饲粮中使用抗生素添加剂能够提高畜禽生产性能，增加养殖效益，但是由于药物残留及抗药性等问题，对人类和动物健康造成的危害日益严重。研究安全有效的添加剂，是发展高效、低耗、污染少养殖业的必然趋势。葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD)是一种脱氢氧化酶，催化肠道内葡萄糖分解产生过氧化氢和葡萄糖酸^[1]，反应过程中消耗胃肠道内的氧，为消化道内有益厌氧微生物(如乳酸杆菌、双歧杆菌等)提供生存环境，同时产生的过氧化氢能够抑制大肠杆菌、沙门氏菌等有害微生物，从而调整肠道微生物菌群结构^{[2, 3, 4, 5, 6]}。大量研究表明，葡萄糖氧化代谢产生的葡萄糖酸能够降低肠道pH，偏酸的环境有利于肠道内各种消化酶保持活性，易于养分的消化吸收^{[7, 8]}，因此GOD能够起到类似于抗生素、益生菌和酸化剂的作用。《饲料添加剂品种目录(2013)》将GOD列为饲用酶制剂允许在饲料中使用。硒是机体不可缺少的一种微量元素，是构成谷胱甘肽氧化物酶(GSH-Px)的主要成分，GSH-Px催化还原型谷胱甘肽(GSH)变为氧化型谷胱甘肽(GSSG)，且能够催化过氧化氢(H₂O₂)分解为水(H₂O)，发挥抗氧化作用，进而保护机体细胞及组织免受过氧化物的损伤^[9]，具有提高动物机体免疫力、促进生长和改善肉品质等作用^[10]。酵母硒是在酵母发酵过程中通过富集高含量的无机硒而形成的一类有机硒，除具备硒元素特有的功能外，同时具有生物安全高、环保和易吸收等特点^[11]，作为饲料中一种优质的有机硒源，在国外尤其是发达国家，应用已久^[12]。研究表明，酵母硒可以改善畜禽生产性能^[13]，增强机体抗氧化能力^{[14, 15]}，提高机体免疫能力^{[16, 17]}。由此可见，GOD和酵母硒均有促进动物机体消化吸收，提高免疫功能的作用。在规模化养殖条件下，GOD和酵母硒联合使用，是否影响肉鸡生产性能及免疫器官的发育，是否影响血清相关指标，尚未见报道。本试验在规模化肉鸡养殖场的配合饲料中使用GOD和酵母硒混合添加剂，测定生产性能及免疫器官发育，为标准化养殖条件下混合添加剂的应用提供数据支持。 1 材料与方法 1.1 试验材料

混合添加剂在饲粮中的添加量为0.2%，其中有效成分为β-D-GOD(活性为30 U/g)、酵母硒(200 mg/kg，其中硒含量为2 000 mg/kg)，其他为载体稻壳粉。 1.2 试验动物及饲粮

试验动物选用1日龄爱拔益加(AA)肉鸡，参照NRC(1994)肉鸡营养需要配制饲粮，基础饲粮组成及营养水平见表1。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis) % 项目 Items 含量 Content 1~21 d 22~42 d 原料 Ingredients 玉米 Corn 60.50 64.10 豆粕 Soybean meal 34.35 29.95 大豆油 Soybean oil 1.00 2.00 石粉 Limestone 1.15 1.11 磷酸氢钙 CaHPO4 1.41 1.31 赖氨酸 Lys·HCl 0.09 0.10 DL-蛋氨酸 DL-Met 0.22 0.14 氯化胆碱 Choline chloride 0.06 0.06 食盐 NaCl 0.22 0.23 预混料 Premix1) 1.00 1.00 合计 Total 100.00 100.00 营养水平 Nutrients levels2) 代谢能 ME/(MJ/kg) 12.13 12.50 粗蛋白质 CP 21.15 19.22 钙 Ca 0.93 0.88 硒 Se/(mg/kg) 0.22 0.22 有效磷 AP 0.39 0.37 赖氨酸 Lys 1.30 1.16 蛋氨酸 Met 0.68 0.49 蛋氨酸+半胱氨酸 Met+Cys 1.01 0.73 1)预混料为每千克饲粮提供The premix provided the following per kg of diets：VA 5 490 IU，VE 76.0 IU，VB1 9.9 mg，VD 9 900 IU，VB2 28.9 mg，VK3 18.5 mg，VB6 19.7 mg，VB12 0.1 mg，D-泛酸 D-pantothenic acid 58.7 mg，生物素 biotin 2.5 mg，烟酸 nicotinic acid 195.0 mg，叶酸 folic acid 4.9 mg，Fe 39.0 mg，Cu 4.0 mg，Zn 37.5 mg，Mn 49.0 mg，Se 0.2 mg，I 0.2 mg。 2)代谢能为计算值，其余为实测值。ME was a calculated value,while the others were measured values.

