磷是蛋禽必需的常量矿物元素，可维持机体渗透压及酸碱平衡，与机体钙、磷代谢及蛋壳形成密切相关^{[1, 2]}。目前关于蛋鸭磷需要量的研究很少，研究报道主要集中肉鸭上^[3]，如NRC^[4](1994)推荐了鸭磷需要量，是根据北京鸭、番鸭等研究结果制定，数据陈旧。而《肉鸭饲养标准(2012)》^[5]中推荐番鸭种鸭产蛋期总磷需要量为0.60%，非植酸磷需要量为0.38%。山麻鸭属于蛋用品种，不适应于上述标准。若饲粮中磷不足会导致蛋鸭产蛋性能下降；而磷过量则影响钙的沉积与蛋壳的形成^[6]，生产中则会增加饲料成本，加剧环境污染，使得研究蛋鸭非植酸磷需要量尤为重要。因此，本试验通过研究不同非植酸磷水平对蛋鸭产蛋性能、蛋品质和胫骨指标的影响，以获得蛋鸭非植酸磷需要量参数，为制定蛋鸭饲养标准提供科学依据。

本试验在广东省农业科学院动物科学研究所花都蛋鸭试验基地进行。选择健康、采食正常、体重接近的即将进入产蛋高峰期(120日龄)的山麻鸭900羽，随机分为6个组，每组设6个重复，每个重复25羽，采用单因子完全随机设计。地面平养(水域面积 ∶ 陆地面积1 ∶ 3)，试验期间每天记录07：00、14：00和20：00的温度、湿度及天气情况。

采用玉米-豆粕型饲粮，饲粮中非植酸磷设6个水平，分别为0.20%、0.25%、0.30%、0.35%、 0.40%、0.45%，所有试验组钙水平均固定为 3.60%，饲料中的非植酸水平通过调整磷酸氢钙比例来满足，试验饲粮组成及营养水平见表1。试验饲粮中代谢能、粗蛋白质、钙和氨基酸的设定水平均参照本课题组前期研究结果^{[7, 8]}。试验前预饲1周，试验期共11个月。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 试验饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) % 项目Items 非植酸磷水平 Non-phytin phosphorus level/% 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.35 原料 Ingredients 玉米 Corn 54.18 54.18 54.18 54.18 54.18 54.18 大豆粕 Soybean meal 25.92 25.92 25.92 25.92 25.92 25.92 小麦麸 Wheat bran 8.34 8.34 8.34 8.34 8.34 8.34 磷酸氢钙 CaHPO4 0.41 0.71 1.01 1.32 1.62 1.92 石粉 Limestone 8.97 8.80 8.63 8.47 8.30 8.13 DL-蛋氨酸 DL-Met 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 L-赖氨酸盐酸盐 L-Lys·HCl 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 食盐 NaCl 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 预混料 Premix1) 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 沸石粉 Zeolite power 0.68 0.54 0.41 0.27 0.14 0.00 合计 Total 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 营养水平 Nutrient levels2) 代谢能 ME/(MJ/kg) 10.46 10.46 10.46 10.46 10.46 10.46 粗蛋白质 CP 17.00 17.00 17.00 17.00 17.00 17.00 钙 Ca 3.60 3.60 3.60 3.60 3.60 3.60 总磷 TP 0.45 0.50 0.55 0.60 0.65 0.70 非植酸磷 NPP 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 赖氨酸 Lys 0.87 0.87 0.87 0.87 0.87 0.87 蛋氨酸 Met 0.42 0.42 0.42 0.42 0.42 0.42 蛋氨酸+半胱氨酸 Met+Cys 0.69 0.69 0.69 0.69 0.69 0.69 色氨酸 Trp 0.19 0.19 0.19 0.19 0.19 0.19 苏氨酸 Thr 0.63 0.63 0.63 0.63 0.63 0.63 异亮氨酸 Ile 0.68 0.68 0.68 0.68 0.68 0.68 亮氨酸 Leu 1.43 1.43 1.43 1.43 1.43 1.43 精氨酸 Arg 1.14 1.14 1.14 1.14 1.14 1.14 缬氨酸 Val 0.78 0.78 0.78 0.78 0.78 0.78 组氨酸 His 0.44 0.44 0.44 0.44 0.44 0.44 粗纤维 CF 2.94 2.94 2.94 2.94 2.94 2.94 蛋能比 Egg/energy/(g/MJ) 16.25 16.25 16.25 16.25 16.25 16.25 1)预混料为每千克饲粮提供The premix provided the following per kg of diets：VA 12 000 IU，VB1 3.0 mg，VB2 9.6 mg，VB5 40 mg，VB6 6.0 mg，VB12 0.03 mg，VD3 1 800 IU，VE 26 IU，VK3 1.0 mg，氯化胆碱 choline chloride 500 mg，生物素 biotin 0.15 mg，叶酸 folic acid 0.6 mg，泛酸钙 calcium pantothenate 28.5 mg，烟酸 nicotinic acid 25 mg，抗氧化剂 antioxidant 100 mg，Cu (as copper sulfate) 10 mg，Fe (as ferrous sulfate) 50 mg，Mn (as manganese sulfate) 90 mg，Zn (as zinc sulfate) 90 mg，I (as potassium iodide) 0.5 mg，Se (as sodium selenite) 0.4 mg。 2)营养水平为实测原料成分后的计算值。All nutrient levels were calculated values according to the measured feed nutrient.

