2. 全国畜牧总站, 北京 100125
2. National Animal Husbandry Station, Beijing 100125, China
蛋氨酸(methionine,Met),又称甲硫氨酸,是家禽玉米-豆粕型饲粮中第一限制性氨基酸[1-2]。在家禽体内,Met可以转化为半胱氨酸,参与甲基转移以及肾上腺素等合成过程[3],在机体代谢过程中起着重要的生理作用。在饲粮中添加Met可以改善家禽生长性能和屠宰性能,提高家禽免疫能力和抗氧化能力等[4-6]。目前,在不同类型饲粮中,肉鸭Met需要量的推荐值存有较大差异[7-8],这种差异可能是由于试验的基础饲粮能量水平不同而造成的。本实验室已有的研究发现,一定程度降低饲粮能量水平并不影响育肥期北京鸭的生长性能[9],可能是由于低能量饲粮增加了北京鸭的采食量。这表明在肉鸭育肥期饲粮中可适当降低能量水平,对降低饲养成本、充分利用饲料营养、减少粪尿排泄物所带来的环境污染等具有重要意义。已有的饲养标准中Met需要量可能不适合应用于低能量饲粮中,评估低能量饲粮中北京鸭Met需要量是非常必要的。因此,本试验旨在研究低能量饲粮中Met水平对育肥期北京鸭生长性能、屠宰性能和血浆生化指标的影响,以确定低能量饲粮中北京鸭Met需要量,以期为低能量饲粮饲养肉鸭提供数据支撑和理论依据。
1 材料与方法 1.1 试验设计与饲粮试验鸭选用中国农业科学院北京畜牧兽医研究所国家北京鸭保种场的瘦肉型Z型北京鸭。采用单因子试验设计,选取1日龄体重相近的200只雄性北京鸭,饲喂育雏期商品饲粮至14日龄,第15日龄时挑选体重[(558.6±4.8) g]相近的北京鸭150只,随机分成5组,每组6个重复,每重复5只鸭。基础饲粮中Met水平为0.284%(实测值),各组分别饲喂Met添加水平为0、0.075%、0.150%、0.225%和0.300%的试验饲粮,Met添加形式为DL-Met(白色晶体,纯度≥99%),各组饲粮Met水平分别为0.284%、0.359%、0.434%、0.509%和0.584%。试验期28 d。
试验采用低能量玉米-豆粕型基础饲粮(为了降低饲粮能量水平,添加一定小麦麸和稻壳粉),除Met和能量水平外,其他营养水平参照我国《肉鸭饲养标准》(NY/T 2122—2012)[10]和NRC(1994)[11]配制,基础饲粮组成及营养水平见表 1。
试验鸭采用网上平养,自由采食和饮水。采用自然光照与人工光照相结合,每日24 h光照,光照强度10~20 lx;试验鸭1~3日龄舍内温度为33 ℃,每隔2 d降低1~2 ℃,直到25 ℃,相对湿度保持在50%~70%,其他参考常规饲养管理进行。
1.3 测定指标与方法 1.3.1 生长性能于试验鸭35和42日龄,空腹12 h,以重复为单位对试验鸭和剩余饲粮进行称重,计算各组35和42日龄试验鸭的平均体重(average body weight,ABW)以及15~35日龄和15~42日龄的平均日增重(average daily gain,ADG)、平均日采食量(average daily feed intake,ADFI)和料重比(feed/gain,F/G),同时根据试验鸭的采食量与饲粮中Met水平计算其Met摄入量。
1.3.2 屠宰性能于试验鸭42日龄,空腹12 h,每重复选取体重相近的2只试验鸭进行称重,去毛称胴体重,然后进行屠宰,分别剥离胸肌、腿肌、腹脂、皮脂、剩余骨架以及肝脏、心脏、肌胃、胰腺、脾脏、盲肠并称重,按照《家禽生产性能名词术语和度量统计方法》(NY/T 823—2004)[12]中的方法计算屠宰率、全净膛率、胸肌率、腿肌率、皮脂率、腹脂率以及各器官指数。
1.3.3 血浆生化指标于试验鸭42日龄,以重复为单位,选取2只接近ABW的试验鸭,采用肝素钠采血管颈静脉采血5 mL,4 ℃、3 500 r/min离心15 min制备血浆,-20 ℃冷冻保存备用。采用全自动生化分析仪(日立7080型,日本)测定血浆中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)活性及总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、葡萄糖(GLU)、尿酸(UA)、总胆固醇(TCHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量,所有试剂盒均购自四川迈克生物科技股份有限公司。
