近年来，益生菌作为饲料添加剂在畜禽养殖中的作用已被越来越多的人所认可^{[ 1,2,3 ]}。乳酸杆菌作为应用最为广泛的一种微生态制剂，具有提高畜禽生产性能、预防及治疗腹泻的作用，是国内外公认的有效益生菌^{[ 4,5,6 ]}。囊素三肽是存在于禽法氏囊中的一种生物活性物质，具有独特组成结构，其氨基酸组成顺序为赖氨酸-组氨酸-甘氨酸(Lys-His-Gly)，具有促进法氏囊发育、淋巴细胞分化和抗体生成等作用^{[ 7,8,9 ]}。囊素三肽作为一种新型的免疫增强剂，对其研究主要集中在对畜禽免疫水平的提高及其作用机制，而对其促进动物生长方面的报道较少，与微生态制剂联合使用的研究还未见报道。本试验旨在通过在基础饲粮中添加乳酸杆菌制剂，以及肌肉注射囊素三肽，研究乳酸杆菌和囊素三肽对科宝肉鸡生长性能、屠宰性能、肉质和血清生化指标的影响，为乳酸杆菌制剂和囊素三肽的联合应用提供参考。

囊素三肽，由专业公司合成，纯度99.9%；植物乳酸杆菌F，由四川农业大学动物微生态中心分离制备，活菌数为1.0×10⁹ CFU/mL。

选用1日龄科宝肉鸡180只，随机分成4组，每组3个重复，每个重复15只鸡。Ⅰ组为对照组，饲喂基础饲粮；Ⅱ组为囊素三肽组，饲喂基础饲粮，并在4和7日龄时肌肉注射囊素三肽(0.01 mg/kg BW)；Ⅲ组为乳酸杆菌组，饲喂基础饲粮+0.1%乳酸杆菌制剂；Ⅳ组为囊素三肽+乳酸杆菌组，饲喂基础饲粮+0.1%乳酸杆菌制剂，并在4和7日龄时肌肉注射囊素三肽(0.01 mg/kg BW)。

基础饲粮为玉米-豆粕型饲粮，其组成及营养水平见表1。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) % 项目 Items 含量 Content 原料 Ingredients 玉米 Corn 51.64 豆粕 Soybean meal 39.60 菜籽油 Colza oil 4.30 DL-蛋氨酸 DL-Met 0.20 磷酸氢钙 CaHPO4 1.85 碳酸钙 CaCO3 1.30 食盐 NaCl 0.40 多维 Multi-vitamines1) 0.03 胆碱 Choline 0.18 微量元素预混料 Microelement premix2) 0.50 合计 Total 100.00 营养水平 Nutrient levels3) 粗蛋白质 CP 21.17 代谢能 ME/(MJ/kg) 14.16 蛋氨酸 Met 0.49 钙 Ca 1.07 总磷 TP 0.71 1)多维为每千克饲粮提供The multi-vitamins provided the following per kg of the diet：VA 50 000 IU，VD3 10 000 IU，VE 25 IU，VK 35 mg，VB1 2 mg，VB2 16 mg，VB6 6 mg，VB12 0.03 mg，烟酸 nicotinic acid 25 mg，泛酸 pantothenic acid 25 mg，叶酸 folic acid 0.5 mg。 2)微量元素预混料为每千克饲粮提供The microelement premix provided the following per kg of the diet：Fe (as ferrous sulfate) 80.00 mg，Cu (as copper sulfate) 8.00 mg，Mn (as manganese sulfate) 60.00 mg，Zn (as zinc sulfate) 40.00 mg，Se (as sodium selenite) 0.15 mg，I (as potassium iodate) 0.35 mg。 3)营养水平为计算值。Nutrient levels were calculated values.

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) %

采用3层笼养，每组按重复分别分布于上、中、下3层。自由采食与饮水。初始温度控制在35~37 ℃。

试验第42天08:00以重复为单位空腹称重，准确记录采食量和剩料量，计算各组平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

试验第42天从各组选取体重接近平均值的4只鸡进行屠宰试验。测定指标包括：屠宰率、半净膛率、全净膛率、胸肌率和腿肌率。

取宰杀鸡的右侧胸肌，用肉色分析仪和pH测定仪分别于屠宰后45 min测定肉色和pH。滴水损失和剪切力参考杜炳旺等^{[ 10 ]}的方法测定。

试验第42天09:00从各组随机选取9只鸡(每个重复3只)，颈静脉采血，3 000 r/min离心10 min分离血清，-20 ℃保存备用。采用JS200全自动生化分析仪测定血清中的总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(UN)、总胆固醇(TC)以及甘油三酯(TG)含量。

