近年来,肉兔产业快速发展[1],但肉兔适宜营养水平的研究相对滞后。蛋氨酸(Met)作为生长肉兔主要的限制性氨基酸[2],对肉兔营养意义重大。不同国家及同一国家的不同研究对于生长肉兔含硫氨基酸的推荐值存在较大差异。NRC(1977)和AEC(1993)推荐的生长肉兔饲粮的含硫氨基酸水平均为0.60%。计成等[3]研究表明,加利福尼亚生长肉兔饲粮中含0.62%的含硫氨基酸时,肉兔的平均日增重(ADG)最高。傅祥超等[4]研究发现,饲粮中含硫氨基酸水平为0.72%时,獭兔生产性能达到最佳水平。周月华等[5]在实测饲粮消化能(DE)的基础上,确定了8~12周龄新西兰肉兔赖氨酸(Lys)、缬氨酸(Val)和异亮氨酸(Ile)的需要量及其适宜比例,但并没有对含硫氨基酸的适宜水平进行研究。因此,本试验以实测原料DE为基础,通过研究饲粮中含硫氨基酸水平对生长肉兔生产性能以及血清生化指标的影响,以确定一定DE水平下生长肉兔饲粮中适宜的含硫氨基酸水平,为完善其与其他氨基酸的比例提供参数和依据。
在饲养试验之前先进行消化试验,选择40日龄左右平均体重为(901.61±51.29) g的健康新西兰生长肉兔56只,随机分成7组,每组8个重复,每个重复1只兔。在测定原料DE基础上,再进行饲养试验。饲养试验采用单因子完全随机试验设计,设7个含硫氨基酸水平(0.50%、0.55%、0.60%、0.65%、0.70%、0.75%、0.80%)。选择平均体重为(954.24±55.61) g的健康新西兰生长肉兔112只,按性别和体重随机分为7组,每组16个重复(公母各占1/2),每个重复1只兔。
消化试验和饲养试验的基础饲粮均参照NRC(1977)和de Blas等[6]建议的生长肉兔饲养标准,并结合我国生长肉兔的推荐值配制。消化试验分别用玉米、豆粕、玉米胚芽粕、细米糠、苜蓿草粉和花生壳替代基础饲粮的20%构成试验饲粮,采用套算法测定各原料的DE。饲养试验与消化试验所用饲粮原料为同一批,饲粮中各原料的DE和粗蛋白质含量均采用实测值。在基础饲粮中分别添加0.05%、0.10%、0.15%、0.20%、0.25%和0.30%的Met,同时相应降低等量的细米糠,配制成含硫氨基酸水平分别为0.50%、0.55%、0.60%、0.65%、0.70%、0.75%和0.80%的7种试验饲粮。消化试验和饲养试验的基础饲粮组成及营养水平见表1。
试验在四川农业大学动物营养研究所教学科研试验基地进行。试验兔单笼饲养,试验期间每天饲喂2次,采用常规饲养管理和免疫消毒程序,自由采食和饮水。舍内温度6~10 ℃,湿度60%~70%。消化试验预试期6 d,正试期6 d。饲养试验预试期7 d,正试期28 d。
试验结束前3天,分别从每组中选4只与该组平均体重较为接近的试验兔,立即心脏采血5 mL,室温避光静置15 min后,3 000 r/min离心10 min,将分离所得血清分装于Eppendorf管中,置于-20 ℃冷冻保存,待测。
正试期第1天和最后1天07:00分别以重复为单位进行空腹称重,并统计全期总耗料量,计算全期平均日采食量(ADFI)、ADG和料重比(F/G)。
消化试验采用全收粪法收集各试验兔的粪样,并准确记录每只试验兔6 d的采食量和排粪量。根据测定的饲粮总能(GE)和排出的粪能(FE),按照以下公式计算DE。
| 表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)
Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis) %
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饲粮表观消化能(MJ/kg,干物质基础)=(食入总能-排粪总能)/食入干物质; 待测原料消化能(MJ/kg,干物质基础)= /待测原料替代基础饲粮比例。
