维生素A是动物体内必需的一种脂溶性维生素，研究表明，维生素A对于维持上皮细胞的完整性、正常视觉、基因调节、动物繁殖、免疫功能、抗氧化作用等方面都是必不可少的。近年来的研究发现，维生素A能增强机体抗感染能力,参与蛋白质的合成,维持骨骼的正常生长代谢^[1]。Maden^[2]进一步研究表明维生素A在胚胎发育中也起重要作用。目前，我国还未正式出台獭兔完整的饲养标准，因此对獭兔维生素A需要量的研究具有重要意义。本试验以生长獭兔为研究对象，探讨饲粮添加不同水平维生素A对其生长性能、毛皮品质、维生素A沉积、血清生化指标和抗氧化性能的影响，寻求獭兔饲粮中维生素A适宜添加水平，为我国制定獭兔饲养标准提供科学依据。

基础饲粮参照NRC(1977)家兔饲养标准配制而成，其组成及营养水平见表1。在基础饲粮中分别添加0(对照组)、5 000、10 000、20 000、40 000 IU/kg维生素A醋酸酯，制成5种试验饲粮，加工成直径4~6 mm的颗粒饲料，通风干燥保存。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) % 项目 Items 含量 Content 原料 Ingredients 玉米 Corn 16.00 豆粕 Soybean meal 17.00 小麦麸 Wheat bran 18.00 花生秧 Peanut vine 46.00 碳酸氢钙 CaHPO4 1.50 食盐 NaCl 0.50 预混料 Premix1) 1.00 合计 Total 100.00 营养水平 Nutrient levels2) 消化能 DE/(MJ/kg) 10.08 粗蛋白质 CP 15.89 粗纤维 CF 12.62 粗脂肪 EE 2.18 钙 Ca 1.23 磷 P 0.60 维生素A VA/(IU/kg) 1 140.00 1)预混料为每千克饲粮提供Premix provided the following per kg of the diet：VD3 2 000 IU，VE 15 mg，VK 1.5 mg，VB1 1.8 mg，VB2 6 mg，VB3 13.5 mg，VB5 24 mg，VB6 0.3 mg，VB12 0.024 mg，Cu 10 mg，Fe 60 mg，Zn 70 mg，Mn 16 mg，Se 0.1 mg，生物素 biotin 0.09 mg，叶酸 folic acid 0.3 mg，地克珠利 diclazuril 5 mg。 2)代谢能为计算值，其余为实测值。ME was a calculated value，while the others were measured values.

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) %

试验选用健康、平均体重为(1.50±0.14) kg的3月龄獭兔200只，公母各占1/2，随机分成5组，每组40个重复，每个重复1只獭兔。分别饲喂以上5种饲粮，预试期7 d，正试期53 d。试兔单笼饲养，试验期间早晚各喂1次，采用常规饲养管理和免疫程序，自然采光、通风。

在试验开始后第53天早晨空腹称重，每组随机抽取8只试兔，立即心脏采血10 mL，37 ℃水浴40 min后，3 000 r/min离心15 min，分离所得血清分装于Eppendorf管中，置于-20 ℃冷冻保存，待测血清维生素A含量、血清生化指标和抗氧化性能指标。

采血完成后将试兔颈动脉放血屠宰，取毛皮进行称重，将毛皮沿腹中线剪开，量其长、宽，记录数据，计算毛皮面积；摘取肝脏放于液氮罐中保存，待测肝脏维生素A含量及抗氧化性能指标。

试验结束后，以重复为单位称量试兔的体重，并统计全期的喂料量，计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

屠宰后，称取毛皮重量，将毛皮平铺后量取皮长、皮宽(肩部、腰部、臀部各量1次，取平均值)计算毛皮面积，毛囊密度采用石蜡切片及苏木精-伊红(HE)染色法进行图像分析，每只试兔选取3张HE染色切片(肩部、背部及臀部各1张)，每张切片选2个视野拍照，用Image-Plus软件对每个视野的毛囊个数、初级毛囊个数、次级毛囊个数进行统计，计算出毛囊密度、初级毛囊密度和次级毛囊密度,并计算次级毛囊密度/初级毛囊密度(S/P)^[3]。