用SPSS 19.0软件对数据进行方差分析，结果以“平均值±标准差”表示，各组间的平均值采用Duncan氏法进行多重比较，以P＜0.05作为差异显著的判断标准，P＜0.01作为差异极显著的判断标准。

由表2可知，Ⅱ和Ⅳ组平均日采食量极显著高于Ⅰ和Ⅲ组(P＜0.01)；与Ⅰ组相比，其他3组平均日增重分别提高了8.41%、3.82%和3.38%，但组间差异均不显著(P＞0.05)；Ⅲ组料重比最低，为1.75，Ⅳ组最高，为1.91，但组间无显著差异(P＞0.05)。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 乳酸杆菌与囊素三肽对肉鸡生长性能的影响 Table 2 Effects of Lactobacilli and bursin on growth performance of broilers 项目 Items Ⅰ组 Group Ⅰ Ⅱ组 Group Ⅱ Ⅲ组 Group Ⅲ Ⅳ组 Group Ⅳ 平均日采食量 ADFI/g 100.98±2.77Aa 111.50±5.31Bb 103.22±1.10Aa 112.36±2.91Bb 平均日增重 ADG/g 56.87±3.64 61.65±2.60 59.04±2.59 58.79±0.77 料重比 F/G 1.78±0.14 1.81±0.16 1.75±0.06 1.91±0.07 同行数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。下表同。 In the same row,values with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05),while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05),and with different capital letter superscripts mean extremely significant difference (P<0.01). The same as below.

表2 乳酸杆菌与囊素三肽对肉鸡生长性能的影响 Table 2 Effects of Lactobacilli and bursin on growth performance of broilers

由表3可知，Ⅲ组屠宰率最高，为89.58%，其次为Ⅱ组，但组间差异均不显著(P＞0.05)。Ⅱ和 Ⅲ组半净膛率极显著高于Ⅰ组(P＜0.01)，Ⅰ与Ⅳ 组差异不显著(P＞0.05)。与Ⅰ组相比，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组全净膛率、胸肌率和腿肌率均有所提高，但组间差异均不显著(P＞0.05)。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 乳酸杆菌与囊素三肽对肉鸡屠宰性能的影响 Table 3 Effects of Lactobacilli and bursin on slaughter performance of broilers % 项目 Items Ⅰ组 Group Ⅰ Ⅱ组 Group Ⅱ Ⅲ组 Group Ⅲ Ⅳ组 Group Ⅳ 屠宰率 Slaughter rate 87.90±2.82 89.23±4.11 89.58±1.43 87.65±0.95 半净膛率 Semi-eviscerated rate 84.89±0.51Aa 88.31±2.67Bb 87.61±0.22Bb 86.02±0.49ABab 全净膛率 Eviscerated rate 68.79±0.73 69.63±5.01 70.70±3.94 71.99±5.06 胸肌率 Breast muscle rate 31.35±0.98 31.44±3.10 33.10±1.95 32.10±1.41 腿肌率 Leg muscle rate 17.06±0.97 17.42±1.06 17.12±1.22 17.68±1.69

表3 乳酸杆菌与囊素三肽对肉鸡屠宰性能的影响 Table 3 Effects of Lactobacilli and bursin on slaughter performance of broilers %