血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(UN)的含量采用意大利AMS公司生产的BT-2245型全自动生化分析仪进行测定。血清胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)的含量采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定。所用试剂盒均购自武汉基因美生物科技有限公司,测定方法按说明书进行。
试验数据用Excel 2007初步处理后,采用SPSS 17.0进行单因素方差分析,分别以P<0.05和P<0.01作为差异显著性和极显著性判断标准。存在显著性差异的结合Duncan氏法进行多重比较,试验结果以平均值±标准差表示。
消化试验测定的几种饲料原料的DE见表2。
| 表2 几种饲料原料的消化能(干物质基础) Table 2 Digestible energy of several feedstuffs (DM basis) |
由表3可知,在初始体重(IBW)无显著差异(P>0.05)的情况下,饲粮含硫氨基酸水平对终末体重(FBW)、ADFI无显著影响(P>0.05),而对ADG和F/G有显著影响(P<0.05)。其中,饲粮含硫氨基酸水平为0.65%组的ADG显著高于饲粮含硫氨基酸水平为0.50%、0.75%和0.80%组(P<0.05),其他各组间差异不显著(P>0.05);饲粮含硫氨基酸水平为0.65%组的F/G显著低于饲粮含硫氨基酸水平为0.50%、0.55%、0.75%和0.80%组(P<0.05),其他各组间差异不显著(P>0.05)。
| 表3 饲粮含硫氨基酸水平对生长肉兔生产性能的影响 Table 3 Effects of dietary sulphur-amino acids level on performance of growing rabbits (n=16) |
由表4可知,饲粮含硫氨基酸水平对生长肉兔血清TP和ALB含量无显著影响(P>0.05),对血清UN和IGF-Ⅰ含量有显著影响(P<0.05)。其中,血清UN含量以饲粮含硫氨基酸水平为0.65%组最低,显著低于饲粮含硫氨基酸水平为0.50%和0.80%组(P<0.05),与其他各组差异不显著(P>0.05);血清IGF-Ⅰ含量以饲粮含硫氨基酸水平为0.65%组最高,显著高于饲粮含硫氨基酸水平为0.50%、0.55%和0.80%组(P<0.05),与其他各组差异不显著(P>0.05)。
| 表4 饲粮含硫氨基酸水平对生长肉兔血清生化指标的影响 Table 4 Effects of dietary sulphur-amino acids level on serum biochemical indices of growing rabbits (n=4) |
含硫氨基酸是动物生长必不可少的氨基酸,饲粮中适宜水平的含硫氨基酸尤其是Met水平对动物生长具有促进作用。综合方差分析的结果,本试验中饲粮含硫氨基酸水平为0.65%(实测值为0.61%)时肉兔生产性能达到最佳。NRC(1977)和AEC(1993)推荐的生长肉兔饲粮中含硫氨基酸水平为0.60%。计成等[3]研究表明,加利福尼亚生长肉兔饲粮中含0.62%的含硫氨基酸时ADG最高,而饲粮中含硫氨基酸水平在0.56%~0.62%时ADG差异不显著,本试验结果与之相近。傅祥超等[4]研究发现,在獭兔饲粮中添加0.25%的含硫氨基酸(总含硫氨基酸水平为0.72%)时ADG最高。何瑞国等[7]采用正交设计得出日本大耳白兔饲粮中含硫氨基酸的适宜水平为0.73%。与以上研究结果相比,本试验结果介于中间水平。Kennedy等[8]研究认为,通过向饲粮中添加氨基酸使饲粮的营养物质达到平衡,可以提高动物生产性能,但过量添加则会导致相反的结果。张丽君等[9]和王春霞等[10]研究均表明,肉仔鸡体重随着饲粮中Met添加水平的升高呈现先升高后降低的趋势。这说明饲粮中添加适宜的Met能提高动物生产性能,缺乏或超量添加对动物都是不利的。本试验结果与以上研究结果基本一致,结合本试验血清UN含量变化表明新西兰生长肉兔饲粮中含硫氨基酸的适宜水平为0.65%(实测值为0.61%),在此水平上继续添加Met将会对肉兔生产性能产生不利影响。究其原因,一方面可能与饲粮中Met和胱氨酸(Cys)的比例有关;另一方面可能与Met本身有一定毒性,而兔对其毒性较为敏感有关。但目前关于饲粮中Met和Cys的比例以及Met毒性对兔生产性能影响方面的研究报道较少,因此本试验中生产性能下降是否由其导致,有待今后进一步研究。
