铜是动物体内具有重要生理功能的微量元素之一，它不仅对生长发育和营养物质的代谢具有重要作用，而且对繁殖、免疫、凝血等许多生理功能都有重要的生物学意义^[1]。饲粮中铜的缺乏或过量都会对动物产生不良影响，严重时甚至发病死亡。Chowdhury等^[2]研究表明，肉鸡育雏饲粮中添加150 mg/kg蛋氨酸铜使血清中总胆固醇(TC)含量显著增加，甘油三酯(TG)含量显著减少，高密度脂蛋白含量无显著变化。Lim等^[3]研究发现，饲粮中添加铜可降低蛋鸡血清和蛋黄中胆固醇含量。Lien等^[4]研究建议，蛋鸡饲粮中添加125 mg/kg铜和800～1 600 μg/kg铬可保证鸡蛋中胆固醇含量的最低标准。滑静等^[5]报道，30 mg/kg硫酸铜为产蛋鸡饲粮中铜的最适添加水平，此时产蛋鸡体内的抗氧化酶活性最高，其抗氧化能力也最强。吴建设等^[6]研究表明，铜缺乏可导致肉仔鸡生长抑制，免疫器官萎缩，淋巴细胞活性下降。迄今为止，家禽饲粮中铜添加水平的研究主要集中在鸡、鸭等禽类，而国内外对鹅饲粮中铜添加水平的研究报道较少。美国NRC(1994)建议家禽铜的营养需要量为8 mg/kg，澳大利亚CSIRO(1987)建议鹅的铜营养需要量为5 mg/kg，《美国Feedstuffs饲料成分分析表》(2009版)的推荐标准是11 mg/kg；目前，国内尚未明确给出铜在鹅饲粮中的适宜添加水平。另外，五龙鹅虽原产于山东胶东半岛，但在东北三省乃至全国不少地方也广有分布，产蛋量居世界领先水平，然而其饲粮中铜的适宜添加水平研究还处于空白。为此，本试验以5～16周龄五龙鹅为试验对象，研究饲粮中不同水平铜对脂类代谢、抗氧化性能和免疫功能的影响，为确定五龙鹅饲粮中铜的适宜添加水平提供理论依据。

选择5周龄健康种用型五龙鹅360只，采用随机分配编号法进行分组。试验设6个组，每组6个重复，每个重复10只(公母各占1/2)。各组分别在基础饲粮(铜含量为5.87 mg/kg)中添加0(Ⅰ组)、15(Ⅱ组)、30(Ⅲ组)、60(Ⅳ组)、120(Ⅴ组)、240 mg/kg(Ⅵ组)的五水硫酸铜。以Ⅰ组为对照组，试验期为12周。试验鹅由国家水禽产业技术体系育种基地莱阳天森豁眼鹅繁育中心提供。试验用的食品级五水硫酸铜购自浙江新维普添加剂有限公司，其有效成分为98.5%。 1.2 基础饲粮

基础饲粮组成及营养水平参照NRC(1994)家禽营养需要量设计(表1)。

试验前对鹅舍进行全面消毒；全期舍饲，地面厚垫料分栏饲养；试验鹅自由饮水和采食；饲粮少添勤喂；注意观察鹅群的生长状况。

16周龄末称重后，从每个重复中随机选取2只鹅(公母各占1/2)，共72只。翅静脉采血10 mL，3 000 r/min离心15 min制得血清样品。干粉酶法测定血清中TC、TG含量，选择性沉淀法测定血清中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量，以上指标均用试剂盒测定，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

