为适应养兔业规模化、集约化的要求，母兔人工授精和半频密繁殖模式应用越来越广泛。在半频密繁殖模式的过程中，首先要对同一批次的母兔进行同期发情处理，然后在同一天进行人工授精，最后在同一天断奶、分群，进入下一个繁殖周期。在半频密繁殖模式的过程中母兔始终处于妊娠或泌乳的过程中，甚至妊娠和泌乳在某一时间内同时进行[1]。研究表明，在半频密繁殖模式下，饲粮能量不足会显著增加母兔的死亡率、淘汰率及降低繁殖性能[2, 3]。而在母兔的妊娠期和泌乳期为其提供适宜的饲粮可以不同程度地提高母兔的繁殖性能，还能延长母兔的使用年限[4, 5, 6, 7]。目前国内对在半频密繁殖模式母兔能量需要的研究相对匮乏，本试验旨通过设计3种饲粮能量水平，初步探究42 d繁殖模式下饲粮不同能量水平对獭兔繁殖性能、体重变化及血清生化指标的影响，确定半频密繁殖模式下獭兔能量的需要量。
1 材料与方法 1.1 试验饲粮参考NRC(1977)[8]和De Blas[9]等的繁殖母兔饲养标准配制设计3种不同能量水平的饲粮，其消化能水平分别为9.2(Ⅰ组)、9.7(Ⅱ组)和10.2 MJ/kg(Ⅲ组)。试验饲粮组成及营养水平见表1。
1.2 试验动物与饲养管理试验选用平均体重(3.56±0.17) kg、血缘相近、胎次为第3胎的经产獭兔150只，随机分为3组，每组50个重复，每个重复1只。采用42 d繁殖模式，连续统计3胎。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组试验兔分别饲喂对应编号的饲粮。
 | 表1 试验饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) |
试验兔单笼饲养(笼子规格40 cm×40 cm×50 cm)，自然通风，自由采食和饮水。人工授精前进行同期发情处理，连续加光6 d，每天光照16 h，授精结束后，调节光照为每天14 h，持续11 d，随后调节光照为每天12 h，一直到下一次配种前6 d。按规定免疫、驱虫，每周消毒1次，每天按时清粪。试验从第1胎配种前6 d开始，到第3胎仔兔断奶分群结束。
1.3 血液采集与血清制备在第3、4胎泌乳期的第15天08：00每组随机挑选5只，空腹耳缘静脉采血5 mL，在37 ℃恒温箱中静置30 min后取出，3 000 r/min离心15 min，分离得到的血清装于Eppendorf管中，-20 ℃保存备用。
1.4 测定指标与方法 1.4.1 繁殖性能受胎率：人工授精后怀孕的母兔所占的百分比。从第3胎开始，从每组50只试验兔中随机选取已产仔的20只母兔统计产仔总数、活仔数、出生窝重、泌乳力、成活率，第4、5胎与第3胎相同。产仔数：母兔实际产仔总数，包括活仔、弱胎、死胎、畸形胎。活仔数：称出生窝重时活仔兔数。出生窝重：整窝仔兔出生后，未吮乳之前的重量。泌乳力：整窝仔兔21日龄窝重与出生窝重之差。断奶窝重：35日龄断奶时整窝重量。成活率：断奶仔数与活仔数之比。试验程中采用艾德姆PGC-8001el型电子称称重。
1.4.2 体重变化从第3胎开始，从每组50只试验兔中随机选取已产仔的20只母兔统计体重，第4、5胎与第3胎相同。配种前体重：配种前1 d空腹对母兔称重。产后母兔重：产仔结束随即对母兔进行称量。仔兔20日龄母兔重。试验过程中采用艾德姆PGC-8001el型电子称称重。
1.4.3 血清生化指标血清中的总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、葡萄糖(GLU)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素氮(UN)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量及肌酸激酶(CK)活性采用日本和光纯药工业株式会社提供的试剂盒，并在日立7020型全自动生化分析仪上进行测定。