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis)

本试验在北京市平谷区某规模化肉鸡养殖场进行。选择1日龄AA肉鸡5 000只，随机分为2个组，分别为对照(CT)组和试验(EM)组，每个组4个重复，每个重复625只鸡。养殖方式为网上平养。对照组饲喂基础饲粮，试验组饲喂基础饲粮+0.2%的GOD和酵母硒混合添加剂。试验期为42 d，1～21 d为试验前期，22～42 d为试验后期。所有肉鸡饲养管理条件一致，自由采食和饮水，24 h光照。1日龄雏鸡温度控制在34～35 ℃，之后每周下降2～3 ℃，至35日龄时鸡舍内温度为21 ℃；相对湿度控制在55%～65%。按照常规程序进行免疫接种。 1.4 测定指标和方法 1.4.1 生产性能测定

每天记录鸡群死淘只数。分别在肉鸡21和42日龄，每个重复随机选取30只鸡，进行个体空腹称重(停料12 h、不停水)，记录采食量，计算各组肉鸡的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)和死亡率。 1.4.2 血清指标测定

肉鸡21和42日龄时，每个重复随机取5只鸡，翅静脉采血，3 000 r/min离心15 min，分离血清，-20 ℃冰箱保存待测。全自动生化分析仪(日立，7100)测定血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮含量。 1.4.3 屠宰性能测定

分别在肉鸡21和42日龄时，每个重复随机取5只鸡开展屠宰试验，参考文献^[18]中描述的方法，测定并计算肉鸡屠宰率、半净膛率、全净膛率和腹脂率。取脾脏、胸腺、法氏囊，去除附着组织并用滤纸吸干血水，电子天平称重，计算免疫器官指数。 1.5 数据处理

试验数据以“平均值±标准差”表示。数据采用SAS 9.2统计软件中ANOVA程序进行单因素方差分析和Duncan氏法多重比较，以P＜0.05为显著水平。 2 结 果 2.1 混合添加剂对肉鸡生产性能和屠宰性能的影响

肉鸡的生产性能指标列于表2。在1～21日龄，试验组肉鸡的ADFI、ADG高于对照组2.58%和1.67%(P＜0.05)，F/G低于对照组3.36%(P＜0.05)。在22～42日龄，试验组肉鸡的ADFI、ADG分别比对照组高了1.55%和6.93%(P＜0.05)，同时F/G降低了5.13%(P＜0.05)。在肉鸡生长全期(1～42日龄)，试验组的ADFI、ADG高于对照组1.83%和6.66%(P＜0.05)，F/G低于对照组4.44%(P＜0.05)。在1～21日龄和22～42日龄时，试验组死亡率低于对照组，但统计上差异不显著(P＞0.05)。在肉鸡生长全期试验组死亡率显著降低(P＜0.05)。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 混合添加剂对肉鸡生产性能的影响 Table 2 Effects of compound additive on performance of broilers 日龄 Days of age/d 组别 Group 平均日采食量 ADFI/g 平均日增重 ADG/g 料重比 F/G 死亡率 Mortality/% 1～21 对照组 CT group 57.86±0.46b 38.83±0.36b 1.49±0.10a 1.57±0.50a 试验组 EM group 59.35±0.13a 41.18±0.33a 1.44±0.01b 1.00±0.28a 22～42 对照组 CT group 155.46±0.85b 79.81±0.63b 1.95±0.01a 2.34±0.51a 试验组 EM group 157.87±1.21a 85.34±1.08a 1.85±0.01b 1.63±0.78a 1～42 对照组 CT group 106.66±0.51b 59.32±0.27b 1.80±0.02a 3.90±0.74a 试验组 EM group 108.61±0.63a 63.27±0.43a 1.72±0.02b 2.64±0.60b 同列数据肩标有不同字母者表示差异显著(P＜0.05)，标有相同字母差异不显著(P＞0.05)。下表同。 In the same column,values with different small letter superscripts mean significant difference (P＜0.05),while with same small letter superscripts mean no significant difference (P＞0.05). The same as below．

表2 混合添加剂对肉鸡生产性能的影响 Table 2 Effects of compound additive on performance of broilers

