维生素A在动物体内参与维持正常生长发育、视觉、免疫和抗氧化等多种生理功能。有关维生素A在肉鸡饲粮中适宜添加水平的研究报道很多，但是报道结果存在明显差异^[1,2,3,4]。大剂量维生素A能增强鸡的免疫功能^[5,6]，所以，实际生产中倾向于向饲粮中添加大量维生素A。维生素A可在体内蓄积，过量维生素A不仅增加饲粮成本且可能引起机体负担加重或中毒。肉鸡饲粮中添加过量的维生素A是导致肉鸡在实际生产中骨骼生长代谢发生障碍的营养因素之一^[7,8,9]，因此适宜的维生素A添加水平成为肉鸡生产需要关注的重要问题。本文通过研究不同添加水平的维生素A对肉鸡生长性能、血清生化指标、器官指数及胫骨灰分含量的影响，为科学补加维生素A和制定有效的肉鸡营养调控措施提供科学依据。

选取体重均匀的1日龄艾拔益加(AA)肉仔鸡540只，公母各占1/2，随机分为6组，每组3个 重复，每重复30只。玉米-豆粕型基础饲粮(表1)中分别添加1 500、3 000、6 000、9 000、12 000和15 000 IU/kg维生素A形成6种试验饲粮，分别饲喂对应的试验鸡。试验期28 d。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) % 原料 Ingredients 含量 Content 营养水平 Nutrient levels2) 含量 Content 玉米 Corn 62.00 代谢能 ME/(MJ/kg) 12.13 豆粕 Soybean meal 32.90 粗蛋白质 CP 20.00 石粉 Limestone 0.70 钙 Ca 1.00 磷酸氢钙 CaHPO4 1.80 总磷 TP 0.50 食盐 NaCl 0.30 赖氨酸 Lys 1.10 预混料 Premix1) 1.00 蛋氨酸+半胱氨酸 Met+Cys 0.90 豆油 Soybean oil 1.30 苏氨酸 Thr 0.80 合计 Total 100.00 1)预混料为每千克饲粮提供The premix provided the following per kg of the diet：VD3 1 000 IU，VE 20 IU，VK3 0.5 mg，VB1 2 mg，VB2 8 mg，D-泛酸 D-pantothenic acid 9 mg，烟酸 nicotinic acid 35 mg，VB6 3.5 mg，VB12 0.01 mg，生物素 biotin 0.18 mg，叶酸 folic acid 0.55 mg，Cu (as copper sulfate) 8 mg，Fe (as ferrous sulfate) 100 mg，Mn (as manganese sulfate) 120 mg，Zn (as zinc sulfate) 100 mg，Se (as sodium selenite) 0.30 mg。 2)营养水平为计算值。The nutrient levels were measured values.

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis)

肉仔鸡网上平养，常规饲养管理，7日龄清粪1次，以后每3天清粪1次，自由采食，充足饮水，常规免疫。

存活率：每天记录各组死淘鸡只数，28日龄时以组为单位计算存活率。

体重：1日龄称量初始体重，28日龄时分别以重复为单位，空腹12 h称体重，计算28日龄每只鸡平均体重。

采食量：以重复为单位每7 d称1次剩料重，计算7 d的每只鸡平均采食量，以重复为单位，28 d每只鸡平均采食量之和即为每只鸡采食量。

料重比：采食量与体增重的比值即为料重比。

血清生化指标：28日龄时，每组每重复随机抽取2只鸡，活体称重，翅静脉采血2 mL，室温下放置30 min，离心分离，取血清，随即送医院检验科，用生化分析仪测定血清钙(Ca)、磷(P)含量和碱性磷酸酶(ALP)活性。

器官指数：28日龄采血后的鸡只，断其颈椎，屠宰，分别摘取肝脏、脾脏、法氏囊，称重。

胫骨灰分：将28日龄屠宰并摘取器官后的鸡只胫骨取下(可置冰箱中备用)，用手术刀剥离并去除附着在胫骨上的肌肉，之后将带少量附着物的胫骨置于85 ℃水中6 min，取出，室温放置10 min后，将附着物清除干净。将胫骨置烘箱中85 ℃烘5 h，去除游离水，然后105 ℃烘3 h，去除结合水。烘干后的胫骨置于干燥器中冷却至室温，用分析天平准确称量胫骨干重。1只完整的胫骨作为1个样品，在1个大容器内夹碎后，将全部样品转入已称至恒重的坩埚中，550 ℃灼烧3 h。将灰化后盛有灰分的坩埚置于干燥器中冷却至室温，用分析天平准确称量灰分重量。

试验数据采用SAS 9.1.3系统软件的GLM程序，首先进行肉鸡各项测定指标的方差分析，差异显著者(P<0.05)进行性能指标与维生素A添加水平之间的回归分析。存活率使用百分数的差异显著性检验方法进行统计。

