微量元素硒是谷胱甘肽过氧化物酶活性中心的必需组成成分，通过含硒酶或硒蛋白调节机体的抗氧化能力，具有抗氧化、抗应激、提高机体免疫力等生物学功能^{[1, 2]}，在实际生产中，生产者多采用亚硒酸钠作为硒源，近年来，由于亚硒酸钠毒性高、利用率低、污染环境，一些国家逐渐限制或禁止亚硒酸钠作为硒源在饲粮中应用，有机硒的开发与应用逐渐成为国内外动物营养学的研究热点，因此，比较有机和无机硒对蛋鸡生产性能和蛋品质影响以及系统研究其在鸡蛋中的沉积规律具有重要意义。目前，市场应用较多的有机硒主要是酵母硒、氨基酸硒和蛋白硒等，但有关有机硒在鸡蛋中沉积的研究结果差异较大，有研究发现，随着有机硒饲粮饲喂时间的增加，蛋硒含量逐渐增加，达到峰值后保持相对稳定^{[3, 4, 5]}，也有研究发现，蛋硒含量随着有机硒饲粮饲喂时间的增加显著增加，并未出现峰值^{[6, 7]}。但这些研究主要是不同种类有机硒之间的比较，有关比较有机和无机硒对蛋硒含量动态变化影响的报道较少，且有关有机和无机硒在鸡蛋中沉积规律的系统研究鲜有报道。因此，本研究以30周龄海兰褐蛋鸡为试验动物，在饲粮中添加相同硒水平的亚硒酸钠和酵母硒，分别测定蛋鸡生产性能、正试期第56天蛋品质以及正试期第1、3、5、7、14、21、28和56天蛋硒含量，旨在比较酵母硒和亚硒酸钠对蛋鸡生产性能、蛋品质和蛋硒含量动态变化的影响，系统研究不同硒源在鸡蛋中的沉积规律。 1 材料和方法 1.1 试验材料与动物

饲料添加剂级亚硒酸钠，白色粉末，硒含量≥1%(实测值：7.458 g/kg)。酵母硒，淡黄色或淡黄棕色，硒含量≥2 g/kg(实测值：2.210 g/kg)，购买于安琪酵母股份有限公司。试验动物为30周龄体况良好、产蛋率接近的海兰褐蛋鸡。 1.2 试验设计

试验选用30周龄体况良好、产蛋率接近健康的海兰褐蛋鸡216只，随机分成3个组，每组6个重复，每个重复12只。对照组饲喂基础饲粮(不额外添加硒源)，试验组饲喂在基础饲粮中分别添加0.30 mg/kg硒的亚硒酸钠和酵母硒，3种饲粮中硒含量分别为0.176、0.342和0.359 mg/kg(测定值)。 1.3 试验饲粮与饲养管理

参照NRC(1994)蛋鸡营养需要配制饲粮，基础饲粮组成及营养水平见表1。试验鸡笼养，每笼2只，自由采食和饮水，常规饲养管理。试验分预试期和正试期，其中预试期14 d，正试期56 d(33~40周龄)。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) % 原料 Ingredients 含量 Content 营养水平 Nutrient levels 含量 Content 玉米 Corn 62.70 代谢能 ME/(MJ/kg) 11.09 豆粕 Soybean meal 26.35 粗蛋白质 CP 16.61 石粉 Limestone 8.65 钙 Ca 3.50 磷酸氢钙 CaHPO4 1.30 有效磷 AP 0.35 食盐 NaCl 0.30 蛋氨酸 Met 0.35 50%氯化胆碱 50% choline chloride 0.10 赖氨酸 Lys 0.85 DL-蛋氨酸 DL-Met 0.10 预混料 Premix 0.50 合计 Total 100.00 预混料可为每千克饲粮提供The premix provides the following per kg of the diet：VA 7 715 IU，VD3 2 755 IU，VE 8.8 IU，VK 2.2 mg，VB12 0.01 mg，VB2 4.41 mg，VB3 5.51 mg，VB 0.55 mg，烟酸 nicotinic acid 19.8 mg，叶酸 folic acid 0.28 mg，Mn 50 mg，Fe 25 mg，Cu 2.5 mg，Zn 50 mg，I 1.0 mg。

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis)

每天09:00准时收蛋，以重复为单位准确记录产蛋数和蛋重。每周末定时结料、称重，统计各重复的实际耗料量。根据饲养试验记录，整理统计各组产蛋率、平均蛋重(各重复所有鸡蛋的平均重量)、平均日产蛋重(每只鸡每日的平均产蛋重)、平均日采食量(每只鸡每日的平均采食量)和料蛋比。 1.4.2 蛋品质

