微量元素是动物维持生命和生产必不可少的营养物质之一，在动物饲粮中含量虽少，但它们直接或间接地参与机体几乎所有生理和生化过程，与动物生长和健康密切相关。为了保证动物健康和正常生长发育，通常在畜禽饲粮中补充一定量的微量元素^[1]。传统上在饲粮中使用的微量元素都是以无机盐形式添加的，但无机盐形式添加的微量元素存在生物利用率低的缺点，导致经饲粮摄入的大部分微量元素经粪尿排放，从而造成微量元素对环境的污染^{[2, 3, 4, 5]}。而通过微量元素与氨基酸、蛋白质等有机物螯合(络合)制备的有机微量元素(organic trace minerals，OTM)产品因具有吸收率高、生物学效价高、稳定性好等优点^[6]，正越来越多地替代无机微量元素(inorganic trace minerals，ITM)被添加于饲粮中。但由于对OTM的使用效果和具体的机理仍存在着一定的争议^[7]，加之市场价格昂贵，限制了其在畜禽饲粮中的应用。本试验拟通过研究不同比例OTM替代ITM对肉仔鸡生长和生化指标的影响，探讨OTM低剂量应用的可行性，并筛选出适宜的OTM和ITM组合比例，以期为生产实践中合理使用微量元素提供科学依据。

试验中ITM采用无机盐形式的七水硫酸亚铁、无水硫酸铜、一水硫酸锰和七水硫酸锌(分析纯，天津市福晨化学试剂厂产品)，其金属含量分别为19.88%、39.52%、32.17%、22.62%；OTM采用氨基酸螯合产品，其中甘氨酸螯合铁由长沙兴嘉生物工程股份有限公司提供，含铁(Fe) 17%；蛋氨酸螯合铜、蛋氨酸螯合锌和蛋氨酸螯合锰由诺伟司国际贸易(上海)有限公司提供，分别含有铜(Cu)15%、锌(Zn)16%、锰(Mn)13%；饲料原料中微量元素含量为：Cu 8.68 mg/kg，Zn 57.95 mg/kg，Mn 21.50 mg/kg，Fe 132.18 mg/kg。

试验采用单因素随机设计，将1日龄爱拔益加(AA)肉仔公鸡400只，随机分成5组，每组8个重复，每个重复10只鸡。各组试验饲粮中Fe、Cu、Mn、Zn的水平一致：Fe 100 mg/kg，Cu 20 mg/kg，Mn 120 mg/kg，Zn 120 mg/kg。试验共设5个组，其中Ⅰ组为基础饲粮，添加无机盐的Fe、Cu、Mn、Zn；Ⅱ～Ⅴ组分别用30%、50%、70%和100%的蛋氨酸螯合OTM Cu、Mn、Zn和甘氨酸螯合铁替代基础饲粮中相同量的ITM。各组分别采食对应的试验饲粮。

