基于动物消化生理学与自动化控制技术开发的单胃动物仿生消化系统(SDS-2)使繁杂的体外模拟消化过程可操作性强，人为干扰少，其测定的酶水解物能值(enzymatic hydrolysate gross energy,EHGE)作为估测饲料有效能值的指标已逐渐在行业中应用，探讨该系统测定EHGE的变异程度以及潜在变异因素与EHGE的相关关系，对仿生消化法的发展与应用非常重要。自20世纪50年代以来，欧、美等地区发达国家一直在开展体外消化法估测猪禽饲料有效能值的研究^[1,2,3,4,5]。其中，以Boisen等^[1]为代表建立的体外消化方法已被法国、荷兰、丹麦等国所接受。然而，关于该方法的变异程度及其影响因素的报道非常有限。在仿生消化系统(仪器)测定鸭饲料原料EHGE的精度上，动物营养学国家重点实验室获得了仪器内与仪器间的变异系数分别不高于1.40%和1.64%^[6]。但关于测试过程中各因素的变异程度仍鲜见相关报道。在仿生消化系统测定饲料的EHGE中，重复间、不同测定批次间，作为计算EHGE的原始素材，上样量、未消化残渣的质量、能值都有不同程度的变异，这些变异可能是影响EHGE测定值的潜在因素。为此，本研究以鸡的仿生消化为对象，通过分析玉米、小麦、菜籽粕、棉籽粕在仿生消化过程中的上样量、未消化残渣的质量、残渣能量浓度与总能值的批内、批间变异系数、总变异系数与相应EHGE的批内、批间变异系数和总变异系数，以及它们之间的相关性，为仿生消化方法测定饲料原料EHGE的变异程度与影响因素提供参考。

以广东温氏食品集团股份有限公司提供的玉米、小麦、菜籽粕、棉籽粕作为研究对象，采用四分法取样后用万能粉碎机粉碎并过60目筛。充分混合均匀，贮存于样品瓶中-20 ℃保存备用。饲料原料的养分含量列于表1。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 饲料原料的养分含量(干物质基础) Table 1 Nutrient contents of feed ingredients (DM basis) 饲料原料 Feed ingredients 养分含量Nutrient contents 干物质 Dry matter/% 粗蛋白质 Crude protein/% 粗纤维 Crude fiber/% 粗脂肪 Extract ether/% 总能 Gross energy/(MJ/kg) 玉米 Corn 89.00 8.88 2.08 4.13 18.55 小麦 Wheat 90.80 15.40 2.17 1.74 18.65 菜籽粕 Rapeseed meal 89.19 42.14 12.57 2.97 19.78 棉籽粕 Cottonseed meal 89.11 46.40 15.79 0.82 19.36 养分含量为实测值。 Nutrient contents were determined values.

表1 饲料原料的养分含量(干物质基础) Table 1 Nutrient contents of feed ingredients (DM basis)

将3台SDS-2置于温度为25 ℃左右的室内，维持室内自然通风，经玉米标准样品测试、校正3台SDS-2的一致性^[6]。在此基础上，采用单因素完全随机设计，将4个饲料样品随机分配于3台SDS-2中。分3个批次测定每个样品的干物质消化率(dry matter digestibility,DMD)和EHGE，每个批次设5个重复，每个重复1根消化管。