正试期第56天，每个重复取8枚蛋，每组共48枚，测量纵径、横径、蛋壳厚度(为鸡蛋大头、小头和中间的平均值)和蛋壳强度，然后剖离鸡蛋，用吸水纸拭去蛋壳上黏附的蛋清，称蛋壳重，用多功能蛋品质测定仪测定蛋白高度和蛋黄颜色，用蛋黄分离器分离出完整的蛋黄，用吸水纸拭去蛋黄上黏附的蛋清，称蛋黄重。测定仪器包括电子数显卡尺(广陆数字测控股份有限公司)、蛋壳厚度测定仪(以色列ORKA公司)、蛋壳强度测定仪(以色列ORKA公司)和多功能蛋品质测定仪(以色列ORKA公司)。哈氏单位(Haugh Unit)计算公式为：

哈氏单位＝100×lg(H-1.7W^0.37+7.6)。

式中：H为蛋白高度(mm)；W为蛋重(g)。 1.4.3 鸡蛋和饲粮硒含量测定及方法

正试期第1、3、5、7、14、21、28和56天，每个重复取6枚蛋，每个处理共36枚，3枚蛋混匀为1个样品，每个重复2个样品，每个处理12个样品。参照Pan等^[10]的方法处理蛋样品，称重去壳后，将3枚蛋的蛋液在冰冷条件下匀浆后备用，测定鸡蛋中硒含量。取每次配制好的各组饲粮少许，混合均匀后粉碎备用，测定饲粮中硒含量。

精确称取上述准备好的样品各2 g左右，分别放入250 mL具塞的三角瓶，然后加入10.0 mL高氯酸与硝酸的混酸(体积比为1 ∶ 9)及几粒玻璃珠，盖上塞子，冷消化过夜。次日于电热板上加热消化(消化温度不超过180 ℃)，并及时补加混合酸。当溶液变为清亮无色并伴有白烟出现时，再继续加热至体积剩余2 mL左右，切不可蒸干。冷却，再加入6 mol/L盐酸5mL，继续加热至溶液变为清亮无色并伴有白烟出现。冷却，转移至50 mL容量瓶中定容，混匀备用。取一定量试样消化液转移到25 mL容量瓶中，加1 mL的10%(质量体积分数)的铁氰化钾溶液，用3 mol/L的盐酸溶液定容，同时用超纯水、试剂和硒标准参照物(GBW8551)作空白对照和标准样品对照，利用氢化物-原子荧光光谱法(参照GB 5009.93—2010)测定饲粮和蛋中硒含量。 1.5 统计分析

数据经Excel 2003整理后，以重复为单位，用SPSS 15.0统计软件进行分析，单因素方差分析(one-way ANOVA)检测组间差异显著性，并用LSD法进行多重比较。P<0.05表示差异显著。 2 结 果 2.1 酵母硒和亚硒酸钠对蛋鸡生产性能的影响

由表2可知，各试验组产蛋率、平均蛋重、平均日产蛋重、平均日采食量、料蛋比和死亡率与对照组相比较差异均不显著(P>0.05)。试验全期未见鸡只出现不适状况。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 酵母硒和亚硒酸钠对蛋鸡生产性能的影响 Table 2 Effects of selenium yeast and sodium selenite on performance in laying hens 项目 Items 对照组 Control group 亚硒酸钠组 Sodium selenite group 酵母硒组 Selenium yeast group SEM P值 P-value 产蛋率 Laying rate/% 92.98 94.27 93.91 0.728 0.442 平均蛋重 Average egg weight/g 60.72 60.51 60.15 0.239 0.636 平均日产蛋重 Average daily egg weight/(g/只) 56.45 57.01 57.29 0.430 0.263 平均日采食量 Average daily feed intake/(g/只) 118.42 118.47 118.43 0.119 0.983 料蛋比 The ratio of feed to egg 2.10 2.08 2.06 0.018 0.307 死亡率 Mortality/% 4.17 0.00 1.39 1.077 0.290 同行数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著(P>0.05)，不同字母表示差异显著(P<0.05)。下表同。 In the same row,values with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05),while with different letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

表2 酵母硒和亚硒酸钠对蛋鸡生产性能的影响 Table 2 Effects of selenium yeast and sodium selenite on performance in laying hens

