蓝狐皮毛绒丰厚，是世界三大毛皮之一，也是制作高档裘皮衣物的优良材料，市场需求量大。我国从20世纪开始了蓝狐的人工养殖，蓝狐存栏量现已超过3 500万只，养狐业已经成为我国特种经济动物饲养的重要组成部分。蛋白质在蓝狐的生命活动中具有重要的营养作用，而氨基酸作为蛋白质的结构组成部分，能合成机体所需蛋白质，满足动物机体正常生长发育的需要，因此对氨基酸尤其是蛋氨酸的研究，日益成为毛皮动物营养领域研究的热点^{[ 1,2,3,4 ]}。狐的第一限制性氨基酸为含硫氨基酸^{[ 5 ]}。Dahlman^{[ 6 ]}研究表明，蛋氨酸的添加不仅影响蓝狐的氮沉积，而且对其毛皮质量至关重要。张铁涛等^{[ 7 ]}研究发现，在蛋白质水平为30%的低蛋白质饲粮中添加适宜水平的蛋氨酸可改善育成期蓝狐的生长性能及营养物质消化率，但添加量过高反而会使其生长性能降低。因此，为进一步完善蓝狐蛋氨酸的营养需要量研究，在前期试验^{[ 7 ]}得出育成期蓝狐适宜蛋氨酸水平的基础上，本试验拟研究在低蛋白质饲粮中添加蛋氨酸对冬毛期蓝狐生产性能、营养物质消化率及氮代谢的影响，筛选出冬毛期蓝狐饲粮适宜的蛋氨酸水平，以期达到高效利用蛋白质资源，节约养殖户成本，提高养殖户经济效益的目的。

试验动物选用25周龄健康雄性蓝狐105只，平均体重为(4.88±0.60) kg，随机分为7组，每组15个重复，每个重复1只。每只蓝狐单笼饲养，各组间初始体重差异不显著(P>0.05)。试验采用单因子随机试验设计方法，正对照组饲喂蛋白质水平为28%的基础饲粮，负对照组饲喂蛋白质水平为26%的基础饲粮，试验组分别饲喂在低蛋白质饲粮(蛋白质水平为26%的基础饲粮)基础上添加0.2%、0.4%、0.6%、0.8%和1.0%蛋氨酸的试验饲粮。预试期7 d，正试期80 d。整个试验期内，由固定人员进行专门饲养并对其进行常规免疫接种。每天07:30和15:00各饲喂1次，自由饮水。

以膨化玉米、鱼粉、豆粕等为主要原料，参照NRC(1982)^{[ 8 ]}及国内的文献报道^{[ 2,3 ]}配制基础饲粮，其组成及营养水平见表1。

在正试期开始30 d后，每组挑选8只体重相近的健康蓝狐进行4 d的消化代谢试验。采用全收粪法，消化代谢试验期间饲养管理与日常饲养管理相同。每天收集的粪便称重后按鲜重的5%加入10%硫酸溶液，并加少量甲苯用于防腐，保存于-20 ℃备用。每天收集的尿液中每100 mL加入10 mL的10%硫酸溶液，并加4滴甲苯用于防腐，保存于-20 ℃备用。

正试期开始后，以试验第1天称重作为初始体重，中间每隔15 d在早晨空腹称重，以试验结束后称重作为终末体重，计算每只蓝狐的日增重以及每组的平均日增重(ADG)。记录每只蓝狐每天的给料量和残余料量，计算每只蓝狐的采食量以及每组的平均日采食量(ADFI)。根据每只蓝狐的采食量和净增重计算饲料转化率。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis) % 项目 Items 蛋白质水平 Protein level/% 26 28 原料 Ingredients 膨化玉米 Extruded corn 47.00 46.00 豆粕 Soybean meal 14.30 10.70 肉骨粉 Meat and bone meal 16.00 12.90 玉米蛋白粉 Corn gluten meal 4.40 8.90 赖氨酸 Lys 0.50 0.50 鱼粉 Fish meal 7.30 10.50 食盐 NaCl 0.50 0.50 豆油 Soybean oil 9.00 9.00 预混料 Premix1) 1.00 1.00 合计 Total 100.00 100.00 营养水平 Nutrient levels2) 代谢能 ME/(MJ/kg) 14.80 14.32 粗蛋白质 CP 26.20 28.17 钙 Ca 2.22 1.98 总磷 TP 1.20 1.10 赖氨酸 Lys 1.42 1.53 蛋氨酸 Met 0.39 0.79 半胱氨酸 Cys 0.42 0.52 1)每千克预混料含有Contained the following per kg of premix:VA 1 000 000 IU，VD3 200 000 IU，VE 6 000 IU，VB1 600 mg，VB2 800 mg，VB6 300 mg，VB12 10 mg，VK3 100 mg，VC 40 000 mg，烟酸 nicotinic acid 4 000 mg，泛酸 pantothenic acid 1 200 mg，生物素 biotin 20 mg，叶酸 folic acid 80 mg，胆碱 choline 30 000 mg，Fe 8 200 mg，Cu 800 mg，Mn 1 200 mg，Zn 5 200 mg，I 50 mg，Se 20 mg，Co 50 mg。 2)粗蛋白质、钙和总磷为测定值，其他为计算值。CP, Ca and TP were measured values, while the others were calculated values.