鸡仿生消化过程参照赵峰等^[7]鸡饲料EHGE测定技术规程的操作过程进行，其主要步骤列于表2。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 鸡仿生消化操作过程 Table 2 Procedures of in vitro bionic digestion for broiler 项目 Items 操作 Operation 手动/自动Manual/automatical 前处理 Pretreatment 透析袋Dialysis tubing 将透析袋截成25 cm左右，在2%质量体积分数NaHCO3，1 mol/L的EDTANa2(pH 8.0)中煮沸10 min后，用蒸馏水清洗，然后继续置于1 mol/L的EDTANa2(pH 8.0)中煮沸10 min。冷却后，保存于4 ℃冰箱中备用 手动 消化液Digestive fluid 模拟胃液胃蛋白酶活性为1 550 U/mL，浓缩模拟小肠液中淀粉酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶的活性分别为4 730、550和154 U/mL 手动 缓冲液Buffer solution 胃缓冲液中NaCl、KCl、HCl浓度分别为16.9、9.6和10 mmol/L，pH 2.00；小肠前段缓冲液中NaCl、KCl、NaH2PO4、NaHPO4浓度分别为35.9、11.5、160和40 mmol/L，pH 6.55；小肠后段缓冲液中NaCl、KCl、NaH2PO4、NaHPO4浓度分别为35.9、11.5、20和180 mmol/L，pH 8.12 手动 时间 Time/h 0 上样：玉米、小麦的上样量为2 g(风干基础)，菜籽粕、棉籽粕的上样量为1 g(风干基础)，精确到0.000 2 g 手动 将消化管固定在SDS-2的消化平台上，连接好管道。在SDS-2控制软件中选择鸡的仿生消化程序后，在主界面点击开始消化 手动 开始胃阶段的消化 自动 4.0 胃消化停止，胃缓冲液排出 自动 去离子水清洗3次，每次清洗泵入1 500 mL去离子水，每次清洗循环40 min后排出清洗液 自动 6.0 小肠前段缓冲液泵入消化管，循环30 min 自动 6.5 注入模拟小肠液，小肠前段缓冲液继续循环。开始小肠前段模拟消化 自动 14.0 小肠前段模拟消化结束，缓冲液排出。小肠后段缓冲液注入，开始小肠后段模拟消化 自动 21.5 小肠后段模拟消化结束，缓冲液排出 自动 去离子水清洗6次，每次清洗泵入1 500 mL去离子水，每次清洗循环40 min后排出清洗液 自动 25.5 消化产物清洗结束 自动 未消化残渣Undigested residues 转移至已知绝干重量的90 mm培养皿中，65 ℃下烘干至无水痕后105 ℃烘干至恒重 手动 烘干的残渣转移到已知绝干重量的G4砂芯坩埚中，用无水乙醇冲洗残渣3次，每次30 mL 手动 将脱脂后的残渣及含有残留物的90 mm培养皿在105 ℃烘干至恒重 手动

表2 鸡仿生消化操作过程 Table 2 Procedures of in vitro bionic digestion for broiler

饲料样品按照GB/T 6435—2006测定水分并计算其干物质含量，并根据ISO 9831:1998的规定同步测定待测饲料总能。脱脂未消化残渣通过差量法计算其干物质含量及总能。

根据单因素完全随机试验设计，用SAS 9.0的MEANS模块对基本统计量进行分析，CORR模块分析4种饲料原料的上样量(干物质、能量)与残渣量的相关性，结果显示仅菜籽粕、棉籽粕的干物质上样量与残渣的干物质量有显著相关关系(P<0.05)，但R²<0.61。而所有饲料的能量上样量与残渣总能值均无显著性相关性(P>0.05)，因此，在本试验条件下的上样量范围内，不进行以上样量为自变量的协方差分析，而直接采用GLM模块对数据进行方差分析。批内变异系数、批间变异系数及总变异系数参照蒋红卫等^[8]的方法计算。数据计算公式及统计模型如下：

统计模型为Y_ij=μ+αi+ε_ij。

式中：M₁为饲料样品干物质量(g)；M₂为未消化残渣干物质量(g)；E₁为饲料样品总能(J)；E₂为脱脂后残渣的总发热量(J)； i为第i个组的均值； 为样本总平均值；G为组数；N为样本总数；Ni为第i个组样本数；μ为总平均值；αi为组间效应；ε_ij为随机误差。