由表3可知，与对照组相比，饲粮中添加0.30 mg/kg硒的亚硒酸钠和酵母硒对正试期第56天海兰褐蛋鸡常规蛋品质指标无显著影响(P>0.05)。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 酵母硒和亚硒酸钠对蛋鸡蛋品质的影响 Table 3 Effects of selenium yeast and sodium selenite on egg quality in laying hens 项目 Items 对照组 Control group 亚硒酸钠组 Sodium selenite group 酵母硒组 Selenium yeast group SEM P值 P-value 蛋壳比例 Eggshell percentage/% 10.13 10.15 10.37 0.105 0.612 蛋黄比例 Yolk percentage/% 23.83 24.05 23.56 0.345 0.863 蛋白比例 Albumen percentage/% 66.03 65.80 66.06 0.354 0.950 蛋壳强度 Eggshell strength/(kg/cm2) 4.02 3.77 4.01 0.118 0.632 蛋形指数 Shape index/% 1.29 1.27 1.29 0.007 0.516 蛋壳厚度 Shell thickness/mm 0.412 0.403 0.410 0.004 0.691 蛋黄颜色 Yolk color 8.17 7.83 7.83 0.069 0.363 蛋白高度 Albumen height/mm 5.76 6.07 5.99 0.144 0.063 哈氏单位 Haugh Unit 74.00 78.96 76.07 1.191 0.077 蛋壳颜色 Eggshell color 亮度 L 58.55 58.18 58.70 0.370 0.854 红度 a 17.79 18.37 17.84 0.196 0.441 黄度 b 29.53 29.78 29.11 0.262 0.606

表3 酵母硒和亚硒酸钠对蛋鸡蛋品质的影响 Table 3 Effects of selenium yeast and sodium selenite on egg quality in laying hens

由表4可知，正试期第1天，试验组蛋鸡蛋硒含量与对照组相比较差异均不显著(P>0.05)；饲喂0.30 mg/kg硒的酵母硒和亚硒酸钠饲粮3 d后，酵母硒组蛋硒含量显著高于对照组和亚硒酸钠组(P<0.05)，14 d后，亚硒酸钠组蛋硒含量显著高于对照组(P<0.05)，正试期第3、5、7、14、21、28和56天，酵母硒组蛋硒含量比亚硒酸钠组分别高出了28.18%、34.98%、45.35%、47.39%、67.53%、63.35%和65.71%，差异显著(P<0.05)。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 酵母硒和亚硒酸钠对蛋硒含量的影响 Table 4 Effects of selenium yeast and sodium selenite on egg selenium content mg/kg 试验天数 Days of experiment/d 对照组 Control group 亚硒酸钠组 Sodium selenite group 酵母硒组 Selenium yeast group SEM P值 P-value 1 0.279 0.290 0.292 0.006 0.635 3 0.284b 0.291b 0.373a 0.010 <0.001 5 0.268b 0.283b 0.382a 0.013 <0.001 7 0.242b 0.269b 0.391a 0.017 <0.001 14 0.242c 0.287b 0.423a 0.020 <0.001 21 0.227c 0.271b 0.454a 0.024 <0.001 28 0.249c 0.281b 0.459a 0.022 <0.001 56 0.237c 0.312b 0.517a 0.029 <0.001

表4 酵母硒和亚硒酸钠对蛋硒含量的影响 Table 4 Effects of selenium yeast and sodium selenite on egg selenium content

由表5可知，对照组蛋鸡蛋硒含量随着试验天数的增加显著降低(P<0.05)，正试期第7、14、21、28和56天的蛋硒含量显著低于正试期第1和3天的蛋硒含量(P<0.05)；亚硒酸钠组蛋鸡蛋硒含量呈现先降低后增加的趋势(P<0.05)，正试期第56天蛋硒含量显著高于正试期第5、7、14、21和28天的蛋硒含量(P<0.05)；酵母硒组蛋鸡蛋硒含量随着试验天数的增加显著增加(P<0.05)，正试期第56天的蛋硒含量显著高于其他试验天数的蛋硒含量(P<0.05)。

表5

Table 5

表5(Table 5)

表5 酵母硒和亚硒酸钠对蛋硒含量动态变化的影响 Table 5 Effects of selenium yeast and sodium selenite on dynamic change of egg selenium content mg/kg 组别 Groups 试验天数 Days of experiment/d SEM P值 P-value 1 3 5 7 14 21 28 56 试验天数 Days of experiment 线性 Linear 二次 Quadratic 对照组Control group 0.279a 0.284a 0.268ab 0.242cd 0.242cd 0.227d 0.249bc 0.238cd 0.004 <0.001 <0.001 <0.001 亚硒酸钠组Sodium selenite group 0.289ab 0.291ab 0.283b 0.269b 0.287b 0.271b 0.281b 0.312a 0.003 0.042 0.029 0.011 酵母硒组Selenium yeast group 0.292e 0.373d 0.381d 0.391d 0.423c 0.454b 0.459b 0.517a 0.010 <0.001 <0.001 <0.001

表5 酵母硒和亚硒酸钠对蛋硒含量动态变化的影响 Table 5 Effects of selenium yeast and sodium selenite on dynamic change of egg selenium content