高效液相色谱法，参照文献^[4]的方法。

血清尿素氮(UN)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)含量均在日立7020型全自动分析仪上测定，试剂盒购自日本和光纯药工业株式会社。

血清和肝脏总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量均在UV-2450型紫外可见分光光度计上测定，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

数据采用SAS 9.1统计软件中的GLM进行数据的方差分析，若有显著差异，则采用Duncan氏法进行数据的多重比较。

由表2可以看出，在初始体重无显著差异(P>0.05)的情况下，饲粮维生素A添加水平对獭兔ADG、ADFI影响不显著(P>0.05)，对F/G影响显著(P<0.05)，其中10 000 IU/kg维生素A添加组F/G最低,显著低于对照组和5 000 IU/kg维生素A添加组(P<0.05)，而10 000、20 000和40 000 IU/kg维生素A添加组之间差异不显著(P>0.05)，ADG在饲粮维生素A添加水平为10 000 IU/kg时最高。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔生长性能的影响 Table 2 Effects of dietary vitamin A level on growth performance of growing Rex rabbits 项目 Items 饲粮维生素A添加水平 Dietary vitamin A level/(IU/kg) R-MSE P值 P-value 0 5 000 10 000 20 000 40 000 初始体重 IBW/kg 1.48 1.50 1.50 1.49 1.49 0.091 1 0.423 8 平均日增重 ADG/g 18.24 18.39 19.63 19.12 19.26 1.735 7 0.400 6 平均日采食量 ADFI/g 130.88 130.71 129.18 128.04 130.35 1.726 8 0.938 2 料重比 F/G 7.17a 7.10a 6.58b 6.69b 6.77b 0.610 1 0.045 4 同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异显著(P<0.05),不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。下表同。 In the same row，values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05)，while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05)，and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as below.

表2 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔生长性能的影响 Table 2 Effects of dietary vitamin A level on growth performance of growing Rex rabbits

由表3可以看出，饲粮维生素A添加水平对生长獭兔毛皮重量和毛皮面积的影响极显著(P<0.01)，毛皮重量及毛皮面积都随饲粮维生素A添加水平增加呈先升高后降低的变化，10 000 IU/kg维生素A添加组均显著高于其他4组(P<0.05)，饲粮维生素A添加水平对毛囊密度、初级毛囊密度、S/P均无显著影响(P>0.05)。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔毛皮品质的影响 Table 3 Effects of dietary vitamin A level on fur quality of growing Rex rabbits 项目 Items 饲粮维生素A添加水平 Dietary vitamin A level/(IU/kg) R-MSE P值 P-value 0 5 000 10 000 20 000 40 000 毛皮重量 Fur weight/g 318.50Cd 342.00ABb 347.50Aa 327.67BCc 327.00BCc 15.208 3 0.009 6 毛皮面积 Fur area/cm2 1 268.38Bc 1 288.25ABb 1 368.81Aa 1 155.00Be 1 218.38Bd 82.293 1 0.000 2 毛囊密度 Hair follicle density/mm2 322.72 326.34 338.21 331.78 315.92 31.564 3 0.227 4 初级毛囊密度 Primary hair follicle density/mm2 12.66 10.98 11.43 12.12 10.05 2.075 6 0.198 7 次级毛囊密度 Secondary hair follicle density/mm2 310.15 316.95 327.01 319.98 305.17 26.664 3 0.289 5 次级毛囊密度/初级毛囊密度 S/P 24.50 28.86 28.43 26.04 30.52 5.633 4 0.342 1

表3 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔毛皮品质的影响 Table 3 Effects of dietary vitamin A level on fur quality of growing Rex rabbits

由表4可以看出，饲粮维生素A添加水平对血清中维生素A含量影响显著(P<0.05)，当饲粮维生素A添加水平在0~20 000 IU/kg范围内时，随饲粮维生素A添加水平增加，血清维生素A含量呈升高趋势，当饲粮维生素A添加水平超过20 000 IU/kg后，血清维生素A含量趋于平稳；饲粮维生素A添加水平对肝脏中维生素A含量影响显著(P<0.05)，随饲粮维生素A添加水平增加，肝脏维生素A含量呈升高趋势，且呈线性关系。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔血清及肝脏维生素A沉积的影响 Table 4 Effects of dietary vitamin A level on vitamin A deposition in serum and liver of growing Rex rabbits 项目 Items 饲粮维生素A添加水平 Dietary vitamin A level/(IU/kg) R-MSE P值 P-value 0 5 000 10 000 20 000 40 000 血清 Serum/(IU/dL) 2.31c 2.35c 2.42b 2.47a 2.47a 0.408 4 0.029 4 肝脏 Liver/(IU/g) 232.19d 253.76c 272.22b 284.86b 296.55a 17.499 9 0.011 5

