微量元素硒是动物和人体必需的营养元素，是一些重要抗氧化酶和含硒蛋白的必需组成部分，能够清理体内活性氧化物质，具有抗氧化、抗应激、提高机体免疫力等生物学功能^{[1, 2]}。亚硒酸钠毒性高、利用率低、污染环境，一些国家已经限制或禁止亚硒酸钠作为硒源在饲粮中应用。因此，比较有机硒源和无机硒源对蛋鸡生产性能、蛋品质和蛋硒含量的影响，确定有机硒源的适宜使用量，具有重要意义。Wu等^[3]在48周龄种蛋鸡饲粮中分别添加0.15、0.30 mg/kg的DL型或L型蛋氨酸硒，饲喂8周后发现，相对于0.30 mg/kg硒组，0.15 mg/kg硒组产蛋率、种蛋孵化率及雏鸡成活率显著提高。Pan等^[4]在58周龄产蛋率为86%的罗曼蛋鸡饲粮中分别添加0.2、0.5和1.0 mg/kg的富硒益生菌，发现富硒益生菌均能显著增加蛋鸡产蛋率、日均产蛋重和平均蛋重，降低料蛋比。Leeson等^[5]在48周龄白来航蛋鸡饲粮中添加硒量为0.30 mg/kg的3种不同硒源，发现不同硒源对产蛋率无显著影响，但能显著提高蛋硒含量。以上研究结果表明，不同蛋鸡品种、日龄和硒源对产蛋性能影响结果差别较大，饲粮中添加有机硒较无机硒显著提高蛋硒含量，且蛋硒含量随着硒添加量的增加而增加。但这些报道大多研究相同硒水平的有机和无机硒或不同有机硒添加水平对蛋鸡生产性能等的影响，对于比较添加不同水平有机和无机硒对蛋鸡生产性能、蛋品质和蛋硒含量影响的报道较少，且有关确定能够替代无机硒源的有机硒源适宜使用量的研究鲜有报道。因此，本研究以30周龄海兰褐蛋鸡为试验动物，在饲粮中添加亚硒酸钠和不同剂量酵母硒，分别测定蛋鸡生产性能、蛋品质以及蛋硒含量，旨在比较亚硒酸钠和酵母硒对蛋鸡生产性能、蛋品质和蛋硒含量的影响，以确定能够替代亚硒酸钠的酵母硒适宜使用量。 1 材料和方法 1.1 试验材料与动物

饲料添加剂级亚硒酸钠，白色粉末，硒含量≥1%(实测值：7.458 g/kg)。酵母硒，淡黄色或淡黄棕色，硒含量≥2 g/kg(实测值：2.210 g/kg)，购买于安琪酵母股份有限公司。试验动物为30周龄体况良好、产蛋率接近的海兰褐蛋鸡。 1.2 试验设计

试验选用30周龄体况良好、产蛋率接近的健康海兰褐蛋鸡360只，随机分成5个组，每组6个重复，每个重复12只。对照组饲喂基础饲粮(不额外添加硒源)，试验组饲喂在基础饲粮中分别添加0.30 mg/kg硒的亚硒酸钠以及0.10、0.20和0.30 mg/kg硒的酵母硒，各组饲粮中硒含量分别为0.176、0.342、0.278、0.302、0.359 mg/kg(测定值)。 1.3 试验饲粮与饲养管理

参照NRC(1994)配制饲粮，基础饲粮组成及营养水平见表1。试验鸡笼养，每笼2只，自由采食和饮水，常规饲养管理。试验分预试期和正试期，其中预试期14 d，正试期28 d(33~36周龄)。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) % 原料 Ingredients 含量 Content 营养水平 Nutrient levels2) 含量 Content 玉米 Corn 62.70 代谢能 ME/(MJ/kg) 11.09 豆粕 Soybean meal 26.35 粗蛋白质 CP 16.61 石粉 Limestone 8.65 钙 Ca 3.50 磷酸氢钙 CaHPO4 1.30 有效磷 AP 0.35 食盐 NaCl 0.30 蛋氨酸 Met 0.35 50%氯化胆碱 50% choline chloride 0.10 赖氨酸 Lys 0.85 DL-蛋氨酸 DL-Met 0.10 预混料 Premix 0.50 合计 Total 100.00 预混料可为每千克饲粮提供The premix provides the following per kg of diet：VA 7 715 IU，VD3 2 755 IU，VE 8.8 IU，VK 2.2 mg，VB12 0.01 mg，VB2 4.41 mg，VB3 5.51 mg，VB 0.55 mg，烟酸 nicotinic acid 19.8 mg，叶酸 folic acid 0.28 mg，Mn 50 mg，Fe 25 mg，Cu 2.5 mg，Zn 50 mg，I 1.0 mg。