本研究结果表明，饲粮中添加0.30 mg/kg硒的亚硒酸钠和酵母硒对正试期生产性能和第56天蛋鸡蛋品质均无显著影响，亚硒酸钠组和酵母硒组的蛋白高度和哈氏单位有增加的趋势，但未达到显著水平。胡华锋等^[7]、李家奎等^[8]和Leeson等^[9]在饲粮中添加不同硒含量的不同硒源，均发现对蛋鸡产蛋性能无显著影响。Pan等^[10]发现不同硒含量的富硒益生菌能显著增加蛋鸡产蛋率，降低料蛋比，但其分析认为蛋鸡生产性能主要受益生菌的影响而不是硒。Pan等^[10]、Arnold等^[11]和Patton^[12]在饲粮中添加不同硒含量的不同硒源，均发现对新鲜鸡蛋的蛋品质无显著影响，但Pan等^[10]和Payne等^[13]发现在饲粮中添加富硒益生菌或酵母硒能减慢储存鸡蛋哈氏单位的降低速度，维持储存鸡蛋的蛋白品质。本研究作者认为，蛋鸡的品种、日龄、基础饲粮中硒的含量以及硒源类型是影响生产性能和蛋品质的主要因素。以上研究均以产蛋后期蛋鸡为试验动物，本研究选用30周龄海兰褐蛋鸡，周龄远小于以上报道中的蛋鸡，蛋鸡本身处在产蛋高峰期，机体免疫力和抗氧 化能力比产蛋后期蛋鸡更较强，对照组蛋鸡鸡蛋哈氏单位达74.00，其抗氧化系统的可调控程度可能相对较低。

3.2 酵母硒和亚硒酸钠对蛋硒含量的影响

本研究结果表明，亚硒酸钠组蛋鸡蛋硒含量呈现先降低后增加的趋势，酵母硒组蛋鸡蛋硒含量随着试验天数的增加显著增加。饲喂0.30 mg/kg硒的酵母硒和亚硒酸钠饲粮3 d后，酵母硒组蛋硒含量显著高于对照组和亚硒酸钠组，14 d后，亚硒酸钠蛋硒含量显著高于对照组，说明蛋鸡对酵母硒吸收和向鸡蛋中的转移速度比亚硒酸钠快；正试期第3、5、7、14、21、28和56天，相同硒含量的酵母硒组蛋硒含量比亚硒酸钠组分别显著高出了28.18%、34.98%、45.35%、47.39%、67.53%、63.35%和65.71%，说明酵母硒比亚硒酸钠的硒转化率更高；对照组(不额外添加硒，饲粮硒含量为0.176 mg/kg)蛋硒含量随着试验天数的增加显著降低，说明饲粮中0.176 mg/kg硒不能满足吸收后的硒由机体向鸡蛋转移，随着试验时间的延长向鸡蛋中转移的越来越少，影响了鸡蛋中的硒含量。研究发现，随着酵母硒组饲粮饲喂时间的增加，蛋硒含量逐渐增加，达到峰值后保持相对稳定。何健等^[3]在蛋鸡饲粮中添加1.0 mg/kg有机硒，发现饲喂20 d后蛋硒含量达到峰值，之后保持相对稳定。李静等^[4]在45周龄海塞克斯蛋鸡饲粮中添加0.50 mg/kg酵母硒，发现饲喂14 d后蛋硒含量达到峰值，之后保持相对稳定。曲湘勇等^[5]在鹌鹑饲粮中分别添加0.2、0.4 mg/kg酵母硒和纳米硒，发现正试期第28天各组蛋硒含量均显著高于正试期第14天；正试期第42天，纳米硒组蛋硒含量与正试期第28天相比较差异不显著，而酵母硒组蛋硒含量显著降低。本研究发现，蛋硒含量随着饲喂天数的增加显著增加，并未出现峰值，这可能由于硒源类型、饲粮硒含量和蛋鸡品种不同所致，本试验结果与胡华锋等^[7]和潘翠玲^[6]的研究结果类似。胡华锋等^[7]在50周龄罗曼蛋鸡饲粮中添加1.60 mg/kg的酵母硒和730 mg/kg的酵母硒，发现蛋硒含量随着饲喂时间的增加显著增加，正试期第38天蛋硒含量显著大于第7、14、21和28天蛋硒含量。潘翠玲^[6]在58周龄产蛋率为86%的罗曼蛋鸡饲粮中分别添加0.2、0.5和1.0 mg/kg的富硒益生菌和亚硒酸钠，发现蛋硒含量随着饲喂时间的增加显著增加，正试期第35天蛋硒含量显著大于第7、14、21和28天蛋硒含量。 4 结 论

① 饲粮中添加0.30 mg/kg硒的酵母硒和亚硒酸钠对生产性能和蛋品质无不良影响。

② 相对于亚硒酸钠，酵母硒中硒向鸡蛋中的转移速度更快，效率更高。

③ 饲粮添加硒能显著提高蛋硒含量，且饲粮添加酵母硒时蛋硒含量随着饲喂天数的增加而增加。