素,在促进动物生长、繁殖、免疫、抗氧化及提高肉品质方面起着重要的作用。Hemingway[1]发现羊缺硒会引起白肌病、生长缓慢、肌营养不良、母羊腹泻、不育、羊毛生长受阻,在我国的西北、华北、西南地区均有白肌病的报道。根据《肉羊饲养标准》(NY/T 816—2004)[2]规定,20~50 kg肉用育肥羊硒的推荐量为0.18~0.31 mg/kg,而山东位于严重缺硒地区,因此,饲粮中补充硒元素成为预防硒缺乏的主要措施。硒的有益剂量与毒性剂量之间的范围狭窄,高于有益需求的水平就会产生毒性,而硒的毒性取决于硒的化学结构,通常情况下,有机硒较无机硒相比毒性小[3]。补硒过量动物会产生急、慢性中毒,表现为食欲下降、心脏和肾皮质出血、肌肉痉挛等症状[4]。酵母硒是唯一经过美国FDA和欧盟认证的有机硒源。于英杰等[5]研究结果证明,饲粮中添加硒含量相同的酵母硒和亚硒酸钠时,有机硒的毒性远远低于无机硒。秦顺义等[6]研究表明,有机硒(酵母硒)提高羔羊机体硒状态以及机体抗氧化能力的效果要优于无机硒(亚硒酸钠);妊娠期母羊补硒可预防羔羊出生后缺硒,增加羔羊的日增重,促进羔羊的生长发育,且有机硒的效果优于亚硒酸钠。Yue等[7]在太行黑山羊羔羊饲粮中添加0.3~0.5 mg/kg蛋氨酸硒显著提高了日增重,显著降低了料重比,显著改善羔羊机体的抗氧化功能。施安等[8]报道,在试验第30天,当饲粮中添加3.78 mg/kg硒,羔羊肉的失水率显著高于对照组和添加2.52 mg/kg硒组,饲粮中添加2.52 mg/kg硒能改善羔羊的肉品质。本试验探讨酵母硒对35~60 kg杜寒杂交羊生长性能、氮代谢指标、肉品质及硒沉积的影响,旨在确定杜寒杂交羊饲粮中酵母硒的适宜添加量,为杜寒杂交羊饲粮中酵母硒的合理添加提供参考依据。
1 材料与方法 1.1 试验动物及饲养管理试验选用体重相近(34 kg左右)、健康状况良好的杜寒杂交断奶羔羊40只,随机分为4组,每组10只试验羊,试验羊单栏单只饲养,于每天06:00、18:00饲喂,自由采食,自由饮水。按养殖厂的常规程序进行免疫和消毒。预试期10 d,正试期70 d。
1.2 试验饲粮基础饲粮参照《肉羊饲养标准》(NY/T 816—2004)配制,其组成及营养水平见表 1。每组饲粮分别在基础饲粮中添加0(对照)、0.2、0.4、0.8 mg/kg硒,硒的添加形式为酵母硒(购自安琪福邦酵母硒,其规格为2 000 mg/kg)。饲粮中硒含量的实测值分别为0.04(对照)、0.32、0.54、0.76 mg/kg。用制粒机将饲粮压成直径4 mm的全价颗粒饲料,通风避光处备用。
试验结束前6天,每组随机选取试验羊3只,放入代谢笼,每笼1只试验羊,进行消化代谢试验,预试期3 d,采样期3 d。试验期间采用全收粪法,样品的采集、处理、化验分析均按照常规方法进行。
采食量测定:每天准确称取每只羊的给料量,并回收当天剩余料量,计算每天的采食量。
粪样的制备:采用全收粪法每天收集试验羊的粪便并称重,取出每只羊每天总排粪量的10%,放入广口瓶,加入10%的硫酸进行固氮,使粪样完全浸泡在10%的硫酸中,最后将每只羊3 d的粪样进行充分混合,用于测定粪氮的含量。另取出该试验羊每天收集粪样的10%,并将该试验样3 d的粪样混合,65 ℃烘干制成风干粪样,用于其他常规成分含量的测定。
尿样制备:每天收集羊的总尿量,量取体积,并取出总尿量的10%,放入集尿瓶,加10%的硫酸固氮,用于测定尿氮含量,另取总尿量的10%,放入集尿瓶,用于尿能的测定。
饲养试验结束后,从每个试验组中随机选取3只羊进行屠宰,所有被屠宰的羔羊在屠宰前24 h停止喂料,宰前2 h停止喂水,屠宰后的胴体沿背中线分半,右半部分进行常规屠宰指标测定,并取相应的肉样,进行肉品质测定。