表4 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔血清及肝脏维生素A沉积的影响 Table 4 Effects of dietary vitamin A level on vitamin A deposition in serum and liver of growing Rex rabbits

由表5可以看出，饲粮维生素A添加水平对血清UN含量影响显著(P<0.05)，10 000、20 000 IU/kg维生素A添加组显著低于其他组(P<0.05)，饲粮维生素A添加水平对血清TP含量影响不显著(P>0.05)，对血清ALB含量影响显著(P<0.05)，对照组显著低于其他组(P<0.05)，其他各组间无显著差异(P>0.05)，其中饲粮维生素A添加水平为10 000 IU/kg时血清ALB含量最高；饲粮维生素A添加水平对血清TG、CHO、HDL和LDL含量影响均不显著(P>0.05)。

表5

Table 5

表5(Table 5)

表5 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔血清生化指标的影响 Table 5 Effects of dietary vitamin A level on serum biochemical indices of growing Rex rabbits 项目 Items 饲粮维生素A添加水平 Dietary vitamin A level/(IU/kg) R-MSE P值 P-value 0 5 000 10 000 20 000 40 000 尿素氮 UN/(mmol/L) 8.15a 8.13a 7.80b 7.63b 8.01a 0.306 4 0.048 2 总蛋白 TP/(g/L) 54.70 61.63 62.68 59.34 57.80 5.660 7 0.056 3 白蛋白 ALB/(g/L) 35.16b 39.76a 41.52a 39.47a 40.00a 3.193 1 0.043 0 甘油三酯 TG/(g/L) 0.48 0.46 0.51 0.49 0.58 0.156 7 0.808 1 胆固醇 CHO/(g/L) 0.87 0.88 0.98 0.91 0.86 0.179 8 0.090 7 高密度脂蛋白 HDL/(g/L) 0.43 0.42 0.44 0.44 0.43 0.061 7 0.870 7 低密度脂蛋白 LDL/(g/L) 0.44 0.46 0.44 0.47 0.43 0.096 6 0.958 9

表5 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔血清生化指标的影响 Table 5 Effects of dietary vitamin A level on serum biochemical indices of growing Rex rabbits

由表6可以看出，饲粮维生素A添加水平对血清GSH-Px和T-SOD活性影响极显著(P<0.01)，当饲粮维生素A添加水平在0~10 000 IU/kg范围内时，随饲粮维生素A添加水平增加，血清GSH-Px和T-SOD活性都呈升高趋势，当饲粮维生素A添加水平超过10 000 IU/kg时，都趋于平稳；饲粮维生素A添加水平对血清MDA含量影响显著(P<0.05)，随饲粮维生素A添加水平增加，血清MDA含量呈降低趋势，40 000 IU/kg维生素A添加组血清MDA含量最低。

表6

Table 6

表6(Table 6)

表6 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔血清和肝脏抗氧化性能指标的影响 Table 6 Effects of dietary vitamin A level on serum and liver antioxidant indices of growing Rex rabbits 项目 Items 饲粮维生素A添加水平 Dietary vitamin A level/(IU/kg) R-MSE P值 P-value 0 5 000 10 000 20 000 40 000 血清 Serum 谷胱甘肽过氧化物酶 GSH-Px/(U/mL) 598.86Cc 645.48BCb 788.48ABa 804.90Aa 799.88ABa 74.123 2 0.006 8 总超氧化物歧化酶 T-SOD/(U/mL) 332.07Bb 343.32Bb 482.18Aa 498.27Aa 499.13Aa 51.296 3 <0.000 1 丙二醛 MDA/(nmol/mL) 5.47a 5.07b 5.01b 4.22c 3.88d 0.912 2 0.049 7 肝脏 Liver 谷胱甘肽过氧化物酶 GSH-Px/(U/mg prot) 192.84Cc 207.63Bb 273.55Aa 289.91Aa 276.32Aa 40.235 1 0.004 8 总超氧化物歧化酶 T-SOD/(U/mg prot) 58.96b 70.89ab 78.43a 83.17a 82.68a 12.741 1 0.023 0 总抗氧化能力 T-AOC/(U/mg prot) 9.49 11.33 13.31 11.07 11.51 2.798 2 0.355 8 丙二醛 MDA/(nmol/mL) 6.18a 5.69ab 5.66b 4.24c 3.55d 1.689 4 0.042 7