试验采用玉米-豆粕型基础饲粮，其营养水平参照我国《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)^[8]推荐的肉仔鸡营养需要量，其中除硒(Se)、碘(I)外不添加任何形式的其他微量元素。基础饲粮组成及营养水平见表1。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diets (air-dry basis) % 项目Items 含量 Content 1～3周 1 to 3 weeks 4～6周 4 to 6 weeks 原料 Ingredients 玉米 Corn 51.75 56.51 植物油 Vegetable oil 3.80 4.67 大豆粕 Soybean meal 31.02 23.75 棉籽粕 Cottonseed meal 4.00 5.00 菜籽饼 Rapeseed meal 3.00 4.00 玉米蛋白粉 Corn protein meal 2.00 2.00 食盐 NaCl 0.30 0.30 磷酸氢钙 CaHPO4 1.93 1.74 石粉 Limestone 1.27 1.14 L-赖氨酸盐酸盐 L-Lys·HCl 0.27 0.25 DL-蛋氨酸 DL-Met 0.16 0.14 预混料 Premix1) 0.50 0.50 合计 Total 100.00 100.00 营养水平 Nutrient levels2) 代谢能 ME/(MJ/kg) 12.33 12.75 粗蛋白质 CP 21.50 19.50 赖氨酸 Lys 1.20 1.05 蛋氨酸 Met 0.50 0.45 蛋氨酸+半胱氨酸 Met+Cys 0.86 0.79 苏氨酸 Thr 0.86 0.77 色氨酸 Trp 0.28 0.24 钙 Ca 1.00 0.90 有效磷 AP 0.45 0.42 1)预混料向每千克1~3周饲粮提供The premix provided the following per kg of diet for 1 to 3 weeks:VA 10 000 IU，VD3 2 000 IU，VE 10 IU，VB1 1.8 mg，VB2 4.0 mg，VB12 0.71 mg，VK3 2.5 mg，泛酸 pantothenic acid 11.0 mg，叶酸 folic acid 0.5 mg，生物素 biotin 0.12 mg，VB6 5 mg，烟酸 niacin acid 35 mg，胆碱 choline 1 000 mg，Se 0.30 mg，I 0.60 mg，金霉素 chlorotetracycline 50 mg。 预混料向每千克4~6周饲粮提供The premix provided the following per kg of diet for 4 to 6 weeks:VA 8 000 IU，VD3 1 500 IU，VE 8 IU，VB1 1.5 mg，VB2 3.0 mg，VB12 0.35 mg，VK3 2.0 mg，泛酸 pantothenic acid 10.0 mg，叶酸 folic acid 0.3 mg，生物素 biotin 0.10 mg，VB6 3 mg，烟酸 niacin acid 30 mg，胆碱 choline 750 mg，Se 0.30 mg，I 0.60 mg，金霉素 chlorotetracycline 50 mg。 2)计算值。Calculated values.

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diets (air-dry basis)

通过在基础饲粮中添加不同组成的微量元素预混料配制成5种试验饲粮。对照饲粮(Ⅰ组)以无机盐(分别为七水硫酸亚铁、无水硫酸铜、一水硫酸锰和七水硫酸锌)形式添加Fe 100 mg/kg、Cu 20 mg/kg、Mn 120 mg/kg和Zn 120 mg/kg，其他饲粮(Ⅱ～Ⅴ组)采用30%、50%、70%和100%的OTM，分别为甘氨酸螯合铁、蛋氨酸螯合铜、蛋氨酸螯合锌和蛋氨酸螯合锰)替换对照饲粮中相同量的ITM。各组元素的添加水平保持一致(表2)。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 试验饲粮的微量元素添加水平 Table 2 Added level of trace elements of experimental diets 项目Items 组别 Groups Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 元素 Element 添加水平 Added level/(mg/kg) ITM OTM ITM OTM ITM OTM ITM OTM ITM OTM 铜 Cu 20 20 0 14 6 10 10 6 14 0 20 铁 Fe 100 100 0 70 30 50 50 30 50 0 100 锌 Zn 120 120 0 84 36 60 60 36 84 0 120 锰 Mn 120 120 0 84 36 60 60 36 84 0 120 无机微量元素比例 ITM percentage/% 100 70 50 30 0 有机微量元素比例 OTM percentage/% 0 30 50 70 100

表2 试验饲粮的微量元素添加水平 Table 2 Added level of trace elements of experimental diets

ITM：无机微量元素(mg/kg);OTM:有机微量元素(mg/kg)。 1.4 饲养管理

将雏鸡饲养于3层重叠式不锈钢镀塑肉鸡笼内，试验期42 d。饲养管理参照《爱拔益加肉鸡饲养管理规程》进行。每天光照时间22 h，黑暗2 h。鸡只自由采食和饮水，分别在07:00和15:00投喂各组所需试验饲粮。试验期间定期对鸡舍消毒，并按常规免疫程序进行免疫，1日龄皮下接种马立克疫苗，7日龄滴鼻点眼接种新城疫-肾传支二联苗，21日龄饮水免疫传染性法氏囊病疫苗。在试验过程中，一旦出现死鸡，立即称死鸡重和剩料量，以消除死鸡对最后试验结果的影响。 1.5 测定指标与方法