1.4.4 血清激素指标血清中的胰岛素(Ins)、胰高血糖素(GC)、瘦素(Leptin)含量均采用上海继棉化学科技有限公司提供的试剂盒，在Biotek ELX-808超级酶标仪进行测定。
1.5 数据处理与分析试验数据采用SAS 9.1统计软件中的GLM进行分析，除受胎率和成活率用x2检验外,其他数据用Duncan氏法多重比较检验。试验结果以平均值和均方根误差表示，P<0.05为差异显著，P<0.01为差异极显著。
2 结果与分析 2.1 饲粮能量水平对42 d繁殖模式下獭兔繁殖性能的影响由表2可知，饲粮能量水平可以极显著影响42 d繁殖模式下獭兔的泌乳力(P=0.006 2)和断奶窝重(P=0.000 6)。Ⅲ组泌乳力极显著高于Ⅰ组(P＜0.01)，Ⅱ组和Ⅰ、Ⅲ组之间差异不显著(P>0.05)。Ⅲ组断奶窝重极显著高于Ⅰ、Ⅱ组(P＜0.01)。饲粮能量水平对产仔数、活仔数、出生窝重以及仔兔的成活率无显著影响(P>0.05)。
| 表2 饲粮能量水平对42 d繁殖模式下獭兔繁殖性能的影响 Table 2 Effects of dietary energy level on reproductive performance of Rex rabbits used 42-day production system (n=60) |
由表3可知，饲粮能量水平可以显著影响42 d繁殖模式下獭兔第1胎泌乳期第21天体重(P=0.047 5)和第3胎泌乳期第21天体重(P=0.030 2)，极显著的影响第1胎的产后体重(P=0.002 1)，对其他时期体重的影响不显著(P>0.05)。
| 表3 饲粮能量水平对42 d繁殖模式下獭兔体重变化的影响 Table 3 Effects of dietary energy level on body weight change of Rex rabbits used 42-day production system (n=20) |
由表4可知，饲粮能量水平可以显著影响42 d繁殖模式下獭兔血清中高密度脂蛋白胆固醇(P=0.036 8)和总胆固醇(P=0.047 6)的含量，Ⅰ组显著高于Ⅲ组(P＜0.05)，Ⅱ组和Ⅰ、Ⅲ组之间差异不显著(P>0.05)。饲粮能量水平可以极显著影响肌酸激酶的活性(P=0.001 5)，Ⅰ组极显著高于Ⅱ、Ⅲ组(P＜0.01)。饲粮能量水平可以极显著影响甘油三酯的含量(P=0.001 3)，Ⅰ、Ⅱ组极显著高于Ⅲ组(P＜0.01)。饲粮能量水平对总蛋白、白蛋白、葡萄糖、尿素氮及低密度脂蛋白的含量均无显著影响(P>0.05)。
| 表4 饲粮能量水平对42 d繁殖模式下獭兔血清生化指标的影响 Table 4 Effects of dietary energy level on serum biochemical indices of Rex rabbits used 42-day production system (n=10) |
由表5可知，饲粮能量水平可以显著影响42 d繁殖模式下獭兔血清中胰岛素的含量(P=0.015 9)，Ⅰ组显著高于Ⅲ组(P＜0.05)，Ⅱ组和Ⅰ、Ⅲ组之间差异不显著(P>0.05)。饲粮能量水平对血清胰高血糖素和瘦素含量无显著影响(P>0.05)。
| 表5 饲粮能量水平对42 d繁殖模式下獭兔血清激素指标的影响 Table 5 Effects of dietary energy level on serum hormones indices of Rex rabbits used 42-day production system (n=10) |