由表2可知，维生素A添加水平为1 500 IU/kg时，存活率最低，随维生素A添加水平的升高存活率逐渐升高，维生素A添加水平为6 000 IU/kg时，存活率最高，达100.00%，显著高于添加1 500 IU/kg维生素A(P＜0.05)，维生素A添加水平继续增加至9 000和12 000 IU/kg时，存活率稍降低，但没有达到显著水平(P＞0.05)，维生素A添加水平增加至15 000 IU/kg时，存活率进一步下降，显著低于添加6 000 IU/kg维生素A(P＜0.05)。维生素A添加水平低于12 000 IU/kg时，28日龄体重差异不显著(P＞0.05)，维生素A添加水平增至15 000 IU/kg时，28日龄体重显著下降，显著低于其他添加水平(P＜0.05)。维生素A添加水平对1~28日龄肉鸡采食量和料重比没有显著影响(P＞0.05)。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 维生素A对1~28日龄肉鸡生产性能的影响 Table 2 Effects of vitamin A on performance of broilers aged 1 to 28 days 项目Items 维生素A添加水平 Vitamin A supplemental levels/(IU/kg) 1 500 3 000 6 000 9 000 12 000 15 000 存活率 Livability/% 93.75b 98.44ab 100.00a 98.44ab 96.88ab 95.31b 28日龄体重 BW at 28 days of age/(kg/只) 1.428±0.022a 1.439±0.015a 1.444±0.017a 1.431±0.014a 1.428±0.014a 1.336±0.043b 采食量 FI/(kg/只) 2.283±0.033 2.300±0.018 2.305±0.016 2.299±0.031 2.288±0.011 2.296±0.023 料重比 F/G 1.695±0.018 1.684±0.016 1.632±0.022 1.732±0.012 1.737±0.014 1.717±0.024 同行数据肩标相同或无字母表示差异不显著(P＞0.05)，不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)。下表同。 In the same row,values with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05),while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as bellow.

表2 维生素A对1~28日龄肉鸡生产性能的影响 Table 2 Effects of vitamin A on performance of broilers aged 1 to 28 days

由表3可知，维生素A添加水平对血清Ca含量有显著影响(P＜0.05)，饲喂低水平维生素A(1 500 IU/kg)和高水平维生素A(15 000 IU/kg)血清Ca含量都较低，显著低于添加3 000和6 000 IU/kg维生素A(P＜0.05)，低于添加9 000和12 000 IU/kg维生素A，但差异不显著(P＞0.05)。由图1可知，经回归分析，血清Ca含量和维生素A添加水平有显著的二次曲线回归关系(P＜0.05)，维生素A添加水平为6 800 IU/kg时，血清 Ca含量最高。维生素A添加水平对血清P含量 也产生了显著影响(P＜0.05)，添加1 500和3 000 IU/kg维生素A血清P含量显著低于添加12 000 IU/kg维生素A，但血清P含量和维生素A添加水平没有显著的回归关系(P＞0.05)。维生素A添加水平对血清ALP活性有显著影响(P＜0.05)，添加低水平维生素A(1 500 IU/kg)的血清ALP活性最高，显著高于添加9 000、12 000、15 000 IU/kg维生素A(P＜0.05)。由图2可知，经回归分析，血清ALP活性和维生素A添加水平有显著的二次曲线回归关系(P＜0.05)，维生素A添加水平为10 000 IU/kg时，血清ALP活性最低。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 维生素A对28日龄肉鸡血清生化指标的影响 Table 3 Effects of vitamin A on serum biochemical indices of broilers aged 28 days 项目Items 维生素A添加水平 Vitamin A supplemental levels/(IU/kg) 1 500 3 000 6 000 9 000 12 000 15 000 钙Ca/(mmol/L) 2.39±0.09b 2.53±0.08a 2.52±0.14a 2.49±0.13ab 2.47±0.15ab 2.39±0.12b 磷 P/(mmol/L) 1.96±0.22b 1.95±0.27b 2.10±0.24ab 2.07±0.16ab 2.23±0.20a 2.07±0.11ab 碱性磷酸酶ALP/(U/L) 16 980±7 010a 8 990±2 690ab 7 880±2 910ab 4 610±1 960b 6 530±2 400b 6 820±2 570b

表3 维生素A对28日龄肉鸡血清生化指标的影响 Table 3 Effects of vitamin A on serum biochemical indices of broilers aged 28 days

图1(Figure 1)

Fig. 1

图1 维生素A对28日龄肉鸡血清钙含量的影响Fig.1 Effects of vitamin A on serum Ca

图2(Figure 2)

Fig. 2

图2 维生素A对28日龄肉鸡血清ALP活性的影响Fig.2 Effects of vitamin A on serum ALP activity of broilers aged 28 days

