银狐也叫银黑狐、玄狐等，原产于北美的北部和西伯利亚的东部，属哺乳纲(Mammalia)，食肉目(Carnivora)，犬科(Canidae)，狐属(Vulpes oken),是珍贵的毛皮动物之一。银狐的生长受诸多因素的影响，其中包括饲粮能量水平，而脂肪是提供饲粮能量的主要来源。以一定水平的油脂替代等能值的蛋白质和碳水化合物,可减少消化过程中能量的消耗，节约饲粮蛋白质，降低成本^[1]。NRC(1982)^[2]建议生长期银狐日代谢能需要量为13.5 MJ/kg。杨嘉实等^[3]总结大量试验结果后推荐育成期银狐饲粮粗脂肪水平为10%。NJF(2012)^[4]报道当育成期银狐饲粮中脂肪所提供的能量占到代谢能的50%时其仍可正常生长。目前有关银狐脂肪营养的研究报道较少。因此，本试验旨在研究饲粮脂肪水平对银狐生长性能及消化代谢的影响，从而筛选出育成期银狐饲粮适宜的脂肪水平，在满足银狐正常生长的条件下将饲料成本和环境污染降至最低。

选择12周龄左右、体重相近的健康雄性银狐50只，随机分成5组(每组10个重复，每个重复1只)，分别饲喂添加8%(Ⅰ组)、10%(Ⅱ组)、12%(Ⅲ组)、14%(Ⅳ组)、16%(Ⅴ组)混合油脂(鸡油∶ 豆油=1∶ 1)的试验饲粮，试验饲粮对应的脂肪水平为9.9%、11.7%、13.3%、15.6%、17.4%。预试期为20 d，正试期为55 d。试验狐单笼饲养，笼子尺寸为100 cm×80 cm×80 cm。整个试验在室外自然光照条件下进行，由专人进行饲养。每天早晚各饲喂1次，自由采食并保证充足的饮水。正式试验开始后，每隔15 d于晨间空腹称重，每日观察并记录试验狐的健康状况。

以膨化玉米、豆粕、鱼粉、肉骨粉、玉米蛋白粉、干酒糟及其可溶物(DDGS)、鸡油、豆油等为主要原料，同时添加由矿物质、维生素等组成的营养性添加剂制成试验饲粮。为防止天气炎热导致油脂氧化，将配制好的试验饲粮存于冷库，现喂现取。试验饲粮组成及营养水平见表1。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 试验饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) % 项目 Items 组别 Groups Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 原料 Ingredients 膨化玉米 Extruded corn 35.75 31.75 27.75 23.75 19.75 豆粕 Soybean meal 20.00 20.00 20.00 20.00 20.00 鱼粉 Fish meal 12.00 12.00 12.00 12.00 12.00 肉骨粉 Meat and bone meal 8.00 8.00 8.00 8.00 8.00 玉米蛋白粉 Corn gluten meal 12.00 12.00 12.00 12.00 12.00 干酒糟及其可溶物 DDGS 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 赖氨酸 Lys 0.50 0.50 0.50 0.50 0.50 蛋氨酸 Met 0.75 0.75 0.75 0.75 0.75 豆油 Soybean oil 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 鸡油 Chicken oil 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 预混料 Premix1) 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 合计 Total 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 营养水平 Nutrient levels2) 代谢能 ME/(MJ/kg) 14.89 15.33 15.96 16.16 16.49 粗蛋白质 Crude protein 30.15 30.41 30.63 31.91 29.44 粗脂肪 Crude fat 9.90 11.72 13.28 15.55 17.36 碳水化合物 Carbohydrate 52.03 49.99 47.80 43.77 44.35 钙 Ca 1.53 1.28 1.24 1.15 1.12 磷 P 0.80 0.79 0.71 0.69 0.74 1)每千克预混料含有One kilogram of premix contained the following：VA 300 000 IU，VD 3 200 000 IU，VE 4 000 mg，VK 350 mg，VB1400 mg，VB2500 mg，VB6200 mg，VB124.2 mg，叶酸 folic acid 50 mg，泛酸 pantothenic acid 2 200 mg，生物素 biotin 1 600 mg，氯化胆碱 choline chloride 120 mg，VC 12 000 mg，Fe 4 000 mg，Zn 3 200 mg，Mn 1 600 mg，I 80 mg，Se 12 mg，Cu 500 mg。 2)代谢能和碳水化合物为计算值，其他为测定值。ME and carbohydrate were calculated values,while the others were measured values.