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis)

每天09:00准时收蛋，以重复为单位准确记录产蛋数和蛋重。每周末定时结料、称重，统计各重复的实际耗料量。根据饲养试验记录，整理统计各试验组产蛋率、平均蛋重(各重复所有鸡蛋的平均重量)、平均日产蛋重(每只鸡每日的平均产蛋重)、平均日采食量(每只鸡每日的平均采食量)和料蛋比。 1.4.2 蛋品质

试验期第28天，每个重复取8枚蛋，每个组共48枚，测量纵径、横径、蛋壳厚度(为鸡蛋大头、小头和中间的平均值)和蛋壳强度，然后剖离鸡蛋，用吸水纸拭去蛋壳上黏附的蛋清，称蛋壳重，用多功能蛋品质测定仪测定蛋白高度和蛋黄颜色，用蛋黄分离器分离出完整的蛋黄，用吸水纸拭去蛋黄上黏附的蛋清，称蛋黄重。测定仪器包括电子数显卡尺(广陆数字测控股份有限公司)、蛋壳厚度测定仪(以色列ORKA公司)、蛋壳强度测定仪(以色列ORKA公司)和多功能蛋品质测定仪(以色列ORKA公司)。哈氏单位(haugh unit)计算公式为：

哈氏单位＝100×lg(H-1.7W^0.37+7.6)。

式中：H为蛋白高度(mm)；W为蛋重(g)。 1.4.3 蛋硒含量测定及方法

利用氢化物-原子荧光光谱法(参照GB 5009.93—2010)测定饲粮和蛋中硒含量。取每次配制好的各组饲粮少许，混合均匀后粉碎备用；参照Pan等^[4]的方法处理蛋样品，称重去壳后，将蛋液在冰冷条件下匀浆后备用。

精确称取上述准备好的样品各2 g左右，分别放入250 mL具塞的三角瓶，然后加入10.0 mL高氯酸与硝酸的混酸(体积比为1 ∶ 9)及几粒玻璃珠，盖上塞子，冷消化过夜。次日于电热板上加热消化(消化温度不超过180 ℃)，并及时补加混合酸。当溶液变为清亮无色并伴有白烟出现时，再继续加热至体积剩余2 mL左右，切不可蒸干。冷却，再加入6 mol/L盐酸5 mL，继续加热至溶液变为清亮无色并伴有白烟出现。冷却，转移至50 mL容量瓶中定容，混匀备用。取一定量试样消化液转移到25 mL容量瓶中，加1 mL的10%(质量体积分数)的铁氰化钾溶液，用3 mol/L的盐酸溶液定容，同时用超纯水、试剂和硒标准参照物(GBW8551)作空白对照和标准样品对照，利用原子荧光光谱仪测定样品硒含量。 1.5 统计分析

数据经Excel 2003整理后，用SPSS 15.0统计软件进行分析，单因素方差分析(one-way ANOVA)检测组间差异显著性。P<0.05表示差异显著。 2 结 果 2.1 酵母硒和亚硒酸钠对蛋鸡生产性能的影响

由表2可知，与对照组相比较，饲粮中添加0.30 mg/kg硒的亚硒酸钠以及0.10、0.20和0.3 mg/kg硒的酵母硒对海兰褐蛋鸡产蛋率、平均蛋重、平均日产蛋重、平均日采食量和料蛋比影响均不显著(P>0.05)。试验全期未见鸡只出现不适状况。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 酵母硒和亚硒酸钠对蛋鸡生产性能的影响 Table 2 Effects of selenium yeast and sodium selenite on performance of laying hens 项目 Items 对照 Control 来自亚硒酸钠的 硒添加水平 Selenium supplemental level from sodium selenite/(mg/kg) 0.30 来自酵母硒的硒添加水平 Selenium supplemental level from selenium yeast/(mg/kg) SEM P值 P-value 0.10 0.20 0.30 产蛋率 Laying rate/% 93.60 93.70 94.00 94.35 92.61 0.477 0.850 平均蛋重 Average egg weight/g 60.98 60.46 61.10 61.07 59.86 0.186 0.162 平均日产蛋重 Average daily egg weight/(g/只) 57.08 56.60 57.43 57.62 55.43 0.341 0.276 平均日采食量 Average daily feed intake/(g/只) 119.22 119.91 119.91 119.73 119.63 0.201 0.792 料蛋比 The ratio of feed to egg 2.09 2.12 2.09 2.08 2.17 0.014 0.284 同行数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著(P>0.05)，不同字母表示差异显著(P<0.05)。下表同。 In the same row,values with the same or no letter superscripts means no significant difference (P>0.05),while with different letter superscripts means significant difference (P<0.05). The same as below.