1.4 数据统计分析试验数据用Excel 2013进行初步整理,采用SAS 9.4软件GLM程序进行单因素方差分析(one-way ANOVA),采用Duncan氏法进行均值多重比较,正交多项式(orthogonal polynomials)分析饲粮Met水平对各指标的线性或二次曲线效应,判断标准均以P < 0.05作为差异显著,以0.05≤P≤0.10作为有差异趋势。试验数据用“平均值±标准差”表示。
采用折线模型拟合北京鸭Met需要量模型[13]。折线模型如下:
式中:y为评价指标(生长性能和屠宰性能);x为Met水平;r为Met需要量;l为北京鸭对饲粮的反应(当x=r);u为曲线的陡度。
2 结果 2.1 低能量饲粮中Met水平对育肥期北京鸭生长性能和Met摄入量的影响由表 2可知,低能量饲粮中Met水平可显著影响15~35日龄和15~42日龄北京鸭的ABW、ADG、F/G和Met摄入量(P < 0.05);随着低能量饲粮中Met水平的提高,北京鸭的BW、ADG呈显著线性升高(P < 0.05),F/G呈显著线性或二次降低(P < 0.05);同时Met摄入量呈显著线性或二次升高(P < 0.05)。单因素方差分析显示,低能量饲粮中Met水平对ADFI没有显著差异(P>0.05);但趋势分析表明,随着低能量饲粮中Met水平的提高,北京鸭15~35日龄ADFI呈先降低后升高的显著二次曲线变化(P < 0.05),15~42日龄ADFI有先降低后升高的二次曲线变化趋势(P=0.089 9)。
由表 3可知,低能量饲粮中Met水平可显著影响42日龄北京鸭胸肌率、腿肌率、皮脂率和腹脂率(P < 0.05);随着低能量饲粮中Met水平的提高,胸肌率和腿肌率呈显著线性升高(P < 0.05),皮脂率和腹脂率呈显著线性或二次降低(P < 0.05)。单因素方差分析显示,低能量饲粮中添加Met有提高42日龄北京鸭全净膛率的趋势(P=0.066 8),0.434% Met水平组全净膛率最大;趋势分析表明,随着低能量饲粮中Met水平的提高,屠宰率呈现出先增加后降低的二次曲线变化趋势(P=0.063 7)。
由表 4可知,单因素方差分析表明,低能量饲粮中添加Met有增加42日龄北京鸭脾脏指数的趋势(P=0.082 4),低能量饲粮中Met水平对其他各器官指数无显著影响(P>0.05)。
由表 5可知,低能量饲粮中添加Met有改变42日龄北京鸭血浆白蛋白含量的趋势(P=0.079 3),低能量饲粮中Met水平对其他血浆生化指标无显著影响(P>0.05)。
由表 6可知,在低能量饲粮中,以ABW、ADG和F/G为评价指标,15~35日龄北京鸭Met需要量分别为0.413%、0.419%和0.434%;以ABW、ADG、F/G和皮脂率为评价指标,15~42日龄北京鸭Met需要量分别为0.428%、0.434%、0.434%和0.387%。
本试验采用玉米-豆粕型基础饲粮,添加部分小麦麸和稻壳粉降低饲粮能量水平,由于玉米、豆粕、小麦麸是家禽饲粮中最常见的饲料原料,且在此饲粮类型中,Met是第一限制性氨基酸,低能量饲粮可提高饲料营养成分的利用,减少粪尿排泄物,降低饲养成本,增加养殖效益,因此,研究该类型饲粮中Met水平对北京鸭生长发育的影响以及Met需要量是非常必要的。Met作为家禽饲粮中最重要的必需氨基酸,饲粮中Met水平可影响其他氨基酸的吸收和利用,直接影响家禽的生长发育。众多研究表明,Met缺乏可显著降低肉鸡[14-15]、肉鸭[7]、肉鹅[16]的ABW、ADG,增加F/G,且随着饲粮中晶体Met(DL-Met)的添加,其生长性能有所改善。在本试验中,饲喂基础饲粮(未添加Met)的北京鸭BW和ADG最低,F/G最高,这与上述的研究结果是一致的。各组间北京鸭ADFI无显著差异,趋势分析表明,随着低能量饲粮中Met水平的提高,ADFI有先下降后上升的二次曲线变化趋势,这可能是由于北京鸭基础饲粮中Met水平处于临界缺乏状态,家禽饲粮中Met水平处于临界缺乏状态时,其采食量可能有稍微增加的趋势[11]。随着饲粮中Met水平的提高,北京鸭Met摄入量均显著线性增加,这可能会导致氨氮排放量增加,机体内Met转化效率降低,因此在保障北京鸭的正常生长性能条件下,准确评估Met需要量对提高生长性能和减少环境污染具有重要意义。
