体况评分(body condition score, BCS)是评价奶牛能量代谢状况或脂肪沉积程度的一种方法^[1]。体况过肥或过瘦，均会对奶牛的繁殖性能、生产性能、健康及福利水平等造成不利影响。对各个生理阶段的奶牛的体况进行评分，有助于发现饲养管理中存在的问题，提升牛场管理水平。分娩阶段是奶牛养殖过程中的重要环节，同时也是很危险的一个时期^[2]，有可能出现产道损伤、胎衣不下、产后瘫痪、乳房炎、子宫炎等疾病，影响母牛的健康^[3-4]。对于分娩阶段的奶牛来说，保持适宜的体况十分重要。研究表明，如果母牛过于肥胖，可能会影响全身肌肉的紧张性，使分娩的动力不足，从而导致胎儿排出困难^[5]。相较于BCS≤3.5的奶牛，BCS>3.5的奶牛产犊过程中羊膜囊破裂到犊牛产出的时间间隔高于120 min的比例增加^[6]，这一阶段是分娩过程中最重要的一个环节，大部分的难产发生在此阶段^[7]，易对母牛和犊牛造成伤害。Civelek等^[8]研究发现，BCS(3.96±0.31)较高的母牛较BCS(2.75~3.50)适宜的母牛出现难产的比例增高。但是Berry等^[9]认为，BCS与奶牛难产的发生率没有显著相关关系。以往报道对分娩时期体况是否会影响难产的发生率关注较多，鲜有对不同体况奶牛分娩行为及其所产新生犊牛状况的研究。因此，本试验拟探究分娩奶牛的体况对其分娩行为、血浆生殖激素和应激激素含量的影响，并探究是否会对新生犊牛产生影响，以期为生产实践中奶牛管理提供依据。

1 材料与方法 1.1 试验时间与地点

本试验于2019年2—4月在山东省曹县银香伟业集团百澳国际牧场进行。

1.2 试验设计及饲养管理

试验选取36头健康的头胎荷斯坦奶牛(所产犊牛均为母犊)，依据分娩时奶牛的BCS分为体况肥胖组(3.75≤BCS≤4.25)20头、体况正常组(3.25≤BCS≤3.50)16头。待产奶牛在预产期前1周左右随机饲养在2个相邻的产犊圈舍(约15 m×12 m)中，每个产犊圈舍中奶牛头数为12头左右。每天08:00、16:30饲喂全混合日粮(TMR)，自由采食，自由饮水。

1.3 样品采集与指标检测 1.3.1 BCS的评定

依据Wildman等^[10]和Edmonson等^[11]的奶牛BCS标准，采用5分制BCS系统进行体况评定，以0.25作为1个增量单位，1表示奶牛过度消瘦，5表示过度肥胖。由经验丰富的牧场人员通过视觉评估和触摸(短肋、腰背和尻部等部位)相结合的方式，对试验牛体况进行评分。

1.3.2 血浆激素含量检测

于奶牛分娩后用肝素钠抗凝的采血管于尾静脉采血10 mL，室温静置30 min，3 000×g离心15 min，将血浆分装至1.5 mL离心管中，置于-20 ℃冰箱中保存待测。

采用放射免疫(RIA)法测定血浆中催乳素(prolactin, PRL)、孕酮(progesterone, P)、睾酮(testosterone, T)、雌二醇(estrone, E₂)、前列腺素E₂(prostaglandin E₂, PGE₂)含量，试剂盒由北京北方生物技术研究所有限公司提供。血浆中催产素(oxytocin, OT)、肾上腺素(epinephrine, EPI)、去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)、皮质醇(cortisol, COR)含量采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定，试剂盒购于上海江莱生物科技有限公司。

1.3.3 行为学指标的观测与记录

试验期间通过24 h视频监控系统记录奶牛产犊时的行为，每个产犊圈舍中安装有1个球形摄像机(海康威视，杭州)，调整摄像头角度使视野覆盖整个圈舍，将拍摄视频定时传输至移动硬盘存储，试验结束后回放录像进行产犊时期行为观测。

观看录像过程中记录分娩母牛腹部第1次出现节律性收缩、阴门处首次露出羊膜囊、阴门处首次露出犊牛蹄、犊牛整个身体从产道排出或仅有一侧牛蹄未从产道排出的时间点以及母牛开始舔舐犊牛的时间点，记录阴门处首次露出犊牛蹄至犊牛产出这段时间母牛的起卧次数^[12]。

在观看录像过程中，由于奶牛之间互相遮挡以及奶牛躺卧与站立的角度问题等原因，未能观察到体况肥胖组10头、体况正常组6头奶牛的上述所有行为，因此在行为分析中体况肥胖组n=10，体况正常组n=10。

1.3.4 新生犊牛体重、初乳采食量的测定

犊牛出生后饲喂初乳之前进行称重。犊牛出生后24 h内用犊牛奶瓶饲喂3次初乳，每次提供2 L初乳，共为犊牛提供6 L初乳，分别记录犊牛3次采食初乳的量。第1次采食的初乳为其所对应分娩母牛所产，第2、3次提供混合初乳供犊牛采食。犊牛3次采食初乳量之和记为总采食初乳量。