由表4可知，维生素A添加水平对肝脏指数有显著影响(P＜0.05)，维生素A添加水平为9 000 IU/kg时，肝脏指数最大，显著高于添加1 500、6 000、12 000、15 000 IU/kg维生素A(P＜0.05)，高于添加3 000 IU/kg维生素A，但差异不显著(P＞0.05)。由图3可知，经回归分析，肝脏指数和维生素A添加水平有显著的二次曲线回归关系(P＜0.05)，维生素A添加水平为8 000 IU/kg时，肝脏指数最大。维生素A添加水平对脾脏指数有显著影响(P＜0.05)。由图4可知，经回归分析，脾脏指数和维生素A添加水平有显著的一元线性回归关系(P＜0.05)，随饲粮维生素A添加水平的提高，脾脏指数线性降低。另外，脾脏指数(y)和肉鸡体重(x)有显著的负相关关系(y=-5E-05x+0.169)(R²=0.140，P＜0.05)。维生素A添加水平对法氏囊指数有显著影响(P＜0.05)，维生素A添加水平为6 000 IU/kg时，法氏囊指数最大，显著高于添加1 500 IU/kg维生素A(P＜0.05)，高于其他添加水平，但差异不显著(P＞0.05)。回归分析表明，法氏囊指数和维生素A添加水平没有显著的回归关系(P＞0.05)。28日龄肉鸡的胫骨灰分含量各添加水平之间无显著差异(P＞0.05)。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 维生素A对28日龄肉鸡器官指数和胫骨灰分含量的影响Table 4 Effects of vitamin A on organ indices and tibia ash content of broilers aged 28 days % 项目Items 维生素A添加水平 Vitamin A supplemental levels/(IU/kg) 1 500 3 000 6 000 9 000 12 000 15 000 肝脏指数 Liver index 2.463±0.165b 2.929±0.515a 2.678±0.158b 3.105±0.322a 2.653±0.376b 2.529±0.121b 脾脏指数 Spleen index 0.128±0.026a 0.108±0.027ab 0.125±0.026a 0.114±0.007ab 0.094±0.008b 0.109±0.015ab 法氏囊指数 IBD index 0.185±0.059b 0.210±0.052ab 0.264±0.105a 0.209±0.060ab 0.214±0.056ab 0.218±0.077ab 胫骨灰分含量 Tibia ash content 37.76±1.90 38.65±2.43 38.86±1.97 38.72±1.71 39.71±0.35 38.08±1.21

表4 维生素A对28日龄肉鸡器官指数和胫骨灰分含量的影响 Table 4 Effects of vitamin A on organ indices and tibia ash content of broilers aged 28 days

图3(Figure 3)

Fig. 3

图3 维生素A对28日龄肉鸡肝脏指数的影响Fig.3 Effects of vitamin A on liver index of broiler aged 28 days

图4(Figure 4)

Fig. 4

图4 维生素A对28日龄肉鸡脾脏指数的影响Fig.4 Effects of vitamin A on spleen index of broiler aged 28 days

本试验中饲粮维生素A添加水平为1 500和15 000 IU/kg时肉鸡存活率显著降低，说明维生素 A添加水平1 500 IU/kg太低，而15 000 IU/kg太高，均不利于鸡的正常发育，不是适宜的添加水平。维生素A添加水平为15 000 IU/kg时肉鸡28日龄体重显著低于其他添加水平，也从另一方面说明维生素A这一添加水平过量，显著影响鸡的生长。这一研究结果与闫素梅等^[10]的研究结果一致。 3.2 维生素A对肉鸡血清生化指标的影响

血清Ca、P含量与动物的骨骼代谢密切相关，正常情况下，机体内存在内稳恒机制，血清Ca、P含量是稳定的，但在机体Ca、P代谢发生明显的异常变化时，血清Ca、P含量会发生异常的升高或降低。本研究中维生素A添加水平影响了血清Ca含量，添加水平为1 500和15 000 IU/kg时显著降低了血清Ca含量，各添加水平之间血清P含量也出现了显著差异，表明饲粮维生素A添加水平对Ca、P的代谢产生了影响，进而会影响骨骼代谢，这一结果和闫素梅等^[10]的研究结果有所不同。闫素梅等^[10]在肉仔鸡饲粮中设4个维生素A添加水平(1 500、3 000、15 000和45 000 IU/kg)，只有维生素A添加水平为45 000 IU/kg的组血清Ca含量有下降的趋势，血清P含量略有增加，但变化不显著，表明饲粮维生素A添加水平与血清Ca、P含量关系不大。研究结果的差异可能是试验饲粮不同造成的，因为饲粮维生素A对机体的影响除自身的作用外，还与饲粮维生素D、维生素E、铜、铁等营养因素有协同或拮抗关系。