屠宰性能是家禽产业的重要的衡量指标,胸肌是胴体可食用部分的主要部分[17],而腹脂一般作为不可食用部分被丢弃。因此,人们经常尝试通过育种或营养的方法提高可食用胴体部分和减少不可食用的内脏部分[18]。在本试验中,在低能量饲粮中添加Met可提高北京鸭的胸肌率和腿肌率,减少腹脂率,这与前人的研究报道结果[7-8, 19]一致,也符合人们对肉鸭生产的需求。
3.2 低能量饲粮中Met水平对育肥期北京鸭血浆生化指标的影响血浆或血清生化指标可直接反映动物机体代谢状况。ALT和AST活性是衡量肝功能的重要敏感指标,其活性越高表明肝脏受损程度越大[20-21];ALP活性也可作为衡量肝脏受损的指标[21-22]。UA含量可衡量机体蛋白质和核酸代谢状况[23]。在本试验中,各组北京鸭血浆生化指标均无显著差异,这表明北京鸭机体各种代谢过程并未出现严重障碍。此外,我们也观察到各组间器官指数均无显著差异,表明各器官的发育没有受到影响。以上这些结果可能是由于基础饲粮中Met缺乏程度较小,并没有影响到机体各器官正常发育以及各代谢过程,这与上述Met缺乏处于临界状态是相符的。饲喂基础饲粮的北京鸭腹脂率和皮脂率增加,这表明Met影响到北京鸭机体脂质代谢过程,但各组间关于脂质代谢相关的血浆生化指标(TCHO、TG、HDL-C、LDL-C含量)无显著差异。ALB仅在肝脏中合成,ALB可以与血清中的游离脂肪酸(NEFA)结合,运输到靶器官细胞膜表面,NEFA可在脂肪酸转运蛋白的作用下对脂肪酸进入细胞过程中起到重要的作用[24-27]。本试验中,0.434% Met水平组北京鸭血浆ALB含量最高,腹脂率最低,可能是由于血浆中ALB含量升高促进了腹脂中解离出的脂肪酸向靶器官或靶组织的运输。
3.3 低能量饲粮中育肥期北京鸭Met需要量我国《肉鸭饲养标准》(NY/T 2122—2012)[10]和NRC(1994)[11]中推荐育肥期北京鸭Met需要量分别为0.40%(3~5周龄)和0.30%(2~7周龄),二者推荐量存在较大差异,仅适用于正常能量水平饲粮。因此,本试验旨在评估低能量饲粮中北京鸭育肥期Met需要量,为肉鸭减排生产提供理论参考。折线模型估测Met需要量已得到广泛使用[7-8]。Xie等[7]研究表明,以ADG和胸肌率为评价指标,21~49日龄北京鸭的Met需要量分别为0.377%和0.379%。而Zeng等[8]研究表明,以ADG和胸肌率为评价指标,肥育期北京鸭Met的需要量分别为0.605%和0.564%。二者存在较大差异可能是由于试验饲粮能量水平不同造成的,能量水平可影响家禽的采食量[28],是影响家禽营养需要量的主要因素之一。不同能量水平下育肥期北京鸭的Met需要量的研究表明,高能量饲粮中北京鸭Met需要量显著高于低能量饲粮,但Met/代谢能(ME)比值保持相对稳定(0.376 g/MJ vs. 0.388 g/MJ)[9]。本试验中,以生长性能为评价指标,Met的需要量为0.413%~0.434%,尽管有些指标拟合模型未达到显著水平,但有显著的趋势,其Met/ME比值为0.36~0.38 g/MJ,与之前的研究结果[9]基本一致。以皮脂率为评价指标,Met需要量为0.387%,可以看出以皮脂率为评价指标估测的Met需要量低于以生长性能为评价指标估测的Met需要量。而本实验室在以前研究胆碱需要量时表明,需要提供北京鸭高于正常生长的胆碱需要量来防止过多的肝脏脂质沉积[29];此外,在评估饲粮中粗蛋白质适宜水平时,以F/G和腹脂率为评价指标时其结果是非常接近的[30],造成本试验结果与上述不一致的原因可能是本试验采用的是低能量饲粮,增加了北京鸭的采食量,导致Met摄入量已满足机体脂质代谢所需。因此,在本试验条件下,北京鸭Met需要量只要满足生长需要,即可满足体内脂质代谢,低能量饲粮中育肥期北京鸭Met需要量约为0.42%。
4 结论① 低能量饲粮中添加Met可提高育肥期北京鸭生长性能,改善屠宰性能。
② 以生长性能和皮脂率为评价指标,利用折线模型估测低能量饲粮中育肥期北京鸭Met需要量为0.387%~0.434%。综合考虑,低能量饲粮中育肥期北京鸭Met需要量约为0.42%。
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