在玉米的仿生消化中(表3)，3个测定批次的干物质上样量存在显著性差异(变化范围1.774 5~1.781 7 g，P<0.05)，但批内、批间和总变异系数都不超过0.22%。未消化残渣量在测定批次间无显著性差异(P>0.05)，而批内、批间和总变异系数分别为4.16%、0.95%和3.84%。干物质的消化量、DMD在测定批次间无显著性差异(P>0.05)，且批内、批间和总变异系数都不超过1.00%。在EHGE上，能量上样量在批次间有显著差异(变化范围32.92～33.05 kJ，P<0.05)，但批内、批间和总变异系数都不超过0.22%。未消化残渣总能量在测定批次间无显著性差异(P>0.05)，而批内、批间和总变异系数分别为4.17%、0.92%和3.84%。残渣能量浓度在批次间有显著差异(变化范围16.07～16.79 kJ/g，P<0.05)，批 内、批间和总变异系数分别为1.10%、1.84%和 2.08%。能量消化量、能量消化率与EHGE在测定批次间无显著性差异(P>0.05)，且批内、批间和总变异系数均不超过1.00%。

在小麦的仿生消化中(表3)，3个测定批次中上样的干物质上样量、未消化残渣量、干物质消化量及DMD均存在显著性差异(P<0.05)，但干物质上样量、干物质消化量及DMD的批内、批间和总变异系数都不超过0.63%，而未消化残渣量的批内、批间和总变异系数分别为1.76%、1.88%和2.45%。在EHGE上，能量上样量及残渣能量浓度在批次间有显著差异(P<0.05)，但能量上样量的批内、批间和总变异系数都不超过0.10%，而残渣能量浓度的批内、批间和总变异系数分别为0.90%、0.76%和1.11%。未消化残渣量、能量消化量、能量消化率与EHGE在测定批次间无显著性差异(P>0.05)，但未消化残渣量批内、批间和总变异系数分别为2.11%、1.12%和2.20%，而能量消化量、能量消化率与EHGE的批内、批间和总变异系数都不超过0.49%。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 仿生消化中玉米、小麦干物质与能量物质的消化 Table 3 Bionic digestion of dry matter and energetic matter of corn and wheat in the simulated digestion system 样品 Samples 项目 Items 平均值 Mean SEM P值 P-value 变异系数 CV/% 批次1 Batch 1 批次2 Batch 2 批次3 Batch 3 批内 Intra-batch 批间 Inter-batch 总和 Total 玉米 Corn 重复数 n 5 5 5 干物质 Dry matter 上样量 Sample weight/g 1.774 5 1.781 7 1.779 0 0.001 2 0.003 9 0.15 0.17 0.22 残渣量 Residues/g 0.332 9 0.325 4 0.327 9 0.006 1 0.684 8 4.16 0.95 3.84 消化量 Digested/g 1.441 6 1.456 3 1.451 1 0.006 5 0.304 7 1.00 0.42 0.99 干物质消化率 DMD/% 81.24 81.73 81.57 0.35 0.600 4 0.95 0.25 0.89 能量Energy 上样量 Sample energy/kJ 32.92 33.05 33.00 0.02 0.004 3 0.15 0.17 0.22 残渣量 Residues/kJ 5.35 5.47 5.43 0.10 0.701 9 4.17 0.92 3.84 残渣能量浓度 Residues energy content/(kJ/g) 16.07 16.79 16.58 0.08 0.000 1 1.10 1.84 2.08 消化量 Digested/kJ 27.57 27.59 27.57 0.11 0.993 6 0.88 0.03 0.79 能量消化率 Ed/% 83.75 83.46 83.53 0.31 0.794 7 0.82 0.15 0.75 酶水解物能值 EHGE/(kJ/g) 15.54 15.48 15.50 0.06 0.782 9 0.82 0.15 0.75 小麦 Wheat 重复数 n 5 5 5 干物质 Dry matter 上样量 Sample weight/g 1.799 8 1.798 9 1.796 4 0.000 5 0.000 6 0.06 0.08 0.10 残渣量 Residues/g 0.377 2 0.360 2 0.368 4 0.002 9 0.005 0 1.76 1.88 2.45 消化量 Digested/g 1.422 6 1.438 6 1.428 0 0.002 8 0.005 6 0.44 0.47 0.61 干物质消化率 DMD/% 79.04 79.97 79.50 0.16 0.005 3 0.45 0.48 0.63 能量 Energy 上样量 Sample energy/kJ 33.56 33.54 33.50 0.01 0.000 6 0.06 0.08 0.10 残渣量 Residues/kJ 6.29 6.12 6.21 0.06 0.163 9 2.11 1.12 2.20 残渣能量浓度 Residues energy content/(kJ/g) 16.68 16.99 16.87 0.07 0.021 9 0.90 0.76 1.11 消化量 Digested/kJ 27.27 27.42 27.28 0.06 0.134 7 0.46 0.26 0.48 能量消化率 Ed/% 81.25 81.75 81.45 0.17 0.159 0 0.47 0.25 0.49 酶水解物能值 EHGE/(kJ/g) 15.15 15.24 15.19 0.03 0.145 0 0.46 0.25 0.49

