动物营养学报    2020, Vol. 32 Issue (5): 2108-2115    PDF    
嗜酸乳杆菌对氧化应激仔猪小肠上皮细胞抗氧化能力和紧密连接蛋白表达的影响
罗波文1 , 邹田德1 *, 陈丽玲1,2 , 曾永娣1 , 郭晓波1 , 游金明1     
1. 江西农业大学, 江西省动物营养重点实验室, 江西省饲料开发工程中心, 南昌 330045;
2. 江西中医药大学, 南昌 330004
摘要: 本研究旨在探讨嗜酸乳杆菌对氧化应激仔猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)抗氧化能力及紧密连接蛋白-1(ZO-1)、闭锁蛋白(occludin)和闭合蛋白(claudin)蛋白表达的影响。首先将IPEC-J2分为9组,分别加入0(对照)、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8和2.0 mmol/L的过氧化氢(H2O2),每组6个复孔,根据细胞活力确定最佳H2O2浓度。然后根据结果选择1.2 mmol/L的H2O2建立氧化应激IPEC-J2模型,将细胞分为7组,分别加入为0(对照)、1.0×105、1.0×106、1.0×107、1.0×108、1.0×109和1.0×1010 CFU/mL嗜酸乳杆菌,每组6个复孔,处理时间为24 h,分析嗜酸乳杆菌对氧化应激IPEC-J2抗氧化能力。最后选择1.2 mmol/L的H2O2建立氧化应激IPEC-J2模型,加入1.0×109 CFU/mL嗜酸乳杆菌继续培养24 h,将细胞分为4组,分别是对照组(添加等量的磷酸盐缓冲液)、H2O2氧化应激组、嗜酸乳杆菌组、嗜酸乳杆菌组+H2O2组(先加入H2O2后加入嗜酸乳杆菌),每组6个重复,测定ZO-1、occludin和claudin蛋白的表达量。结果显示:1)与对照组相比,当H2O2浓度高于0.6 mmol/L时,细胞活力显著降低(P < 0.05)。与对照组和0.6~1.0 mmol/L H2O2组相比,当H2O2浓度处于1.2~1.8 mmol/L时,细胞活力显著下降(P < 0.05)。2)与对照组相比,当嗜酸乳杆菌浓度高于1.0×108 CFU/mL时,细胞活力显著提高(P < 0.05)。3)在氧化应激条件下,随着嗜酸乳杆菌浓度的增加,细胞活力逐渐上升。与对照组相比,当嗜酸乳杆菌浓度低于1.0×107 CFU/mL时,细胞活力显著降低(P < 0.05),当嗜酸乳杆菌浓度高于1.0×109 CFU/mL时,细胞活力显著提高(P < 0.05)。4)与对照组相比,当嗜酸乳杆菌浓度高于1.0×106 CFU/mL时,细胞中丙二醛(MDA)含量显著降低(P < 0.05),嗜酸乳杆菌浓度高于1.0×107 CFU/mL时,细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性显著上升(P < 0.05),其他各组中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性较对照组显著升高(P < 0.05)。5)与H2O2氧化应激组相比,嗜酸乳杆菌组和嗜酸乳杆菌+H2O2组中细胞浆内ZO-1和occludin蛋白表达量显著降低(P < 0.05);与对照组和H2O2氧化应激组相比,嗜酸乳杆菌组和嗜酸乳杆菌+H2O2组中claudin蛋白表达量显著降低(P < 0.05)。由此可知,嗜酸乳杆菌能够促进细胞的生长,增强细胞的抗氧化能力,降低胞浆内紧密连接蛋白的表达量。
关键词: 嗜酸乳杆菌    IPEC-J2    抗氧化    紧密连接蛋白    
Effects of Lactobacillus acidophilus on Antioxidative Ability and Expression of Tight Junction Protein in Intestinal Epithelial Cells of Piglets under Oxidative Stress
LUO Bowen1 , ZOU Tiande1 *, CHEN Lilin1,2 , ZENG Yongdi1 , GUO Xiaobo1 , YOU Jinming1     
1. Jiangxi Province Key Laboratory of Animal Nutrition, Engineering Research Center of Feed Development, Jiangxi Agricultural University, Nanchang 330045, China;
2. Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China
Abstract: The purpose of this study was to investigate the effects of Lactobacillus acidophilus on antioxidative ability and expression of tight junction protein (occludin, ZO-1 and claudin-1) in intestinal epithelial cells of piglets (IPEC-J2) under oxidative stress. Firstly, the IPEC-J2 were treated with different H2O2 concentrations, including 0 (control), 0.6, 0.8, 1.0, 1.2, 1.4, 1.6, 1.8 and 2.0 mmol/L, with 6 replications in each group. The optimum concentration of H2O2 was determined according to cell activity. And then, the 1.2 mmol/L H2O2 were used to induce oxidative stress. The cells were divided into 7 groups, and added 0(control), 1.0×105, 1.0×106, 1.0×107, 1.0×108, 1.0×109 and 1.0×1010 CFU/mL Lactobacillus acidophilus, respectively, with 6 replications in each group, and treated for 24 h, analyzing the antioxidant ability of Lactobacillus acidophilus in IPEC-J2 under oxidative stress. At last, 1.2 mmol/L H2O2 was selected to establish the IPEC-J2 oxidative stress model, and then 1.0×109 CFU/mL Lactobacillus acidophilus was added to culture cells for 24 h, and then cells was divided into four groups:the control group (adding equivalent phosphate buffer), the H2O2 oxidative stress group, the Lactobacillus acidophilus group, and the Lactobacillus acidophilus+H2O2 group (adding H2O2 first and then Lactobacillus acidophilus), with 6 replications in each group. The expressions of epithelial tight junction proteins (occludin, ZO-1 and claudin-1) were measured. The results showed as follows:1) compared with the control group, at the concentration of H2O2 ≥ 0.6 mmom/L, the cell activity was significantly reduced (P < 0.05). Compared with control group and 0.6 to 1.0 mmol/L H2O2 groups, the activities of cells were decreased significantly at the concentration between 1.2 and 1.8 mmol/L H2O2 (P < 0.05). 2) Compared with control group, at the concentration of Lactobacillus acidophilus ≥ 1.0×108 CFU/mL, the cell activity was significantly increased (P < 0.05). 3) Under oxidative stress, with the increase of Lactobacillus acidophilus concentration, cell activity was increaseed gradually. Compared with control group, at the concentration of Lactobacillus acidophilus ≤ 1.0×107 CFU/mL, the cell activity was significantly decreased (P < 0.05), at the concentration of Lactobacillus acidophilus ≥ 1.0×109 CFU/mL, cell activity was increased significantly (P < 0.05). 4) Compared with control group, at the concentration of Lactobacillus acidophilus ≥ 1.0×106 CFU/mL, the content of malonaldehyde (MDA) in cells was significantly reduced (P < 0.05). Compared with control group, at the concentration of Lactobacillus acidophilus ≥ 1.0×107 CFU/mL, superoxide dismutase (SOD) activity was significantly increased (P < 0.05), and glutathion peroxidase (GSH-Px) activity in cells in other groups was significantly increased compared with control group (P < 0.05). 5) Compared with the H2O2 oxidative stress group, the protein expressions of ZO-1, occludin and claudin proteins in Lactobacillus acidophilus group and Lactobacillus acidophilus+H2O2 group were significantly decreased (P < 0.05). Compared with the control group and H2O2 oxidative stress group, claudin protein expression in Lactobacillus acidophilus group and Lactobacillus acidophilus+H2O2 group was significantly decreased (P < 0.05). In conclusion, Lactobacillus acidophilus can promote the growth of cells, enhance the antioxidant ability of cells, and reduce the expression of intracytoplasmic tight junction protein.
Key words: Lactobacillus acidophilus    IPEC-J2    antioxidant    tight junction protein    

