枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌由中国农业科学院饲料研究所家畜研究室实验室制备，活菌数≥2×10⁹ CFU/g。

采用单因素随机试验，选用128头42日龄断奶的“长×大”二元杂交健康仔猪，按性别比例一致的原则随机分为4个组，每组4个重复，每个重复8头仔猪。对照组(CT)饲喂基础饲粮(不添加抗生素和益生菌)，植物乳杆菌组(LB)饲喂基础饲粮+植物乳杆菌GF103制剂[8.6×10⁹ CFU/(头·d)]，枯草芽孢杆菌组(BS)饲喂基础 饲粮+枯草芽孢杆菌B27制剂[2.0×10⁸ CFU/(头·d)]， 复合菌组(LBS)饲喂基础饲粮+ 植物乳杆菌GF103制剂[4.3×10⁹ CFU/(头·d)]。 枯草芽孢杆菌B27制剂[1.0×10⁸ CFU/(头·d)]。试验全期共35 d，分为2个阶段，第1阶段为第1~14天，第2阶段为第15~35天。

仔猪基础饲粮参照猪场实际饲粮配制，基础饲粮组成及营养水平见表1。试验于北京市大兴区种猪场完成。试验猪饲养在封闭式猪舍内，自动料槽，通风良好，舍温保持在20~25 ℃，每天早、中、晚加3次饲料，保证自动料槽内一直有料，自由采食，自由饮水。每日清粪2次，保持舍内清洁，每周猪舍消毒2次。试验期间按照仔猪常规免疫程序进行免疫。

数据先用Excel 2007进行初步处理，然后用SAS 8.0进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，以P<0.05作为差异显著性判断标准。

由表2可以看出，各组初始重差异不显著(P>0.05)。在试验的前2周，与对照组相比，各组平均日增重均无显著差异(P>0.05)；各益生菌组均显著降低了平均日采食量和料重比(P<0.05)，植物乳杆菌组、枯草芽孢杆菌组和复合菌组分别比对照组降低了23.27%、20.61%、15.39%及24.75%、24.75%、23.23%。在试验的第3~5周，各组平均日采食量、平均日增重和料重比均无显著差异(P>0.05)。整个试验期，各组平均日采食量和平均日增重无显著差异(P>0.05)，但各益生菌组料重比显著低于对照组(P<0.05)，分别降低了12.23%、10.64%、9.04%。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 益生菌对断奶仔猪生长性能的影响 Table 2 Effects of probiotics on growth performance of weaner piglets (n=16) 项目 Items 对照组 CT 植物乳杆菌组 LB 枯草芽孢杆菌组 BS 复合菌组 LBS SEM P值 P-value 初始重 IBW/kg 10.03 9.98 10.03 10.07 0.29 1.000 1~2周 1 to 2 weeks 平均日采食量 ADFI/g 825a 633b 655b 698b 26.07 0.010 平均日增重 ADG/g 419 441 440 463 12.58 0.731 料重比 F/G 1.98a 1.49b 1.49b 1.52b 0.07 0.007 3~5周 3 to 5 weeks 平均日采食量 ADFI/g 1 167 1 047 1 023 1 147 32.42 0.335 平均日增重 ADG/g 635 599 575 638 20.66 0.728 料重比 F/G 1.84 1.76 1.79 1.80 0.02 0.591 1~5周 1 to 5 weeks 平均日采食量 ADFI/g 1 030 882 876 967 28.25 0.150 平均日增重 ADG/g 549 536 521 568 14.83 0.777 料重比 F/G 1.88a 1.65b 1.68b 1.71b 0.03 0.001 同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，相同或无字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。 In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

表2 益生菌对断奶仔猪生长性能的影响 Table 2 Effects of probiotics on growth performance of weaner piglets (n=16)

由表3可以看出，在试验的第15天，复合菌组的肝脏指数显著高于对照组、植物乳杆菌组和枯草芽孢杆菌组(P<0.05)，分别提高了13.52%、12.63%和15.25%；而对照组、植物乳杆菌菌组和枯草芽孢杆菌组之间无显著差异(P>0.05)；各组脾脏指数无显著差异(P>0.05)，但植物乳杆菌组、枯草芽孢杆菌组和复合菌组分别比对照组提高了3.24%、25.41%、22.67%(P>0.05)。在试验的第36天，各组肝脏指数和脾脏指数无显著差异(P>0.05)。