表3 仿生消化中玉米、小麦干物质与能量物质的消化 Table 3 Bionic digestion of dry matter and energetic matter of corn and wheat in the simulated digestion system

在菜籽粕和棉籽粕的仿生消化中(表4)，3个测定批次中2种原料的干物质上样量、残渣量及DMD均有批间显著性差异(P<0.05)，其中干物质上样量的批内、批间和总变异系数都不超过0.40%，而残渣量及DMD的批内、批间和总变异系数也都不超过1.31%和1.08%。干物质消化量的批间差异不显著(P>0.05)，且批内、批间和总变异系数都不超过0.95%。在EHGE上，2种原料的能量上样量在批次间有显著差异(P<0.05)，但能量上样量的批内、批间和总变异系数都不超过0.39%。菜籽粕的残渣总能量在测定批次间差异显著(P<0.05)，其批内、批间和总变异系数分别为1.83%、1.33%和2.11%。棉籽粕残渣总能量在测定批次间差异不显著(P>0.05)，其批内、批间和总变异系数分别为0.76%、0.53%和0.86%。2种饲料原料的残渣能量浓度、能量消化量、能量消化率与EHGE在测定批次间无显著性差异(P>0.05)，其中菜籽粕中这些变量的批内、批间和总变异系数分别介于1.56%～1.76%、0.44%～0.86%及1.59%～1.64%之间，棉籽粕中这些变量的批内、批间和总变异系数分别介于0.48%～0.96%、0.19%～0.42%及0.47%～0.94%之间。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 仿生消化中菜籽粕、棉籽粕干物质与能量物质的消化 Table 4 Bionic digestion of dry matter and energetic matter of rapeseed meal and cottonseed meal in the simulated digestion system 样品 Samples 项目 Items 平均值 Mean SEM P值 P-value 变异系数 CV/% 批次1 Batch 1 批次2 Batch 2 批次3 Batch 3 批内 Intra-batch 批间 Inter-batch 总和 Total 菜籽粕 Rapeseed meal 重复数 n 5 5 5 干物质 Dry matter 上样量 Sample weight/g 0.892 5 0.885 6 0.889 8 0.001 1 0.002 9 0.28 0.32 0.40 残渣量 Residues/g 0.449 7 0.437 7 0.445 7 0.001 5 0.000 5 0.77 1.12 1.31 消化量 Digested/g 0.442 8 0.447 9 0.444 2 0.001 8 0.168 2 0.92 0.48 0.95 干物质消化率 DMD/% 49.61 50.57 49.92 0.18 0.008 1 0.81 0.80 1.08 能量 Energy 上样量 Sample energy/kJ 17.65 17.52 17.60 0.02 0.002 5 0.27 0.31 0.39 残渣量 Residues/kJ 8.06 7.84 8.06 0.07 0.048 2 1.83 1.33 2.11 残渣能量浓度 Residues energy content/(kJ/g) 17.93 17.90 18.08 0.14 0.633 0 1.76 0.44 1.64 消化量 Digested/kJ 9.58 9.68 9.54 0.07 0.391 1 1.65 0.61 1.59 能量消化率 Ed/% 54.31 55.25 54.21 0.38 0.142 1 1.56 0.86 1.64 酶水解物能值 EHGE/(kJ/g) 10.74 10.93 10.72 0.08 0.146 3 1.56 0.86 1.64 棉籽粕 Cottonseed meal 重复数 n 5 5 5 干物质 Dry matter 上样量 Sample weight/g 0.891 9 0.887 0 0.887 8 0.000 6 0.000 3 0.16 0.24 0.28 残渣量 Residues/g 0.521 7 0.514 8 0.514 1 0.001 4 0.005 2 0.63 0.66 0.87 消化量 Digested/g 0.370 2 0.372 3 0.373 7 0.001 3 0.213 6 0.79 0.38 0.81 干物质消化率 DMD/% 41.51 41.97 42.09 0.15 0.042 0 0.80 0.60 0.93 能量 Energy 上样量 Sample energy/kJ 17.27 17.17 17.19 0.01 0.000 4 0.16 0.24 0.28 残渣量 Residues/kJ 9.65 9.57 9.53 0.03 0.057 6 0.76 0.53 0.86 残渣能量浓度 Residues energy content/(kJ/g) 18.50 18.59 18.53 0.04 0.330 3 0.48 0.19 0.47 消化量 Digested/kJ 7.62 7.61 7.66 0.03 0.492 5 0.96 0.30 0.91 能量消化率 Ed/% 44.13 44.30 44.57 0.19 0.283 2 0.95 0.41 0.94 酶水解物能值 EHGE/(kJ/g) 8.54 8.58 8.63 0.04 0.262 8 0.94 0.42 0.94