由于血清中大部分ALP来源于肝脏与骨骼，因此血清ALP活性常作为检测肝脏和骨骼代谢状况的指标之一，临床上血清中ALP活性测定可用于肝胆疾病及骨骼系统疾病的辅助诊断。就骨骼发育而言，通常认为，当血清ALP活性异常升高时，标志着骨骼矿化不足。ALP活性异常升高有2种情况，一种是生理性升高，幼龄动物由于处于骨骼高速发育期，骨组织中ALP很活跃，值会偏高；二是病理性偏高，如佝偻病、骨质疏松等。有人在研究ALP对佝偻病患儿的早期诊断中的临床意义时曾指出，测定ALP活性是一种简便、快速、特异、早期诊断佝偻病的好方法^[11]。视磺酸(维生素A的一种)可调节未分化的间叶细胞干细胞转化为骨母细胞和脂肪细胞^[12]，全反视磺酸可在鼠肝、骨、肾细胞中ALP基因上诱导染色质重塑^[13]。但在维生素A对肉鸡血清ALP活性影响的研究中却得出与此不一致的结果。过量维生素A抑制了成骨细胞活性，对骨骼发育造成不利影响，使肉鸡血清ALP活性下降^{[3, 8, 10]}，但维生素A不太过量的情况下(饲粮维生素A添加水平低于12 000 IU/kg)，肉鸡血清ALP活性也会随饲粮维生素A添加水平的增加而降低^{[3, 14, 15]}，这种机制还需进一步研究。本试验中28日龄肉鸡血清ALP活性随维生素A添加水平的提高呈先降低、后升高的二次曲线变化趋势，添加10 000 IU/kg维生素A时，血清ALP活性最低。血清ALP活性还受饲粮维生素D₃、锌水平的显著影响^[15,16,17]。这些研究结果说明，血清ALP活性受饲粮维生素A添加水平影响很大，而且还受其他多种营养因素的影响，因此，肉鸡饲喂不同饲粮，其血清ALP活性测定值会出现很大的波动。

脾脏、法氏囊是肉鸡最重要的免疫器官，肝脏也具有重要的免疫机能。一般认为，免疫器官的相对重量越大说明动物免疫能力越强，但肉鸡免疫器官重量及指数作为衡量免疫功能的指标尚无明确界定，已有的研究结果也有明显差异。有报道，饲粮中添加不同水平维生素A(1 500、8 000、15 000 IU/kg)，35日龄时各免疫器官指数均无显著差异，47日龄时饲喂15 000 IU/kg维生素A的肉鸡肝脏指数显著增大^[18]。本试验结果与上述报道有明显不同，28日龄肉鸡肝脏指数呈二次曲线变化，单从肝脏指数的变化规律来看，本试验中维生素A添加水平在8 000 IU/kg左右时较为适宜。多乐^[3]报道，饲粮中添加不同水平维生素A(1 500、3 000、9 000、15 000 IU/kg)，21日龄肉鸡脾脏指数组间有显著差异，42日龄时各组差异不显著。也有不少研究结果表明，饲粮中添加不同水平维生素A对脾脏指数无显著影响^{[19,20,21,22]}。本研究中，28日龄肉鸡脾脏指数随饲粮维生素A添加水平的增加呈显著的线性下降关系，出现这一结果的机制需要进一步探讨。另外，本试验还发现脾脏指数和体重也有显著的负相关关系，这可能是因为肉鸡体重增长快，而脾脏不能同步快速发育所致。有研究结果表明饲粮中添加不同水平维生素A对法氏囊指数有显著影响^[23]，也有很多研究表明没有显著影响^{[3, 18, 19, 20, 22]}，本试验中组间有显著差异，维生素A添加水平为6 000 IU/kg时最大。出现试验结果的差异，一是因为法氏囊指数除受饲粮维生素A添加水平的影响外，还和机体的机能状况、其他营养的状况有关，二是摘取法氏囊的过程中可能造成试验误差，法氏囊所处的位置可能会使熟练和不熟练的操作者摘取的法氏囊重量产生较大差别。胫骨灰分是评价肉鸡骨骼生长的重要指标，含量越高骨骼发育越好，有很多试验研究应用该指标衡量骨骼的发育状况^[24,25,26]。本试验条件下，28日龄肉鸡胫骨灰分含量组间无显著差异，仅维生素A添加水平为1 500和15 000 IU/kg时稍低，说明维生素A添加水平对骨骼的影响还未达到显著的程度。

① 饲粮维生素A适宜的添加水平是6 000~10 000 IU/kg。

② 饲粮营养因素，特别是饲粮维生素A添加水平对血清ALP活性的影响非常显著，既使在适宜的维生素A添加范围内，骨骼和生产性能没有受到显著影响的情况下，血清ALP活性与饲粮维生素A添加水平也有显著的线性关系，因此，血清ALP活性高低不能准确反应骨骼代谢状况是否异常。