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis) %

体长：使用软尺测量鼻尖到尾根的长度。

干皮长：鲜皮经干燥加工后，用软尺测量鼻尖到尾根的长度。

样品分析：105 ℃烘干法测定干物质含量，参考GB/T 6435—2006^[9]；索氏浸提法测定粗脂肪含量，参考GB/T 6433—2006^[10]，采用索氏脂肪提取器测定，主要试剂为无水乙醚；凯氏定氮法测定粗蛋白质含量，参考GB/T 6432—1994^[11]，采用Kjeltec 8400全自动凯氏定氮仪测定；采用日立L-8900氨基酸分析仪测定氨基酸含量。

采用统计软件SAS 9.1对数据进行分析，结果以平均值±标准差表示，采用one-way ANOVA进行差异显著性检验，其中P<0.05为差异显著，P<0.01为差异极显著。

由表2可以看出，各组蓝狐的初始体重差异不显著(P>0.05)，随着蓝狐日龄的增长，0.6%蛋氨酸组终末体重极显著高于0.2%、0.4%蛋氨酸组和负对照组(P<0.01)，并且与正对照组及0.8%蛋氨酸组相比差异不显著(P>0.05)；0.6%蛋氨酸组平均日增重极显著高于负对照组和0.2%蛋氨酸组(P<0.01)；0.6%蛋氨酸组饲料转化率极显著高于负对照组和0.2%蛋氨酸组(P<0.01)，并且显著高于0.4%、0.8%、1.0%蛋氨酸组和正对照组(P<0.05)；0.6%蛋氨酸组和正对照组干皮长显著长于0.2%、0.4%、0.8%蛋氨酸组和负对照组(P<0.05)。各组蓝狐的平均日采食量和体长差异不显著(P>0.05)。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 低蛋白质饲粮中添加蛋氨酸对冬毛期蓝狐生产性能的影响 Table 2 Effects of methionine supplementation in low-protein diets on performance of blue foxes during the winter hair period 项目 Items 组别 Groups 负对照 Negative control 0.2%蛋氨酸 0.2%Met 0.4%蛋氨酸 0.4%Met 0.6%蛋氨酸 0.6%Met 0.8%蛋氨酸 0.8%Met 1.0%蛋氨酸 1.0%Met 正对照 Positive control 初始体重 IBW/g 4 884.01 ±103.21 4 855.31 ±97.33 4 834.37 ±89.56 4 887.62 ±131.41 4 896.46 ±135.51 4 878.53 ±90.89 4 893.33 ±106.81 终末体重 FBW/g 7 661.12 ±301.10Cc 7 705.19 ±286.48BCbc 7 990.00 ±261.24BCbc 8 443.05 ±363.42Aa 8 202.26 ±450.11ABab 8 213.51 ±186.36ABab 8 550.41 ±406.19Aa 平均日采食量 ADFI/(g/d) 379.79 ±0.98 378.57 ±1.56 383.75 ±1.38 432.39 ±1.62 377.05 ±1.20 384.21 ±1.56 438.70 ±1.52 平均日增重 ADG/(g/d) 36.75 ±6.33Cc 37.77 ±7.13BCc 41.31 ±6.13ABCb 44.53 ±7.24Aa 43.93 ±6.31ABa 42.99 ±8.20ABab 43.78 ±7.66Aa 饲料转化率 FCR/％ 9.14 ±0.96Bc 9.41 ±1.07Bc 10.28 ±1.11Ab 11.09 ±0.83Aa 10.96 ±1.26Ab 10.85 ±1.09Ab 10.42 ±1.51Ab 体长 Body length/cm 63.81 ±2.72 64.12 ±1.81 64.34 ±2.60 66.02 ±1.51 65.10 ±1.78 65.09 ±2.43 66.48 ±2.70 干皮长 Dry fur length/cm 96.75 ±2.83c 97.06 ±1.74bc 98.08 ±3.32bc 102.33 ±3.02a 100.33 ±2.58ab 98.00 ±2.48bc 101.98 ±2.94a 同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。下表同。 In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean extremely significant difference (P<0.01). The same as below.