1.4 测定指标与方法 1.4.1 常规营养成分含量测定氮(GB/T 6432—2018)[9]、干物质(GB/T 6435—2014)[10]、中性洗涤纤维(GB/T 20806—2006)[11]、酸性洗涤纤维(NY/T 1459—2007)[12]、钙(GB/T 6436—2002)[13]、磷(GB/T 6437—2002)[14]、硒(GB/T 13883—2008)[15]、粗脂肪(GB/T 6433—2006)[16]含量参考标准中的方法进行测定;氨基酸含量用SPD-10AV高效液相色谱仪(日本岛津)按照说明书进行测定。
1.4.2 能量测定用氧弹式燃烧测热器(WZR-1TCⅡ,长沙奔腾仪器有限公司)测定饲粮、粪和尿中能量。代谢能计算公式如下:
代谢能=食入能-粪能-尿能。
1.4.3 生长性能指标测定预试期结束,试验正式开始时空腹称量试验羊初始体重(IBW),试验结束时空腹称试验羊的终末体重(FBW),并统计试验期间(不包括预试期)的喂料量,计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。
1.4.4 氮代谢指标测定饲粮及粪、尿中含氮量依据GB/T 6432—2018[9]的方法进行测定。
可消化氮(DN)=食入氮(IN)-粪氮(FN);
沉积氮(RN)=IN-FN-尿氮(UN);
氮表观消化率(%)=(DN/IN)×100;
氮利用率(%)=(RN/IN)×100;
氮生物利用率(%)=(RN/DN)×100。
1.4.5 屠宰性能指标测定屠宰率(%)=(胴体重/宰前活重)×100;
净肉率(%)=(净肉重/宰前活重)×100;
胴体净肉率(%)=(净肉重/胴体重)×100;
骨肉比=胴体骨重/胴体净肉重。
眼肌面积:测量倒数第1与第2肋骨之间脊椎上眼肌(背最长肌)的横切面积,它与产肉量呈高度正相关。用硫酸绘图纸描绘出眼肌横切面的轮廓,用求积仪算出面积。
GR值:指在第12与第13肋骨之间,距离背脊中线11 cm处的组织厚度,用游标卡尺测量胴体的GR值。
1.4.6 肉品质指标测定pH:用肉类食品酸度计直接测定,在45 min内测定背最长肌肉样pH,再测定背最长肌肉样在4 ℃条件下贮藏24 h后的pH24 h。
肉色:用SCQ-1A肉色测定仪进行测定。
滴水损失:将修整好的肉样(约10 g、厚1 cm、面积6 cm2)装入专用塑料袋中,将肉样悬挂于挂钩上避免与袋壁接触,在4 ℃冰箱放置24 h后,用定性滤纸轻轻拭去肉样表层汁液,称重。
滴水损失(%)=[(贮前重量-贮后重量)/贮前重量]×100。
嫩度:在屠宰后2 h内取形状规则背最长肌肉样,水浴至75 ℃时,取出冷却至室温,用直径1.27 cm的取样器顺着肌纤维方向钻取肉柱,然后用嫩度仪测定每个肉柱的剪切力值,求其平均值。
失水率:截取第1腰椎以后背最长肌5 cm肉样1段,平置在洁净的橡皮片上,用直径为2.532 cm的圆样取样器(面积约5 cm2),切取中心部分眼肌样品1块,其厚度为1 cm,立即用感量为0.000 1 g的天平称重,然后放置于铺有18层吸水性好的定性中速滤纸上,上层也放18层滤纸,加压至35 kg,保持5 min,撤除压力后,立即称取肉样重量。
失水率(%)=[(肉样压前重量-肉样压后重量)/肉样压前重量]×100。
熟肉率:取一侧腰大肌中段100 g,于宰杀后12 h内进行测定。剥离外膜所附着的脂肪后,用感量为0.1 g的天平称重(计为W1),将样品置于铝蒸锅上用沸水在2 000 W的电炉上蒸煮45 min,取出后冷却30~45 min或吊挂于室内无风阴凉处,30 min后称重(计为W2)。
熟肉率(%)=(W2/W1)×100。
1.5 数据处理试验数据用平均值±标准误表示,采用SPSS 13.0软件进行单因素方差分析,组间差异用Duncan氏法进行多重比较,P < 0.05为差异显著,P>0.05为差异不显著。