表2 酵母硒和亚硒酸钠对蛋鸡生产性能的影响 Table 2 Effects of selenium yeast and sodium selenite on performance of laying hens

由表3可知，与对照组相比，饲粮中添加0.30 mg/kg硒的亚硒酸钠以及0.10、0.20和0.30 mg/kg硒的酵母硒对试验期第28天海兰褐蛋鸡常规蛋品质无显著影响(P>0.05)。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 酵母硒和亚硒酸钠对蛋鸡常规蛋品质的影响 Table 3 Effects of selenium yeast and sodium selenite on egg quality of laying hens 项目 Items 对照 Control 来自亚硒酸钠的 硒添加水平 Selenium supplemental level from sodium selenite/(mg/kg) 0.30 来自酵母硒的硒添加水平 Selenium supplemental level from selenium yeast/(mg/kg) SEM P值 P-value 0.10 0.20 0.30 蛋壳比例 Eggshell percentage/% 10.18 10.01 10.50 10.56 10.72 0.092 0.097 蛋黄比例 Yolk percentage/% 23.93 23.10 23.17 23.18 22.82 0.167 0.306 蛋白比例 Albumen percentage/% 65.89 66.88 66.33 66.26 66.46 0.178 0.536 蛋壳强度 Eggshell strength/(kg/cm2) 4.53 4.20 4.22 3.95 3.89 0.091 0.192 蛋形指数 Shape index/% 1.28 1.29 1.30 1.28 1.29 0.004 0.768 蛋壳厚度 Shell thickness/mm 0.326 0.332 0.311 0.328 0.324 0.004 0.439 蛋黄颜色 Yolk color 7.08 7.64 7.25 7.75 7.27 0.095 0.125 蛋白高度 Albumen height/mm 6.77 7.10 6.93 6.97 6.22 0.139 0.333 哈氏单位 Haugh unit 81.15 83.27 82.52 82.80 77.31 0.959 0.309 蛋壳颜色 Eggshell color 亮度 L 57.06 55.89 57.81 58.54 56.85 0.347 0.162 红度 a 18.38 19.00 18.11 17.64 18.41 0.180 0.209 黄度 b 28.18 29.20 28.93 27.89 29.14 0.285 0.483

表3 酵母硒和亚硒酸钠对蛋鸡常规蛋品质的影响 Table 3 Effects of selenium yeast and sodium selenite on egg quality of laying hens

由表4可知，试验期第28天，亚硒酸钠组和酵母硒组蛋硒含量均显著高于对照组(P<0.05)；酵母硒组蛋硒含量均显著高于亚硒酸钠组(P<0.05)，并随酵母硒添加量的增加显著增加(P<0.05)；0.10 mg/kg硒的酵母硒组蛋硒含量显著高于0.30 mg/kg硒的亚硒酸钠组(P<0.05)。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 酵母硒和亚硒酸钠对蛋硒含量的影响 Table 4 Effect of selenium yeast and sodium selenite on selenium content of egg μg/kg 项目 Items 对照 Control 来自亚硒酸钠的 硒添加水平 Selenium supplemental level from sodium selenite/(mg/kg) 0.30 来自酵母硒的硒添加水平 Selenium supplemental level from selenium yeast/(mg/kg) SEM P值 P-value 0.10 0.20 0.30 蛋硒含量 Egg selenium content 249.58e 280.63d 302.64c 406.35b 459.10a 22.462 0.000

表4 酵母硒和亚硒酸钠对蛋硒含量的影响 Table 4 Effect of selenium yeast and sodium selenite on selenium content of egg