1.4 数据统计与分析

试验数据采用SPSS 25.0统计软件进行分析，采用t检验对奶牛分娩行为、血浆激素含量、犊牛初生重数据进行分析比较，结果以“平均值±标准误”表示；依据第1次采食初乳量统计体况正常组、体况肥胖组中第1次采食初乳量＜2 L、第1次采食初乳量=2 L的犊牛头数，依据总采食初乳量统计体况正常组、体况肥胖组中总采食初乳量＜6 L、总采食初乳量=6 L的犊牛头数，采用卡方检验(Chi-squared test)对第1次采食2 L初乳以及总采食6 L初乳的犊牛比例进行分析，结果以百分比(%)表示。以P＜0.05表示差异显著，0.05≤P＜0.10表示有显著差异的趋势。

2 结 果 2.1 奶牛分娩行为

由表 1可知，体况肥胖组奶牛分娩过程中出现腹部收缩到犊牛产出的时间间隔较体况正常组奶牛显著增长(P＜0.05)，羊膜囊可见到犊牛产出的时间间隔有高于体况正常组奶牛的趋势(P=0.092)，露蹄后至犊牛产出这段时间里的起卧次数也有高于体况正常组奶牛的趋势(P=0.076)。露蹄到犊牛产出的时间间隔及产后母牛站立到舔舐犊牛的时间间隔在体况肥胖组与体况正常组奶牛之间无显著差异(P>0.05)。

2.2 奶牛血浆生殖激素含量

由表 2可知，体况肥胖组奶牛血浆中催乳素含量显著低于体况正常组(P＜0.05)；体况肥胖组奶牛血浆中催产素含量较体况正常组奶牛有降低的趋势(P=0.060)。血浆中孕酮、睾酮、雌二醇、前列腺素含量在体况肥胖组与体况正常组奶牛之间均无显著差异(P>0.05)。

2.3 奶牛血浆应激激素含量

由表 3可知，体况肥胖组奶牛血浆中皮质醇含量显著高于体况正常组奶牛(P＜0.05)，血浆中肾上腺素、去甲肾上腺素含量在体况肥胖组与体况正常组奶牛之间均无显著差异(P>0.05)。

2.4 新生犊牛初生重及采食初乳情况

由图 1可知，体况肥胖组总采食6 L初乳的犊牛比例较体况正常组有减少的趋势(P=0.091)。2组奶牛所产犊牛初生重及出生后第1次采食2 L初乳的犊牛比例无显著差异(P>0.05)。

3 讨 论 3.1 体况肥胖对奶牛分娩行为的影响

奶牛的产犊过程包括3个时期：子宫开口期(第1产程)、胎儿排出期(第2产程)、胎衣排出期(第3产程)。本研究对奶牛分娩行为的观察集中于第2产程，在这一阶段，子宫颈充分开张，胎囊及胎儿前置部分进入阴道，母畜通过阵缩和努责将胎儿从产道排出。Campler等^[12]对娟姗奶牛与荷斯坦奶牛的产犊行为进行了观察，发现从腹部收缩到犊牛产出的时间间隔为79~151 min，平均为114 min。虽然其研究对象既有经产奶牛也有初产奶牛(经产牛的产犊过程比初产牛更为顺利^[13])，但研究中涉及到了顺产、轻度助产以及部分中度助产奶牛，因此表现出来的时间间隔稍长。Schuenemann等^[14]发现，初产奶牛在顺产的情况下出现腹部收缩到犊牛产出的时间间隔为66 min，羊膜囊出现到犊牛产出的时间间隔为45 min，露蹄到犊牛产出的时间间隔为30 min。本研究中各阶段时间较Schuenemann等^[14]的研究得到的时间长，是由于本研究中的部分奶牛经历了轻度助产(由1人在90 s内拉出)。本研究发现，体况肥胖组奶牛分娩过程中出现腹部收缩到犊牛产出的时间间隔相较于体况正常组奶牛显著增长。究其原因，可能是由于体况肥胖的奶牛产道脂肪沉积较多，导致产道狭窄，从而使胎儿排出受阻^[15]。胎儿排出主要依靠的是子宫阵缩和母体腹壁肌和膈肌收缩的力量，体况肥胖的奶牛可能会出现肌肉乏力现象，使产程加长。Lamb等^[16]研究表明，在产犊前4周奶牛以5.47 km/h的速度行走1.6 km/d，每周进行5 d，其产犊过程较不运动奶牛更加顺利，建议牛场为干奶牛配备运动场，通过适当的运动避免奶牛体况过肥，增强分娩时肌肉的收缩力。