表1 试验饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis)

试验期间每天07：00和16：00各喂料1次，所有试验鸭在正常情况下采食量保持基本一致，准确记录给料量和剩料量。准确记录试验鸭每日产蛋数量、蛋重、破蛋数、畸形蛋数量和重量[蛋过小，形状不规则，蛋壳异常(软壳蛋、螺纹、麻壳、砂壳等)]，统计平均日采食量、产蛋率、平均蛋重、日产蛋重、料蛋比、破蛋率、畸形蛋率。

于产蛋高峰期每月采1次蛋样，从每个重复栏中各取4枚蛋(接近平均重)做好标记，用于测定蛋形指数、蛋壳强度、蛋壳厚度和蛋壳比例。蛋形指数用数显游标卡尺量出其纵径和横径，纵径/横径计算值即为蛋形指数；蛋壳强度由蛋壳强度测定仪(SN:EF0451 2011型，ORKA食品技术公司，以色列)测定；蛋壳厚度用数显千分尺测定蛋钝端、中端和锐端计算平均值，测定在48 h内完成。

取左侧胫骨去除肌肉和筋腱，称重，立即使用游标卡尺测量胫骨长度和胫骨内外径(胫骨管围)，测定骨密度和胫骨折断力。采用骨密度仪(BMD-1000B)测定胫骨密度和骨矿盐含量。利用Instron4411型材料力学测定仪测定胫骨折断力。将测量胫骨折断力后的胫骨用滤纸包好后，置入无水乙醇中浸泡24 h脱水，继用乙醚抽提24 h脱脂，采用马沸炉550~600 ℃灰化24 h制得胫骨灰分(GB/T 6438—9)，乙二胺四乙酸二钠(EDTA)直接容量法测定胫骨钙含量(GB/T 6436—92)，磷钼酸铵比色法测定胫骨磷的含量(GB/T 6437—92)。

于试验结束前1 d，在每个重复中选取2只接近平均体重的试验鸭，翅静脉采血5 mL，待静置后3 000 r/min离心15 min，制备出血清。用Beckman全自动生化分析仪(CX5型，Beckman仪器公司，美国)测定蛋鸭血清中钙和磷含量。

试验数据采用SAS 8.1软件进行单因素方差分析，Duncan氏法进行多重比较。结果以平均值表示，显著性水平为P<0.05。对差异显著的指标，建立测定指标结果(Y为骨密度或骨矿盐含量)与饲粮非植酸磷水平(X)的回归方程。其中，二次曲线方程：Y=aX²+bX+c。当X=-b/2a时，此时为饲粮非植酸磷最适宜水平。根据Robbins等^[9]的方法，运用SAS 8.1软件的NLIN程序建立折线方程，计算饲粮适宜的非植酸磷水平。

