胆碱是一种水溶性维生素，动物对胆碱的需要量远远超出其他营养物质。胆碱可通过体内生物合成，主要是通过磷脂酰乙醇胺甲基化作用生成卵磷脂，再进一步生成胆碱。但是胆碱从头合成途径根本无法满足动物机体对胆碱的需要量^[1]，机体必须通过肠道中胆碱转运蛋白来吸收饲粮中胆碱^[2]。 被吸收的胆碱在细胞膜磷脂合成^[3]、甲基组代谢^[4]和神经递质合成^{[5, 6]}等方面起着重要作用。饲粮中添加胆碱能显著提高家禽生长性能，当胆碱缺乏时，家禽表现为生长缓慢、脂肪性肝炎和滑键症^{[7, 8, 9]}。NRC(1994)^[10]提供了肉鸡、火鸡、鹅和鹌鹑的胆碱需要量，但是北京鸭胆碱需要量没有列在其中。Lien等^[11]研究了不同水平的胆碱对鸭生长性能和脂肪代谢的影响，但并未探讨鸭胆碱需要量。直到现在，关于研究北京鸭胆碱需要量的文献未见报道。因此，本文旨在研究1～14日龄北京鸭胆碱需要量，并进一步探讨胆碱缺乏的症状及对生长前期北京鸭的影响。 1 材料与方法 1.1 试验设计及饲养管理

试验采用单因子完全随机设计，选用体重相近的1日龄雄性北京鸭384只，随机分成8个组，每个组6个重复，每个重复8只，每组饲喂不同的试验饲粮，试验期为14 d。

肉鸭采用网上平养，自由采食和饮水。鸭舍起始温度为32 ℃，以后逐步稳定下降，每2 d降低1~2 ℃，直至25 ℃。相对湿度由最初的20%逐渐升高到60%。采取人工补光制度，光照时数由前期24 h/d减至采食补光和自然光照结合，其他按常规饲养管理方式进行。 1.2 试验材料及饲粮

试验动物来自于中国农业科学院北京畜牧兽医研究所种鸭场。胆碱购自国药集团，为白色结晶粉，纯度≥98%。

试验采用玉米-大豆分离蛋白-玉米淀粉型基础饲粮， 胆碱以氯化胆碱的形式添加到基础饲粮中，换算比例为74.6%。各组胆碱水平分别为0、200、400、600、800、1 000、1 200、1 400 mg/kg。采用离子色谱法测得试验饲粮的实际胆碱含量分别为302、496、778、990、1 182、1 414、1 625、1 832 mg/kg。其他营养物质参照《肉鸭饲养标准》^[12]进行设计，基础饲粮组成及营养水平见表1。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) % 项目 Items 含量 Content 原料 Ingredients 玉米 Corn 68.50 玉米淀粉 Corn starch 10.00 大豆分离蛋白 Isolated soybean protein 17.50 磷酸氢钙 CaHPO4 1.50 石粉 Limestone 1.00 预混料 Premix1) 1.00 食盐 NaCl 0.30 DL-蛋氨酸 DL-Met 0.20 合计 Total 100.00 营养水平 Nutrient levels 代谢能 ME/(MJ/kg)2) 13.17 粗蛋白质 CP 20.20 钙 Ca 0.90 有效磷 AP 0.41 蛋氨酸 Met 0.46 赖氨酸 Lys 1.12 色氨酸 Try 0.22 苏氨酸 Thr 0.67 胆碱 Choline/(mg/kg) 302.00 1)预混料为每千克基础饲粮提供Premix provided the following per kilogram of the basal diet：VA 10 000 IU，VB1 2 mg，VB2 8 mg，VB6 4 mg，VB12 0.06 mg，VD3 3 000 IU，VE 20 IU，VK3 2 mg，生物素 biotin 0.2 mg，叶酸 folic acid 1.0 mg，D-泛酸 D-pantothenic acid 20 mg，烟酸 nicotinic acid 50 mg，Cu (as copper sulfate) 10 mg，Fe (as ferrous sulfate) 60 mg，Mn (as manganese sulfate) 80 mg，Zn (as zinc sulfate) 60 mg，I (as potassium iodide) 0.20 mg，Se (as sodium selenite) 0.30 mg。 2)胆碱为实测值，其他营养水平根据北京鸭代谢能计算。Choline was a measured value,while the other nutrient levels were calculated according to the ME of Peking ducks.