血清TP和ALB一定程度上反映了机体营养状况及蛋白质代谢程度。本试验中随着饲粮含硫氨基酸水平的增加,血清TP和ALB含量没有显著变化。周勤飞等[11]和吴振宇等[12]研究均表明,饲粮中添加不同水平的Met对血清TP和ALB的含量没有显著影响,这与本试验结果一致。血清UN的含量可以较准确地反映动物体内蛋白质代谢和氨基酸的平衡情况,其含量与蛋白质和氨基酸利用率呈显著负相关[13],即血清UN含量较低表明氨基酸间的平衡较好,供给量较恰当。本试验中,饲粮含硫氨基酸水平显著影响血清UN含量,其中以含硫氨基酸水平为0.65%组的血清UN含量最低,这与本试验中肉兔生产性能和血清IGF-Ⅰ含量的变化规律也相吻合。动物的生长主要受生长轴的调控,而生长轴中IGF-Ⅰ含量最能反映动物的营养和生长状况。Stick等[14]研究发现,血清IGF-Ⅰ含量对肉牛的生长及饲粮利用率起着重要的作用。张永翠[15]研究表明,血清中IGF-Ⅰ含量与F/G呈现负相关(r=-0.745 9,P=0.144 7)。本试验中,饲粮含硫氨基酸水平显著影响血清IGF-Ⅰ含量,且以含硫氨基酸水平为0.65%组血清IGF-Ⅰ含量最高,这与本试验中生产性能结果相符合。
含硫氨基酸包括Met和Cys,Met在动物体内可转化为Cys,因此在饲粮中满足含硫氨基酸需要的同时还要注意Met的供给量。李天俊等[16]研究表明,肉兔对Met有特殊的需求,一般饲粮很难达到肉兔对Met的需要,其饲粮配方无论按照哪种饲养标准,除满足能量、粗蛋白质及其他主要营养成分的条件外,必须单独添加Met。目前,关于生长肉兔饲粮中Met适宜水平的研究报道尚少,而且仅有的研究结果差异也较大,一般在0.31%~0.84%范围内。本试验主要是通过向饲粮中添加合成Met来调整饲粮含硫氨基酸的水平,因此不存在Met供给量不足的问题。
目前,由于缺乏某些兔饲料原料的DE数据,兔饲粮DE一般是借用猪的,造成计算结果不够准确。由于本试验中主要饲料原料DE是通过消化试验得到的实测值,因此在此基础上确定的一定DE水平下饲粮中含硫氨基酸的适宜水平相对更准确。本试验饲粮的DE为10.87 MJ/kg,处于各国标准的推荐值及de Blas等[6]推荐的生长肉兔的DE范围10.30~11.30 MJ/kg之内。结合本试验Lys水平,当饲粮DE水平为10.87 MJ/kg时,饲粮中含硫氨基酸的适宜水平为0.65%(实测值为0.61%)是可行的。
目前,关于饲粮中Met以及含硫氨基酸适宜水平的研究结果差异较大,究其原因可能与目前氨基酸分析误差较大以及研究采用的是总氨基酸而不是可消化氨基酸有关。由于肉兔饲粮中粗饲料所占比例较大,可用的原料种类也较多,而不同的饲粮组成和精粗原料比例势必会导致氨基酸的消化率存在较大差异,即可能提供的总氨基酸相同而可消化氨基酸却不同,因此得出的结论也就不尽相同。本试验对饲粮氨基酸进行实测得出饲粮Lys和含硫氨基酸水平分别为0.79%和0.61%,比估计值偏低。尽管本试验也没有对氨基酸的消化率进行测定,但考虑到目前国内研究的现状,本试验的结果又基本介于各研究结果的中间水平,因此仍有一定的参考价值。
① 饲粮含硫氨基酸水平显著影响生长肉兔的ADG、F/G以及血清UN和IGF-Ⅰ含量。
② 在本试验条件下,当饲粮DE水平为10.87 MJ/kg时,以ADG、F/G及血清UN和IGF-Ⅰ含量为指标所确定的生长肉兔饲粮含硫氨基酸的适宜水平为0.65%(实测值为0.61%)。
