大恒优质肉鸡配套系是四川省畜牧科学研究院采用现代家禽育种方法和手段培育的优质肉鸡新品系，既保持了地方鸡种的优质风味，又充分发挥了生长和繁殖潜力。作为品种推广工作的重要组成部分，营养需要及其营养调控技术研究将助推大恒肉鸡及其配套系遗传潜能的充分发挥，也将为该品系的全面推广应用提供科学饲养依据。硒是动物必需的微量元素之一，在提高动物的生长性能、增强机体抗氧化和免疫能力、改善畜产品品质、充分发挥动物繁殖性能等方面具有重要作用^{[1, 2, 3, 4]}。与无机硒相比，有机硒具有安全、高效、环保等特点，应用前景十分广阔^{[5, 6, 7, 8]}。Yuan等^{[9, 10]}指出，与亚硒酸钠相比，蛋氨酸硒能显著增加母鸡及其1日龄雏鸡血浆及肝脏硒蛋白磷(P)含量和硫氧化还原蛋白还原酶活性及其mRNA水平。到目前为止，大恒肉鸡及其配套系的营养需要研究才刚刚起步，还未见其对微量元素硒的适宜需要量的相关报道。本研究通过考察不同水平蛋氨酸硒对大恒肉鸡父母代母鸡繁殖性能的影响，为蛋氨酸硒在大恒肉种鸡上的合理应用提供科学依据。

选同批次、产蛋性能相近的32周龄健康大恒肉种母鸡500只，按单因素随机试验设计分成5个组，每个组5个重复，每个重复20只鸡。试验鸡来自四川大恒家禽育种有限公司。

本试验分5个组，包括1个对照组和4个试验组。对照组饲喂玉米-豆粕-鱼粉-菜粕型基础饲粮，基础饲粮参照NRC(1994)和《中国鸡饲养标准》(2004)配制，其组成及营养水平见表1。4个试验饲粮分别在基础饲粮中添加0.10、0.25、0.40和0.55 mg/kg硒(蛋氨酸硒)。蛋氨酸硒由成都旭卫生物科技有限责任公司提供，硒含量为0.50%。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 基础饲粮组成及营养水平(饲喂基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (as-fed basis) % 项目 Items 含量 Content 原料 Ingredients 玉米 Corn 62.50 麦麸 Wheat bran 3.00 菜籽粕 Rapeseed meal 3.00 豆粕 Soybean meal 20.00 鱼粉 Fish meal 1.00 碳酸钙 CaCO3 8.36 磷酸氢钙 CaHPO4 0.70 DL-蛋氨酸 DL-Met 0.07 食盐 NaCl 0.20 微量元素预混料 Mineral premix1) 0.20 豆油 Soybean oil 0.50 氯化胆碱 Choline chloride 0.10 维生素预混料 Vitamin premix2) 0.04 植酸酶 Phytase 0.01 小苏打 NaHCO3 0.32 合计 Total 100.00 营养水平 Nutrient levels3) 代谢能 ME/(MJ/kg) 11.37 粗蛋白质 CP 16.21 赖氨酸 Lys 0.80 蛋氨酸 Met 0.35 钙 Ca 3.49 有效磷 AP 0.72 硒 Selenium/(mg/kg) 0.12 1)微量元素预混料为每千克饲粮提供Mineral premix provided the following per kg of the diet：Fe 80.00 mg，Cu 8.00 mg，Mn 100.00 mg，Zn 80.00 mg，I 0.90 mg。 2)维生素预混料为每千克饲粮提供Vitamin premix provided the following per kg of the diet：VA 16 000.00 IU，VD 4 800.00 IU，VE 60.00 IU，VK3 6.00 mg，VB1 6.00 mg，VB2 16.00 mg，VB12 0.04 mg，叶酸 folic acid 2.80 mg，生物素 boitin 0.24 mg，烟酸 nicotinic acid 68.00 mg，D-泛酸 D-pantothenic acid 21.60 mg。 3)硒为实测值，其余为计算值。Selenium was a measured value， while the others were calculated values.