氧化应激是机体受到外界有害刺激后,因体内活性氧产量增加导致氧化与抗氧化系统失衡而引起的一种细胞功能紊乱现象。氧化应激也是导致多种细胞发生凋亡的主要途径之一[1]。早期断奶是当前生猪养殖过程的常用技术手段,但早期断奶常常带来仔猪的肠道氧化应激反应。单层上皮能把微生物和病原菌与免疫细胞分隔开,可预防感染和炎症的发生[2]。肠上皮细胞紧密连接是细胞间的主要连接方式,紧密连接蛋白在调节肠道黏膜屏障的通透性和维持上皮细胞的完整性方面发挥着重要的作用[3],此外紧密连接蛋白还参与基因转录、细胞增殖和分化状态的调节[4]。其中,紧密连接蛋白-1(ZO-1)、闭锁蛋白(occludin)和闭合蛋白(claudin)是构成肠道紧密连接屏障功能的重要蛋白,对维持肠道紧密连接的完整性起到关键作用[5]。肠道通透性增加会影响肠黏膜上皮细胞间紧密连接蛋白的合成,进而导致紧密连接结构受损[6]。嗜酸乳杆菌是一种活的微生物,对宿主机体健康具有重要作用。研究发现,嗜酸乳杆菌能够促进仔猪肠道有益菌的增殖,增强肠道屏障功能[7],同时还可通过增加黏蛋白分泌、调节免疫、抑制病原菌以及影响整个生物丛,进而维持肠道屏障功能的完整性[8]。Dai等[9]研究发现,益生菌能够提高紧密连接蛋白的表达量,增强肠道上皮屏障功能。嗜酸乳杆菌可能是通过减少细胞间紧密连接蛋白向胞浆内转移,从而起到保护紧密连接蛋白的作用[10]。为了探讨嗜酸乳杆菌在氧化应激条件下对猪肠上皮细胞(IPEC-J2)抗氧化能力和紧密连接蛋白表达的影响,本试验分析了嗜酸乳杆菌对IPEC-J2的活力及抗氧化能力相关指标的作用效果,并检测ZO-1、claudin和occludin蛋白的表达量,明确嗜酸乳杆菌对肠道屏障的保护作用。