微量元素硒是一些重要抗氧化酶和含硒蛋白的必需组成部分，能够清理体内活性氧化物质，具有抗氧化、抗应激、提高机体免疫力等生物学功能。李家奎等^[6]在70周龄产蛋率60%的伊莎蛋鸡饲粮中分别添加0.70 mg/kg硒的亚硒酸钠和富硒麦芽，发现硒对试验蛋鸡生产性能无显著影响。Leeson等^[5]在48周龄白来航蛋鸡饲粮中添加0.30 mg/kg硒的3种不同硒源，发现不同硒源对产蛋率无显著影响。胡华锋等^[7]在50周龄罗曼蛋鸡饲粮中分别添加0.951和0.943 mg/kg硒的亚硒酸钠和酵母硒，发现酵母硒可显著提高产蛋率，而对日产蛋量和料蛋比无显著影响。Pan等^[4]在58周龄产蛋率86%的罗曼蛋鸡饲粮中分别添加0.2、0.5和1.0 mg/kg的富硒益生菌，发现富硒益生菌均能显著增加蛋鸡产蛋率、日均产蛋重和平均蛋重，降低料蛋比，但该研究者分析认为产蛋性能主要受益生菌的影响而不是硒。本研究认为，蛋鸡的品种、日龄、基础饲粮中硒的含量以及硒源类型是影响产蛋性能的主要因素。以上研究均以产蛋后期蛋鸡为试验动物，品种、日龄和硒源对产蛋性能影响结果差别较大，这可能由于不同品种和日龄蛋鸡机体抗氧化防御系统的可调控性差别较大造成的，产蛋前及产蛋高峰蛋鸡机体免疫力比产蛋后期蛋鸡强，抗氧化系统的可调控程度相对较低。本研究发现，在饲粮中添加亚硒酸钠和不同水平酵母硒对试验期蛋鸡生产性能无显著影响，这可能由于本研究选用海兰褐蛋鸡日龄远小于以上报道中的蛋鸡日龄，其处在产蛋高峰期，产蛋性能的可调控程度相对较低，产蛋率受硒的影响较小。 3.2 酵母硒和亚硒酸钠对蛋鸡蛋品质的影响

硒是谷胱甘肽过氧化物酶活性中心的必需组成成分，通过含硒酶或硒蛋白调节机体的抗氧化能力，在机体抗氧化防御系统中发挥重要作用。有研究报道在饲粮中添加硒能提高储存鸡蛋的哈氏单位和谷胱甘肽过氧化物酶活性。Arnold等^[8]发现饲粮中添加0.4 mg/kg硒的亚硒酸钠对鸡蛋哈氏单位无显著影响。Patton^[9]发现饲粮中分别添加0.3 mg/kg硒的亚硒酸钠和酵母硒对新鲜鸡蛋和储存21或42 d鸡蛋的哈氏单位均无显著影响。Pan等^[4]研究发现富硒益生菌对新鲜鸡蛋的蛋品质无显著影响，但能减慢储存6 d后鸡蛋哈氏单位的降低速度。Payne等^[10]也发现饲粮中添加酵母硒能减慢储存鸡蛋哈氏单位的降低速度，维持储存鸡蛋的蛋白品质。本研究发现在饲粮中添加亚硒酸钠和不同水平酵母硒对试验期第28天蛋鸡蛋品质无显著影响。这可能是由于本研究选用的海兰褐蛋鸡处在产蛋高峰期，机体免疫力和抗氧化能力较强，鸡蛋哈氏单位较高，对照组蛋鸡鸡蛋哈氏单位为81.15，受硒的可调控程度相对较低，在饲粮中添加硒后，鸡蛋谷胱甘肽过氧化物酶活性可能有所增加，并不能改善常规蛋品质指标。 3.3 酵母硒和亚硒酸钠对蛋硒含量的影响

微量元素硒具有抗氧化、抗应激、抗癌和提高机体免疫力等生物学功能，人和动物体内硒主要来源于食物，鸡蛋是人类膳食的主要来源之一，因此通过在蛋鸡饲粮中添加硒调控蛋硒含量具有重要意义。Pan等^[4]研究发现蛋硒含量随着富硒益生菌添加量的增加显著增加。Leeson等^[5]在48周龄白来航蛋鸡饲粮中添加0.30 mg/kg硒的3种不同硒源，发现无机硒或酵母硒均能显著提高蛋硒含量。本研究结果与以上结果一致，即饲粮添加硒能显著提高蛋硒含量，添加有机硒较无机硒显著提高蛋硒含量，且蛋硒含量随着硒添加量的增加而增加。在饲粮中分别添加0.30 mg/kg硒的酵母硒和亚硒酸钠，酵母硒组的蛋硒含量是亚硒酸钠组的1.64倍，酵母硒比亚硒酸钠的硒转化率更高。0.10 mg/kg硒的酵母硒组蛋硒含量显著高于0.30 mg/kg硒的亚硒酸钠组，说明在蛋鸡饲粮中添加0.10 mg/kg硒的酵母硒即可满足饲粮中的硒向鸡蛋中沉积。与亚硒酸钠相比，在饲粮中添加酵母硒能有效的增加蛋硒含量，通过在饲粮中添加酵母硒调控蛋硒含量，生产符合人体健康的功能性鸡蛋具有重要的意义。 4 结 论

① 相对于亚硒酸钠，蛋鸡对酵母硒吸收和向鸡蛋中的转移效率更高。

② 饲粮添加硒能显著提高蛋硒含量，且蛋硒含量随着酵母硒添加量的增加而增加。

③ 饲粮中添加0.10~0.30 mg/kg硒的酵母硒对蛋鸡生产性能和蛋品质无不良影响。