表2 低蛋白质饲粮中添加蛋氨酸对冬毛期蓝狐生产性能的影响 Table 2 Effects of methionine supplementation in low-protein diets on performance of blue foxes during the winter hair period

由表3可以看出，0.6%蛋氨酸组干物质消化率与0.4%、0.8%、1.0%蛋氨酸组及正对照组相比差异不显著(P>0.05)，但极显著高于负对照组和0.2%蛋氨酸组(P<0.01)；0.4%、0.6%、0.8%和1.0%蛋氨酸组粗蛋白质消化率与正对照组相比差异不显著(P>0.05)，但均显著高于负对照组(P<0.05)；0.2%、0.4%、0.6%、0.8%和1.0%蛋氨酸组粗脂肪消化率与正对照组相比差异不显著(P>0.05)，但均显著高于负对照组(P<0.05)；1.0%蛋氨酸组半胱氨酸消化率显著高于正对照组(P<0.05)，极显著高于0.2%、0.4%、0.6%、0.8%蛋氨酸组和负对照组(P<0.01)；1.0%蛋氨酸组蛋氨酸消化率极显著高于其他各组(P<0.01)，0.6%和0.8%蛋氨酸组极显著高于0.2%、0.4%蛋氨酸组以及负对照组和正对照组(P<0.01)。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 低蛋白质饲粮中添加蛋氨酸对冬毛期蓝狐营养物质消化率的影响 Table 3 Effects of methionine supplementation in low-protein diets on nutrient digestibility of blue foxes during the winter hair period % 项目 Items 组别 Groups 负对照 Negative control 0.2%蛋氨酸 0.2%Met 0.4%蛋氨酸 0.4%Met 0.6%蛋氨酸 0.6%Met 0.8%蛋氨酸 0.8%Met 1.0%蛋氨酸 1.0%Met 正对照 Positive control 干物质消化率 DM digestibility 62.49 ±2.22Cd 64.93 ±3.06BCc 65.98 ±3.57ABb 68.73 ±1.96Aa 66.79 ±2.67ABb 66.77 ±1.71ABb 68.09 ±1.43Aa 粗蛋白质消化率 CP digestibility 63.14 ±3.66b 65.73 ±3.11ab 67.48 ±3.84a 68.59 ±2.93a 67.32 ±2.81a 67.42 ±2.93a 69.10 ±1.62a 粗脂肪消化率 EE digestibility 81.74 ±6.92b 87.51 ±1.01a 88.76 ±3.92a 89.68 ±1.27a 88.24 ±2.38a 87.65 ±1.64a 89.91 ±3.64a 半胱氨酸消化率 Cys digestibility 65.10 ±2.14CDcd 64.67 ±2.98Dd 65.20 ±3.02CDcd 67.75 ±2.32BCbc 67.13 ±2.26CDcd 74.01 ±3.56Aa 70.37 ±1.99ABb 蛋氨酸消化率 Met digestibility 81.90 ±1.29Ee 84.97 ±1.86Dd 87.21 ±1.55Cc 90.46 ±0.48Bb 90.25 ±0.71Bb 94.27 ±1.04Aa 83.08 ±1.70DEde

表3 低蛋白质饲粮中添加蛋氨酸对冬毛期蓝狐营养物质消化率的影响Table 3 Effects of methionine supplementation in low-protein diets on nutrient digestibility of blue foxes during the winter hair period %