表6 饲粮维生素A添加水平对生长獭兔血清和肝脏抗氧化性能指标的影响 Table 6 Effects of dietary vitamin A level on serum and liver antioxidant indices of growing Rex rabbits

饲粮维生素A添加水平对肝脏GSH-Px活性影响极显著(P<0.01)，对T-SOD活性影响显著(P<0.05)，当饲粮维生素A添加水平在0~10 000 IU/kg范围内时，随饲粮维生素A添加水平增加，肝脏GSH-Px和T-SOD活性都呈升高趋势，当饲粮维生素A添加水平超过10 000 IU/kg时，都趋于平稳；饲粮维生素A添加水平对肝脏MDA含量影响显著(P<0.05)，随饲粮维生素A添加水平增加，肝脏MDA含量呈降低趋势，40 000 IU/kg维生素A添加组肝脏MDA含量最低；饲粮维生素A添加水平对肝脏T-AOC影响不显著(P>0.05)，但随饲粮维生素A添加水平增加，肝脏T-AOC先升高后降低，10 000 IU/kg维生素A添加组肝脏T-AOC最高。 3 讨 论 3.1 饲粮维生素A添加水平与生长獭兔生长性能

谢登玉等^[5]以肉兔为研究对象，发现6 000 IU/kg维生素A可显著提高獭兔的ADG，降低F/G。林映才等^[6]研究表明添加300～10 000 IU/kg维生素A显著提高仔猪ADG，极显著降低F/G。郭晓宇等^[7]以肉鸡为研究对象，发现饲粮维生素A水平为3 000 IU/kg时,肉鸡生长性能较高；饲粮维生素A水平为1 500、45 000 IU/kg时，生长性能显著下降；饲粮维生素A水平为15 000 IU/kg时，生长性能呈降低趋势。本试验研究发现，随饲粮维生素A添加水平的提高，獭兔ADG、ADFI有上升趋势，F/G呈降低趋势。当饲粮维生素A添加水平达到10 000 IU/kg时，獭兔的F/G显著低于其他4组，说明当饲粮维生素A添加水平为10 000 IU/kg时，可以显著提高獭兔的饲料转化率。因此，从生长性能指标分析可知，在本试验条件下，生长獭兔饲粮的适宜维生素A添加水平为10 000 IU/kg。

獭兔是典型的皮用型兔，其经济价值主要在于其毛皮，毛皮品质除了与品种有一定关系外，饲粮营养供应也不可忽视。毛皮品质可以从毛皮重量、毛皮面积、毛囊密度等诸多指标进行综合评定。张福勋^[8]通过研究发现，断奶至3月龄的獭兔应保证足够的营养水平与采食量，这样可以提高商品獭兔的毛皮品质。任殿付等^[9]通过研究发现饲粮中性洗涤纤维水平对断奶至3月龄獭兔的皮毛重量影响极显著。本试验中，饲粮维生素A添加水平对生长獭兔毛皮重量和毛皮面积的影响极显著，毛皮重量及毛皮面积都随饲粮维生素A添加水平增加呈先升高后降低的变化，而且均在维生素A添加水平10 000 IU/kg时达到最大值。