16周龄末称重后，从每个重复中随机选取2只鹅(公母各占1/2)，共72只。翅静脉采血10 mL，3 000 r/min离心15 min制得血清样品。血清中总抗氧化能力(T-AOC)、铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)和铜蓝蛋白(CP)活性均用试剂盒测定，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) % 项目 Items 含量 Content 原料 Ingredients 玉米 Corn 60.00 豆粕 Soybean meal 28.40 玉米秸秆 Maize stover 2.00 次粉 Wheat middling 5.00 鱼粉 Fish meal 2.00 磷酸氢钙 CaHPO4 0.84 食盐 NaCl 0.30 石粉 Limestone 0.96 多维 Multivitamin1) 0.30 微量元素 Trace elements1) 0.20 合计 Total 100.00 营养水平 Nutrient levels2) 粗蛋白质 CP 18.92 代谢能 ME/(MJ/kg) 11.76 赖氨酸 Lys 1.02 蛋氨酸 Met 0.31 胱氨酸 Cys 0.31 钙 Ca 0.74 有效磷 AP 0.33 粗纤维 CF 3.27 铜 Cu/(mg/kg) 5.87 1)多维和微量元素(不含铜)为每千克饲粮提供The multivitamin and trace elements (without Cu) provided the following per kg of the diet：烟酸 nicotinic acid 65 mg，泛酸 pantothenate 15 mg，叶酸 folic acid 0.5 mg，VD3 200 IU，VA 1 500 mg，VB1 2.2 mg，VB2 5.0 mg，VB6 2 mg，VE 12.5 mg，VK3 1.5 mg，生物素 biotin 0.2 mg，胆碱 choline 1 000 mg，Fe 85 mg，Mn 80 mg，I 0.42 mg，Se 0.3 mg，Co 2.5 mg。 2)营养水平为计算值。Nutrient levels were calculated values．

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) %

相关免疫指标测定方法均参照《动物免疫学实验教程》^[7]。

16周龄末称重后，从每个重复中随机选取2只鹅(公母各占1/2)，共72只。翅静脉采血后进行屠宰，宰前禁食12 h。取出胸腺、脾脏和法氏囊，并剔除附着的组织，用滤纸吸干血水后准确称其重量，并计算免疫器官指数。计算公式如下：

试验第5周末鹅群注射禽流感疫苗，注射后第2周从每个重复中选取2只体重接近该组平均体重的鹅。清晨喂料前，无菌翅静脉采血10 mL，不抗凝，3 000 r/min离心15 min制备血清，分装，测定禽流感抗体效价。

1)血球凝集试验(HA)

试验在96孔“V”型微量反应板上进行。结果判定：以100%凝集的病毒最大稀释孔为血凝价(1个凝集单位)，不凝集者红细胞沉于孔底呈点状。

2)血细胞凝集抑制试验(HI)

根据HA试验结果，确定血凝价。结果判定：以100%抑制凝集的血清最大稀释度为血清效价，凡被血清抑制凝集的，就为禽流感病毒。

采用SPSS 17.0软件中单因素方差分析(one-way ANOVA)中的LSD法进行多重比较。试验数据以“平均值±标准差”表示。P＜0.05和P＜0.01分别为差异显著和极显著水平。

由表2可见，Ⅲ组血清中TC含量极显著低于Ⅰ组(P<0.01)，显著低于Ⅱ组(P<0.05)，与Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组间差异不显著(P>0.05)；Ⅲ组血清中TG含量显著低于Ⅰ组(P<0.05)，其他各组间差异不显著(P>0.05)；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组血清中HDL-C含量显著高于Ⅰ组(P<0.05)；Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组血清中LDL-C含量极显著低于Ⅰ组(P<0.01)。而Ⅱ和Ⅲ组的血清中TG和HDL-C含量差异不显著(P>0.05)。Ⅳ～Ⅵ组血清中TC、TG和LDL-C含量逐渐提高，HDL-C含量逐渐降低。

由此表明，饲粮中添加30 mg/kg铜能够显著降低血清中TC、TG和LDL-C含量(P<0.05)，显著提高HDL-C含量(P<0.05)。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 饲粮中不同水平铜对五龙鹅脂类代谢的影响 Table 2 Effects of dietary different copper levels on lipid metabolism of Wulong geese mmol/L 组别 Groups 总胆固醇 TC 甘油三酯 TG 高密度脂蛋白胆固醇 HDL-C 低密度脂蛋白胆固醇 LDL-C Ⅰ 7.49±0.70c 6.27±0.36b 3.41±0.67a 2.63±0.79c Ⅱ 6.74±1.99bc 5.89±0.41ab 5.41±0.73b 2.38±1.82bc Ⅲ 4.78±2.32a 5.30±0.62a 5.60±1.05b 1.48±1.53a Ⅳ 4.98±1.24ab 5.73±0.52ab 5.27±0.85b 1.58±1.17a Ⅴ 5.25±0.86abc 5.76±0.80ab 4.52±1.37ab 1.89±0.67a Ⅵ 5.48±1.05abc 5.78±0.52ab 4.20±1.46ab 2.46±1.09bc 同列数据肩标相同小写字母或无字母表示差异不显著(P＞0.05)，相邻小写字母表示差异显著(P＜0.05)，相间小写字母表示差异极显著(P＜0.01)。下表同。 In the same column， values with the same small letter or no letter superscripts mean no significant difference (P＞0.05)，while with adjacent small letter superscripts mean significant difference (P＜0.05)， and with alternate small letter superscripts mean significant difference (P＜0.01)．The same as below．