由表4可以看出，负对照组食入氮显著低于0.6%蛋氨酸组和正对照组(P<0.05)，0.6%蛋氨酸组与正对照组相比差异不显著(P>0.05)；负对照组粪氮排出量显著低于其他各组(P<0.05)，其他各组间差异不显著(P>0.05)；0.6%蛋氨酸组尿氮排出量极显著低于0.4%、0.8%、1.0%蛋氨酸组和正对照组(P<0.01)；0.6%蛋氨酸组氮沉积与正对照组相比差异不显著(P>0.05)，但极显著高于负对照组及0.2%、0.4%和1.0%蛋氨酸组(P<0.01)；0.6%蛋氨酸组净蛋白质利用率与正对照组相比差异不显著(P>0.05)；0.6%蛋氨酸组和正对照组蛋白质生物学价值显著高于负对照组及1.0%蛋氨酸组(P<0.05)。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 饲粮蛋氨酸水平对冬毛期蓝狐氮代谢的影响 Table 4 Effects of methionine supplementation in low-protein diets on nitrogen metabolism of blue foxes during the winter hair period 项目 Items 组别 Groups 负对照 Negative control 0.2%蛋氨酸 0.2%Met 0.4%蛋氨酸 0.4%Met 0.6%蛋氨酸 0.6%Met 0.8%蛋氨酸 0.8%Met 1.0%蛋氨酸 1.0%Met 正对照 Positive control 食入氮 Nitrogen intake/ (g/d) 15.24 ±0.43b 16.53 ±0.38ab 16.73 ±0.73ab 17.19 ±0.15a 16.76 ±0.77ab 16.58 ±0.16ab 17.16 ±0.13a 粪氮 Fecal nitrogen/ (g/d) 5.98 ±0.60a 5.32 ±0.47b 5.44 ±0.64b 5.41 ±0.51b 5.46 ±0.48b 5.39 ±0.48b 5.50 ±0.28b 尿氮 Urinary nitrogen/ (g/d) 6.32 ±0.79Bc 5.97 ±0.15Bc 7.15 ±0.63Ab 6.45 ±0.18Bc 7.02 ±0.16Ab 7.62 ±0.66Aa 7.69 ±0.14Aa 总氮排出量 Total nitrogen output/(g/d) 12.31 ±1.51 11.30 ±1.07 12.59 ±0.98 11.85 ±1.62 12.49 ±1.11 12.47 ±0.20 13.19 ±1.63 氮沉积 Nitrogen deposition/ (g/d) 3.92 ±0.15Cd 4.23 ±0.13BCc 4.13 ±0.46BCc 5.39 ±0.20Aa 4.77 ±0.63ABb 4.33 ±0.21Bc 5.11 ±0.15Aa 净蛋白质利用率 NPU/％ 24.17 ±2.36b 24.27 ±1.13b 24.69 ±1.88b 31.30 ±1.87a 25.35 ±1.81b 26.15 ±1.21b 27.44 ±2.10ab 蛋白质生物学价值 BV of protein/％ 36.36 ±4.31b 38.60 ±1.61ab 37.66 ±1.45ab 41.61 ±1.71a 37.40 ±2.16ab 35.15 ±1.18b 40.46 ±1.52a

表4 饲粮蛋氨酸水平对冬毛期蓝狐氮代谢的影响 Table 4 Effects of methionine supplementation in low-protein diets on nitrogen metabolism of blue foxes during the winter hair period

本试验结果表明，在低蛋白质饲粮中添加0.6%的蛋氨酸，冬毛期蓝狐的终末体重、平均日增重和饲料转化率在各试验组中最高，与正对照组差异不显著。蓝狐进入冬毛期生长阶段以后，长日照变成短日照，蓝狐肌肉和骨骼生长基本结束，体重增长主要变为脂肪的沉积。在冬毛期，蓝狐对饲粮中蛋白质的需要量较育成期低，饲粮中添加适量的蛋氨酸可以提高脂肪的消化率，促进蓝狐的生长，提高饲料转化率^[6]。刘景等^[12]研究表明，在低蛋白质饲粮中添加氨基酸可显著提高肥育猪的日增重，降低料重比，改善生产性能。本试验中，当蛋氨酸添加到一定水平，蓝狐的平均日增重随着蛋氨酸添加水平的升高而降低，这与Abe等^[13]研究得出的饲粮蛋氨酸水平过高会抑制动物生长的结果相一致。饲粮中蛋氨酸的添加要控制在一个适宜的水平，过量的蛋氨酸会抑制动物的生长发育^[14]，降低动物的生长性能。