由表2可见，饲粮非植酸磷水平对蛋鸭平均日采食量、产蛋率、平均蛋重、日产蛋重、料蛋比、破蛋率和畸形蛋率均无显著影响(P>0.05)。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 饲粮非植酸磷水平对蛋鸭产蛋性能的影响 Table 2 Effects of dietary non-phytin phosphorus level on laying performance of laying ducks 项目Items 非植酸磷水平 Non-phytin phosphorus level/% SEM P值 P-value 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 平均日采食量 Average daily feed intake/g 166.05 165.31 165.40 166.13 165.78 166.11 0.33 0.33 产蛋率 Laying rate/% 90.78 90.19 89.05 90.40 89.09 91.71 0.91 0.31 平均蛋重 Average egg weight/g 67.49 67.44 67.78 67.78 67.53 67.27 0.30 0.81 日产蛋重 Daily egg mass/(g/d) 61.26 60.83 60.36 61.26 60.16 61.69 0.61 0.48 料蛋比 Feed to egg 2.71 2.72 2.74 2.71 2.76 2.69 0.02 0.48 破蛋率 Broken egg rate/% 0.40 0.38 0.49 0.36 0.49 0.36 0.06 0.11 畸形蛋率 Abnormal egg rate/% 0.04 0.04 0.02 0.03 0.06 0.02 0.01 0.25 同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，相同或无字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。 In the same row,values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05),while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

表2 饲粮非植酸磷水平对蛋鸭产蛋性能的影响 Table 2 Effects of dietary non-phytin phosphorus level on laying performance of laying ducks

由表3可见，饲粮非植酸磷水平对蛋形指数、蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋壳重量和蛋壳比例均无显著影响(P>0.05)。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 饲粮非植酸磷水平对蛋鸭蛋品质的影响 Table 3 Effects of dietary non-phytin phosphorus level on egg quality of laying ducks 项目Items 非植酸磷水平 Non-phytin phosphorus level/% SEM P值 P-value 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 蛋形指数 Egg shape index 1.37 1.39 1.39 1.37 1.38 1.37 0.01 0.16 蛋壳强度 Eggshell strength/kgf 3.83 3.91 4.06 3.99 4.04 3.99 0.10 0.61 蛋壳厚度 Eggshell thickness/mm 0.31 0.32 0.31 0.31 0.31 0.32 0.00 0.89 蛋壳重量 Eggshell weight/g 8.21 8.13 8.45 8.34 8.00 8.03 0.12 0.10 蛋壳比例 Eggshell percentage/% 12.66 12.32 12.93 12.62 12.38 12.25 0.17 0.07

表3 饲粮非植酸磷水平对蛋鸭蛋品质的影响 Table 3 Effects of dietary non-phytin phosphorus level on egg quality of laying ducks

由表4可见，饲粮非植酸磷水平对蛋鸭的胫骨重、胫骨长度和折断力均无显著影响(P>0.05)。饲粮非植酸磷水平对骨密度和骨矿盐含量有显著影响(P<0.05)，其中0.35%组和0.40%组的骨密度显著高于0.20%组和0.25%组(P<0.05)。胫骨 骨矿盐含量随饲粮非植酸磷水平升高呈现先上升后降低的变化趋势，其中当非植酸磷水平升至0.35%以上时，骨矿盐含量显著高于0.20%组(P<0.05)。而胫骨灰分、胫骨灰分中钙和磷含量在各组间无显著差异(P>0.05)。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 饲粮非植酸磷水平对蛋鸭胫骨指标的影响 Table 4 Effects of dietary non-phytin phosphorus level on tibia indices of laying ducks 项目Items 非植酸磷水平 Non-phytin phosphorus level/% SEM P值 P-value 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 胫骨重 Tibia weight/g 4.74 4.97 5.22 5.26 5.26 5.19 0.17 0.22 胫骨长度 Tibia length/mm 92.19 92.24 92.84 94.48 94.00 94.65 1.06 0.39 折断力 Broken strength/N 197.65 188.20 189.47 213.27 195.41 197.84 5.02 0.14 骨密度 Bone density/(g/cm2) 0.27d 0.30cd 0.32bcd 0.36ab 0.38a 0.33abc 0.02 <0.01 骨矿盐含量 Bone mineral content/g 1.10b 1.19ab 1.39ab 1.50a 1.48a 1.41a 0.10 0.04 胫骨灰分 Tibia ash/% 65.22 64.95 65.51 65.70 66.37 65.70 0.61 0.67 灰分中钙含量Calcium content in ash/% 38.96 39.29 38.67 39.76 39.84 39.84 0.41 0.15 灰分中磷含量Phosphorous content in ash/% 17.25 17.44 17.48 17.60 17.49 17.56 0.15 0.67

