随着肉鸡集约化养殖程度的逐渐提高，高密度、通风不良及环境温湿度等应激因素不断增加，肉鸡在养殖过程中经常处于亚健康状态，对生长性能、抗病能力及畜产品品质造成影响。通过营养调控技术来消除或减弱肉鸡应激程度，提高健康水平，改善肉品质，对肉鸡生产实际具有重要意义。葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，GOD)属于脱氢氧化酶，可催化葡萄糖产生葡萄糖酸和过氧化氢。大量研究表明，GOD能够降低消化道pH，改善畜禽消化道环境，从而提高生长性能和成活率。在肉鸡饲粮中添加0.5% GOD(酶活为15 IU/g)可显著降低回肠和空肠pH^[1]；GOD可增加肉鸡十二指肠和空肠绒毛高度，降低隐窝深度，提高绒毛高度/隐窝深度(V/C)，提高淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶的活性^[2]；体外抑菌试验证明，2 IU/mL GOD可有效抑制大肠杆菌和沙门氏菌生长^[3]；肉鸡饲粮中添加0.2%～0.5% GOD(酶活为15 IU/g)可提高肉鸡胸腺、脾脏、法氏囊指数，显著提高肉鸡血清免疫球蛋白A(IgA)水平^[4]。因此，GOD对提高畜禽消化吸收及抗病能力具有良好的作用。硒作为动物必需微量元素，是体内磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的重要组成成分，可清除细胞内形成的过氧化氢和脂质过氧化物，阻止活性氧化自由基与细胞膜的反应，减轻细胞损伤^[5]。饲粮中一般以无机硒或有机硒作为硒的添加剂。酵母硒是作为主要的有机硒来源，具有绿色安全、生物活性和吸收率高的特点，日本及欧美的部分国家在饲粮中普遍使用酵母硒^[6]。试验证明，酵母硒能够提高畜禽生产性能^[7]，提高生长育肥猪血清和肝脏GSH-Px活性，降低丙二醛(MDA)含量，从而提高机体抗氧化应激能力^[8]，同时还可以改善生长育肥猪胸肌肉色及系水力^{[9, 10]}。由此可见，GOD通过改善畜禽肠道环境，提高营养物质消化吸收和抗病能力，酵母硒通过清除细胞内过氧化物质，改善动物抗应激能力。在畜禽养殖过程中的应激因素很多，热应激、免疫应激、氧化应激等，但利用GOD和酵母硒的叠加功能，能否提高畜禽抵抗各种应激的能力,提高夏季养殖的效率，目前尚未见报道。本试验选择夏季的规模化养殖场，开展复合添加剂对肉鸡生长性能影响的研究，观测其在生产实际中抗应激、改善畜产品品质的效果，为肉鸡养殖过程中合理使用GOD和酵母硒提供试验数据和理论依据。