动物毛皮的生长需要大量胱氨酸和半胱氨酸，而蛋氨酸能通过转硫基作用在动物体内转化为绒毛生长所需的半胱氨酸，同时有研究表明，蛋氨酸对针毛质量的影响效果较明显，而针毛质量是评价毛皮质量的一个重要指标^[6]。Liu等^[15]研究指出，在饲粮中添加适量蛋氨酸能显著提高羊毛纤维直径和羊毛产量。Typpnen等^[16]研究发现，饲喂低蛋白质补充蛋氨酸饲粮的水貂毛皮质量与饲喂高蛋白质饲粮水貂差异不显著。本试验结果表明，降低饲粮中蛋白质水平会影响蓝狐的干皮长，但在低蛋白质饲粮中补充适宜水平的蛋氨酸能够增加干皮长，使其与正对照组干皮长差异不显著，这与前人的研究结果^[6]相似。

本试验结果表明，低蛋白质饲粮下，随着饲粮蛋氨酸添加水平的升高，冬毛期蓝狐的营养物质消化率呈现先增高后降低的趋势，在低蛋白质饲粮中添加0.6%的蛋氨酸时冬毛期蓝狐的干物质消化率、粗蛋白质消化率和粗脂肪消化率在各试验组中均为最高，且与正对照组差异不显著。张铁涛等^[17]研究冬毛期雄性水貂对不同蛋白质水平饲粮营养物质的消化率时发现，水貂对蛋白质的消化率随着饲粮蛋白质水平的升高先升高后降低，而较高的饲粮蛋白质水平能够提高脂肪的消化率。Dahlman^[6]研究表明，在低蛋白质饲粮中添加蛋氨酸能够显著提高冬毛期蓝狐的粗脂肪消化率。这种现象有可能与消化酶的成分或活化作用有关系，蛋氨酸是启动酶合成的关键必需氨基酸^[18]。Rsj等^[19]对大西洋鲑的研究发现，蛋氨酸提高营养物质消化率可能与其参与缩胆囊素的刺激作用有关。缩胆囊素的主要作用是影响胃肠平滑肌的运动，刺激胆囊收缩，促进胆汁排放，并能够通过刺激小肠和结肠运动提高营养物质消化率^[20]。

本试验中，0.4%蛋氨酸组与正对照组饲粮中蛋氨酸水平相同，但是前者蛋氨酸消化率要更高；此外，半胱氨酸消化率和蛋氨酸消化率的最高值均出现在1.0%蛋氨酸组。Dahlman等^[21]研究表明，饲粮中添加DL-蛋氨酸或L-蛋氨酸能够提高蓝狐的氨基酸表观消化率，补充外源性的氨基酸比调节饲粮中氨基酸比例效果更加明显。张铁涛等^[7]研究发现，在育成期蓝狐饲粮中添加蛋氨酸可以提高饲粮中含硫氨基酸的表观消化率，本试验结果与该结果基本一致。

本试验中，由于各组饲粮蛋白质水平差异不大，蓝狐食入氮除负对照组外其余各组均差异不显著，在低蛋白质饲粮中添加0.6%蛋氨酸时，冬毛期蓝狐粪氮和尿氮排出量均相对较少。董志岩等^[22]研究表明，在饲粮氨基酸水平一定的情况下，降低饲粮蛋白质水平，猪的尿氮排出量显著降低；在饲粮蛋白质水平一定的情况下，提高限制性氨基酸水平，尿氮和粪氮排出量均显著降低。杨春花等^[23]研究表明，饲粮氨基酸平衡可减少尿氮排出量，提高氮的利用率。本试验结果表明，在低蛋白质饲粮中添加0.6%蛋氨酸时冬毛期蓝狐的氮沉积为最高，且与正对照组差异不显著，说明在低蛋白质饲粮中添加适宜水平的蛋氨酸能够提高冬毛期蓝狐氮的利用率。张海华等^[24]研究表明，在低蛋白质饲粮中补充适宜水平的蛋氨酸时，蓝狐的氮沉积高于饲喂高蛋白质饲粮的对照组。本研究结果表明，净蛋白质利用率和蛋白质生物学价值均在0.6%蛋氨酸组达到最高，这可能是因为在低蛋白质饲粮中添加适宜水平的蛋氨酸，使得饲粮中氨基酸达到平衡，提高了蛋白质的消化率。

在蛋白质水平为26%的低蛋白质饲粮中添加0.6%蛋氨酸，即饲粮中蛋氨酸水平为0.99%时，冬毛期蓝狐的生长性能、营养物质消化率、氮沉积和相应的毛皮参数较为理想，并且饲喂效果与蛋白质水平为28%的饲粮基本一致，可在冬毛期蓝狐生产中推广应用。