表1 试验饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) %

消化代谢试验于2013年9月1日至2013年9月4日进行，从每组选出8只采食与排粪正常的健康银狐作为消化代谢试验动物。采用全收粪法收集连续4 d的粪尿，尿样收集前在收集桶内加入10 mL 10%硫酸固氮，测定尿中粗蛋白质含量。每只试验狐的粪样混匀分成2份：一份先在80 ℃下杀菌2 h,再将温度降至65~70 ℃烘干至恒重，测定初水分。将干粪样粉碎过孔径为0.45 mm(40目)筛，制成样品测定粗脂肪含量。另一份鲜粪样加10%硫酸处理后于100~105 ℃下烘干，粉碎过孔径为0.45 mm(40目)筛，制成样品测定粗蛋白质含量。

测定基础饲粮中干物质、粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分、钙、磷含量，粪样中干物质、粗蛋白质、粗脂肪含量，尿样中粗蛋白质含量。干物质含量采用105 ℃烘干法测定，参照GB/T 6435—2006；粗蛋白质含量采用凯氏定氮法测定，参照GB/T 6432—94；粗脂肪含量采用索氏抽提法测定，参照GB/T 6433—94；粗灰分含量采用550 ℃灼烧法测定，参照GB/T 6438—92；钙含量采用乙二胺四乙酸(EDTA)络合滴定法测定，参照GB/T 6436—92；磷含量采用钒钼酸铵比色法测定，参照GB/T 6437—92。

干物质消化率(%)=[(干物质采食量－干物质排出量)/干物质采食量]×100；

蛋白质消化率(%)=[(蛋白质摄入量－蛋白质排出量)/蛋白质摄入量]×100；

脂肪消化率(%)=[(脂肪摄入量－脂肪排出量)/脂肪摄入量]×100；

碳水化合物消化率(%)=[(碳水化合物摄入量－碳水化合物排出量)/碳水化合物摄入量]×100；

总能消化率(%)=[(总能摄入量－总能排出量)/总能摄入量]×100；

氮沉积(g/d)=食入氮－粪氮－尿氮；

净蛋白质利用率(%)=(氮沉积/食入氮)×100；

蛋白质生物学价值(%)=[氮沉积/(食入氮－粪氮)]×100。

1.6 数据统计与分析

试验结果以平均值±标准差表示，数据用Excel进行整理并用SAS 8.0软件中的GLM程序进行方差分析，采用Duncan氏法进行多重比较，P<0.05为差异显著，P<0.01为差异极显著。

根据整个试验期称重结果，按照各组银狐不同日龄的平均体重绘制了累积生长曲线(图1)，结合各阶段日增重(表2)可以看出育成期银狐体重几乎呈直线上升，尤其是90~105日龄阶段，其体重增加幅度最大。由表3可看出，饲粮脂肪水平对育成期银狐的平均日增重、干物质采食量、日采食代谢能和料重比的影响不显著(P>0.05)。

图1(Fig. 1)

图1 育成期银狐的累积生长曲线 Fig.1 Accumulative growth curve of silver foxes in growing period

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 饲粮脂肪水平对育成期银狐不同阶段日增重的影响 Table 2 Effects of dietary fat level on daily gain in different stages of silver foxes in growing period g 日龄 Days of age 组别 Groups P值 P-value Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 90~105 104.00±11.48 103.33±10.07 105.33±10.97 112.66±17.96 114.33±6.09 0.059 7 105~120 35.83±4.62a 37.89±4.82a 33.34±5.00ab 36.66±6.46a 30.09±7.50b 0.045 1 120~129 26.27±6.41ab 30.77±9.46a 33.67±6.67a 20.67±8.38b 29.63±7.65a 0.013 0 129~143 26.68±8.68b 24.25±6.23b 28.56±8.22b 34.96±8.79a 31.25±6.24a 0.029 6 同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。下表同。 In the same row,values with different small letter superscripts mean significant difference (P＜0.05),and with different capital letter superscripts mean extremely significant difference (P<0.01). The same as below.

表2 饲粮脂肪水平对育成期银狐不同阶段日增重的影响 Table 2 Effects of dietary fat level on daily gain in different stages of silver foxes in growing period g

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 饲粮脂肪水平对育成期银狐平均日增重、干物质采食量、日采食代谢能和料重比的影响Table 3 Effects of dietary fat level on ADG,DMI,DME and F/G of silver foxes in growing period 日龄 Days of age 组别 Groups P值 P-value Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 平均日增重 ADG/(g/d) 49.20±3.89 49.44±4.96 51.07±2.44 52.05±7.48 53.30±4.08 0.314 0 干物质采食量 DMI/(g/d) 193.02±7.19 186.11±7.06 186.75±11.30 181.47±10.51 184.19±8.05 0.157 7 日采食代谢能 DME/(MJ/d) 2.87±0.11 2.85±0.11 2.89±0.25 2.87±0.31 3.05±0.13 0.231 2 料重比 F/G 3.42±0.30 3.39±0.43 3.33±0.36 3.29±0.41 3.22±0.27 0.125 1