复合添加剂在饲粮中的添加量为0.2%，成分为β-D-GOD(酶活30 IU/g)、酵母硒(200 mg/kg)和载体，载体为稻壳粉。

试验在北京市平谷区某规模化肉鸡养殖场进行。选择1日龄AA肉鸡6 000只，随机分为2个组，每组4个重复，每个重复750只鸡，养殖方式为网上平养。参照NRC(1994)营养需要配制玉米-豆粕基础饲粮，其组成及营养水平见表1。对照组饲喂基础饲粮，试验组饲喂基础饲粮+0.2%复合添加剂。试验期为42 d，1～21日龄为试验前期，22～42日龄为试验后期。所有肉鸡饲养管理条件一致，自由采食和饮水，24 h光照，按照常规程序进行免疫接种。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis) % 项目Items 含量 Content 1～21 d 22～42 d 原料 Ingredients 玉米 Corn 60.40 64.05 豆粕 Soybean meal 34.40 30.00 豆油 Soybean oil 1.00 2.00 石粉 Limestone 1.21 1.12 磷酸氢钙 CaHPO4 1.40 1.30 赖氨酸 Lys 0.08 0.10 DL-蛋氨酸 DL-Met 0.21 0.13 氯化胆碱 Choline chloride 0.05 0.05 食盐 NaCl 0.25 0.25 预混料 Premix1) 1.00 1.00 合计 Total 100.00 100.00 营养水平 Nutrient levels2) 代谢能 ME/(MJ/kg) 12.14 12.51 粗蛋白质 CP 21.17 19.24 钙 Ca 0.92 0.87 有效磷 AP 0.38 0.36 赖氨酸 Lys 1.29 1.15 蛋氨酸 Met 0.67 0.48 蛋氨酸+半胱氨酸 Met+Cys 1.00 0.72 1)预混料为每千克饲粮提供The premix provided the following per kg of diets：VA 5 000 IU，VB1 9.8 mg，VB2 28.8 mg，VB6 19.6 mg，VB12 0.1 mg，VD 10 000 IU，VE 75.0 IU，VK3 18.8 mg，生物素 biotin 2.5 mg，叶酸 folic acid 4.9 mg，D-泛酸 D-pantothenic acid 58.8 mg，烟酸 nicotinic acid 196.0 mg，Cu 4.0 mg，Fe 40.0 mg，Mn 50.0 mg，Zn 37.6 mg，I 0.20 mg，Se 0.2 mg。 2)代谢能为计算值，其余为实测值。ME was a calculated value， while the others were measured values.

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis)

每日观察并记录鸡群发病和死亡只数，分别在21、42日龄每个重复随机选取30只鸡，进行个体空腹称重，统计试验期内的采食量，计算各组的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)和死亡率。

于21、42日龄每个重复随机选取体重相近的5只鸡，翅静脉采血，3 000 r/min离心5 min，取血清，-20 ℃冰箱保存待测。测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、GSH-Px活性、总抗氧化能力(T-AOC)和MDA含量，所用试剂盒购于南京建成生物工程研究所。

21、42日龄屠宰后，分离结扎各肠段，用pH计(PB-10，德国)测量十二指肠、空肠、回肠和盲肠食糜pH。

21、42日龄屠宰后，取左侧胸肌保存于4 ℃冰箱，24 h后将pH计电极完全包埋在肉样中，测定肌肉pH。

按照文献^[11]提供的方法测定。屠宰后取右侧胸肌修整为3 cm×2 cm×1 cm的肉块，称重(W₁)，置于密封袋中，并向袋中冲入空气使之膨胀，避免肉样与保鲜袋接触，悬吊于4 ℃冰箱内，24 h后取出样品用滤纸轻轻拭干表面水分后称重(W₂)。

按照文献^[12]提供的方法测定。屠宰后，取左侧胸肌不少于6 cm×3 cm×3 cm的整块肉样保存于4 ℃冰箱内，24 h后用C-LM型数字嫩度计(东北农业大学工程学院)测定。

按照文献^[12]提供的方法测定。屠宰后，取左侧胸肌于4 ℃冰箱保存，24 h后采用WSC-S型色差仪(上海精密科学仪器有限公司)测定胸肌L、a和b值。其中L值表示亮度(L=0，表示黑；L=100，表示亮)，a值表示红绿(+a表示红色；-a表示绿色)，b值表示黄蓝(+b表示黄色；-b表示蓝色)。