1 材料与方法 1.1 试验材料

试验所用细胞为猪空肠IPEC-J2,由中国农业大学馈赠。

嗜酸乳杆菌的活化:将冻存的嗜酸乳杆菌培养接种于MRS固体培养基中,菌体经过MRS固体培养基中传代活化3次。

嗜酸乳杆菌的传代:将活化后的菌体接种至MRS液体培养基中,37 ℃厌氧培养24 h。培养结束后3 000×g离心5 min,弃去上清液,磷酸盐缓冲液(PBS)重悬菌体,用麦氏比浊仪调整菌体的浓度至试验所需浓度。

1.2 过氧化氢(H2O2)对细胞活力的影响

取对数期增长的细胞,用0.1%胰蛋白酶消化后,用完全培养基吹打细胞制备单细胞悬液,接种于96孔细胞培养板中,接种数量为1×104个/孔,置37 ℃、5% CO2恒温培养箱中培养24 h。弃旧培养基,用无菌PBS清洗,后将细胞分为9组,分别加入0(对照)、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8和2.0 mmol/L的H2O2,每组6个复孔,培养1 h。弃去培养液,加入终浓度为0.5 mg/mL的四甲基偶氮唑盐(MTT)150 μL,37 ℃孵育4 h,然后轻轻吸出培养液,加入二甲基亚砜(DMSO)150 μL/孔,振荡10 min,使蓝紫色结晶充分溶解。使用酶联免疫检测仪检测490 nm处的吸光度,计算细胞活力。根据细胞活力确定最佳H2O2浓度。MTT试剂盒购自Solarbio公司。

1.3 嗜酸乳杆菌对细胞活力的影响

取对数增长期的细胞,用0.1%胰蛋白酶消化后,用完全培养基吹打细胞制备细胞悬液,接种于96孔细胞培养板中,接种量为1×104个/孔,置37 ℃、5% CO2恒温培养箱中培养24 h。弃旧培养基,用无菌PBS清洗,后将细胞分为7组,分别加入0(对照)、1.0×105、1.0×106、1.0×107、1.0×108、1.0×109和1.0×1010 CFU/mL的嗜酸乳杆菌,每组设6个复孔,处理时间为24 h。采用MTT法,利用酶联免疫检测仪检测490 nm处的吸光度,计算细胞活力。

1.4 嗜酸乳杆菌对氧化应激细胞活力的影响

根据上述试验结果,选择1.2 mmol/L的H2O2建立本试验中氧化应激IPEC-J2模型,将细胞分为7组,分别加入为0(对照)、1.0×105、1.0×106、1.0×107、1.0×108、1.0×109和1.0×1010 CFU/mL嗜酸乳杆菌,每组6个复孔,处理时间为24 h,采用MTT法,利用酶联免疫检测仪检测490 nm处的吸光度,计算细胞活力。