2 结果与分析 2.1 饲粮中添加酵母硒对杜寒杂交羊生长性能的影响由表 2可知,在初始体重无显著差异(P>0.05)的情况下,当硒添加量为0.8 mg/kg时,终末体重显著低于其他各组(P < 0.05)。当硒添加量为0.2 mg/kg时,平均日增重最高,为351.00 g/d,显著高于0.4、0.8 mg/kg组(P < 0.05),与对照组相比差异不显著(P>0.05)。当硒添加量为0.2 mg/kg时,料重比最低,为6.04,与0.8 mg/kg组相比差异显著(P < 0.05)。
由表 3可知,饲粮中添加酵母硒对食入氮、粪氮、可消化氮、沉积氮、氮表观消化率均无显著影响(P>0.05)。当硒添加量为0.2 mg/kg时,尿氮含量显著低于0.4、0.8 mg/kg组(P < 0.05),与对照组相比差异不显著(P>0.05)。当硒添加量为0.2 mg/kg时,氮利用率最高,为35.84%,显著高于0.4、0.8 mg/kg组(P < 0.05);当硒添加量为0、0.2 mg/kg时,氮生物学利用率显著高于0.4、0.8 mg/kg组(P < 0.05)。
由表 4可知,当硒添加量为0.2 mg/kg时,试验羊屠宰率、净肉率均为最高,显著高于对照组和0.8 mg/kg组(P < 0.05);当硒添加量为0.8 mg/kg时,胴体净肉率显著低于其他各组(P < 0.05)。硒添加量对骨肉比、眼肌面积、GR值无显著影响(P>0.05),但随着硒添加量的提高,基本呈现先升高后降低的趋势。
由表 5可知,当硒添加量为0.4、0.8 mg/kg时,屠宰后pH显著高于对照组和0.2 mg/kg组(P < 0.05),而硒添加量对pH24 h无显著影响(P>0.05)。硒添加量对肉亮度值、黄度值、滴水损失、失水率均无显著影响(P>0.05)。当硒添加量为0.4、0.8 mg/kg时,肉红度值显著高于对照组和0.2 mg/kg组(P < 0.05)。当硒添加量为0.2 mg/kg时,肉剪切力最大,为8.03 kgf,同时熟肉率最高,为45.53%,2个指标均显著高于其他各组(P < 0.05)。
由表 6可知,饲粮中硒含量对血清、肝脏和肌肉中硒含量均无显著影响(P>0.05)。血清中硒含量随硒添加量增加呈先增高后降低的趋势。肝脏、肌肉中硒沉积量随饲粮中硒含量增加而呈现增加的趋势。
硒元素是动物生长不可缺少的一种矿物质元素,在促进动物生长方面起着重要的作用。朱翱翔等[17]研究发现,在饲粮中添加酵母硒可显著增加湖羊的日增重,降低料重比。马雄等[18]研究得出,补硒对绒山羊羔羊的平均日增重有所提高,但影响并不显著。罗霄等[19]研究表明,酵母硒(以硒计)能显著提高断奶仔猪的平均日采食量、平均日增重和饲料转化率,降低料重比。本试验中,硒添加量为0.2 mg/kg时,平均日增重最高,但随硒添加量增加,平均日增重逐渐下降,料重比增加。NRC(1985)绵羊硒的需要量为0.1~0.2 mg/kg DM,最高耐受量为2 mg/kg DM;AEC(1993)建议奶山羊硒的需要量为0.1 mg/kg DM;NY/T 816—2004规定,20~50 kg肉用育肥羊硒的推荐量为0.18~0.31 mg/kg,试验的基础饲粮中硒含量为0.04 mg/kg,羊对硒的需要量较低,硒的最适需要量和中毒剂量之间范围较小,稍微超过最适剂量就会导致羊的生长性能下降。试验过程中,硒添加量为0.8 mg/kg时,此组羊普遍出现体温偏高、呼吸困难、大量饮水、尿频等症状,在屠宰过程中发现,2只羊皮下有出血、腹腔有积液、肝脏和肾变性等症状,其中1只羊瘤胃乳头退化、瘤胃肌层变薄,这可能是硒添加量达到0.8 mg/kg时,羊出现中毒。Koller等[20]认为当硒饲喂量高于5.0 mg/d时,动物出现硒中毒,症状包括贫血、被毛粗糙、身体僵硬和蹄变形。本试验中,羊的日采食硒量小于2.0 mg,即出现中毒症状,这可能是由于杜寒杂交羊对硒的耐受剂量较低有关。
3.2 饲粮中添加酵母硒对杜寒杂交羊氮代谢指标的影响在缺硒地区妊娠后期的母羊饲粮中添加适量酵母硒和维生素E对羔羊生后生长发育、体重、体尺增长均有明显的促进作用,并且能提高成年羊粗脂肪、粗蛋白质、粗纤维表观消化率[21]。