表1 基础饲粮组成及营养水平(饲喂基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (as-fed basis)

试验鸡饲养管理按常规方法进行，每天07:00每只鸡平均一次性定量喂料130 g，09:00定时收蛋1次，第2天06:00~07:00结算余料。动物试验在四川省大恒家禽育种有限公司育种场内进行，试验期6周。正式试验前，对试验鸡进行调整，确保各试验组初始产蛋性能差异不显著(P>0.05)。试验母鸡每3 d人工授精1次。其余按常规饲养管理方法进行。

以重复为单位每天准确结算实际耗料量、蛋重和产蛋数，蛋重采用电子天平测定(精确至0.1 g)。每周计算各组的平均产蛋率、蛋重和料蛋比。以全期产蛋性能的平均值作为最终结果。

在试验第4周和第6周结束前4天开始，收集4 d的种蛋进行孵化，记录合格种蛋数、入孵蛋数、无精蛋数、出雏数，计算种蛋合格率、种蛋受精率、受精蛋孵化率、入孵蛋孵化率，取2次测定结果的平均值作为最终结果。

种蛋合格率(%)=(合格种蛋数/总产蛋数)×100；
种蛋受精率(%)=(受精蛋数/入孵蛋数)×100；
受精蛋孵化率(%)=(出壳雏鸡数/受精蛋数)×100；
入孵蛋孵化率(%)=(出壳雏鸡数/入孵蛋数)×100。

试验结束时，每个重复分别选2只母鸡，翅静脉采血，分离血浆，测定雌二醇和孕酮水平。采用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒进行测定。

试验第4周和第6周末，在每个重复中选蛋重相似的鸡蛋2枚，测定蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋形指数、哈氏单位。蛋形指数：用日本FHK公司的蛋形指数测定器测定；蛋壳强度：用日本FHK公司的卵壳强度测定仪测量；蛋壳厚度：通过用日本FHK公司的蛋壳厚度测量仪测量大头、中间、小头的厚度得来；浓蛋白高度：用日本FHK公司的蛋白高度测定仪测定蛋黄边缘与浓蛋白边缘中点的浓蛋白高度，取成正三角形的3个点的平均值。将2次测定结果取平均值作为最终结果。蛋形指数、蛋壳厚度、哈氏单位(Hu)的计算公式如下：

蛋形指数＝纵径长度/横径长度；
蛋壳厚度=(大头厚度+中间厚度+小头厚度)/3；
哈氏单位=100×lg(H-1.7W^0.37+7.57)。

式中：H为浓蛋白高度(mm);W为蛋重(g)。

采用SPSS 19.0对数据进行单因素方差分析，差异显著时用Duncan氏法进行多重比较，结果以平均值±标准误表示。

由表2可知，各组之间产蛋率、蛋重和料蛋比差异不显著(P>0.05)。但从数值上看，产蛋率为0.10 mg/kg硒组最高、0.55 mg/kg硒组最低，蛋重则相反，料蛋比为0.25 mg/kg硒组最低、对照组最高。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 蛋氨酸硒对大恒肉种鸡产蛋性能的影响 Table 2 Effects of selenomethionine on laying performance in Daheng broiler breeders 项目 Items 对照组 Control group 0.10 mg/kg硒组 0.10 mg/kg Se group 0.25 mg/kg硒组 0.25 mg/kg Se group 0.40 mg/kg硒组 0.40 mg/kg Se group 0.55 mg/kg硒组 0.55 mg/kg Se group 产蛋率 Laying rate/% 70.93±2.99 72.37±2.99 69.39±3.41 71.99±4.73 66.90±3.71 蛋重 Egg weight/g 52.79±0.92 52.53±0.44 54.06±0.77 53.94±0.82 54.25±1.07 料蛋比 The ratio of feed to egg 2.38±0.05 2.29±0.04 2.25±0.08 2.29±0.08 2.30±0.07 同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著(P＞0.05)，不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)，不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。下表同。 In the same row,values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P＞0.05),while with different small letter superscripts mean significant difference (P＜0.05),and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as below.

表2 蛋氨酸硒对大恒肉种鸡产蛋性能的影响 Table 2 Effects of selenomethionine on laying performance in Daheng broiler breeders