表2 饲粮中不同水平铜对五龙鹅脂类代谢的影响 Table 2 Effects of dietary different copper levels on lipid metabolism of Wulong geese mmol/L

由表3可见，Ⅲ组血清中T-AOC显著高于Ⅰ组(P<0.05)，其他各组间差异不显著(P>0.05)；Ⅲ组血清中CuZn-SOD活性极显著高于Ⅰ组(P<0.01)，显著高于Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组(P<0.05)；Ⅲ组血清中CP活性极显著高于Ⅰ组(P<0.01)，显著高于Ⅵ组(P<0.05)，与其他各组间差异不显著(P＞0.05)。

从总体来看，Ⅱ、Ⅲ组血清中T-AOC和CP活性差异不显著(P>0.05)，Ⅳ～Ⅵ组抗氧化酶活性逐渐降低，由此表明，饲粮中添加15～30 mg/kg铜能显著提高抗氧化酶活性，增加机体抗氧化能力，但过多添加导致抗氧化酶活性降低。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 饲粮中不同水平铜对五龙鹅抗氧化酶活性的影响 Table 3 Effects of dietary different copper levels on antioxidant enzyme activity of Wulong geese 组别 Groups 总抗氧化能力 T-AOC/(U/mL) 铜锌超氧化物歧化酶 CuZn-SOD/(U/mL) 铜蓝蛋白 CP/(U/L) Ⅰ 14.45±2.93a 200.60±9.31a 6.02±3.00a Ⅱ 19.10±4.23ab 210.34±7.97ab 13.81±3.70bc Ⅲ 20.02±1.73b 221.48±11.60c 15.91±5.36c Ⅳ 16.44±4.15ab 213.07±9.87ab 15.21±4.13bc Ⅴ 14.18±3.63a 206.36±11.40ab 10.53±4.69abc Ⅵ 14.62±2.32a 204.66±11.32ab 9.02±3.23ab

表3 饲粮中不同水平铜对五龙鹅抗氧化酶活性的影响 Table 3 Effects of dietary different copper levels on antioxidant enzyme activity of Wulong geese

由表4可见，Ⅱ组胸腺指数比Ⅰ组提高了20.44%(P<0.05)，Ⅲ组比Ⅰ组提高了29.78%(P<0.01)；Ⅲ、Ⅳ组脾脏指数比Ⅰ组分别提高了17.50%、16.25%(P<0.05)，Ⅱ组比Ⅰ组提高了7.50%(P>0.05)；Ⅱ、Ⅳ组法氏囊指数分别比Ⅰ组提高了21.05%、18.42%(P<0.05)，Ⅲ组比Ⅰ组提高了36.84%(P<0.01)。Ⅱ和Ⅲ组胸腺指数和脾脏指数差异不显著(P>0.05)。Ⅳ～Ⅵ组免疫器官指数逐渐降低。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 饲粮中不同水平铜对五龙鹅免疫器官指数的影响 Table 4 Effects of dietary different copper levels on immune organ index of Wulong geese mg/g 组别 Groups 胸腺指数 Index of thymus 脾脏指数 Index of spleen 法氏囊指数 Index of bursa of Fabricius Ⅰ 2.25±0.29a 0.80±0.23a 0.38±0.03a Ⅱ 2.71±0.26bc 0.86±0.18ab 0.46±0.03b Ⅲ 2.92±0.19c 0.94±0.13b 0.52±0.04c Ⅳ 2.48±0.34ab 0.93±0.18b 0.45±0.05b Ⅴ 2.42±0.26ab 0.89±0.13ab 0.42±0.04ab Ⅵ 2.26±0.18a 0.88±0.22ab 0.40±0.05ab

表4 饲粮中不同水平铜对五龙鹅免疫器官指数的影响 Table 4 Effects of dietary different copper levels on immune organ index of Wulong geese mg/g

由此表明，饲粮中添加15～30 mg/kg铜能提高免疫器官指数，增强免疫力，但过多添加导致免疫器官指数降低。 2.3.2 饲粮中不同水平铜对五龙鹅禽流感抗体效价的影响