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis)

于试验开始和结束时，以重复为单位记录北京鸭体重、采食量，计算14日龄各组平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。 1.3.2 胆碱缺乏症观察及统计

饲养期内对试验鸭进行观察，并对患有胆碱缺乏症的北京鸭从发病到死亡时腿部病变的整个过程进行观察，找出变化规律。14日龄时对各组北京鸭腿病按重复进行系统统计，并按照表2等级进行统计打分。统计和打分由同一个人进行。 每个等级缺乏症得分=(每组相应等级缺乏症总数/6)×相应等级分数； 总分数=∑每个等级缺乏症得分。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 北京鸭腿病症状评分 Table 2 The score for leg symptom of Peking ducks 评分 Scores 北京鸭腿病症状描述 Description of leg symptom of Peking ducks 分数0 Score 0 北京鸭行为特征和采食完全正常 分数2 Score 2 单腿或双腿轻微的关节肿大，个别轻微弓形腿，采食正常 分数4 Score 4 双腿严重的关节肿大，胫跖骨关节扭曲，个别伴有严重滑键症，靠半蹲状态采食，影响采食 分数6 Score 6 北京鸭跛行，无法站立，瘫痪，靠爬行采食，严重影响采食，甚至无法采食

表2 北京鸭腿病症状评分 Table 2 The score for leg symptom of Peking ducks

试验数据采用SAS 8.0中单因素方差分析(one-way ANOVA)进行统计分析，各组间采用Duncan氏法多重比较进行差异显著性检验，结果以平均值±标准差表示，以P<0.05作为差异显著性判断标准。采用二次曲线模型对北京鸭胆碱需要量进行估算^[13]。 2 结果与分析 2.1 饲粮胆碱水平对北京鸭生长性能的影响

由表3可知，各组初始重差异不显著(P>0.05)，而14日龄时，饲粮胆碱水平对北京鸭平均日增重和平均日采食量影响显著(P<0.05)，呈现先逐渐升高再趋于平稳的趋势，在990 mg/kg胆碱组达到最大。302 mg/kg胆碱组平均日增重和平均日采食量显著低于其他各组(P<0.05)，说明胆碱缺乏显著抑制了北京鸭的生长发育。990 mg/kg胆碱组与302 mg/kg胆碱组相比，平均日增重和平均日采食量分别提高了33.52%和26.17%。饲粮胆碱水平对料重比没有显著影响(P>0.05)。以平均日增重和平均日采食量为评定指标，二次曲线模型估算的1～14日龄北京鸭胆碱 需要量分别为1 289(y=23.554 6+0.017 53x-0.000 006 8x²，P=0.041 8，R²=0.727)和1 291 mg/kg(y=27.822 98+0.022 47x-0.000 008 7x²，P=0.024 0，R²=0.775)。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 饲粮胆碱水平对1~14日龄北京鸭生长性能的影响 Table 3 Effects of dietary choline level on growth performance of Peking ducks from 1 to 14 days of age 饲粮胆碱水平 Dietary choline level/(mg/kg) 初始重 Initial weight/g 平均日增重 ADG/g 平均日采食量 ADFI/g 料重比 F/G 302 55.17±0.26 26.64±1.26b 31.99±2.22b 1.20±0.06 496 55.19±0.35 32.43±1.16a 39.02±2.36a 1.21±0.09 778 55.15±0.23 33.15±3.63a 39.85±1.14a 1.21±0.14 990 54.92±0.17 35.57±1.71a 43.33±2.38a 1.22±0.03 1 182 55.15±0.28 34.29±3.87a 41.47±4.92a 1.21±0.11 1 414 55.29±0.26 32.34±3.21a 40.18±3.86a 1.24±0.07 1 625 55.13±0.22 34.52±2.37a 40.89±3.73a 1.18±0.05 1 832 55.02±0.27 33.67±2.05a 41.10±5.19a 1.22±0.11 P值 P-value 0.344 3 <0.000 1 0.000 2 0.978 4 同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，相同或无字母表示差异不显著(P>0.05)。 In the same column,values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05),while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05).

表3 饲粮胆碱水平对1~14日龄北京鸭生长性能的影响 Table 3 Effects of dietary choline level on growth performance of Peking ducks from 1 to 14 days of age

对各组北京鸭的生长发育进行观察后发现，饲粮胆碱缺乏明显抑制北京鸭生长发育，饲粮胆碱水平从302到1 832 mg/kg时，胆碱缺乏症状逐渐减轻。从表4可以看出，胆碱缺乏症随饲粮胆碱水平的提高而逐渐减少，当胆碱水平达到1 182 mg/kg时，胆碱缺乏症能够得到有效缓减。同时，对患有胆碱缺乏症的北京鸭进行观察后发现，患病北京鸭表现为从腿骨无力而爬行、胫跖骨关节肿大、弓形腿、跛脚站立不起到死亡的变化趋势，其中302 mg/kg胆碱组最为严重。图1为胆碱缺乏症的典型症状，图1-A表现为腿无力，图1-B表现为腿骨无力，无法站立，图1-C表现为弓形腿，图1-D表现为劈叉、爬行，图1-E表现为跛行，瘫痪不起。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 北京鸭胆碱缺乏症评分 Table 4 The score of choline deficiency symptom in Peking ducks 饲粮胆碱水平Dietary choline level/(mg/kg) 各等级缺乏症得分 The scores of each deficiency symptom 总得分 Total scores 分数0 Score 0 分数2 Score 2 分数4 Score 4 分数6 Score 6 302 0.00 5.33 6.00 8.00 19.33 496 0.00 6.00 6.00 1.00 13.00 778 0.00 4.00 0.00 0.00 4.00 990 0.00 1.33 0.00 0.00 1.33 1 182 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 1 414 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 1 625 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 1 832 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00