由表3可知，尽管各组间种蛋合格率在统计学上差异不显著(P>0.05)，但对照组在数值上最低。就入孵蛋受精率而言，对照组最低，分别比0.10、0.25和0.40 mg/kg硒组显著或极显著低了15.59%(P<0.01)、19.86%(P<0.01)和13.46%(P<0.05)；0.55 mg/kg硒组比0.25 mg/kg硒组显著低了11.93%(P<0.05)。就入孵蛋孵化率而言， 0.10 mg/kg硒组最高，分别比对照组、0.40和0.55 mg/kg硒组显著或极显著高了35.31%(P<0.01)、19.17%(P<0.05)和20.73%(P<0.05)；0.25 mg/kg硒组仅次于0.10 mg/kg硒组，极显著高于对照组(P<0.01)。就受精蛋孵化率而言，0.10 mg/kg硒组最高，分别比对照组和0.40 mg/kg硒组显著高了13.50%和16.65%(P<0.05)。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 蛋氨酸硒对大恒肉种鸡种蛋孵化性能的影响 Table 3 Effects of selenomethionine on incubation performance of breeeding egg in Daheng broiler breeders % 项目 Items 对照组 Control group 0.10 mg/kg硒组 0.10 mg/kg Se group 0.25 mg/kg硒组 0.25 mg/kg Se group 0.40 mg/kg硒组 0.40 mg/kg Se group 0.55 mg/kg硒组 0.55 mg/kg Se group 种蛋合格率 Percent of breeding eggs 85.48±4.27 86.48±2.60 91.42±4.41 91.46±3.19 91.24±2.49 入孵蛋受精率 Fertility of hatching eggs 74.69±3.88Bc 88.49±3.79Aab 93.20±2.18Aa 86.31±4.11ABab 82.08±4.34ABb 入孵蛋孵化率 Hatchability of hatching eggs 64.83±3.48B 87.72±4.24Aa 84.16±3.34Aabc 73.61±6.18Abc 72.66±1.96Ac 受精蛋孵化率 Hatchability of fertile eggs 87.27±4.36b 99.05±0.95a 90.30±2.87ab 84.91±4.76b 89.28±4.03ab

表3 蛋氨酸硒对大恒肉种鸡种蛋孵化性能的影响 Table 3 Effects of selenomethionine on incubation performance of breeeding egg in Daheng broiler breeders

由表4可知，各组间雌二醇水平差异不显著(P>0.05)，但从数值上来看0.10 mg/kg硒组最高，对照组最低。0.10 mg/kg硒组孕酮水平显著高于0.40 mg/kg硒组和对照组(P<0.05)，分别为0.40 mg/kg硒组和对照组的2.23倍和2.38倍，其余各组间孕酮水平差异不显著(P>0.05)。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 蛋氨酸硒对大恒肉种鸡部分血浆生殖激素的影响 Table 4 Effects of selenomethionine on some plasma reproductive hormone in Daheng broiler breeders 项目 Items 对照组 Control group 0.10 mg/kg硒组 0.10 mg/kg Se group 0.25 mg/kg硒组 0.25 mg/kg Se group 0.40 mg/kg硒组 0.40 mg/kg Se group 0.55 mg/kg硒组 0.55 mg/kg Se group 雌二醇 E2/(ng/L) 174.73±16.64 300.09±91.85 209.53±52.28 179.12±59.28 261.92±63.87 孕酮 P/(ng/mL) 189.84±43.52b 452.30±154.33a 241.86±61.94ab 202.56±66.96b 239.74±56.45ab

表4 蛋氨酸硒对大恒肉种鸡部分血浆生殖激素的影响 Table 4 Effects of selenomethionine on some plasma reproductive hormone in Daheng broiler breeders

由表5可知，各组间在蛋形指数、蛋壳厚度和蛋壳强度上差异不显著(P>0.05)，但从数值上看，0.10 mg/kg硒组蛋壳强度最低；0.40 mg/kg硒组蛋壳厚度和蛋壳强度最高，蛋形指数最低。0.10 mg/kg硒组哈氏单位最高，分别比0.25和0.55 mg/kg硒组显著高了9.19%和11.34%(P<0.05)；0.40 mg/kg硒组仅次于0.10 mg/kg硒组，比0.55 mg/kg硒组显著高了10.38%(P<0.05)；其余各组间哈氏单位差异不显著(P>0.05)。

表5

Table 5

表5(Table 5)

表5 蛋氨酸硒对大恒肉种鸡种蛋品质的影响 Table 5 Effects of selenomethionine on quality of breeding eggs in Daheng broiler breeders 项目 Items 对照组 Control group 0.10 mg/kg硒组 0.10 mg/kg Se group 0.25 mg/kg硒组 0.25 mg/kg Se group 0.40 mg/kg硒组 0.40 mg/kg Se group 0.55 mg/kg硒组 0.55 mg/kg Se group 蛋形指数 Egg shape index 1.30±0.03 1.33±0.02 1.31±0.03 1.27±0.05 1.35±0.02 蛋壳厚度 Eggshell thickness/mm 0.37±0.01 0.37±0.01 0.37±0.01 0.39±0.01 0.37±0.01 蛋壳强度 Eggshell breaking strength/ (kg/cm2) 3.76±0.52 3.50±0.47 3.62±0.24 3.96±0.37 3.72±0.41 哈氏单位 HU 85.07±2.09abc 90.42±1.29a 82.81±3.41bc 89.64±1.52ab 81.21±2.04c