表4 仿生消化中菜籽粕、棉籽粕干物质与能量物质的消化 Table 4 Bionic digestion of dry matter and energetic matter of rapeseed meal and cottonseed meal in the simulated digestion system

由表5可知，在玉米和小麦仿生消化过程中各变量与DMD及EHGE的相关性上，两者的结果相一致。即残渣的干物质量和干物质的消化量与DMD存在显著性相关关系(P<0.05)，而样品的上样量与DMD无显著性相关关系(P>0.05)。残渣的总能量、能量消化量及能量消化率与EHGE存在显著性相关性(P<0.05)，而样品能量物质的上样量及残渣能量浓度与EHGE无显著性相关关系(P>0.05)。

表5

Table 5

表5(Table 5)

表5 玉米、小麦在仿生消化过程中上样量、残渣量、消化量与DMD与EHGE的相关性 Table 5 Correlation between sample volume,residues or digested contents and DM digestibility or EHGE of corn and wheat digested in the simulated digestion system (n=15) 样品 Samples 项目 Items 相关系数 Correlation coefficient 测值范围 Range of the values DMD EHGE 最小值 Minimum 平均值 Mean 最大值 Maximum 玉米 Corn 干物质 Dry matter 上样量 Sample weight/g 0.376 4 1.785 9 1.778 4 1.769 8 残渣量 Residues/g -0.998 6* 0.355 9 0.328 8 0.314 1 消化量 Digested/g 0.979 7* 1.470 8 1.449 7 1.423 2 干物质消化率 DMD/% 82.36 81.51 79.99 能量 Energy 上样量 Sample energy/kJ 0.021 9 33.13 32.99 32.83 残渣量 Residues/kJ -0.997 8* 5.99 5.42 5.20 残渣能量浓度 Residues energy content/(kJ/g) -0.212 5 17.05 16.48 15.95 消化量 Digested/kJ 0.963 6* 27.93 27.58 27.02 能量消化率 Ed/% 0.999 7* 84.31 83.58 81.86 酶水解物能值 EHGE/(kJ/g) 15.64 15.51 15.19 小麦 Wheat 干物质 Dry matter 上样量 Sample weight/g -0.232 8 1.801 6 1.798 4 1.795 8 残渣量 Residues/g -0.999 3* 0.385 1 0.368 6 0.354 6 消化量 Digested/g 0.987 8* 1.442 0 1.429 8 1.416 5 干物质消化率 DMD/% 80.26 79.50 78.63 能量 Energy 上样量 Sample energy/kJ -0.191 9 33.59 33.53 33.48 残渣量 Residues/kJ -0.997 3* 6.54 6.21 5.99 残渣能量浓度 Residues energy content/(kJ/g) 0.004 7 17.24 16.85 16.51 消化量 Digested/kJ 0.983 8* 27.54 27.32 27.05 能量消化率 Ed/% 0.999 0* 82.13 81.49 80.53 酶水解物能值 EHGE/(kJ/g) 15.31 15.19 15.02 *表示相关系数达到显著性水平(P<0.05)。下表同。 * means that correlation coefficient reaches significant level(P<0.05). The same as below.