由表4可知，Ⅱ和Ⅲ组红度分别极显著(P＜0.01)和显著(P＜0.05)高于Ⅰ组。Ⅱ组黄度显著高于Ⅰ组(P＜0.05)，Ⅲ和Ⅳ组黄度极显著高于Ⅰ组(P＜0.01)。Ⅱ组亮度显著高于Ⅰ组(P＜0.05)，Ⅲ组极显著高于Ⅰ组(P＜0.01)，Ⅰ与Ⅳ组差异不显著(P＞0.05)。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组pH均高于Ⅰ组，但组间差异不显著(P＞0.05)。Ⅰ和Ⅲ组滴水损失极显著低于Ⅱ和Ⅳ组(P＜0.01)。与Ⅰ组相比，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组剪切力均极显著降低(P＜0.01)。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 乳酸杆菌与囊素三肽对肉鸡肉质的影响 Table 4 Effects of Lactobacilli and bursin on meat quality of broilers 项目 Items Ⅰ组 Group Ⅰ Ⅱ组 Group Ⅱ Ⅲ组 Group Ⅲ Ⅳ组 Group Ⅳ 肉色 Meat color 红度 a* 3.21±0.15Bb 3.97±0.17Cd 3.51±0.23Bc 2.62±0.15Aa 黄度 b* 5.97±0.31Aa 6.76±0.32ABb 7.12±0.50Bb 7.96±0.36Cc 亮度 L* 45.32±2.98Aa 49.74±3.36ABbc 51.46±2.47Bc 46.78±2.61ABab pH 5.68±0.19 5.70±0.22 5.71±0.12 5.77±0.19 滴水损失 Drip loss/% 1.30±0.09Aa 1.57±0.07Bb 1.31±0.04Aa 1.59±0.12Bb 剪切力 Shear force/kg 5.76±0.18Cd 3.61±0.06Aa 4.59±0.15Bc 4.25±0.19Bb

表4 乳酸杆菌与囊素三肽对肉鸡肉质的影响 Table 4 Effects of Lactobacilli and bursin on meat quality of broilers

由表5可知，与Ⅰ组相比，Ⅲ组血清中总蛋白和白蛋白含量显著升高(P＜0.05)，Ⅱ和Ⅳ组也有升高的趋势，但差异不显著(P＞0.05)。各组间血清中尿素氮和总胆固醇含量差异均不显著(P＞0.05)。Ⅲ和Ⅳ组血清中甘油三酯含量比Ⅰ组分别降低了40.00%和25.71%，差异显著(P＜0.05)，Ⅱ组与其余各组间差异均不显著(P＞0.05)。

表5

Table 5

表5(Table 5)

表5 乳酸杆菌和囊素三肽对肉鸡血清生化指标的影响 Table 5 Effects of Lactobacilli and bursin on serum biochemical parameters of broilers 项目 Items Ⅰ组 Group Ⅰ Ⅱ组 Group Ⅱ Ⅲ组 Group Ⅲ Ⅳ组 Group Ⅳ 总蛋白 TP/(g/L) 32.60±0.81a 33.00±2.17ab 33.40±0.99b 33.00±0.89ab 白蛋白 ALB/(g/L) 17.75±0.25a 18.00±0.32ab 18.40±0.93b 18.20±0.37ab 尿素氮 UN/(mmol/L) 0.72±0.05 0.66±0.05 0.68±0.06 0.70±0.04 总胆固醇 TC/(mmol/L) 3.23±0.27 3.18±0.14 3.18±0.30 3.18±0.15 甘油三酯 TG/(mmol/L) 0.35±0.05b 0.28±0.01ab 0.21±0.03a 0.26±0.01a

表5 乳酸杆菌和囊素三肽对肉鸡血清生化指标的影响 Table 5 Effects of Lactobacilli and bursin on serum biochemical parameters of broilers

微生态制剂在动物肠道内繁殖，产生多种生理活性物质，促进动物对营养物质消化、吸收，提高饲料转化率^{[ 11 ]}。Kalavathy等^{[ 12 ]}研究表明，饲喂0.1%乳酸菌混合物可显著提高雏鸡1~21 d的平均日增重，降低料重比。徐基利等^{[ 13 ]}研究表明，不同乳酸杆菌制剂均能显著提高肉仔鸡平均日增重，降低料重比。与上述结果不同，本试验中乳酸杆菌提高肉鸡平均日采食量，但对平均日增重和料重比无显著影响，原因可能是本试验所用菌株为非鸡源性的乳酸杆菌，与宿主肠道肠黏膜的相互作用不密切，导致其不能发挥良好的应用效果。囊素三肽的促生长作用可能与免疫增强作用有关，且囊素三肽作为动物体自身分泌的一种氨基酸组成的物质，不会引起动物强烈的免疫应激，在体内分解也具有无毒、无残留的特点。计慧琴^{[ 14 ]}和田光洪^{[ 15 ]}的研究表明囊素三肽可不同程度提高鸡的生长速度。本试验结果表明，囊素三肽单独使用和囊素三肽和乳酸杆菌联合使用均能提高肉鸡平均日采食量，但两者无论单独使用或联合使用对平均日增重和料重比均无显著影响。其原因可能与囊素三肽能够提高机体靶细胞第二信使含量，促进细胞蛋白质的合成与转化有关^{[ 16 ]}。而联合使用效果不如两者单独使用，是否揭示两者不存在协同作用，还有待进一步试验论证。