由表5可见，Ⅲ组免疫后14 d禽流感抗体效价显著高于Ⅰ和Ⅵ组(P<0.05)，与Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ组差异不显著(P>0.05)；Ⅲ组免疫后21 d禽流感抗体效价极显著高于Ⅰ和Ⅵ组(P<0.01)，也显著高于Ⅳ和Ⅴ组(P<0.05)，与Ⅱ组差异不显著(P>0.05)；Ⅲ组免疫后28 d禽流感抗体效价极显著高于Ⅰ和Ⅵ组(P<0.01)，也显著高于Ⅴ组(P<0.05)，Ⅱ和Ⅳ组也显著高于Ⅰ组(P<0.05)，而Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组差异不显著(P>0.05)。

由此表明，饲粮中添加15～30 mg/kg铜在免疫后14、21、28 d时禽流感抗体效价均达到较高水平。

由表6可见，血清中T-AOC与TC、TG、LDL-C含量呈负相关，但相关性差异不显著(P>0.05)，与血清中HDL-C含量呈显著正相关(P<0.05)；血清中CP活性与TC含量呈显著负相关(P<0.05)，与血清中HDL-C含量呈极显著正相关(P<0.01)，与血清中LDL-C含量呈负相关，相关性差异不显著(P>0.05)；血清中CuZn-SOD活性与TC和LDL-C含量呈极显著负相关(P<0.01)，与血清中TG含量呈显著负相关(P<0.05)，与血清中HDL-C含量呈极显著正相关(P<0.01)。

由此表明，5~16周龄五龙鹅血清中T-AOC、CuZn-SOD和CP活性与脂类代谢指标有一定相关性。可见，饲粮中添加铜可以提高五龙鹅机体内脂类代谢水平和抗氧化能力。

表5

Table 5

表5(Table 5)

表5 饲粮中不同水平铜对五龙鹅禽流感抗体效价的影响 Table 5 Effects of dietary different copper levels on antibody titer of Wulong geese log2 组别 Groups 免疫后14 d The fourteenth day after immunization 免疫后21 d The twenty-first day after immunization 免疫后28 d The twenty-eighth day after immunization Ⅰ 3.67±0.58a 4.33±1.52a 5.50±0.58a Ⅱ 5.00±1.73b 6.00±1.73bc 6.67±1.73bc Ⅲ 5.33±1.52b 6.67±0.58c 7.33±1.52c Ⅳ 4.67±0.58ab 5.33±1.50ab 6.50±1.52bc Ⅴ 4.50±1.73ab 5.00±1.73ab 6.00±1.73ab Ⅵ 4.00±0.58a 4.50±1.52a 5.33±1.52a

表5 饲粮中不同水平铜对五龙鹅禽流感抗体效价的影响 Table 5 Effects of dietary different copper levels on antibody titer of Wulong geese log2

表6

Table 6

表6(Table 6)

表6 血清抗氧化酶活性与脂类代谢指标的相关性 Table 6 The correlation of serum antioxidant enzyme activities and lipid metabolism indexes 项目 Items 总胆固醇 TC 甘油三酯 TG 高密度脂蛋白胆固醇 HDL-C 低密度脂蛋白胆固醇 LDL-C 总抗氧化能力T-AOC -0.163 -0.188 0.359* -0.007 铜蓝蛋白 CP -0.353* -0.006 0.632** -0.238 铜锌超氧化物歧化酶 CuZn-SOD -0.634** -0.342* 0.456** -0.479** *表示显著相关(P<0.05)，* *表示极显著相关(P<0.01)。下表同。 * means significant correlation (P<0.05), and * * means extremely significant correlation (P<0.01). The same as below.