试鸡在试验期结束前1天23:00断料，但不断水，次日08:00称重后每个重复随机选取1只鸡颈静脉采血，制备抗凝血(肝素钠抗凝)测定血红蛋白含量，制备血清测血清铁蛋白和Fe、Cu、Mn、Zn含量。采血后试鸡颈部充分放血屠宰，取肝脏、脾脏、心脏、胸肌和腿肌，-20 ℃冰箱冻存，备测各组织中Fe、Cu、Mn、Zn的含量；在分割腿肌后，取出两侧胫骨，-20 ℃冰箱冻存，备测胫骨指标。

分别在1、21和42日龄以重复为单位称重，称重前绝食9 h，并统计各阶段耗料量，计算平均日增重(average daily gain，ADG)、平均日采食量(average daily feed intake，ADFI)、料重比(feed to gain ratio，F/G)和死亡率。

血红蛋白的含量采用氰高铁血红蛋白法测定；血清铁蛋白含量采用放射免疫法测定(采用铁蛋白试剂盒，购自北京华英生物技术研究所)；血清Fe、Cu、Mn、Zn含量采用火焰光度法通过岛津novAA 400P型原子吸收分光光度仪测定。

先用MSD-10型高通量微波消解仪对各组织样品用硝酸和双氧水进行湿法消化，稀释后用火焰光度法岛津novAA 400P型原子吸收分光光度仪通过测定各组织中Fe、Cu、Mn、Zn的含量；心肌中铜锌-超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)和锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性采用黄嘌呤氧化酶法测定[采用超氧化物歧化酶(测分型)试剂盒，购自南京建成生物工程研究所]。

用直尺测量胫骨长度，用TMS-Pro型质构仪(Food Technology公司)测定胫骨强度，胫骨经高温灰化(550 ℃，18 h)后用火焰光度法通过岛津novAA 400P型原子吸收分光光度仪检测胫骨中粗灰分Zn和Mn的含量。

试验数据采用SPSS 19.0统计软件one-way ANOVA程序进行单因素方差分析，对F检验显著的主效应采用Duncan氏法进行平均值间多重比较。当P<0.05时差异显著，当0.05≤P<0.10时有变化的趋势。表中各组试验数据均以“平均值±标准误”表示。

由表3可知，1～3周龄各组中ADG、ADFI、F/G和死亡率差异不显著(P>0.05)；4～6周龄各组中ADG、ADFI和死亡率差异不显著(P>0.05)，但Ⅱ和Ⅲ组F/G显著低于Ⅰ组(P<0.05)，其他各组之间差异不显著(P>0.05)。饲粮处理对1～6周龄ADG、ADFI和死亡率无显著影响(P>0.05)，但对F/G有一定程度的影响(P=0.052)，其中Ⅱ和Ⅲ组显著低于Ⅰ组(P<0.05)，其他各组之间差异不显著(P>0.05)。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 不同比例的ITM和OTM对肉仔鸡生长性能的影响 Table 3 Effects of different ITM/OTM on growth performance of broiler chickens 项目Items 组别 Groups P值 P-value Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 1～3周 1 to 3 weeks 平均日增重 ADG/g 36.74±0.44 36.93±0.96 39.11±0.57 37.24±0.66 37.21±0.40 0.206 平均日采食量 ADFI/g 52.34±0.99 52.22±1.12 54.65±1.05 53.67±0.67 52.51±0.74 0.299 料重比 F/G 1.37±0.01 1.37±0.02 1.38±0.02 1.39±0.03 1.35±0.02 0.803 死亡率 Mortality/% 2.50±1.64 2.50±1.64 1.25±1.25 1.25±1.25 1.43±1.43 0.933 4～6周 4 to 6 weeks 平均日增重 ADG/g 81.04±1.34 82.85±2.26 83.93±2.11 81.05±1.33 80.25±1.55 0.584 平均日采食量 ADFI/g 156.63±1.59 151.05±5.57 153.19±2.54 156.42±1.44 153.92±3.21 0.798 料重比 F/G 1.99±0.06a 1.82±0.05b 1.83±0.03b 1.96±0.03ab 1.92±0.02ab 0.034 死亡率 Mortality/% 1.39±1.38 0.00±0.00 0.00±0.00 1.25±1.25 0.00±0.00 0.586 1～6周 1 to 6 weeks 平均日增重 ADG/g 59.48±0.72 60.06±1.42 60.07±0.88 59.15±0.71 58.73±0.82 0.699 平均日采食量 ADFI/g 104.06±0.99 101.35±2.99 102.19±1.60 104.56±0.73 103.05±1.92 0.800 料重比 F/G 1.78±0.04a 1.68±0.04b 1.68±0.02b 1.77±0.02ab 1.73±0.02ab 0.052 死亡率 Mortality/% 4.51±3.23 2.78±1.82 1.39±1.38 2.78±1.82 1.59±1.58 0.840 同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著(P＞0.05)，不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)。下表同。 In the same row,values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P＞0.05),while with different small letter superscripts mean significant difference (P＜0.05). The same as below.