表4 饲粮非植酸磷水平对蛋鸭胫骨指标的影响 Table 4 Effects of dietary non-phytin phosphorus level on tibia indices of laying ducks

由表5可见，饲粮非植酸磷水平对血清钙和磷含量无显著影响(P>0.05)。

表5

Table 5

表5(Table 5)

表5 饲粮非植酸磷水平对蛋鸭血清钙和磷含量的影响 Table 5 Effects of dietary non-phytin phosphorus level on serum calcium and phosphorus content of laying ducks mmol/L 项目Items 非植酸磷水平 Non-phytin phosphorus level/% SEM P值 P-value 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 钙 Calcium 2.91 2.94 2.78 2.82 2.99 2.96 0.09 0.41 磷 Phosphorus 1.63 1.73 1.78 1.98 1.92 1.82 0.13 0.46

表5 饲粮非植酸磷水平对蛋鸭血清钙和磷含量的影响 Table 5 Effects of dietary non-phytin phosphorus level on serum calcium and phosphorus content of laying ducks

由表4可知，饲粮非植酸磷水平对蛋鸭骨密度有极显著影响(P<0.01)，对骨矿盐含量有显著影响(P<0.05)。通过二次曲线和折线-直线回归模型(表6)可以得出，以骨密度为评价指标，饲粮非植酸磷的适宜需要量分别为0.38%(P>0.05)和0.35%(P>0.05)；以骨矿盐含量为评价指标，饲粮非植酸磷的适宜需要量分别为0.38%(P<0.05)和0.33%(P<0.05)。

表6

Table 6

表6(Table 6)

表6 模型估测蛋鸭饲粮非植酸磷的需要量 Table 6 Non-phytin phosphorus requirement for laying duck estimated by model 估测指标 Estimated criteria 类型 Model 曲线模型 Quadratic curve model 需要量 Requirement/% 回归方程 Regression equation P值 P-value 骨密度 Bone density/(g/cm2) 二次曲线Quadratic curve 0.38 Y=-0.062 0+2.188 6X-2.857 1X2 0.060 5 折线-直线Broken line 0.35 Y=0.36-0.57(0.35-X)，X≤0.35；Y=0.36，X>0.35 0.068 0 骨矿盐 含量 Bone mineral Content/g 二次曲线Quadratic curve 0.38 Y=-0.304 8+9.245 7X-12.000 0X2 0.013 5 折线-直线Broken line 0.33 Y=1.46-2.90(0.33-X)，X≤0.33；Y=1.46，X>0.33 0.010 8

表6 模型估测蛋鸭饲粮非植酸磷的需要量 Table 6 Non-phytin phosphorus requirement for laying duck estimated by model

本试验结果表明，饲粮非植酸磷水平对蛋鸭产蛋性能无显著影响，丁保安等^[10]也发现饲粮非植酸磷水平(0.20%、0.25%、0.30%、0.40%)对北京红鸡(蛋鸡)的产蛋性能无显著影响。同样，俞路等^[11]也获得类似结果。谢幼梅等^[12]提出高峰期海兰褐蛋鸡当产蛋性能和饲料转化率较好时钙与有效磷比例为10.3 ∶ 1。本试验中钙水平为 3.60%，非植酸磷水平为0.35%，钙与有效磷比例 为10.29 ∶ 1，平均蛋重及料蛋比均为最佳值。
3.2 饲粮非植酸磷水平对蛋鸭蛋品质的影响

在蛋壳无机物中，磷含量虽然不到1%，但是决定了蛋壳的韧性和弹性^[3]。本试验中，饲粮非植酸磷水平对蛋品质各指标均无显著影响。Annamária等^[13]研究发现，当Tetra-SL蛋鸡饲粮中非植酸磷水平由0.20%升至0.25%时，蛋壳强度显著提高。Keshavarz等^[14]研究发现，饲粮有效磷水平对产蛋母鸡的蛋壳质量无显著影响。Panda等^[15]研究发现，给28~44周龄白来航蛋鸡饲喂非植酸磷水平分别为0.15%、0.18%、0.21%、0.24%、0.27%和0.30%的饲粮时，各组之间蛋壳重、蛋壳厚度、蛋壳强度均无显著差异。