毛囊根据发生时间的早晚和结构特点分为初级毛囊和次级毛囊，毛和绒都是由毛囊产生的，獭兔的初级毛囊长出的毛又被称为针毛，次级毛囊长出的毛称为绒毛。由于毛囊发育的优劣是影响毛皮重量的关键因素，所以对獭兔毛囊进行研究为提高獭兔毛皮品质具有重要的理论和实践意义。张焱如^[10]研究绒山羊羊皮表明，绒山羊在刚出生时其所有的初级毛囊基本完全发育成熟，而只有少数的次级毛囊发育成熟，出生后山羊针毛的数量是不变的，只是随着皮张大小的变化，针毛的密度发生变化，受营养等其他因素的影响，绒毛数量会有差异。Rasmussen等^[11]研究表明，极低的饲粮蛋白质水平可能阻碍毛囊的再生，而毛囊的再生直接影响着冬季毛皮的绒毛密度。本试验中饲粮维生素A添加水平对毛囊密度、初级毛囊密度、次级毛囊密度及S/P均无显著影响，可能与5组饲粮蛋白质水平一致有关。

饲粮维生素A添加水平与体内维生素A的状况密切相关，维生素A的体内代谢受饲粮中维生素A含量的影响很大^{[12, 13]}。血清维生素A和肝脏维生素A含量是监测动物机体维生素A的营养状况的常用指标^[14]。Shaik等^[15]对鲈鱼的研究发现，血清维生素A含量在饲粮维生素A添加水平在210～3 764 IU/kg范围内，与饲粮维生素A添加水平呈正相关，在高水平维生素A饲粮下达到平台期而不再升高。本研究发现，饲粮维生素A添加水平对血清中维生素A含量影响显著，当饲粮维生素A添加水平在0~20 000 IU/kg范围内时，随饲粮维生素A添加水平增加，血清维生素A含量呈升高趋势，当饲粮维生素A添加水平超过20 000 IU/kg后，血清维生素A含量趋于平稳；饲粮维生素A添加水平对肝脏中维生素A含量影响显著，随饲粮维生素A添加水平增加，肝脏维生素A含量呈升高趋势，且呈现线性关系。

梁鸿雁等^[12]以獭兔为研究对象研究发现，血清维生素A含量随饲粮维生素A添加水平的提高而有升高的趋势，但不显著，血清UN含量随饲粮维生素A添加水平的提高而下降。谢登玉等^[5]研究发现，饲粮维生素A添加水平对肉兔血液TG和CHO含量无显著影响，对血液UN含量影响显著。在本试验中，饲粮维生素A添加水平对血清UN含量影响显著，10 000、20 000 IU/kg维生素A添加组显著低于其他组，对血清ALB含量影响显著，对血清TP、TG、CHO、HDL和LDL含量影响均不显著。

GSH-Px是动物体内广泛存在的一种催化过氧化氢分解的酶，能催化已形成的过氧化氢生成水和氧气，并防止过氧化物进一步水解产生有害物质MDA。Palacios等^[16]报道维生素A缺乏大鼠的肝组织中GSH-Px活性显著低于正常对照组动物。Dogra等^[17]试验表明维生素A缺乏使小鼠肺中超氧化物歧化酶(SOD)活性显著下降。Surai等^[18]研究发现，大剂量维生素A摄入可降低鸡SOD活性，促进体内脂质过氧化反应，使机体抗氧化能力减弱。李英哲等^[19]研究发现，维生素A完全缺乏组和轻度缺乏组的大鼠血清、肝脏及脑组织的SOD活性显著下降，全血、肝脏及脑组织GSH-Px活性显著下降，而血清、肝脏及脑组织MDA含量显著升高。本研究结果与此相似，饲粮维生素A添加水平对血清和肝脏GSH-Px活性影响极显著，对血清T-SOD活性影响极显著，对肝脏T-SOD活性影响显著，当饲粮维生素A添加水平在0~10 000 IU/kg范围内时，随饲粮维生素A添加水平增加，血清和肝脏GSH-Px和T-SOD活性都呈升高趋势，当饲粮维生素A添加水平超过10 000 IU/kg时，都趋于平稳；饲粮维生素A添加水平对血清和肝脏MDA含量影响显著，随饲粮维生素A添加水平增加，MDA含量呈降低趋势。饲粮维生素A添加水平对肝脏T-AOC影响不显著，但随饲粮维生素A添加水平增加，T-AOC呈先升高后降低趋势。饲粮中添加维生素A可以极大地改善血清和肝脏的抗氧化性能。

综合本试验测定的指标可以得出，生长獭兔的饲粮适宜维生素A添加水平为10 000 IU/kg。