表3 不同比例的ITM和OTM对肉仔鸡生长性能的影响 Table 3 Effects of different ITM/OTM on growth performance of broiler chickens

2.2 饲粮处理对肉仔鸡血液生化指标的影响 2.2.1 不同比例的ITM和OTM对肉仔鸡血液血红蛋白和血清铁蛋白含量的影响

由表4可知，ITM和OTM的不同配比对血红 蛋白含量无显著性影响(P>0.05)；对于血清铁蛋白，Ⅱ组和Ⅳ组显著高于Ⅴ组(P<0.05)，其他各组之间差异不显著(P>0.05)。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 不同比例的ITM和OTM对肉仔鸡血红蛋白和血清铁蛋白含量的影响 Table 4 Effects of different ITM/OTM on the contents of blood hemoglobin and serum ferritin of broiler chickens 项目Items 组别 Groups P值 P-value Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 血红蛋白 Hemoglobin/(g/L) 120.25±3.83 120.25±3.46 118.14±5.82 116.43±4.76 118.86±4.33 0.948 血清铁蛋白 Serum ferritin/(ng/mL) 105.89±7.55abc 126.72±8.26ab 115.63±12.27abc 120.81±8.48ab 89.79±1.83c ＜0.001

表4 不同比例的ITM和OTM对肉仔鸡血红蛋白和血清铁蛋白含量的影响 Table 4 Effects of different ITM/OTM on the contents of blood hemoglobin and serum ferritin of broiler chickens

表5可知，血清中Fe含量Ⅳ组显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ组(P<0.05)，其他各组间差异不显著(P>0.05)；血清中Cu、Mn、Zn含量各组间差异不显著(P>0.05)。

表5

Table 5

表5(Table 5)

表5 不同比例的ITM和OTM对肉仔鸡血清中微量元素含量的影响(鲜重基础) Table 5 Effects of different ITM/OTM on the contents of trace elements in serum of broiler chickens (fresh weight basis) mg/kg 项目Items 组别 Groups P值 P-value Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 铜 Cu 2.50±0.41 2.82±0.52 3.80±1.04 2.39±0.50 2.67±0.60 0.637 铁 Fe 4.94±0.80b 6.93±0.82b 4.83±0.82b 11.96±1.24a 6.21±0.72b ＜0.001 锰 Zn 4.22±1.17 4.71±0.62 4.06±0.45 5.80±1.86 5.16±1.25 0.107 锌 Mn 0.85±0.49 0.82±0.48 0.90±0.41 1.68±0.75 0.56±0.31 0.746

表5 不同比例的ITM和OTM对肉仔鸡血清中微量元素含量的影响(鲜重基础) Table 5 Effects of different ITM/OTM on the contents of trace elements in serum of broiler chickens (fresh weight basis)

由表6可知，肝脏中Cu的含量Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组均显著高于Ⅰ组(P<0.05)，且Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ组显著高于Ⅳ组(P<0.05)；肝脏中Mn含量Ⅱ、Ⅲ组显著高于Ⅳ组(P<0.05)，Ⅰ组、Ⅳ组显著高于Ⅴ组(P<0.05)；肝脏中Fe、Zn含量各组之间差异不显著(P>0.05)。