表6 血清抗氧化酶活性与脂类代谢指标的相关性 Table 6 The correlation of serum antioxidant enzyme activities and lipid metabolism indexes

由表7可见，胸腺指数与血清中T-AOC呈显著正相关(P<0.05)，与血清中CuZn-SOD活性呈极显著正相关(P<0.01)，与血清中CP活性的相关性不显著(P>0.05)；脾脏指数与血清中T-AOC和CuZn-SOD活性呈显著正相关(P<0.05)，与血清中CP活性的相关性不显著(P>0.05)；法氏囊指数与血清中T-AOC和CuZn-SOD活性呈极显著正相关(P<0.01)，与血清中CP活性呈显著正相关(P<0.05)。

由此表明，血清中T-AOC和CuZn-SOD活性与免疫器官指数显著相关，而血清CP活性与法氏囊指数有显著相关性。

表7

Table 7

表7(Table 7)

表7 血清抗氧化酶活性与免疫器官指数的相关性 Table 7 The correlation of serum antioxidant enzyme activities and immune organ indexes 项目 Items 胸腺指数 Index of thymus 脾脏指数 Index of spleen 法氏囊指数 Index of bursa of Fabricius 总抗氧化能力 T-AOC 0.360* 0.319* 0.562** 铜蓝蛋白 CP 0.291 0.090 0.367* 铜锌超氧化物歧化酶 CuZn-SOD 0.480** 0.445* 0.438**

表7 血清抗氧化酶活性与免疫器官指数的相关性 Table 7 The correlation of serum antioxidant enzyme activities and immune organ indexes

血清TC含量是衡量肝功能的重要指标之一，肝脏是动物体内胆固醇合成的重要器官，有60%~80%的血清胆固醇来自肝脏，同时，肝脏又是胆固醇代谢的主要场所^[8]。Al Ankari等^[9]研究表明，饲粮中添加250 mg/kg铜可导致蛋鸡产蛋量下降，蛋黄胆固醇含量降低。Konjufca等^[10]研究表明，罗斯鸡的饲粮中补充铜可改变血脂和胆固醇代谢。本试验结果表明，随饲粮中铜添加水平的增加，血清中TC含量总体呈现降低的趋势，当饲粮中添加30 mg/kg铜时，血清中TC含量最低。另有研究表明，在饲粮中补充铜能够显著增加肝脏谷胱甘肽(GSH)的含量^[11]，而GSH的含量可能与β-羟β-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCoA-R)的活性有关，由于GSH含量增加，抑制了HMGCoA-R的活性，达到降低TC含量的目的，所以说铜、GSH、HMGCoA-R和TC之间可能存在一种内在的相互影响的机制。

TG是脂肪的主要成分，血清中TG的含量可作为机体内脂肪代谢正常的一项重要指标。家禽体内，脂类物质特别是TG可在脂肪细胞、肝细胞和生长中的卵母细胞中沉积。血清中TG含量的降低，说明脂肪分解增强或转化为体脂增强^[12]。Griffin等^[13]报道达到上市体重的肉仔鸡脂肪组织的80%～85%脂肪酸来自血脂。因此，脂肪沉积的速度受血浆中TG含量的影响。本试验结果表明，饲粮中添加30 mg/kg铜时，血清中TG含量达到最低。

高密度脂蛋白为血清蛋白质之一，富含磷脂质，运载周围组织中的胆固醇，可输出胆固醇促进胆固醇的代谢，所以现在医学上将其作为动脉硬化预防因子，被称为“胆固醇的清道夫”。低密度脂蛋白主要功能是把胆固醇运输到全身各处细胞，运输到肝脏合成胆酸，因此在胆固醇代谢中起着重要作用。被氧化的LDL-C是导致动脉粥样硬化的危险因素，LDL-C含量如果超出正常范围时就会使心脏的危险性增加，因此防止LDL-C被氧化成为不可忽视的因素。尹靖东等^[14]研究表明，铜和有机铬均能极显著降低蛋鸡LDL-C含量，显著升高HDL-C含量。Kouba等^[15]报道，极低密度脂蛋白含量也是反映火鸡胴体肥度的良好指标。本试验研究发现，饲粮中添加15～60 mg/kg铜可显著提高血清中HDL-C含量，添加30～120 mg/kg铜可显著降低血清中LDL-C含量，本试验与上述研究结果有类似之处。表明饲粮中添加铜对血清中HDL-C和LDL-C含量均有良好影响。

随饲粮中添加铜水平的增加，血清中TC、TG和LDL-C含量有先降低后升高的趋势，各组较对照组均有一定程度的降低，而HDL-C含量呈现先升高后降低的趋势。但最高与最低值均出现在Ⅲ组，这可能与铜影响脂肪吸收机制有关。一方面，吸收后游离状态的铜离子在消化道内干扰胆汁的肝肠循环，使小肠内脂肪酶的活性降低，脂肪的消化和吸收减少，增加了粪便中脂肪的排出；另一方面，在饲粮中添加高水平的铜后，血清中TC、TG、LDL-C和HDL-C含量会随着动物的种类和性别不同而出现较大差异，所以有关血清铜含量与血清脂质代谢相关指标之间的关系有待进一步深入研究。