由表3可知，肉鸡21日龄，试验组屠宰率、全净膛率和半净膛率显著高于对照组(P＜0.05)，分别提高2.35%、4.11%和3.23%；在肉鸡42日龄屠宰时，试验组各项指标与对照组无显著差异(P＞0.05)。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 混合添加剂对肉鸡屠宰性能的影响 Table 3 Effects of compound additive on slaughter performance of broilers % 日龄 Days of age/d 组别 Group 屠宰率 Slaughter rate 全净膛率 Eviscerated percentage 半净膛率 Seml-eviscerated percentage 腹脂率 Abdominal fat rate 21 对照组 CT group 88.60±0.24b 66.91±0.54b 81.32±0.71b 1.67±0.13a 试验组 EM group 90.68±0.63a 69.66±0.55a 83.95±0.80a 1.89±0.18a 42 对照组 CT group 89.10±0.60a 71.84±1.12a 83.25±0.94a 2.46±0.15a 试验组 EM group 88.62±0.68a 72.45±0.55a 83.86±0.95a 2.13±0.23a

表3 混合添加剂对肉鸡屠宰性能的影响 Table 3 Effects of compound additive on slaughter performance of broilers

由表4可知，21日龄时，试验组肉鸡法氏囊指数显著高于对照组(P＜0.05)，脾脏指数和胸腺指数虽有提高，但未达显著水平(P＞0.05)；42日龄时，试验组肉鸡的胸腺指数显著高于对照组(P＜0.05)，其余指数在2组之间无显著差异(P＞0.05)。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 混合添加剂对肉鸡免疫器官指数的影响 Table 4 Effects of compound additive on immune organ index of broilers % 日龄 Days of age/d 组别 Group 脾脏指数 Spleen index 法氏囊指数 Bursa index 胸腺指数 Thymus index 21 对照组 CT group 0.76±0.03a 1.34±0.11b 3.41±0.26a 试验组 EM group 0.80±0.06a 1.49±0.05a 3.55±0.14a 42 对照组 CT group 0.98±0.05a 0.34±0.02a 1.33±0.16b 试验组 EM group 1.03±0.08a 0.31±0.03a 1.92±0.19a

表4 混合添加剂对肉鸡免疫器官指数的影响 Table 4 Effects of compound additive on immune organ index of broilers

由表5可知，在21日龄时，与对照组相比，试验组肉鸡血清总蛋白含量提高了6.36%(P＜0.05)，白蛋白、球蛋白含量没有显著变化(P＞0.05)；在42日龄时，试验组肉鸡血清球蛋白含量高于对照组8.50%(P＜0.05)，总蛋白、白蛋白含量无显著变化(P＞0.05)。21、42日龄试验组肉鸡血清尿素氮含量显著低于对照组(P＜0.05)。

表5

Table 5

表5(Table 5)

表5 混合添加剂对肉鸡血清生化指标的影响 Table 5 Effects of compound additive on serum biochemical parameters of broilers 日龄 Days of age/d 组别 Group 总蛋白 Total protein/ (g/L) 白蛋白 Albumin/ (g/L) 球蛋白 Globulin/ (g/L) 尿素氮 Urea nitrogen/ (mmol/L) 21 对照组 CT group 26.70±0.80b 14.20±0.70a 12.40±0.40a 0.32±0.03a 试验组 EM group 28.40±1.10a 14.50±1.10a 12.80±1.20a 0.27±0.03b 42 对照组 CT group 29.10±1.30a 14.00±0.60a 15.30±0.50b 0.19±0.02a 试验组 EM group 31.90±2.70a 13.90±1.00a 16.60±0.70a 0.11±0.01b

表5 混合添加剂对肉鸡血清生化指标的影响 Table 5 Effects of compound additive on serum biochemical parameters of broilers