表6

Table 6

表6(Table 6)

表6 不同比例的ITM和OTM对肉仔鸡肝脏中微量元素含量的影响(鲜重基础) Table 6 Effects of different ITM/OTM on the contents of trace elements in liver of broiler chickens (fresh weight basis) mg/kg 项目Items 组别 Groups P值 P-value Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 铜 Cu 4.52±0.47c 7.00±0.24a 7.85±0.20a 5.98±0.29b 7.04±0.30a ＜0.001 铁 Fe 110.05±15.37 120.26±11.46 143.23±15.23 118.18±11.83 99.61±6.16 0.138 锌 Zn 31.66±1.00 33.74±1.52 34.51±1.54 32.83±1.71 35.54±0.98 0.505 锰 Mn 7.03±0.25ab 7.89±0.48a 8.01±0.27a 6.74±0.47b 4.09±0.21c ＜0.001

表6 不同比例的ITM和OTM对肉仔鸡肝脏中微量元素含量的影响(鲜重基础) Table 6 Effects of different ITM/OTM on the contents of trace elements in liver of broiler chickens (fresh weight basis)

由表7可知，不同比例的ITM和OTM对肉仔鸡脾脏Fe含量无显著影响(P>0.05)。

表7

Table 7

表7(Table 7)

表7 不同比例的ITM和OTM对肉仔鸡脾脏中微量元素Fe含量的影响(鲜重基础) Table 7 Effects of different ITM/OTM on the iron content of trace elements in spleen of broiler chickens (fresh weight basis) mg/kg 项目Items 组别 Groups P值 P-value Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 铁 Fe 127.23±6.86 114.45±6.18 117.97±9.36 118.31±5.39 112.53±12.21 0.600

表7 不同比例的ITM和OTM对肉仔鸡脾脏中微量元素Fe含量的影响(鲜重基础) Table 7 Effects of different ITM/OTM on the iron content of trace elements in spleen of broiler chickens (fresh weight basis)

由表8可知，不同比例的ITM和OTM对肉仔鸡胸肌中Cu、Mn、Zn含量无显著影响(P>0.05)；但对Fe含量有一定程度的影响，且Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组有高于Ⅰ组的趋势(P=0.074)，其中Ⅲ组最高；不同比例的ITM和OTM对肉仔鸡腿肌中Fe、Cu、Mn、Zn含量无显著影响(P>0.05)。

表8

Table 8

表8(Table 8)

表8 不同比例的ITM和OTM对肉仔鸡胸肌和腿肌中微量元素含量的影响(鲜重基础) Table 8 Effects of different ITM/OTM on the contents of trace elements in chest muscle and leg muscle of broiler chickens (fresh weight basis) mg/kg 项目Items 组别 Groups P值 P-value Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 胸肌 Chest muscle 铜 Cu 0.56±0.05 0.44±0.05 0.50±0.06 0.73±0.13 0.56±0.06 0.105 铁 Fe 7.20±0.83 7.75±0.54 8.82±1.22 7.86±0.37 7.56±1.06 0.074 锌 Zn 10.10±0.55 8.79±0.43 9.95±0.48 10.96±1.37 8.65±0.56 0.282 锰 Mn 0.12±0.05 0.34±0.16 0.27±0.08 0.40±0.15 0.25±0.07 0.638 腿肌 Leg muscle 铜 Cu 0.67±0.14 0.84±0.23 0.87±0.23 0.92±0.35 0.63±0.06 0.945 铁 Fe 18.22±4.44 14.53±3.29 21.99±4.94 17.00±3.95 13.33±3.29 0.593 锌 Zn 19.23±0.70 17.38±1.95 16.16±1.66 16.68±1.77 13.96±1.35 0.366 锰 Mn 0.63±0.08 0.39±0.07 0.61±0.08 0.36±0.03 0.49±0.10 0.163

表8 不同比例的ITM和OTM对肉仔鸡胸肌和腿肌中微量元素含量的影响(鲜重基础) Table 8 Effects of different ITM/OTM on the contents of trace elements in chest muscle and leg muscle of broiler chickens (fresh weight basis)