1.5 嗜酸乳杆菌对氧化应激细胞抗氧化能力的影响

根据上述试验结果,选择1.2 mmol/L的H2O2建立本试验中氧化应激IPEC-J2模型,将细胞分为7组,分别加入为0(对照)、1.0×105、1.0×106、1.0×107、1.0×108、1.0×109和1.0×1010 CFU/mL嗜酸乳杆菌,每组6个复孔,处理时间为24 h,待细胞处理后收集细胞上清液,采用比色法,利用分光光度计,按照南京建成生物工程研究所试剂盒说明测定细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、氧化氢酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)含量。

1.6 嗜酸乳杆菌对氧化应激细胞紧密连接蛋白表达量的影响

根据上述试验结果,选择1.0×109 CFU/mL的嗜酸乳杆菌探讨其对氧化应激IPEC-J2中紧密连接蛋白表达量的影响。选择1.2 mmol/L的H2O2建立氧化应激IPEC-J2模型。试验分为4组,分别是对照组(添加等量的PBS)、H2O2氧化应激组、嗜酸乳杆菌组、嗜酸乳杆菌+H2O2组(先加入H2O2后加入嗜酸乳杆菌),每组6个重复。向嗜酸乳杆菌组和嗜酸乳杆菌+H2O2组中加入1.0×109 CFU/mL嗜酸乳杆菌继续培养24 h,然后移除培养液,用PBS洗2遍,每孔中加入适量的非变性细胞裂解液,用移液枪吹打至细胞能够充分接触裂解液。待细胞充分裂解后,12 000×g离心5 min,去上清分装保存,用于嗜酸乳杆菌对氧化应激IPEC-J2中紧密连接蛋白ZO-1、occludin和claudin的蛋白表达量检测。按照RIPA蛋白提取试剂盒提取各组蛋白,用BCA试剂盒测定蛋白浓度。通过Westen blot检测紧密连接蛋白的表达,采用ECL发光液在凝胶成像仪上成像,利用Image J软件进行灰度值计算。

1.7 数据统计处理

采用SPSS 17.0软件对数据进行方差分析,并用Duncan氏法进行多重比较。数据以“平均值±标准误”表示。以P < 0.05为差异显著性判断标准。

2 结果与分析 2.1 H2O2对细胞活力的影响

图 1所示,不同浓度的H2O2处理IPEC-J2后,细胞活力不同程度的降低。与对照组相比,当H2O2浓度为0.6 mmol/L时,细胞活力差异不显著(P>0.05);但当H2O2浓度高于0.6 mmol/L时,细胞活力显著降低(P < 0.05)。与对照组和0.6~1.0 mmol/L H2O2组相比,当H2O2浓度为1.2~1.8 mmol/L时,细胞活力显著下降(P < 0.05),此时其细胞活力为60%左右。2.0 mmol/L H2O2组与对照组、0.6、0.8、1.0和1.2 mmol/L H2O2组相比,细胞活力均差异显著(P < 0.05)。

数据柱标注不同字母表示差异显著(P < 0.05)。下图同。 Data column with different letters mean significant difference (P < 0.05). The same as below. 图 1 H2O2对细胞活力的影响 Fig. 1 Effects of H2O2 on cell activity
2.2 嗜酸乳杆菌对细胞活力的影响

图 2可知,与对照组相比,当嗜酸乳杆菌浓度分别为1.0×105、1.0×106、1.0×107和1.0×108 CFU/mL时,随着嗜酸乳杆菌浓度的增加,细胞活力增加但差异不显著(P>0.05);与对照组和嗜酸乳杆菌浓度≤1.0×108 CFU/mL组相比,当嗜酸乳杆菌浓度高于1.0×108 CFU/mL时,细胞活力显著提高(P < 0.05)。

图 2 嗜酸乳杆菌对细胞活力的影响 Fig. 2 Effects of Lactobacillus acidophilus on cell activity
2.3 嗜酸乳杆菌对氧化应激细胞活力的影响