表3 饲粮脂肪水平对育成期银狐平均日增重、干物质采食量、日采食代谢能和料重比的影响 Table 3 Effects of dietary fat level on ADG,DMI,DME and F/G of silver foxes in growing period

由表4可知，饲粮脂肪水平极显著影响脂肪和碳水化合物消化率(P<0.01)，显著影响总能消化率(P<0.05)，对蛋白质和干物质消化率无显著影响(P>0.05)。脂肪消化率随饲粮脂肪水平的升高而增加，Ⅳ和Ⅴ组极显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(P<0.01),其他组间无显著差异(P>0.05)。碳水化合物消化率以Ⅰ组最高，Ⅴ组最低，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组间差异不显著(P>0.05)。总能消化率以Ⅴ组最高，Ⅰ组最低，Ⅳ和Ⅴ组显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(P<0.05)，其他组间差异不显著(P>0.05)。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 饲粮脂肪水平对育成期银狐营养物质消化率的影响 Table 4 Effects of dietary fat level on nutrient digestibility of silver foxes in growing period % 日龄 Days of age 组别 Groups P值 P-value Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 脂肪消化率 Fat digestibility 85.31±2.73Bb 85.11±1.94Bb 88.79±3.14Bb 91.42±2.24Aa 95.10±1.41Aa <0.000 1 蛋白质消化率 Protein digestibility 71.69±3.57 70.27±8.08 68.09±3.03 69.88±2.59 66.09±1.44 0.154 7 碳水化合物消化率 Carbohydrate digestibility 80.73±3.53Aa 75.28±5.42Bb 74.54±2.25Bb 77.00±2.89Bb 70.71±1.51Cc 0.000 2 干物质消化率 DM digestibility 69.71±5.89 67.29±8.98 66.68±3.97 68.56±1.98 65.07±1.99 0.534 7 总能消化率 GE digestibility 76.35±3.84b 75.07±3.29b 78.62±2.90ab 80.05±1.57a 80.15±1.55a 0.022 2

表4 饲粮脂肪水平对育成期银狐营养物质消化率的影响 Table 4 Effects of dietary fat level on nutrient digestibility of silver foxes in growing period %

由表5可知，各组间食入氮和粪氮差异不显著(P>0.05)。尿氮以Ⅴ组最高，极显著高于其他各组(P<0.01)，同时Ⅱ和Ⅳ组极显著高于Ⅰ组(P<0.01),而与Ⅲ组差异不显著(P>0.05),Ⅰ和Ⅲ组间差异也不显著(P>0.05)。Ⅰ组氮沉积、净蛋白质利用率和蛋白质生物学价值均极显著高于其他各组(P<0.01)，Ⅴ组则极显著低于其他各组 (P<0.01)，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组间差异不显著(P>0.05)。

表5

Table 5

表5(Table 5)

表5 饲粮脂肪水平对育成期银狐氮代谢的影响 Table 5 Effects of dietary fat level on nitrogen metabolism of silver foxes in growing period 日龄 Days of age 组别 Groups P值 P-value Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 食入氮 IN/(g/d) 9.31±0.32 9.06±0.32 8.96±0.76 9.02±0.87 8.73±0.37 0.171 1 粪氮 FN/(g/d) 2.95±0.63 2.95±0.79 2.94±0.46 2.78±0.39 2.82±0.13 0.267 6 尿氮 UN/(g/d) 2.44±0.81Cc 3.30±0.58Bb 3.12±0.83BCbc 3.32±0.71Bb 4.86±0.31Aa <0.000 1 氮沉积 RN/(g/d) 3.84±0.98Aa 2.46±0.32Bb 2.51±0.46Bb 2.71±0.72Bb 1.62±0.30Cc <0.000 1 净蛋白质利用率 NPU/% 46.51±8.48Aa 32.35±4.06Bb 32.21±5.46Bb 33.51±8.92Bb 14.63±3.06Cc <0.000 1 蛋白质生物学价值 BV of protein/% 66.61±9.84Aa 47.80±4.82Bb 40.99±9.64Bb 44.22±5.76Bb 21.00±4.05Cc <0.000 1

表5 饲粮脂肪水平对育成期银狐氮代谢的影响 Table 5 Effects of dietary fat level on nitrogen metabolism of silver foxes in growing period