由表9可知，对于Mn-SOD和CuZn-SOD活性，Ⅲ组显著高于Ⅱ、Ⅴ组(P<0.05)，其他各组之间差异不显著(P>0.05)。

表9

Table 9

表9(Table 9)

表9 不同比例的ITM和OTM对肉仔鸡心肌SOD活性的影响(鲜重基础) Table 9 Effects of different ITM/OTM on myocardium SOD activities of broiler chickens(fresh weight basis) U/mg prot 项目Items 组别 Groups P值 P-value Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 锰-超氧化物歧化酶Mn-SOD 25.91±4.41ab 21.19±2.74bc 37.51±3.78a 23.69±4.27ab 28.02±4.76bc ＜0.001 铜锌-超氧化物歧化酶CuZn-SOD 69.45±4.93ab 61.38±3.19b 79.09±4.12a 72.58±4.61ab 63.47±4.91b 0.035

表9 不同比例的ITM和OTM对肉仔鸡心肌SOD活性的影响(鲜重基础) Table 9 Effects of different ITM/OTM on myocardium SOD activities of broiler chickens(fresh weight basis)

由表10可知，饲粮处理对胫骨长度无显著影响(P>0.05)，但在一定程度上影响了胫骨强度(P=0.058)和胫骨粗灰分含量(P=0.073)，Ⅱ组胫骨强度和胫骨粗灰分有高于其他组的趋势；不同组胫骨粗灰分Mn含量有显著差异，其中Ⅰ组显著高于Ⅱ、Ⅳ组(P<0.05)，其他各组间差异不显著(P>0.05)；胫骨粗灰分Zn含量各组之间差异不显著(P>0.05)。

表10

Table 10

表10(Table 10)

表10 不同比例的ITM和OTM对42日龄肉仔鸡胫骨发育及微量元素Mn和Zn沉积的影响 Table 10 Effects of different ITM/OTM on the tibia development and deposition of Mn and Zn of broiler chickens aged 42 days 项目Items 组别 Groups P值 P-value Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 胫骨长度 Length of tibia/mm 9.54±0.15 9.64±0.13 9.39±0.15 9.82±0.15 9.60±0.08 0.598 胫骨强度Strength of tibia/N 194.11±18.46 276.44±19.30 201.41±27.48 195.42±13.67 216.29±24.87 0.058 粗灰分含量 Ash content/% 2.67±0.14 2.98±0.10 2.45±0.17 2.51±0.13 2.46±0.17 0.073 粗灰分锰含量 Mn content in ash/(μg/g) 7.81±0.49a 5.69±0.30bc 6.94±0.56ab 5.69±0.35bc 6.57±0.49ab 0.040 粗灰分锌含量 Zn content in ash/(μg/g) 184.92±8.78 209.72±7.13 217.78±20.43 214.90±5.01 219.84±12.64 0.479

表10 不同比例的ITM和OTM对42日龄肉仔鸡胫骨发育及微量元素Mn和Zn沉积的影响 Table 10 Effects of different ITM/OTM on the tibia development and deposition of Mn and Zn of broiler chickens aged 42 days

由表11可知，用OTM替代肉仔鸡饲粮中不同比例的ITM，增重饲料成本Ⅳ和Ⅴ组比Ⅰ组高，而Ⅱ和Ⅲ组的增重饲料成本比Ⅰ组低。

表11

Table 11

表11(Table 11)

表11 不同组经济效益分析 Table 11 Economic analysis of the different groups 项目Items 组别 Groups Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 饲料价格 Feed price/(元/kg) 3.35 3.37 3.41 3.45 3.48 增重饲料成本 Feed costs of the weight gain/(元/kg) 5.97 5.66 5.72 6.10 6.03 增重饲料成本比较 Feed costs of the weight gain compare/% 100.00 94.81 95.81 102.17 101.01 蛋氨酸螯合铜、蛋氨酸螯合锌、蛋氨酸螯合锰和甘氨酸螯合铁市场价分别为：75.00、75.00、70.00和34.00元/kg，无水硫酸铜、七水硫酸锌、一水硫酸锰和七水硫酸亚铁的市场价分别为：56.00、56.00、38.00和30.00元/kg，基础饲粮价格为3.26元/kg。 The market price of methionine chelated copper,methionine chelated zinc,methionine chelated manganese,and glycine chelated iron were 75.00,75.00,70.00 and 34.00 yuan/kg；the market price of analytical grade iron vitriol,anhydrous cupric sulfate,manganese sulfate monohydrate,and zinc vitriol were 56.00， 56.00， 38.00 and 30.00 yuan/kg,the market price of the basal diet was 3.26 yuan/kg.