表5 玉米、小麦在仿生消化过程中上样量、残渣量、消化量与DMD与EHGE的相关性 Table 5 Correlation between sample volume,residues or digested contents and DM digestibility or EHGE of corn and wheat digested in the simulated digestion system (n=15)

由表6可知，在菜籽粕和棉籽粕仿生消化过程中各变量与DMD及EHGE的相关性上，两者的结果表现出不一致性。与玉米和小麦类似，这2种原料残渣的干物质量和干物质的消化量与DMD存在显著性相关关系(P<0.05)，残渣的总能量、能量消化量及能量消化率与EHGE存在显著性相关关系(P<0.05)。 菜籽粕干物质上样量与DMD、能量上样量与EHGE分别无显著性相关关系(P>0.05)，但残渣能量浓度与EHGE有显著性相关(P<0.05)。棉籽粕的干质量上样量与DMD有显著性相关关系(P<0.05)，但能量上样量与残渣能量浓度与EHGE均无显著性相关关系(P>0.05)。

表6

Table 6

表6(Table 6)

表6 菜籽粕、棉籽粕在仿生消化过程中上样量、残渣量、消化量与DMD与EHGE的相关性 Table 6 Correlation between sample volume,residues or digested contents and DM digestibility or EHGE of rapeseed meal and cottonseed meal digested in the simulated digestion system (n=15) 样品 Samples 项目 Items 相关系数 Correlation coefficient 测值范围 Range of the values DMD EHGE 最小值 Minimum 平均值 Mean 最大值 Maximum 菜籽粕 Rapeseed meal 干物质 Dry matter 上样量 Sample weight/g -0.470 4 0.896 7 0.889 3 0.884 3 残渣量 Residues/g -0.963 2* 0.455 4 0.444 4 0.430 6 消化量 Digested/g 0.928 4* 0.454 0 0.444 9 0.434 8 干物质消化率 DMD 51.32 50.03 48.84 能量 Energy 上样量 Sample energy/kJ -0.260 8 17.73 17.59 17.49 残渣量 Residues/kJ -0.982 8* 8.28 7.99 7.73 残渣能量浓度 Residues energy content/(kJ/g) -0.834 4* 18.65 17.97 17.54 消化量 Digested/kJ 0.971 9* 9.77 9.60 9.31 能量消化率 Ed/% 0.999 0* 55.82 54.59 52.92 酶水解物能值 EHGE/(kJ/g) 11.04 10.80 10.47 棉籽粕 Cottonseed meal 干物质Dry matter 上样量 Sample weight/g -0.586 6* 0.893 1 0.888 9 0.885 3 残渣量 Residues/g -0.966 1* 0.525 6 0.516 8 0.509 7 消化量 Digested/g 0.958 2* 0.376 9 0.372 0 0.367 5 干物质消化率 DMD/% 42.43 41.86 41.15 能量 Energy 上样量 Sample energy/kJ -0.225 2 17.29 17.21 17.14 残渣量 Residues/kJ -0.955 6* 9.76 9.58 9.45 残渣能量浓度 Residues energy content/(kJ/g) -0.455 4 18.65 18.54 18.33 消化量 Digested/kJ 0.956 1* 7.75 7.63 7.51 能量消化率 Ed/% 0.999 5* 44.92 44.33 43.54 酶水解物能值 EHGE(kJ/g) 8.70 8.58 8.43