由表4可以看出，在试验的第15天，与对照组相比，复合菌组显著降低了胃和十二指肠的pH(P<0.05)，分别降低了33.93%和16.50%；但各组空肠、回肠和盲肠的pH无显著差异(P>0.05)；植物乳杆菌组和枯草芽孢杆菌组胃、十二指肠、空肠、回肠和盲肠的pH与对照组差异不显著(P>0.05)。在试验的第36天，各组胃、十二指肠、空肠、回肠及盲肠的pH无显著差异(P>0.05)。

通常，动物在消化道内有特定的有益微生物来维持消化道内的菌群平衡，促进动物的生长和对饲料的消化吸收，但在环境和饲料组成发生改变时引起的应激会造成消化道内微生物区系的紊乱，使病原菌大量繁殖，引起消化道疾病，使动物生长受阻^[2]。益生菌是一类含有活菌或其代谢产物的生物制剂，能够促进肠道有益菌的定植和优化肠道微生物区系，并且能改善宿主的消化和免疫功能。国内外大量研究发现，益生菌可以提高仔猪的采食量^[3]和生长性能^[4]，并且提高机体免疫力^[5]，促进肠道益生菌的生长并抑制有害菌的生长。然而，在实际生产中，益生菌的作用并不是十分一致^[6]。张董燕等^[4]对断奶仔猪饲喂不同剂量的猪源罗伊氏乳酸杆菌，结果表明，添加0.50%和0.75%猪源罗伊氏乳酸杆菌组断奶仔猪平均日增重分别比对照组提高了7.56%和20.07%，料重比分别比对照组降低了1.96%和14.90%。但辛娜等^[7]的研究结果表明，饲喂芽孢杆菌对断奶仔猪的平均日增重及饲料转化率均没有影响。引起益生菌对断奶仔猪产生不同作用效果的原因有很多，主要原因是试验采用的菌种及其用量不同。目前的研究多数为单一菌或同属间的复合菌，不同属间的复合菌作用效果的研究相对较少，而Rolfe^[8]认为复合菌比单一菌效果更好，因为复合菌更能促进乳酸菌的增殖。

在本试验中，试验的前2周，益生菌组平均日采食量和料重比均显著低于对照组，但对平均日增重没有显著影响。这些结果表明，对断奶仔猪饲喂植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌及其复合菌，可以使益生菌组与对照组在具有相同平均日增重的情况下，采食较少的饲料，在养殖生产中节约饲料成本。仔猪在断奶后，由于断奶应激会造成采食、饮水行为的减少^[9],由应激引起的采食量下降会对仔猪的生长性能产生影响，出现生长抑制的现象^[9]，并且会引起小肠吸收功能的下降^[10]。但在本试验中，试验的前2周各益生菌组虽然平均日采食量下降，但其生长性能未受到影响，并且料重比也比对照组显著降低。其原因可能是在本试验条件下，各组仔猪的生长性能已经达到较高水平，益生菌组在相近平均日增重的情况下提高了仔猪的饲料转化率，从而使其平均日采食量下降。这个结果与Ross等^[11]的研究结果相似，Ross等^[11]向仔猪饲粮中添加食淀粉乳杆菌和肠球菌35 d后发现，在试验全期，试验组采食量均显著低于对照组，但其生长性能未受影响。

在本试验的第3~5周，益生菌组与对照组之间的平均日增重、平均日采食量和料重比均没有显著差异。同时Giang等^[12]也发现，向23日龄断奶仔猪中添加不同组合的益生菌后，在试验的前2周，益生菌组能显著提高仔猪的平均日增重、平均日采食量和饲料转化率，但在试验的3~5周，各益生菌组对仔猪的平均日增重、平均日采食量及饲料转化率均无显著影响。这可能与仔猪因断奶应激所引起的肠道内变化有关^[13]，并且仔猪肠道也需要时间来适应其变化^[14]。在断奶过程中，有一些关键的营养和环境因素促使胃肠道结构和功能发生显著变化^{[15, 16, 17, 18, 19, 20, 21]}，从而导致胃肠道结构和功能的短暂变化。Pluske等^[17]将这个时期分为急性期和适应期。在急性期内，由于采食量的下降会导致肠道重量下降和黏膜厚度的降低^[23]，同时小肠绒毛高度显著降低^[17]，从而使小肠的吸收功能下降。在适应期内，仔猪采食量恢复到正常水平，主要表现为小肠、胃和大肠的重量显著增加并且超过断奶前的重量^[24]。此外，肠道消化酶活性，尤其是胃蛋白酶、胰蛋白酶和α-淀粉酶活性大幅提高^[25]。因此，益生菌的作用效果在试验的前2周较明显，当应激的影响减弱直到消失后，仔猪肠道功能恢复正常^[13]，益生菌的作用效果也会减弱^[26]。