| [1] | 谢晓红,郭志强,秦应和.我国肉兔产业现状及发展趋势[J]. 中国畜牧杂志,2011,47(4):34-38. ( 1)
|
| [2] | DE BLAS C,WISEMAN J.Nutrition of the rabbit[M].2nd ed.Cambridge,M.A. :CAB International,2010. ( 1)
|
| [3] | 计成,顾宏伟,杜玉川,等.加利福尼亚肉兔含硫氨基酸需要量的研究[J]. 北京农业大学学报,1994,20(3):332-337. ( 2)
|
| [4] | 傅祥超,文斌,汪平,等.含硫氨基酸对獭兔生长及被毛发育的影响[J]. 动物营养学报,2013,25(4):761-767. ( 2)
|
| [5] | 周月华,贾刚,王康宁,等.8-12周龄肉兔缬氨酸和异亮氨酸需要量及其与赖氨酸的适宜比例[J]. 动物营养学报,2012,24(11):2148-2153. ( 1)
|
| [6] | DE BLAS C J,MATEOS G G.Feed formulation[M].New York:CAB International,1998:241-253. ( 2)
|
| [7] | 何瑞国,金岭梅,王玉莲,等.生长期实验兔日粮消化能、蛋白质、粗纤维适宜水平和氨基酸模式的研究[J]. 中国实验动物学报,2000,8(1):53-61. ( 1)
|
| [8] | KENNEDY L G,HERSHBERGER T V.Protein quality for the nonruminant herbivore[J].Journal of Animal Science,1974,31(3):506-511. ( 1)
|
| [9] | 张丽君,徐克明,曹福池.商品代AA肉仔鸡饲粮中氨基酸添加量的研究[J]. 黑龙江畜牧兽医,1989(11):1-3. ( 1)
|
| [10] | 王春霞,黄俊纯,杨忠源.肉用仔鸡对甲硫亚砜生物学利用性的研究[J]. 畜牧兽医学报,1991,22(3):212-218. ( 1)
|
| [11] | 周勤飞,肖文川,王永才.饲粮蛋氨酸水平对新西兰肉兔生长性能和毛皮品质的影响[J]. 动物营养学报,2011,23(1):73-77. ( 1)
|
| [12] | 吴振宇,李福昌,王雪鹏,等.饲粮蛋氨酸添加水平对断奶至3月龄獭兔生长性能、免疫功能及血清生化指标的影响[J]. 动物营养学报,2012,24(10):1897-1902. ( 1)
|
| [13] | MALMLOF K.Amino acid in farm animal nutrition metabolism partition and consequences of imbalance[J].Journal of Agriculture Research,1988,18(4):191-193. ( 1)
|
| [14] | STICK D A,DAVID M E,LOERCH S C,et al.Relationship between blood serum insulin-like growth factor Ⅰ concentration and post weaning feed efficiency of crossbred cattle at three levels of dietary intake[J].Journal of Animal Science,1998,76:498-505. ( 1)
|
| [15] | 张永翠.蛋氨酸对肉兔生长发育、免疫性能、血液生化指标及IGF-Ⅰ mRNA表达量的影响 .硕士学位论文.泰安:山东农业大学,2008:25-26. ( 1)
|
| [16] | 李天俊,宋桂敏,周淑云,等.肉兔添加蛋氨酸肥育实验[J]. 中国养兔杂志,2005(1):7-8. ( 1)
|


1)