表4 北京鸭胆碱缺乏症评分 Table 4 The score of choline deficiency symptom in Peking ducks

图 1(Figure 1)

Fig. 1

图1 北京鸭胆碱缺乏的不同症状 Fig.1 The different symptom of choline deficiency in Peking ducks

本试验采用玉米、大豆分离蛋白和玉米淀粉配制成胆碱缺乏的基础饲粮。因为玉米中胆碱含量为620 mg/kg且胆碱利用率低,大豆分离蛋白和玉米淀粉这2种原料中胆碱含量基本为0，很多试验也成功地应用这2种原料来研究鸡和火鸡的胆碱需要量以及饲料中胆碱的生物学利用率^{[14, 15, 16]}。从本试验北京鸭平均日增重和平均日采食量随胆碱的剂量反应效应可以看出，此饲粮类型适合研究北京鸭胆碱需要量和缺乏症。

胆碱是一种水溶性维生素，在动物体内发挥着构成细胞膜磷脂、神经递质传递和提供甲基等作用。在肉鸡研究上，胆碱缺乏会显著降低肉鸡生长速率和采食量^{[17, 18]}。然而，饲粮中添加胆碱也会提高肉鸡和火鸡生长性能以及降低胆碱缺乏症的发生率^{[7, 19, 20]}。同时，Bernard等^[8]和Roos等^[9]研究发现，饲粮中添加胆碱能够提高北京鸭体增重和减少胆碱缺乏症的发生率。Lien等^[11]研究了不同胆碱水平对鸭生产性能的影响，但并未研究鸭胆碱需要量。本试验中，胆碱缺乏组(302 mg/kg胆碱组)显著抑制了北京鸭的生长发育，表现为体重减轻和采食量降低，这种抑制作用随饲粮胆碱水平的提高而逐渐减缓。北京鸭平均日增重和平均日采食量随饲粮胆碱水平的提高而呈现先逐渐升高后平稳的趋势，在990 mg/kg时达到最大。过去，直线折线模型常常被使用估算胆碱需要量，但Pesti等^[13]认为直线折线模型容易低估需要量。同时，二次曲线模型也广泛应用于家禽胆碱需要量的估算上^[21]，因此本试验使用二次曲线模型估算胆碱需要量。以平均日增重和平均日采食量为评定指标，采用二次曲线模型估算的1～14日龄胆碱需要量分别为1 289和1 291 mg/kg，与NRC(1994)^[10]推荐的1～14日龄肉鸡胆碱需要量相当(1 300 mg/kg)。

胆碱缺乏症首次被Jukes^[20]在火鸡上发现，其症状和已经发现的肉鸡锰缺乏症相似，主要以跗关节肿大、骨短粗、弓形腿和跟键滑脱为主要特征。本试验中，生长前期北京鸭胆碱缺乏主要表现为腿无力、站立困难、弓形腿、关节扭曲以及跛行和瘫痪的症状，与Jukes^[20]在火鸡上发现的症状类似。但是本试验中胆碱缺乏症主要以鸭弓形腿为主，个别表现为关节肿大和跟腱滑落的症状。陈季春^[22]认为，禽类胆碱缺乏症是一个不断变化的病理过程，应该从动态发展的观点评述这一病症。胆碱缺乏症最初特点是关节点状出血，随后附骨扭转致使胫跗关节肿胀，跗骨继续扭曲呈弯形，以至与胫骨不呈一条直线。由于腿不能承受禽的重量，关节软骨错位，跟键从踝骨头滑脱。一些处于中期阶段、跟腱不完全滑落而表现为胫骨短粗、扭曲和关节肿大的病症也属于胆碱缺乏症的范畴。从表4可以看出，当饲粮中胆碱含量超过990 mg/kg时，北京鸭胆碱缺乏症可有效缓解。为什么胆碱缺乏会导致北京鸭腿骨发育不良呢？Fritz等^[23]认为胆碱是构成卵磷脂重要生理活性物质的组成部分，而卵磷脂是动物细胞膜的结构成分，同样也是软骨组织磷脂的构成成分，因此胆碱是防止鸡和火鸡胫骨短粗症和滑健症所必需的物质。另外，动物体内胆碱摄入量与体内高半胱氨酸浓度有直接关系，当胆碱缺乏时，体内高半胱氨酸浓度明显升高^{[24, 25, 26]}。血浆高浓度高半胱氨酸影响骨代谢，与骨折密切相关，是骨质疏松骨折的危险信号，这也是医学上早已证明的^{[27, 28, 29]}。 4 结 论

① 饲粮胆碱缺乏可显著抑制生长前期北京鸭生长发育，胆碱缺乏症表现为从腿骨无力而爬行、胫跖骨关节肿大、跛脚站立不起到死亡的变化趋势。

② 本试验条件下，1～14日龄北京鸭胆碱推荐量为1 300 mg/kg。