油脂含有较高的能量，添加到饲粮中可提高能量浓度，促进动物生长。Schyen等^[5]试验表明，冬毛期银狐饲喂含16%~17%脂肪和32%蛋白质的饲粮，其日增重最大。但是，饲粮中油脂添加水平不宜过高，过高反而不利于动物生长。耿业业^[6]在雄性蓝狐饲粮中添加不同水平的猪油时发现26%组生长最快，而54%组蓝狐由于采食量的显著下降而生长最慢。Oleinik^[7]报道了蓝狐小肠黏膜上皮细胞内含有丰富的蛋白酶和脂肪酶，这就决定了其可消化高能量高蛋白质的饲粮。Kopczewski等^[8]研究得出高脂肪高能量饲粮可提高蓝狐体重，加快其生长速度。银狐对脂肪的耐受性虽不及蓝狐，但当育成期银狐饲粮中脂肪水平占到代谢能的50%时仍可正常生长^[4]。本试验结果显示，饲粮脂肪水平对育成期银狐平均日增重、料重比均没有显著影响，干物质采食量虽在高脂肪水平时有所降低，但组间亦差异不显著，可能原因是试验设计的脂肪梯度小，银狐可通过调节采食量平衡体内的脂肪代谢。虽然Ⅴ组的干物质采食量略低，但该组饲粮脂肪水平最高，因此日采食代谢能与其他组差异不显著。

研究表明，除一些硬脂酸外，水貂对大多数脂肪酸都有很高的消化率，饲粮中脂肪的平均消化率是85%，有时甚至更高^[9]。本试验结果表明，随饲粮脂肪水平的升高，育成期银狐的脂肪和总能消化率显著提高。该趋势与Geng等^[10]在蓝狐上和Ahlstrm等^[11]在水貂上的研究结果相一致。与脂肪消化率提高的趋势不同，本试验中碳水化合物的消化率随饲粮脂肪水平的升高而降低，可能原因是Ⅴ组饲粮脂肪水平足够银狐生长发育对能量的需要，减少了碳水化合物氧化供能，多余的碳水化合物被排出体外，进而降低其利用率。虽然饲粮脂肪水平对蛋白质和干物质消化率的影响不显著，但二者都随饲粮脂肪水平的升高而呈降低的趋势。这与杨颖^[12]在水貂上和Htoo等^[13]在猪上的研究结果不同，可能原因是不同动物对营养物质的吸收利用程度不同，具体机制有待进一步研究。

氮代谢能够反映机体蛋白质代谢情况。银狐采食饲粮中的含氮物质后，经体内消化代谢，一部分用于合成体蛋白质沉积于体内或被机体利用，另一部分作为代谢产物随粪、尿排出。刘佰阳等^[14]以冬毛期蓝狐为研究对象，认为当脂肪供应不足时，蛋白质转化成脂肪用于供能，而饲粮中过多的脂肪会使多余的蛋白质排出体外，降低蛋白质的利用率。本试验结果也显示出相同的趋势，即随饲粮脂肪水平的升高，尿氮增加，氮沉积减少。蛋白质与脂肪都是动物维持生长所必需的营养物质，二者之间应保持适当的比例。Campbell等^[15]研究认为，蛋白质和能量之间的平衡是影响猪体内蛋白质沉积利用和尿氮损失的主要因素之一。陈佳毅等^[16]就不同能蛋比对梭鲈幼鱼生长和代谢的影响进行研究，结果表明能蛋比过高氮沉积反而降低。本试验中各组饲粮蛋白质水平基本一致，而能量水平以Ⅰ组最低、Ⅴ组最高，因此能蛋比以Ⅰ组最低、Ⅴ组最高。高能蛋比是否是影响育成期银狐尿氮增加、氮沉积降低的主要因素还有待进一步研究。

净蛋白质利用率是指动物体内沉积的蛋白质或氮占食入的蛋白质或氮的百分比，蛋白质生物学价值是指体内沉积的蛋白质占食物中被消化的蛋白质的百分比，二者均是评价蛋白质被利用程度的指标。本试验结果表明，饲粮脂肪水平显著影响育成期银狐的净蛋白质利用率和蛋白质生物学价值，其中Ⅰ组最高、Ⅴ组最低。这可能是因为当饲粮中添加8%的混合油脂使饲粮脂肪水平达到9.9%时,饲粮中的脂肪与蛋白质和碳水化合物的比例较适宜,所以提高了蛋白质的利用率。

本试验条件下，饲粮中混合油脂添加水平从8%提高到16%对育成期银狐的平均日增重没有显著影响，结合营养物质消化率和氮代谢指标得出：饲粮添加8%的混合油脂使饲粮脂肪水平达到9.9%时即可满足育成期银狐的生长需要，并且此时尿氮排出量少，可降低环境污染。