表5 蛋氨酸硒对大恒肉种鸡种蛋品质的影响 Table 5 Effects of selenomethionine on quality of breeding eggs in Daheng broiler breeders

本研究结果表明，0.10~0.55 mg/kg蛋氨酸硒来源的硒对大恒肉种鸡的产蛋率、蛋重和料蛋比没有显著影响，说明在硒水平为0.12 mg/kg的基础饲粮中，外源添加0.10~0.55 mg/kg蛋氨酸硒来源的硒不影响大恒肉种鸡产蛋性能，Paton等^[11]也在来航鸡上得出相似的结论。0.10和0.25 mg/kg蛋氨酸硒能极显著提高大恒肉种鸡入孵种蛋受精率和孵化率；0.10 mg/kg蛋氨酸硒能显著提高大恒肉种鸡受精种蛋孵化率，说明蛋氨酸硒可以显著改善大恒肉种鸡种蛋孵化性能，这也证实了硒在禽类胚胎的发育过程中发挥着重要作用有关^[12]。本研究中，当蛋氨酸硒的添加水平超过0.25 mg/kg时，种蛋孵化性能随蛋氨酸硒添加水平增加而降低，说明过量的蛋氨酸硒反而不利于种蛋的孵化。

Fortier等^[13]在酵母硒和亚硒酸钠上的研究结果证实，蛋氨酸硒能影响血浆生殖激素的水平，本研究在硒水平为0.12 mg/kg的基础饲粮中添加0.10 mg/kg蛋氨酸硒来源的硒，显著提高了大恒肉种鸡母鸡血浆孕酮水平，提高了血浆雌二醇水平，这与种蛋孵化性能的结果是一致的,说明蛋氨酸硒对种蛋孵化性能的影响可能与其对母鸡生殖激素的影响有关，但具体机理尚需进一步研究。

孙从佼等^[14]在丝羽乌鸡上证明哈氏单位值越大，种蛋受精率和孵化率就越高。哈氏单位是评价鸡蛋蛋白质质量和新鲜度的一个重要指标，何柳清等^[15]研究指出，硒水平为0.25 mg/kg的酵母硒能显著或极显著提高蛋鸡血清总超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶等主要抗氧化物酶的活性和机体总抗氧化能力，极显著降低丙二醛的水平；极显著提高常温下贮存15 d的鸡蛋哈氏单位，说明硒对鸡蛋新鲜度的影响可能与其抗氧化功能有关。本研究在硒水平为0.12 mg/kg的基础饲粮中添加0.10 mg/kg的蛋氨酸硒来源的硒，也显著提高了大恒肉种鸡种蛋哈氏单位。目前关于种蛋孵化性能与蛋壳品质关系的研究并不多，本研究结果显示，孵化性能最优组，其种蛋蛋壳强度最低；杜晓惠等^[16]和李笑春等^[17]也认为种蛋孵化性能与蛋壳厚度和蛋壳强度在一定程度上呈负相关关系。蛋壳过厚会通过减少蛋壳气孔数，尤其是钝端气孔数来影响胚胎散热，造成胚胎发育异常；李昂等^[18]在番鸭上进一步证明，蛋壳过厚主要影响孵化前期胚胎的感温和孵化中后期胚胎的散热。蛋壳强度与蛋壳弹性变形度和厚度指标相关，蛋壳强度过大会使蛋壳不易破裂，雏鸡出壳困难。因此，有必要进一步研究种蛋孵化性能与蛋壳质量的相关性。本研究外源添加蛋氨酸硒对蛋壳强度、蛋壳厚度以及蛋形指数没有显著影响。可见蛋氨酸硒可以显著提高大恒肉种鸡种蛋新鲜度，但对蛋壳品质没有显著影响。

在硒水平为0.12 mg/kg的基础饲粮中，外源添加0.10~0.55 mg/kg的蛋氨酸硒对大恒肉种鸡产蛋性能没有显著影响；添加0.10~0.25 mg/kg的蛋氨酸硒可显著改善大恒肉种鸡产蛋母鸡种蛋孵化性能。