家禽的生产性能受品种、营养、环境等诸多因素的影响。规模化肉鸡养殖场为了提高效益，往往在饲粮中使用多种添加剂，比如抗生素、抗氧化剂、酸化剂、多种复合酶等，这些添加剂的作用效果是否具有累加效应或拮抗作用，相关研究报道较少。本试验选择以GOD和酵母硒为主要成分的混合添加剂，在规模化肉鸡场开展试验，结果表明，混合添加剂显著提高肉鸡ADFI和ADG，显著降低F/G与死亡率。有研究发现，饲粮中加入0.2%的GOD，35日龄肉鸡采食量显著提高，增重率和成活率分别比对照组提高6.23%和3.5%^[19]。在玉米-豆粕基础饲粮中添加0.15 mg/kg的酵母硒，岭南黄羽肉鸡平均日增重和饲料转化率分别提高了17.86%和16.19%^[20]。本试验将GOD与酵母硒联合使用，当混合制剂添加量为0.2%时，肉鸡ADG提高了6.66%，F/G降低了4.44%，成活率增加了32.31%，这与本实验室前期研究结果相一致^[21]。与前人研究结果相比，混合添加剂改善成活率的效果比单独添加GOD要高，表明酵母硒与GOD的联合使用，具有改善肉鸡健康水平的作用。本试验屠宰数据显示，混合添加剂可以显著提高21日龄肉鸡的屠宰率、全净膛率和半净膛率，这与二者的特性有关。GOD可以消耗肠道内的氧，产生葡萄糖酸及H₂O₂，调节肠道微生态平衡^[5]，改善肠道形态^[22]，提高消化酶的活性^[23]，提高养分利用率^{[24, 25]}。酵母硒具有使过氧化物变成羟基化物的作用，保护动物细胞及其组织不被过氧化物损伤^[9]。GOD与酵母硒联合使用，能够改善肉鸡生产性能，同时提高屠宰性能。 3.2 混合添加剂对肉鸡免疫器官指数和免疫球蛋白含量的影响

动物免疫功能的高低取决于免疫器官的发育状态及机能的强弱。一般用胸腺、脾脏和法氏囊的相对重量来评价雏鸡的免疫状态^[26]，并认为免疫器官重量降低为免疫抑制所致，反之则为免疫增强、生长发育快^[27]。免疫器官迅速成熟，可使肉鸡机体免疫机能增加，抵抗各种病原微生物感染的能力和抵抗各种应激的能力得到提高^[28]。免疫球蛋白是一种抗体蛋白，主要由单核巨噬细胞产生，当机体循环抗体含量增加时，血清中球蛋白水平升高，从而提高动物机体抵抗不良环境和疾病的能力^[29]。GOD具有抗氧化作用，可以清除自由基，保护肠道上皮细胞的完整性，降低大肠杆菌、沙门氏菌等感染畜禽的机会，达到防御病原菌侵袭的目的^[30]。有研究表明，金水乌鸡饲粮添加GOD可以极显著降低球虫引发的疾病和死亡率^[31]；蛋鸡饲粮添加0.1%～0.4%的GOD可以提高血清中球蛋白含量^[32]。有研究报道，酵母硒可以显著提高仔猪^[10]、柴鸡^[33]血清中球蛋白含量，提高机体免疫力。孙春阳等^[21]研究表明，饲粮中添加0.2%的GOD和酵母硒混合添加剂可以提高肉鸡抗氧化酶活性，有效降低肉鸡血清中丙二醛(MDA)含量，即降低了机体脂质过氧化程度，改善动物机体的抗氧化应激能力，提高机体免疫力。本试验结果进一步证实，含有GOD与酵母硒的混合添加剂对肉鸡免疫器官的发育有促进作用，可显著提高肉鸡血清免疫球蛋白含量，这与前人研究结果基本一致。 3.3 混合添加剂对血清中总蛋白和尿素氮含量的影响

尿素氮是机体内氨基酸分解代谢的终产物之一，其含量是反映机体蛋白质代谢的重要指标^[34]，血清总蛋白包括白蛋白和球蛋白，其含量在一定程度上反映机体蛋白质的吸收和代谢情况，其含量增加是肝脏合成蛋白质能力加强的表现，有利于机体生长和提高饲料转化率^[35]。白蛋白是血清含量最多的蛋白质，占总蛋白含量的50%以上，具有增加抗体，提高免疫力等作用^[36]。

研究发现，饲粮中添加0.4%GOD可以显著提高蛋鸡血清中总蛋白含量，添加0.1%和0.4%的GOD能显著提高蛋鸡血清中白蛋白含量^[3]。饲粮中添加0.3、0.5和1.0 mg/kg的酵母硒能显著提高柴鸡血清中总蛋白含量，具有提高白蛋白含量的趋势，并随着酵母硒含量的增加呈上升趋势^[37]。本试验结果表明，饲粮中添加GOD和酵母硒混合添加剂能显著提高肉鸡21日龄血清总蛋白含量；显著降低21和42日龄血清尿素氮含量。这与前人的研究结果基本一致，说明GOD和酵母硒混合添加剂，可提高肝脏代谢功能，改善饲粮中营养物质的吸收及蛋白质与氨基酸的利用率，蛋白质合成代谢增强，有利于动物机体的正常生长发育^[3]。 4 结 论

饲粮中添加GOD和酵母硒混合添加剂能够提高肉鸡生产性能，降低死亡率，提高免疫器官指数，降低血清尿素氮含量。