试验数据以“平均值±标准差”表示。采用SAS 9.2进行统计分析，进行t检验，以P＜0.05为显著水平。

由表2可知，在1~21日龄，试验组ADFI、ADG分别比对照组显著提高了1.92%、3.35%(P<0.05)，F/G比对照组显著降低了0.70%(P<0.05)，死淘率降低了21.02%，但差异不显著(P>0.05)。在22~42日龄，试验组ADFI、ADG分别比对照组显著提高了1.42%、6.64%(P<0.05)，F/G比对照组显著降低了4.46%(P<0.05)；死淘率降低了41.18%，但差异不显著(P>0.05)。从肉鸡整个生长期(1~42日龄)的数据可以看出，试验组ADFI、ADG分别显著高于对照组1.53%和5.58%(P<0.05)，F/G显著低于对照组3.85%(P<0.05)，死淘率显著低于对照组32.41%(P<0.05)。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 复合添加剂对肉鸡生长性能的影响 Table 2 Effects of compound additive on growth performance of broilers 项目 Items 1~21日龄 1~21 days of age 22~42日龄 22~42 days of age 1~42日龄 1~42 days of age 平均日采食量 对照组 Control group 55.75±0.32b 153.16±0.70b 104.46±0.43b ADFI/(g/d) 试验组 Experimental group 56.82±0.10a 155.34±0.39a 106.08±0.18a 平均日增重 对照组 Control group 38.85±0.15b 75.74±0.78b 57.34±0.33b ADG/(g/d) 试验组 Experimental group 40.15±0.09a 80.77±0.40a 60.50±0.19a 料重比 对照组 Control group 1.43±0.01a 2.02±0.02a 1.82±0.01a F/G 试验组 Experimental group 1.42±0.01b 1.93±0.01b 1.75±0.01b 死淘率 对照组 Control group 1.57±0.75 2.04±0.43 3.61±0.58a Mortality/% 试验组 Experimental group 1.24±0.17 1.20±0.60 2.44±0.59b 同列数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著(P＞0.05)，肩标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)。表3、表4同。 In the same column， values with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P＞0.05)， while with different small letter superscripts mean significant difference (P＜0.05). The same as Table 3 and Table 4.

表2 复合添加剂对肉鸡生长性能的影响 Table 2 Effects of compound additive on growth performance of broilers

由表3可知，随着肉鸡日龄的增加，各个肠段pH均出现升高的趋势。在21和42日龄时，试验组肉鸡盲肠内容物pH显著低于对照组(P＜0.05)，试验组和对照组其他肠段pH无显著差异(P＞0.05)。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 复合添加剂对肉鸡消化道pH的影响 Table 3 Effects of compound additive on intestinal pH of broilers 日龄 Days of age 十二指肠 Duodenum 空肠 Jejunum 回肠 Ileum 盲肠 Cecum 21 对照组 Control group 6.33±0.04 6.27±0.02 6.57±0.04 6.61±0.06a 试验组 Experimental group 6.35±0.09 6.24±0.06 6.53±0.11 6.49±0.06b 42 对照组 Control group 6.74±0.04 6.64±0.03 6.85±0.06 6.89±0.03a 试验组 Experimental group 6.73±0.03 6.63±0.01 6.87±0.02 6.77±0.06b

表3 复合添加剂对肉鸡消化道pH的影响 Table 3 Effects of compound additive on intestinal pH of broilers

由表4可知，在21日龄时，试验组肉鸡血清SOD、GSH-Px活性和T-AOC均显著高于对照组(P＜0.05)，分别提高了2.01%、8.90%和8.89%。在42日龄时，试验组肉鸡血清SOD、GSH-Px活性和T-AOC显著高于对照组(P＜0.05)，分别提高了7.96%、13.23%和19.01%。21日龄肉鸡血清MDA含量试验组低于对照组8.53%，但差异不显著(P>0.05)，42日龄肉鸡血清MDA含量显著低于对照组34.93%(P＜0.05)。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 复合添加剂对肉鸡血清抗氧化指标的影响 Table 4 Effects of compound additive on serum antioxidant indexes of broilers 日龄 Days of age 超氧化物歧化酶 SOD/(U/mL) 谷胱甘肽过氧化物酶 GSH-Px/(10 U/mL) 丙二醛 MDA/(nmol/mL) 总抗氧化能力 T-AOC/(U/mL) 21 对照组 Control group 234.0±3.0b 1 378.2±49.1b 4.57±0.20 19.57±0.98b 试验组 Experimental group 238.7±1.3a 1 500.7±30.3a 4.18±0.41 22.16±1.23a 42 对照组 Control group 242.8±9.1b 1 910.2±62.8b 2.72±0.59a 17.15±1.43b 试验组 Experimental group 264.4±5.2a 2 062.3±29.2a 1.77±0.14b 20.41±1.17a

表4 复合添加剂对肉鸡血清抗氧化指标的影响 Table 4 Effects of compound additive on serum antioxidant indexes of broilers