益生菌在动物疾病特别是肠道感染的防治中起着重要作用，主要有以下2个方面。1)刺激机体产生抗体，提高免疫细胞的活性。马明颖等^[27]的研究发现，向雏鸡饲喂益生菌后可以显著提高雏鸡血清中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)的水平。司振书等^[28]研究表明，饲喂微生态制剂后，10和17日龄肉鸡的脾脏T细胞百分数显著高于对照组。此外，王莉莉等^[29]利用嗜酸乳杆菌细胞壁提取成分对小鼠上皮淋巴细胞共同孵育后发现小鼠淋巴细胞杀伤活性明显增强。研究表明，益生菌可以提高动物的免疫器官指数，从而提高动物机体的免疫力。2)促进免疫细胞、组织和器官生长发育。马明颖等^[27]研究表明，向雏鸡饲喂微生态制剂后，法氏囊指数和脾脏指数有了显著的提高。刘克琳等^[30]用微生态制剂饲喂雏鸡后，试验组免疫器官的重量均高于对照组，面积大于对照组。其胸腺的皮质较宽，皮质内T淋巴细胞明显增多，法氏囊褶皱数量多，盲肠扁桃体面积增大，表明试验组雏鸡的中枢免疫器官胸腺和法氏囊器官生长发育快和成熟度高。辛娜等^[7]研究发现，添加0.75%芽孢杆菌组仔猪的胸腺指数比对照组提高了62.30%，脾脏指数提高了12.04%。在本试验条件下，试验的前2周，复合菌组可以提高仔猪的肝脏指数，且对脾脏指数没有显著影响；在试验的3~5周，各组间的免疫器官指数无显著差异，说明饲喂益生菌对断奶仔猪消化免疫器官的发育没有影响。

胃肠道不但是动物机体营养物质消化吸收的场所，而且还能通过多种非特异的免疫机制和免疫防御机制，形成阻止外界环境中有害物质入侵机体的天然屏障。仔猪胃肠道酸度是影响其消化环境的重要因素，也是调节仔猪内环境酸碱平衡、电解质平衡的基础条件，适宜的酸度是维持仔猪消化系统正常生理功能的关键，尤其是断奶仔猪。但仔猪在断奶应激的条件下，仔猪肾上腺皮质酮的分泌增加，由消化道分泌的做为厌氧菌营养源的黏蛋白数量下降,结果肠道内有机酸产生减少，产酸乳酸杆菌数量减少^[31]，导致胃肠道内环境pH升高。而胃肠道内环境pH的升高不仅会影响消化酶的活性，还会引起大肠杆菌等病原菌的增殖^[32]。研究表明，益生菌能增加仔猪肠道中挥发性脂肪酸的含量，并且降低肠道的pH^[33]，抑制病原菌的增殖作用^[34]。

苏勇等^[35]研究发现，断奶后,仔猪空肠和结肠食糜中乳酸菌和大肠杆菌的数量均明显下降,乳酸菌的下降更显著，与对照组相比,芽孢乳杆菌S1能提高断奶后仔猪空肠和结肠食糜中乳酸菌与大肠杆菌的数量比值，断奶后，仔猪结肠挥发性脂肪酸(VFA)含量明显下降,与对照组相比,试验组结肠VFA含量明显升高。陈惠等^[36]和王红宁等^[37]研究表明,在生长育肥猪饲粮中添加芽孢杆菌,肠道中芽杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌的数量均较对照组显著增加,而大肠杆菌数量显著减少。金鹿等^[38]在蛋种鸡基础饲粮中分别添加50、100、200 g/t的复合微生态制剂，饲养16周后，分3个时期比较了微生态制剂组与空白组的小肠pH和盲肠微生物区系，结果发现，试验1、2组蛋种鸡21日龄空肠和回肠的pH显著低于对照组，试验3组蛋种鸡21、42、112日龄十二指肠及42日龄空肠的pH也显著降低，微生态制剂组可以显著提高21日龄蛋种鸡盲肠乳酸菌的数量。

在本试验中，试验的前2周，复合菌组可以显著降低胃、十二指肠的pH,说明仔猪饲粮中添加复合益生菌可以维护仔猪肠道的健康。健康的仔猪胃肠道中虽然也有大肠杆菌等致病菌，但由于这些致病菌不耐酸，因此并不是优势菌群，但仔猪在受到应激时，胃肠道pH升高，导致其快速增殖从而引发肠道疾病。而饲喂益生菌可以促进动物肠道中有益菌的增殖，使肠道形成一个稳定的酸环境，从而抑制病原菌的增殖，减少肠道疾病的发生。