胫骨密度和骨矿物含量反映了其骨质量状况，是对磷水平较为敏感的指标，若钙磷不足，会导致蛋禽的骨质疏松症。章世元等^[16]也指出，有效磷水平为0.35%时，58周龄罗曼蛋鸡骨密度显著高于有效磷水平0.25%组和0.15%组。本试验得出结果与其基本一致，胫骨重、胫骨长度和折断力在各组间均无显著差异，而饲粮非植酸磷水平对骨密度有极显著影响。饲粮中适宜的钙磷比可促进钙磷吸收与沉积，比例过高或过低均会影响钙磷的吸收与沉积。若钙磷比例严重失调，形成不易被吸收的钙磷复合物，减少在骨骼中的沉积，易发生骨骼去矿化^[17]。本试验中当饲粮钙水平固定为3.60%，非植酸磷水平为0.20%时，蛋鸭胫骨中钙磷含量均偏低，骨矿盐含量也偏低。随着饲粮中非植酸磷水平升高，胫骨灰分和灰分中磷含量有提高趋势，也说明提高饲粮非植酸磷水平可促进胫骨的矿化程度及钙磷的沉积，这与呙于明等^[18]在肉鸡上的研究结果一致。

血清钙、磷含量可反映动物机体的钙、磷营养状况^[3]。丁保安等^[10]研究发现，当饲粮非植酸磷水平为0.20%时，20~40周龄北京红鸡的血清磷含量显著低于其他组(非植酸磷水平0.25%、0.30%和0.40%组)，而血清中钙含量在各组间也无显著差异。Sohail等^[19]在海兰W36蛋鸡上试验结果表明，血清中磷含量随饲粮中非植酸磷水平(0.09%、0.40%、0.45%)升高而有升高的趋势，且0.45%组血清中磷含量显著高于0.09%组。本试验结果中血清磷和钙含量在各组之间均无显著差异，可能是因为血清中钙和磷含量不仅受饲粮因素还受内分泌激素等复杂因素调控，能够维持相对恒定。

家禽磷的需要量受饲粮类型、饲养方式、日龄及季节等因素影响^[20]。Boorman等^[21]指出，产蛋高峰期的伊莎褐蛋鸡饲粮非植酸磷水平应为0.20%~0.35%。Snow等^[22]研究表明，白来航母鸡在第1次产蛋循环中适宜的有效磷水平为0.18%。Skrivan等^[23]指出，在饲粮钙水平为3.5%时，给伊莎褐壳蛋鸡饲喂小麦基础饲粮和玉米基础饲粮适宜产蛋和较好蛋品质的有效磷水平分别为0.27%和0.30%。Ahmadi等^[24]根据大量文献报道，采用元分析方法依据产蛋率、蛋重和饲料效率指标得出蛋鸡在非植酸磷水平为0.22%时性能最佳。Khalaji等^[25]通过产蛋率和蛋重2个指标估测老龄蛋鸡对有效磷的最低需要量0.17%~0.24%，最高需要量为0.28%，可能是蛋鸡处于换羽后期阶段。本试验中，饲粮非植酸磷水平在0.20%~0.45%时，蛋鸭产蛋高峰期的产蛋性能、蛋品质、胫骨重量、长度、折断力、胫骨灰分及灰分中钙和磷含量、血清中钙和磷含量均无显著影响，根据骨密度和骨矿盐含量指标，做回归模型得出蛋鸭适宜的饲粮非植酸磷水平为0.33%~0.38%，与《肉鸭饲粮标准(2012)》中种鸭的非植酸磷需要量0.38%接近。在实际生产中，若只考虑生产性能，建议采用0.20%饲粮非植酸磷水平，可节约饲料成本。

① 饲粮非植酸磷水平对高峰期蛋鸭产蛋性能、蛋品质、胫骨灰分中钙和磷含量、血清中钙和磷含量均无显著影响。

② 饲粮非植酸磷水平对骨密度和骨矿盐含量有显著影响，其中0.35%组和0.40%组的骨密度显著高于0.20%组和0.25%组。当饲粮非植酸磷水平升至0.35%以上时，骨矿盐含量显著高于0.20%组。

③ 本试验中，以骨密度和骨矿盐含量作为参考指标，得出蛋鸭适宜的饲粮非植酸磷水平为0.33%~0.38%。在实际生产中，若只考虑生产性能，建议采用0.20%饲粮非植酸磷水平，可节约饲料成本。