图 3可知,在氧化应激条件下,随着嗜酸乳杆菌浓度的增加,细胞活力逐渐上升。与对照组相比,当嗜酸乳杆菌浓度为1.0×105、1.0×106和1.0×107 CFU/mL时,细胞的活力显著降低(P < 0.05)。与对照组相比,嗜酸乳杆菌浓度为1.0×108 CFU/mL时,细胞活力差异不显著(P>0.05)。当嗜酸乳杆菌浓度高于1.0×109 CFU/mL时,与对照组相比细胞活力差异显著(P < 0.05)。

图 3 嗜酸乳杆菌对氧化应激细胞活力的影响 Fig. 3 Effects of Lactobacillus acidophilus on cell activity under oxidative stress
2.4 嗜酸乳杆菌对氧化应激细胞抗氧化能力的影响

表 1所知,与对照组相比,当嗜酸乳杆菌浓度高于1.0×107 CFU/mL时,细胞中SOD活性显著上升(P < 0.05),其中当嗜酸乳杆菌浓度为1.0×107 CFU/mL时,细胞中SOD活性显著低于对照组和嗜酸乳杆菌浓度1.0×105 CFU/mL组(P < 0.05),且显著高于嗜酸乳杆菌浓度高于1.0×107 CFU/mL组(P < 0.05);与对照组相比,其他嗜酸乳杆菌浓度组的细胞中GSH-Px活性显著升高(P < 0.05),其中当嗜酸乳杆菌浓度为1.0×105 CFU/mL时,细胞中GSH-Px活性显著高于对照组(P < 0.05),但显著低于嗜酸乳杆菌浓度高于1.0×108 CFU/mL的各组(P < 0.05);各组间细胞中CAT活性差异不显著(P>0.05)。当嗜酸乳杆菌浓度高于1.0×106 CFU/mL时,细胞内MDA含量显著降低(P < 0.05),其中当嗜酸乳杆菌浓度为1.0×106CFU/mL时,细胞内MDA含量显著低于对照组和嗜酸乳杆菌浓度为1.0×105 CFU/mL组(P < 0.05),且显著高于嗜酸乳杆菌浓度高于1.0×106 CFU/mL的各组(P < 0.05)。

表 1 嗜酸乳杆菌对氧化应激细胞抗氧化能力的影响 Table 1 Effects of Lactobacillus acidophilus on cell antioxidant capacity under oxidative stress (n=6)
2.5 嗜酸乳杆菌对细胞紧密连接蛋白表达的影响

图 4可知,与H2O2氧化应激组相比,嗜酸乳杆菌组和嗜酸乳杆菌+H2O2组细胞浆内ZO-1、occludin和claudin蛋白表达量显著降低(P < 0.05);与对照组相比,嗜酸乳杆菌组和嗜酸乳杆菌+H2O2组claudin蛋白表达量显著降低(P < 0.05),ZO-1和occludin蛋白表达有降低的趋势但差异不显著(P=0.064)。H2O2氧化应激组中ZO-1、occludin和claudin蛋白表达量高于对照组(P>0.05)。

对照组control group; H2O2氧化应激组H2O2 oxidative stress group; 嗜酸乳杆菌组Lactobacillus acidophilus group; 嗜酸乳杆菌组+H2O2Lactobacillus acidophilus+H2O2 group。 图 4 嗜酸乳杆菌对细胞occludin、ZO-1和claudin蛋白表达量的影响 Fig. 4 Effects of Lactobacillus acidophilus on protein expression of occludin, ZO-1 and claudin of cells
3 讨论

IPEC-J2在肠道中起着重要的作用,可通过不同的机制参与肠道内屏障功能的调节、抗菌肽的合成、黏液的分泌以及细胞因子的趋化等活动[11]。在正常的生理条件下,机体可利用酶类或非酶类物质平衡氧化与抗氧化系统,活性氧的产生和清除处于动态平衡状态[12]。氧化应激和细胞内氧化还原平衡的破坏都会导致猪上皮细胞损伤。有研究表明,仔猪在氧化应激状态下会产生过量的活性氧,从而导致断奶仔猪肠道屏障功能障碍[13]。研究证实,许多胃肠溃疡、炎症等疾病都与活性氧自由基的代谢紊乱相关[14-15]。同时氧化应激也是细胞凋亡的介质,在氧化应激状态下,机体自由基处于失衡状态,从而使自由基参与细胞凋亡过程,激活Caspase家族蛋白,引发线粒体途径细胞凋亡[16]。H2O2经常被用于研究氧化还原反应过程,在生物体内,H2O2较其他氧化物稳定,且在生物体外也不易分解[17]。因此,本试验选用H2O2作为氧化应激物构建细胞氧化应激模型。本试验中,IPEC-J2在经过H2O2处理1 h后细胞活力显著降低。