由表5可知，21日龄，试验组肉色a值显著高于对照组(P<0.05)，b值显著低于对照组(P<0.05)，试验组肌肉的滴水损失和剪切力分别低于对照组2.00%和6.95%，但差异不显著(P>0.05)，肉色L值和肌肉pH在试验组与对照组之间无显著差异(P>0.05)。42日龄，试验组肉色a值和肌肉pH显著高于对照组(P<0.05)，b值显著低于对照组(P<0.05)，试验组肌肉的滴水损失和剪切力分别低于对照组1.10%和6.47%，但差异不显著(P>0.05)，试验组和对照组L值无显著差异(P＞0.05)。

表5

Table 5

表5(Table 5)

表5 复合添加剂对肉鸡肉品质的影响 Table 5 Effects of compound additive on meat quality of broilers 项目Items 21日龄 21 days of age 42日龄 42 days of age 对照组 Control group 试验组 Experimental group 对照组 Control group 试验组 Experimental group 水分 Moisture/% 74.84±0.46 74.76±0.50 74.00±0.79 73.59±0.35 滴水损失 Dirp loss/% 2.50±0.06 2.45±0.07 1.81±0.03 1.79±0.06 pH 6.31±0.03 6.29±0.06 5.95±0.04b 6.08±0.07a 剪切力 Shear force/(kg·f) 3.351±0.280 3.118±0.225 3.804±0.167 3.558±0.328 肉色 Meat colour L值 L value 30.37±0.97 30.00±0.61 36.07±0.50 36.17±0.89 a值 a value 10.97±0.67b 12.63±0.44a 11.73±0.09b 12.90±0.74a b值 b value 9.86±0.60a 8.97±0.41b 9.08±0.41a 8.29±0.12b 同行数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著(P＞0.05)，肩标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)。 In the same row，values with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P＞0.05)，while with the different small letter superscripts mean significant difference (P＜0.05).

表5 复合添加剂对肉鸡肉品质的影响 Table 5 Effects of compound additive on meat quality of broilers

GOD为脱氢氧化酶，在动物肠道内催化葡萄糖转化为葡萄糖酸，此过程中可消耗肠道内氧气，产生过氧化氢。氧气被消耗，可造成消化道内厌氧或微厌氧环境，从而有利于厌氧菌，如乳酸菌、双歧杆菌的生长^[13]，同时产生的葡萄糖酸可降低肠道pH，也有利于乳酸菌类肠道微生物的生长^[14]，生成的过氧化氢积累到一定浓度能直接抑制大肠杆菌及沙门氏菌等病原微生物的生长繁殖^[15]，上述这些功能均可对畜禽生长起到有益作用，同时也可提高畜禽抵抗疾病能力。饲粮适量添加硒，可提高血浆中三碘甲腺原氨酸(T3)水平，促进生长激素(GH)的合成与分泌，从而加快动物的生长和蛋白质的合成^[16]。

本试验数据显示，在规模化养殖场肉鸡饲粮中使用含有GOD及酵母硒的抗应激复合添加剂，能够显著提高不同日龄阶段肉鸡ADFI、ADG和成活率，降低F/G，这与前人研究结果相近。He等^[17]在肉鸡饲粮中补硒0.1、0.3和0.5 mg/kg，都能促进肉鸡的生长，添加0.5 mg/kg时促进效果达到显著水平。宋海彬^[15]研究表明，基础饲粮中添加0.5% GOD(15 IU/g)可显著提高1~21日龄和22~42日龄肉鸡ADG，降低F/G。

畜禽肠道pH沿着十二指肠、空肠、回肠依次升高，由弱酸性逐渐向弱碱性变化^[18]，本试验结果也符合这一生理规律。此外，不同消化道pH的测定结果显示，试验组的盲肠食糜pH显著低于对照组，而十二指肠、空肠、回肠pH在不同组之间无显著差异。这一结果与前人测定的结果略有不同。在赵国先等^[1]的试验中，肉鸡饲粮中添加0.5% GOD(15 IU/g)可降低空肠和回肠pH，但对胃和十二指肠pH无显著影响，也就是对小肠前段无影响，可降低小肠后段pH。杨久仙等^[14]研究表明显示，饲粮中添加0.2% GOD可降低断奶仔猪胃和十二指肠pH。由此可见，GOD对消化道pH的影响与畜禽品种、消化道部位、酶的活性有关。GOD以葡萄糖为底物产生葡萄糖酸，葡萄糖酸通常会进入盲肠，由盲肠乳酸菌进一步利用发酵产生丁酸等短链脂肪酸^[19]。本试验测定结果显示肉鸡盲肠部位的pH显著降低，推测与葡萄糖酸的进一步发酵有关，这方面有待于深入研究。