T-AOC是用于衡量机体抗氧化系统功能状况的综合性指标。当动物饲粮中铜缺乏时，机体的抗氧化机能降低，在一定范围内适当提高饲粮中铜水平可有效提高动物机体抗氧化能力，但动物机体抗氧化能力并非随饲粮中铜添加水平增加而呈线性上升^[16]。本试验结果显示，当饲粮中添加15～30 mg/kg铜时，血清中T-AOC达到最高，超过120 mg/kg时，血清中T-AOC显著降低，本试验结果也说明铜的过量添加可能超过了机体生理对它的需求，从而导致机体的抗氧化能力降低，体内抗氧化酶合成减少或利用非酶性抗氧化物质的能力减弱所致。

CuZn-SOD广泛存在于动物组织中，是抗自由基毒性的关键酶之一。Chen等^[17]研究发现，CuZn-SOD在动物机体内能够清除氧自由基的毒害作用，其对氧化还原副产物及过氧化离子的抑制作用是通过其对氧的氢化作用来完成的，此酶的活性具有生长依赖性。Hill等^[18]给3～21日龄仔猪口服10 mg/d硫酸铜后，血清中CuZn-SOD活性明显得到了提高。Zhou等^[19]给仔猪注射相当于饲粮中添加250 mg/kg铜的组氨酸铜溶液后，血清中CuZn-SOD活性显著增加。滑静等^[5]在基础饲粮中分别添加0、6、15、30、60、125 mg/kg五水硫酸铜饲喂产蛋鸡，结果发现，8周龄时，饲粮中添加30 mg/kg五水硫酸铜，血清中CuZn-SOD活性达到最高值，添加125 mg/kg五水硫酸铜，血清中CuZn-SOD活性显著降低。张力等^[20]试验结果表明，猪饲粮中铜含量从4.36 mg/kg上升到125.00 mg/kg时，其血液中CuZn-SOD活性提高了40%；当饲粮中铜含量从125.00 mg/kg提高到250.00 mg/kg时，血液中CuZn-SOD活性下降了9%。许多研究结果表明，在一定范围内适当提高饲粮中铜添加水平可有效提高动物体组织中CuZn-SOD的活性，但CuZn-SOD活性并非随饲粮中铜添加水平增加而呈线性上升。本试验研究表明，5~16周龄五龙鹅饲粮中添加30 mg/kg铜时，血清中CuZn-SOD活性达到最高值，当铜添加水平超过120 mg/kg时出现显著降低，与上述研究结果基本一致。

CP的主要功能是运输铜，能动员机体内的贮存铁，并促进铁的运输和代谢。高原等^[21]研究表明，高剂量硫酸铜能显著提高猪血清中CP活性。本研究表明，添加铜试验组血清中CP活性较对照组显著提高；饲粮中添加15～30 mg/kg铜时，血清中CP活性极显著高于对照组，并达到最高值。其他添加铜试验组血清中CP活性也显著高于对照组。

血清中T-AOC、CuZn-SOD和CP活性反映了机体消除氧自由基的能力。本试验表明，当饲粮中添加15～30 mg/kg铜时，血清中T-AOC、CuZn-SOD和CP活性显著高于对照组，说明此剂量范围能使5~16周龄五龙鹅体内抗氧化能力达到最强。

免疫器官指数是反映免疫器官生长发育状况的一个重要指标。一般认为，免疫器官重量增加是由于其自身细胞生长发育和分裂增殖所致，是免疫增强的表现；免疫器官重量的降低为免疫抑制所致，表明机体免疫状况变差。免疫器官指数的提高表明了该器官成熟快。Bala等^[22]试验指出，缺铜大鼠脾脏和法氏囊萎缩，胸腺重量减轻。李秀霞等^[23]研究证明，提高饲粮中铜添加水平有促进小鼠的脾脏发育、缓解胸腺退化趋势的作用，并能提高小鼠体液免疫功能和单核细胞吞噬功能。吴建设等^[24]研究证明，在基础饲粮中添加0(低铜)、100 mg/kg(高铜)铜与添加11 mg/kg铜相比，肉仔鸡的胸腺、法氏囊和脾脏不同程度萎缩。本试验结果表明，免疫器官指数呈现先升高后降低的趋势，这与张彩英等^[25]的研究结果相一致。在饲粮中添加15～30 mg/kg铜显著增加了胸腺指数和脾脏指数。由此可见，硫酸铜在一定条件下可影响免疫器官的发育。