在42 d繁殖模式下獭兔在产仔后的第12天开始人工授精，自此以后泌乳和妊娠行为同时进行，能量需求增加。动物的饲粮能量水平对其繁殖性能有重大的影响。Monget等[10]研究结果表明，当动物处于能量负平衡状态时可以引起动物排卵紊乱甚至停止。这种反应可能是动物机体在能量摄入不足的情况下，为减少繁殖行为能量消耗而做出的一种适应性调节。周平等[11]研究表明，能量水平可以调控猪的情期启动，影响猪的发情率。Fortun-lamothe等[12]研究发现，由于泌乳和妊娠同时进行导致的能量供应不足会影响母兔的排卵、受胎率和胚胎的发育。本试验研究表明，3种能量水平的饲粮对母兔的受胎率、产仔率及仔 兔的成活率没有显著影响，这与Fortun-lamothe 等[13]的研究结果相一致。任克良等[14]研究表明，给泌乳獭兔饲喂较高消化能(10.71 MJ/kg)的饲粮，有利于断奶仔兔数、断奶窝重的提高。本试验中3种能量水平的饲粮可以极显著影响泌乳力和仔兔的断奶窝重，高能量组极显著高于中、低能量组。这可能是因为当泌乳和妊娠同时进行时，对能量分配形成竞争，所以饲粮能量水平提高可以一定程度上提高泌乳力。仔兔从21日龄以后开始采食母兔料，高能饲粮的摄入有助于仔兔体重的增加，提高断奶窝重。 3.2 饲粮能量水平对42 d繁殖模式下獭兔体重变化的影响
本试验研究结果表明，不同能量水平的饲粮在母兔初始体重差异不显著的情况下，可以显著影响第1胎母兔产后体重和泌乳期第21天的体重。Parigi-bini等[15]研究表明，在妊娠期间，母兔的采食量增加25%～50%，在妊娠期的前3周胎儿发育缓慢，对营养物质和能量的需求量较少，能量以体脂的形式得以沉积，体重增加。配种前可能因为沉积的时间不够，体重差异不显著，妊娠结束后差异显现。第2胎泌乳过程和第3胎妊娠同时进行，Parigi-bini等[16]研究表明，在母兔妊娠和泌乳同时进行时能量处于严重的负平衡状态，母兔每天能量最大吸收量为3.70 MJ，维持自身每天需要1.27 MJ，泌乳每天需要2.90 MJ，而妊娠的最后1周也是个能量负平衡过程(-0.95 MJ)。缺少的能量由体脂代谢补充，大约80%的能量来源于饲粮，20%来源于体脂。可能是由于体脂的降解过程降低了母兔的体重，使各组之间母兔的体重差异不显著。妊娠第3胎由于没有继续进行人工授精，所以只有泌乳过程没有再次妊娠，母兔的体重得以恢复，泌乳第21天时差异显现。
3.3 饲粮能量水平对42 d繁殖模式下血清生化指标的影响Young等[17]研究认为，血清白蛋白含量可以反映动物对蛋白质的需求，总蛋白、白蛋白和尿素氮含量可以反映蛋白质的吸收和代谢情况。本试验结果表明，3种能量水平的饲粮对42 d繁殖模式下獭兔蛋白质吸收和代谢无显著差异。Gilbert等[18]和Parigi-bini[19]的研究表明,在妊娠期母兔的血清葡萄糖含量是下降的。Fortun等[20]研究表明，在泌乳期母兔的血清葡萄糖含量更低，因为乳汁的合成会消耗葡萄糖。本研究结果表明，在3种饲粮条件下血清葡萄糖含量差异不显著，这可能是因为胰岛素和胰高血糖素的调节作用使葡萄糖含量保持相对稳定。夏万良等[21]研究表明，血清总胆固醇含量与肌酸激酶活性与体重呈显著的负相关，与本研究结论一致，本试验中高能量组血清总胆固醇含量和肌酸激酶活性显著低于低能量组，与体重呈负相关。甘油三酯和胆固醇是血液脂肪的组成部分，其含量的高低可以反映脂类的吸收和代谢状况[22]。本研究表明，饲粮能量水平同样显著影响了42 d繁殖模式獭兔血清中高密度脂蛋白胆固醇和甘油三脂的含量。
3.4 饲粮能量水平对42 d繁殖模式下血清激素指标的影响Fortun等[23]研究表明，在能量转化成体脂的过程中，血清胰岛素含量显著升高。Gilbert等[18]和Parigi-bini等[15]研究表明，在妊娠后期血清胰高血糖素含量显著增高。本研究表明，随饲粮能量水平的增高血清胰岛素含量增高，这可能是因为有更多的能量被吸收转化。在本试验中饲粮能量水平对血清胰高血糖素和瘦素含量没有显著影响。
4 结 论高能饲粮(10.2 MJ/kg)可以显著提高42 d繁殖模式下獭兔的泌乳力和仔兔的断奶窝重，降低血清中总胆固醇、甘油三酯含量及磷酸激酶活性，维持母兔较好体况。
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