3.2 体况肥胖对奶牛血浆生殖激素含量的影响

分娩启动时，子宫内环境发生了很大变化，就生殖激素而言，分娩时孕激素含量降低，雌激素和前列腺素含量急剧增加，进而促进催产素、催乳素以及生长激素(GH)的分泌，使得子宫平滑肌收缩能力加强，子宫颈变软，宫口扩大而产生分娩动作^[17-18]。催产素是由下丘脑室旁核和视上核合成的一种肽类激素，在分娩过程中起着调节子宫肌收缩、缩短产程等作用，是催产的主要激素^[19]。本研究发现体况肥胖组奶牛血浆中催产素含量有低于体况正常组奶牛的趋势，这表明体况肥胖可能会减少催产素的分泌。本研究对奶牛分娩行为进行了观察，发现体况肥胖组奶牛胎儿排出所需时间较长，这可能与血浆中催产素含量减少有关，催产素含量减少会影响子宫平滑肌的收缩，不利于犊牛从产道产出，因此延长了分娩时长。

催乳素是一种由垂体前叶分泌的蛋白质激素，在哺乳动物的泌乳、繁殖、母性行为表达等方面都起着重要作用^[20]。Bridges等^[21]研究发现，通过药物抑制内源性催乳素的释放会阻止大鼠母性行为的表达，外源性注射催乳素会促进大鼠表达母性行为。本研究发现体况肥胖组奶牛血浆中催乳素含量显著低于体况正常组奶牛，这表明产犊时体况肥胖可能会抑制奶牛母性行为的表达。

3.3 体况肥胖对奶牛血浆应激激素含量的影响

机体受到内外环境应激源的刺激后，会引起下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴和交感肾上腺髓质的活性增强，导致血浆中肾上腺素、去甲肾上腺素和促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、糖皮质激素含量升高。分娩时剧烈的疼痛以及胎儿和母体的相互作用会引起分娩母牛血浆中肾上腺素和去甲肾上腺素含量升高以及皮质醇、葡萄糖含量等发生变化^[22]。本研究发现体况肥胖组奶牛与体况正常组奶牛血浆中肾上腺素与去甲肾上腺素含量无显著差异，血浆中皮质醇含量在2组之间存在显著差异。皮质醇是由肾上腺皮质分泌的对糖类代谢具有最强作用的激素，是机体受到压力情况下分泌的一种维持生物体正常生理机能的激素。Petrowski等^[23]报道，机体皮质醇含量的高低可以有效反映动物的应激程度。分娩过程中奶牛会遭受剧烈疼痛，产生很大的应激，如果发生难产等情况，产程加长，应激程度又会进一步加剧^[24-25]。Horst等^[26]研究发现，奶牛在分娩期间血液中皮质醇含量可达平时的3~4倍。本研究发现，体况肥胖组奶牛血浆中皮质醇含量显著高于体况正常组奶牛，这提示我们分娩时体况肥胖的奶牛经历了更大的应激，这可能源于较长的产犊时间，体况肥胖组奶牛产犊时间较体况正常组显著增长，其经历的应激时间更长。体况肥胖组奶牛较多的起卧次数也反映了它们较高的应激状态。

3.4 母牛体况肥胖对新生犊牛初生重及初乳采食量的影响

初生重反映了犊牛在母体内的生长发育状况，也与其出生后的生长性能和生产性能发挥息息相关。犊牛的初生重受多种因素的影响，包括性别、胎次、产犊季节、妊娠天数、公牛以及母体营养状况等^[27-28]。在人类研究中发现，产妇孕前超重或肥胖会增加高体质量儿与巨大儿的风险^[29]。关于母牛体况对胎儿初生重的影响报道不一，Spitzer等^[30]比较了产犊时BCS分别为4、5、6(9分制体况评分系统)的肉牛所产犊牛情况，发现随着BCS增大犊牛初生重显著升高，但Mulliniks等^[31]研究发现，产犊时BCS分别为4、5、6(9分制体况评分系统)的奶牛所产犊牛初生重没有显著差异。本研究中不同体况奶牛所产犊牛初生重没有显著差异，但相对于上述研究本试验涉及到的样本量较少，今后可以通过大样本量统计来对此进行研究。

由于胎盘的屏障作用，犊牛在母牛体内不能获得抗体，新生犊牛不具备主动免疫能力, 因此只能通过采食初乳来获得抗体建立被动免疫^[32]。犊牛出生后，足量优质初乳的及时摄入是影响犊牛的健康和成活率的重要因素^[33]。被动免疫的成功建立对后备牛的培育具有重要意义，能够提高犊牛日增重，减少断奶前犊牛的发病率和死亡率^[34-35]，提升奶牛第1泌乳期和第2泌乳期的产奶量^[36]。Vasseur等^[37]研究表明犊牛自由采食初乳量主要是受犊牛初生重和活力影响。本研究中2组新生犊牛初生重没有显著差异，但是体况肥胖组奶牛所产犊牛在24 h内总采食初乳量有低于体况正常组奶牛的趋势，反映出了肥胖奶牛所产新生犊牛的活力较差。这可能是由于体况肥胖奶牛皮下脂肪沉积较多，阻碍胎盘营养传输，导致胎儿营养吸收受限，造成犊牛活力下降^[38]；此外，体况肥胖奶牛产犊时间较长，这也会对新生犊牛的活力造成不利影响^[39]。

4 结 论

综上所述，相比体况正常奶牛，分娩时体况肥胖奶牛应激反应较大，产程较长，所产犊牛初乳采食量较低，影响其健康，因此应加强围产期奶牛的体况管理，避免过肥。