表6 菜籽粕、棉籽粕在仿生消化过程中上样量、残渣量、消化量与DMD与EHGE的相关性 Table 6 Correlation between sample volume,residues or digested contents and DM digestibility or EHGE of rapeseed meal and cottonseed meal digested in the simulated digestion system (n=15)

在新方法的开发与检验中，批内变异系数、批间变异系数及总变异系数分别表示同一测定批次内数据的离散状况、不同测定批次间数据的离散状况以及整个数据的离散状况。李辉等^[6]报道，在玉米、棉籽粕和小麦麸的鸭仿生消化中，同一套仿生消化系统和不同套仿生消化系统测定的DMD和EHGE的批内、批间与总变异系数分别不超过1.40%和1.64%。本试验中，SDS-2模拟鸡的体内消化测定玉米、小麦、棉籽粕的DMD和EHGE的批内、批间与总变异系数均不超过1.00%。菜籽粕DMD的批内、批间与总变异系数均不超过1.00%，但EHGE的批内、批间与总变异系数最大值达到1.64%。对比上述研究结果，SDS-2在测定鸡饲料DMD与EHGE的变异上与SDS-1测定鸭饲料DMD与EHGE是类似的。而且均比基于动物试验的国家标准方法(GB/T 26437—2010)测 定鸡饲料代谢能值的批内、批间及总变异系数低 (分别为5.39%、1.89%和5.27%)^[9]。这表明，基于SDS-2的仿生消化法在测定鸡饲料的DMD及EHGE上比国家标准方法(GB/T 26437—2010)^[10]的稳定性好。
3.2 仿生消化法测定鸡饲料DMD与EHGE的主要影响因素

从测定过程各因素的变异看，虽然4个饲料原料的上样量(干物质、能量)存在批间显著性差异，但批内、批间及总变异系数均低于0.40%。而且玉米、棉籽粕的干物质上样量与DMD无显著性相关关系，仅棉籽粕的干物质上样量与DMD存在低度相关性。4种饲料原料的上样量总能值与EHGE也无显著性相关关系。这表明，上样量不是影响DMD及EHGE测定值的主要因素。而残渣的干物质量、残渣总能量的批内、批间及总变异系数均高于测定过程中其他变异的相应值(平均值比对)，且残渣的干物质量与DMD，残渣总能量与EHGE高度相关。这表明，残渣量是影响DMD及EHGE的主要因素。这与国家标准方法(GB/T 26437—2010)^[10]测定鸡饲料代谢能值时排泄量的变异占表观代谢能(AME)方差贡献的96.46%的结论相一致^[9]。而残渣能量浓度的批内、批间及总变异系数高于上样量的相应值，但低于残渣量的相应值，除菜籽粕的EHGE与残渣能量浓度有显著性相关外，其他3个饲料的EHGE与残渣能量浓度无显著性相关关系，这表明残渣能量浓度对EHGE的影响对饲料原料具有选择性。因此，残渣能量浓度对EHGE的影响低于残渣总能量对EHGE的影响。这一结果也与国家标准方法(GB/T 26437—2010)测定鸡饲料代谢能值时排泄物能量浓度的变异占AME方差贡献的3.23%的结论类似^[9]。综合上述结果，可以推断残渣干物质量的变异是引起DMD及EHGE变异的主要因素。

① 基于SDS-2的鸡仿生消化法测定玉米、菜籽粕、棉籽粕的DMD和EHGE的批内、批间和总变异系数都在1.64%以内。

② 基于SDS-2的鸡仿生消化法中，残渣干物质量的变异是影响DMD与EHGE测值变异的主要因素。