有研究认为，肉鸡活体质量直接影响胴体质量和品质，但关于乳酸杆菌对肉鸡屠宰性能影响的报道并不多。李菊等^{[ 17 ]}研究发现，益生素对肉仔鸡屠宰指标的影响主要表现在能显著提高肉仔鸡胸肌率，而对肉仔鸡的全净膛率、腿肌率和腹脂率等没有显著影响。郭元晟等^{[ 18 ]}研究报道，发酵乳酸杆菌(L.fermentum F-6)可以显著提高肉鸡的屠宰率和胸肌率，对肉鸡全净膛率和腿肌率有一定的促进作用，但无显著影响。本试验结果表明，乳酸杆菌能显著提高肉鸡半净膛率，而对屠宰率、全净膛率、胸肌率和腿肌率没有显著的影响，与上述结果的差异可能与试验所选的菌种、添加的剂量、饲养环境条件以及动物自身生理状态等有关，值得进一步探讨。

近年来关于乳酸杆菌对肉鸡肌肉品质的影响报道结果不一。李菊等^{[ 17 ]}研究发现，对肉鸡饲喂乳酸菌(CAU6001)，可以提高肉鸡胸肌和腿肌红度和黄度，但对亮度无显著影响，对肌肉品质有一定的改善作用。郭元晟等^{[ 18 ]}研究报道，饲喂L.fermentum F-6对肉鸡烹饪损失率、肉色、pH均无显著影响，但与对照组相比，L.fermentum F-6组的肉色红度与pH有不同程度增加。然而，Zhu等^{[ 19 ]}研究表明唾液乳酸杆菌对肉鸡胸肌肉色及肌肉中肌红色素含量均无显著影响。林高峰^{[ 20 ]}等研究发现，微生态制剂组肉色黄度显著高于对照组和抗生素组，而pH和剪切力组间差异不显著。本试验结果表明，乳酸杆菌和囊素三肽均能显著改善肉色，提高肌肉嫩度，而对pH的影响不显著。囊素三肽和乳酸杆菌联合使用未显协同效应的原因可能与二者作用的部位和机理不同有关：囊素三肽主要通过促进B细胞信号传导，诱导前体B细胞分化，增加环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)浓度，从而促进B细胞抗体的合成；而乳酸杆菌作为有效益生菌，在动物肠道内定植，通过与有害菌群占位竞争，并产生乳酸菌素等抗菌素抑制病原菌的增殖，维持肠道微生态平衡，从而达到促进动物生长及提高免疫力的作用。

血清中的总蛋白和白蛋白含量能反映机体蛋白质代谢水平，乳酸杆菌通过产生特殊酶系分解食物中的蛋白质，同时产酸酸化肠道环境，增加蛋白酶活性来参与蛋白质代谢过程。王全溪等^{[ 21 ]}证实，在饲粮中添加100 mg/kg的乳酸菌素能提高28日龄肉鸡的血清总蛋白含量。本试验结果显示，乳酸杆菌和囊素三肽的单独使用和联合应用有提高肉鸡血清总蛋白和白蛋白含量的趋势，增强机体对蛋白质的代谢能力。血清尿素氮是机体蛋白质代谢的最终产物，可以反映机体蛋白质代谢和氨基酸之间的平衡状况，平衡良好时血清尿素氮含量下降，尿素氮含量的降低可以为其他组织的蛋白质沉积提供氨基酸等原料。Fukushim等^{[ 22 ]}用混合益生菌饲喂大鼠4周后血清总胆固醇含量降低，认为益生菌可以抑制胆固醇合成过程中的关键酶，从而降低机体胆固醇含量。本试验结果表明，乳酸杆菌和囊素三肽的使用能降低血清总胆固醇含量，这与王全溪等^{[ 21 ]}的研究结果一致，可能是饲粮中添加乳酸杆菌在肉鸡前期生长中促进了机体对脂类的吸收，而后期有效地抑制了胆固醇合成过程中关键酶的活性^{[ 23 ]}，但其作用机理还有待进一步研究。

乳酸杆菌和囊素三肽在一定程度上有提高肉鸡生长性能和屠宰性能的作用，并能改善肉鸡肉质及血清生化指标，但两者联合使用的效果并未优于单独使用。