本试验研究嗜酸乳杆菌对氧化应激条件下IPEC-J2抗氧化能力以及改变细胞通透性能力。动物体内能通过自身调节维持机体自由基动态平衡的物质主要包括SOD、CAT、GSH-Px等酶类[18]。研究表明,益生菌中的抗氧化酶,如SOD、GSH-Px具有清除活性氧的作用[19-20]。SOD、CAT是重要的抗氧化酶,在平衡氧化和抗氧化过程中发挥着重要的作用。研究表明,CAT能高效地促进H2O2分解成为H2O和O2,防止细胞氧化损伤[21]。白明[22]比较了乳杆菌、双歧杆菌、嗜热链球菌和乳酸乳球菌的抗氧化活性,分析了抗氧化活性较高的菌株内与抗氧化相关的菌株,发现大部分益生菌都具有抗氧化活性。本试验结果表明,当IPEC-J2在受到H2O2氧化应激时,经过嗜酸乳杆菌处理能够提高细胞中SOD和GSH-Px活性,并显著降低细胞内MDA含量。这表明嗜酸乳杆菌能够保护损伤细胞中的抗氧化物酶,有效地保护细胞抗氧化能力,在一定程度上可缓解氧化应激对IPEC-J2的影响。

小肠上皮细胞与细胞之间的主要连接方式为紧密连接,该结构具有维持肠道屏障功能、选择性物质运输、阻止病原菌入侵及协助毒素、炎性物质转运等功能,紧密连接结构的完善与否是衡量肠道屏障通透性的一个重要因素[23]。紧密连接蛋白主要由ZO-1、occudin、claudins等组成,ZO-1起到细胞骨架和传递信号分子的作用,是肠道紧密连接的主要蛋白。occudin与claudins共同构成选择性屏障,控制物质运输[24]。嗜酸乳杆菌是一类能在机体肠道内定植的益生菌,能缓解仔猪肠道屏障损伤,加强肠道屏障功能。有研究发现,用EcN(Escherichia coli Nissle 1917)饲喂小鼠后,肠道内ZO-1的mRNA表达量和蛋白表达量都显著上升,同时还能修复肠道黏膜,增强上皮屏障功能[25]。Patel等[26]研究发现,在新生小鼠饲粮中添加益生菌可以提高claudin-3蛋白的表达,同时促进新生小鼠肠道屏障功能的发育成熟。基因水平的研究表明,植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)MB452能够改变肠上皮细胞紧密连接蛋白相关基因表达量,如编码细胞骨架和occludin的基因[27]。张俊等[28]研究发现,添加2%发酵饲料组中回肠黏膜claudin-3、ZO-1、Toll样受体2(TLR2)mRNA的表达量均显著上调,表明益生菌发酵产物在一定程度上能改善肠道形态结构,从而提高肠道机械屏障功能。前人研究发现,当刺激源刺激肠道上皮细胞后,细胞间的紧密连接蛋白向胞浆内转移,导致胞浆内的紧密连接蛋白增加[29]。本试验结果表明,嗜酸乳杆菌组与嗜酸乳杆菌+H2O2组细胞浆内ZO-1、occludin、claudin蛋白表达量显著低于H2O2氧化应激组,表明嗜酸乳杆菌在一定程度上可降低IPEC-J2氧化损伤过程中胞浆内紧密连接蛋白的表达量,保护细胞紧密连接的屏障作用,维持IPEC-J2正常的功能。

4 结论

当嗜酸乳杆菌浓度高于1.0×108 CFU/mL时,在一定程度上能够促进IPEC-J2的生长,可有效缓解H2O2引起的IPEC-J2氧化损伤,提高细胞的抗氧化能力,同时降低IPEC-J2氧化损伤过程中胞浆内紧密连接蛋白的表达量,保护细胞紧密连接的屏障作用,使细胞活力上升。

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