禽流感抗体效价的检测是衡量动物体液免疫水平的重要指标之一。缺铜导致机体体液免疫功能降低，抗体合成受损及抗体效价降低。这是因为铜缺乏导致抗体生成细胞应答反应降低，对各种微生物的易感性增高，并且还产生不完全抗体。吴建设等^[24]在肉仔鸡饲粮中分别添加0、6.5、11.0、55.0、100.0 mg/kg铜，研究表明铜过低或过量均导致血清鸡新城疫病毒(NDV)、马立克氏病病毒(MDV)抗体效价显著降低。本试验结果表明，饲粮添加15～30 mg/kg铜时，禽流感抗体效价都维持在较高水平，其中添加30 mg/kg铜时最高。此结果说明，鹅体液免疫功能与硫酸铜的添加水平密切相关，铜添加水平过低和过高(Ⅰ和Ⅵ组)都会降低体液免疫功能。从整个试验阶段来看，饲粮中添加15～30 mg/kg铜时，5～16周龄鹅的禽流感抗体效价最好。

脂类代谢可影响动物肝脏中脂肪和胆固醇的合成及脂肪组织中脂肪合成酶与分解酶的活性，促进脂肪的重分配。机体的氧化状况反映了机体抗氧化酶系统和非酶系统对外来刺激的代偿能力以及机体自由基代谢的状态。Lamb等^[26]在新西兰白兔高胆固醇饲粮中添加0.02%的醋酸铜，研究发现，铜补充剂抑制动脉粥样硬化是通过增加超氧化物歧化酶的表达，从而减少一氧化氮与超氧化物歧化酶的相互作用，防止动脉粥样硬化的。Galhardi等^[27]研究表明，在大鼠饮食中添加铜可改善内源性抗氧化防御系统并降低体内的氧化应激，从而改善大鼠机体的血脂水平。目前有关血清脂类代谢与抗氧化性能之间的相关性报道较少。从本试验结果中可以看出，超氧化物歧化酶与脂类代谢呈现极显著或显著负相关，表明饲粮中添加铜可以提高血清的氧化酶活性，从而降低血脂水平。这也许是间接影响五龙鹅的脂类代谢的重要原因之一。

超氧化物歧化酶的主要功能是去除动物体液或组织中由代谢所产生的超氧基，从而减少或去除超氧基氧化破坏动物细胞膜或细胞内还原性活性成分的作用，并提高动物机体的免疫功能^[28]。王敏奇等^[29]研究表明，断奶仔猪饲粮中添加载铜纳米壳聚糖能提高机体免疫力，增强抗氧化能力，从而产生抵抗断奶应激、改善生产性能的效果。从本试验的结果中可以看出，饲粮中添加适宜水平的铜可提高免疫器官指数，也就意味着免疫器官组织重量和免疫细胞数量的增加，抗氧化酶活性也相应增强，因此免疫器官指数与抗氧化酶活性之间存在着显著的相关性。说明铜可能通过调节自身的抗氧化酶活性与免疫机能以维持机体代谢平衡。

畜禽饲养标准中营养需要量是指动物在最适宜环境条件下，正常、健康生长或达到理想生产成绩对各种营养物质种类和数量的最低要求。营养需要中规定的营养物质定额一般不适宜直接在畜禽生产中应用，常要根据不同的具体条件，适当考虑一定程度保险系数，以保证获得最佳生长性能。本试验得出：5～16周龄，饲粮中添加15～30 mg/kg铜时，五龙鹅能够达到最佳抗氧化能力和免疫功能；此生长期铜过多添加无生物学意义。另外，五龙鹅属于小型品种，至于我国其他类型品种鹅的饲粮中铜的适宜添加水平还有待于继续研究。

① 5~16周龄五龙鹅饲粮中添加铜有降低TC、TG和LDL-C含量的作用。

② 饲粮中添加15～30 mg/kg铜时，能够显著增强机体抗氧化能力和免疫力。

③ 机体抗氧化酶活性与脂类代谢指标、免疫器官指数相互间存在一定的相关性。