王登峰[22]研究表明,有机硒可增加奶牛对粗脂肪的消化率,对中性洗涤纤维、粗蛋白质、钙、磷和硒的消化也有一定促进作用,但差异不显著。目前,关于有机硒对羊营养物质消化率的报道较少。本试验中,硒添加量为0.2 mg/kg时,尿氮、氮生物学利用率显著高于0.4、0.8 mg/kg组。其原因可能是酵母硒具有促进瘤胃微生物的生长的作用[23-24],同时提高瘤胃对饲粮营养物质的消化能力[25-26],而随着硒添加量增加,氮生物学利用率下降,可能是硒的最适需要量与中毒剂量接近,过量的硒导致瘤胃微生物的生长受到抑制。
3.3 饲粮中添加酵母硒对杜寒杂交羊屠宰性能的影响动物的屠宰性能在一定程度上反映了动物对饲粮的转化效率。王燕燕等[27]研究发现,分别给5月龄布尔山羊×关中奶山羊注射1、2、3、4 mL亚硒酸钠维生素E,硒含量分别为0.46、0.92、1.38、1.84 mg,各试验组之间以及试验组与对照组之间胴体重、净肉重、屠宰率、净肉率、骨肉比和眼肌面积均无显著差异。本试验中,硒添加量为0.2、0.4 mg/kg时,屠宰率和净肉率显著高于对照组和0.8 mg/kg组,硒添加量为0.2 mg/kg时,屠宰率和净肉率最高,这与生长性能指标一致,这说明硒添加量为0.2~0.4 mg/kg时,能促进杜寒杂交羊的生长性能和产肉率。本结果与上述结论不同的原因可能是由于硒添加的方式、形态不同造成的,本试验以酵母硒添加在饲粮中进行饲喂,而上述研究是通过注射亚硒酸钠的方式进行补硒。
3.4 饲粮中添加酵母硒对杜寒杂交羊肉品质的影响羊肉品质性状包括pH、系水力、肉色,还包括主观性状如嫩度、风味等。Vignola等[28]认为,添加富硒化合物可抑制脂质氧化的速度,对肉色的稳定性和肉质保存期具有明显功效,
一般富硒肉在0~4 ℃条件下可保存9 d。罗文友等[29]在饲粮中添加0.3 mg/kg酵母硒,提高了育肥猪的抗氧化能力,增强了肌肉保水能力,显著降低了肉质的滴水损失,明显改善了猪肉肉色,延长猪肉货架期。周明等[30]在60~90 kg肥育猪饲粮中添加有机硒和维生素E能提高新鲜猪肉初始pH、最终pH,改善猪肉的肉色,降低肌肉滴水损失。试验中,硒添加量为0.4、0.8 mg/kg时,肉红度显著高于对照组和0.2 mg/kg组,可能是因为硒含量显著改善了肉色,而硒添加量为0.8 mg/kg时,羊有中毒症状,在羊的皮下有出血点,导致肉红度值最高。硒添加量为0.2 mg/kg时,肉的滴水损失最低,与上述研究一致。
3.5 饲粮中添加酵母硒对杜寒杂交羊硒沉积量的影响Arthington[31]研究表明,向肉用阉牛饲粮中添加每头2.5 mg/d硒发现,在试验第60天和第90天时其肝脏、血浆中硒含量比不添加组有显著升高。Juniper等[32]报道,泌乳奶牛饲粮(硒含量为0.15 mg/kg DM)中分别添加酵母硒和亚硒酸钠,结果表明添加酵母硒组饲粮硒含量和血清硒、乳硒含量呈显著正相关,酵母硒的生物利用率比亚硒酸钠高。Mahan等[33]研究表明,机体的各个组织和细胞中,由于种属差异、组织差异、硒含量及硒元素的化学形态等不同,会造成组织硒沉积的差别,一般来讲,有机硒更能增加机体内硒沉积。本试验中,血清硒含量及肝脏、肌肉中硒沉积量随饲粮中硒含量增加而增加,但差异不显著,与上述研究结果是一致的。
4 结论根据本试验结果,饲粮中添加0.8 mg/kg酵母硒形式的硒时,会导致杜寒杂交羊生长性能下降,出现体温偏高、呼吸困难、大量饮水、尿频的症状并出现皮下有出血、腹腔有积液、肝脏和肾脏变性等症状。综合生长性能、肉品质等指标,推荐体重为34~60 kg的杜寒杂交羊饲粮中酵母硒形式硒的添加量为0.2 mg/kg(饲粮中硒含量的实测值为0.32 mg/kg)。
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