SOD是动物机体重要的抗氧化酶，具有清除超氧阴离子自由基(·O^-₂)，保护细胞免受损伤的作用。GSH-Px是动物机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶，硒是GSH-Px酶系的组成成分，该酶能催化谷胱甘肽(GSH)生成氧化型谷胱甘肽(GSSG)，从而保护细胞膜的结构及功能不受过氧化物的干扰及损害^[20]。T-AOC可反映机体抗氧化性能的高低，血清脂质过氧化物MDA含量可间接反映自由基的产生情况和机体组织细胞的脂质过氧化程度。

本试验测定了21、42日龄肉鸡血清SOD、GSH-Px活性及T-AOC以及MDA含量，结果显示，肉鸡饲喂复合添加剂，可提高抗氧化酶活性，有效降低42日龄肉鸡血清MDA含量，表明含有酵母硒的复合添加剂能够降低动物机体脂质过氧化程度，改善动物机体抗应激能力。这一结果与单独使用GOD或者单独添加硒具有抗氧化应激效果相一致。宋海彬等^[4]研究结果显示，饲粮中添加GOD可提高肉鸡血清SOD活性，降低MDA含量，具有抗氧化与抗应激的作用。Tapiero等^[21]研究表明，亚硒酸钠可显著提高肉鸡GSH-Px活性，增加血清抗氧化性能；寇庆等^[20]研究发现，肉鸡饲粮中添加0.3 mg/kg酵母硒能够显著提高血清和肝脏GSH-Px活性，提高鸡群抗氧化性能；李锋等^[22]在饲粮中添加0.2、0.3 mg/kg酵母硒，发现可显著提高21日龄白羽肉鸡血清和肝脏中GSH-Px活性。对于GOD与酵母硒是否具有相互协同作用还需要进一步研究。

脂质氧化是肉品质下降的主要原因，肌肉细胞膜因富含多不饱和脂肪酸，极易发生脂质氧化，产生自由基，细胞膜受到自由基的攻击后，膜完整性被破坏，肉中水分渗出，表现为吸水力降低，肉品质降低^{[23, 24]}。有研究证明，SOD活性越高、MDA含量越低的肌肉，其系水力越高、肉色越鲜艳，并且肉质越细嫩^[25]。

本试验测定21、42日龄肉鸡胸肌的肌肉肉品质，统计分析表明，饲喂复合添加剂可显著提高42日龄肉鸡胸肌pH，可显著提高肉色a值，降低肉色b值，有降低胸肌滴水损失和剪切力的趋势。Tapiero等^[20]研究表明，微量元素硒可以有效阻止肉鸡肌红蛋白或氧合肌红蛋白氧化形成高铁肌红蛋白，加深肌肉红色度，提高肉色评分，降低滴水损失，且随酵母硒添加量的提高，肉色a值呈增加趋势，滴水损失呈降低趋势。王珏等^[26]在闽中麻鸡饲粮添加富硒酵母，发现可改善肉品质，使胸肌、腿肌肌肉的滴水损失显著降低，肌肉红色度和粗蛋白质含量显著提高，肌肉含水率、肌纤维直径显著降低。孟丹等^[27]研究显示，酵母硒可降低肉鸡春季和夏季胸肌PSE(pale soft exudative)发生率。本试验测定血清中SOD、GSH-Px活性、T-AOC以及MDA含量，显示复合添加剂具有提高肉鸡抗氧化性能的作用，通过胸肌肉品质指标的测定，显示复合添加剂可以改善肉色，降低滴水损失和剪切力，从而改善肉品质，这与复合添加剂中酵母硒和GOD的功能相符合。

GOD与酵母硒组成的复合添加剂应用于肉鸡生产，可增加ADG和ADFI，降低F/G，提高肉鸡抗氧化性能，改善肉品质。