表11 不同组经济效益分析 Table 11 Economic analysis of the different groups

许多研究表明，OTM替代ITM能提高动物生长性能。周桂莲等^[9]用蛋氨酸螯合锌替代无机Zn显著降低了黄羽肉鸡生长全期的F/G，其中蛋氨酸螯合锌组(每千克饲粮中添加Zn 60 mg)与硫酸锌组(每千克饲粮中添加Zn 60 mg)相比F/G降低了8.74%。邓灶福^[10]在肉仔鸡饲粮中分别添加40和60 mg/kg的羟基蛋氨酸螫合锌，与对照组相比，1～6周龄的ADF提高了3.4%和5.8%，F/G降低了3.93%和4.49%。也有报道显示OTM替代ITM并不能改善生长性能指标^[11]。本试验表明，微量元素的供给形式并没有对肉仔鸡生长前期的生长性能产生显著影响，但30%和50%OTM替代组显著改善了后期和全期的饲料转化率，而高比例(75%和100%)OTM替代组与对照组相比则无显著差异，表明以有机形式提供部分微量元素有利于提高肉仔鸡饲料转化率，当全部或高比例以OTM供给微量元素时其正效应消失。陆娟娟等^[12]的试验也得到过相似的结果，其发现肉仔鸡在1～4周龄时，75%OTM替代组肉仔鸡ADG显著高于对照组，但100%替代组不论是1～4周龄、4～9周龄还是1～9周龄其对ADG和F/G与对照 组相比都无显著影响。张纯等^[13]对断奶仔猪的研究也发现，有机Zn与无机Zn合用时，饲喂效果要好于单独使用，最佳配比为60%的氨基酸螯合锌加上40%硫酸锌。OTM和ITM联合使用时的这种优势是否与机体吸收和转运OTM与ITM的方式不同有关，如混合使用增加了微量元素Fe、Cu、Mn、Zn的吸收通道，加快了运转速率，进而提高了微量元素Fe、Cu、Mn、Zn的生物利用率，具体作用机理还有待进一步的研究。
3.2 饲粮处理对肉仔鸡微量元素生化代谢的影响

血红蛋白和血清铁蛋白含量是反映机体Fe吸收状况的2个重要指标^{[14, 15]}。当缺乏Fe时会导致血红蛋白的降低^[16]。本研究基础饲粮中Fe水平较高，当再添加Fe后未影响肉仔鸡血红蛋白含量，并且无机和有机Fe的不同替代比例也未显著影响血红蛋白的含量。董冬华等^[17]报道，在妊娠母猪饲粮中添加甘氨酸铁与硫酸亚铁相比血红蛋白含量有增加的趋势，但差异也不显著。血清铁蛋白具有强大的结合和贮备Fe的能力^[18]，以维持体内Fe的供应和血红蛋白相对稳定性，其含量变化可作为判断是否缺Fe或Fe负荷过量的指标^[19]。本研究观察到，当微量元素以100%有机形式添加时，血清铁蛋白含量反而降低，其原因可能是饲粮中过高的Fe水平导致Fe负荷过量进而导致较高的血铁蛋白含量，而有机Fe可能不易导致Fe过载(Fe overload)，使得血铁蛋白可维持到相对正常的水平，具体的机理还有待进一步的研究。

血清微量元素含量降低通常代表机体微量元素缺乏，但在微量元素供应充足情况下血清微量元素含量会基本保持平衡。夏中生等^[20]的试验结果表明，分别用氨基酸螯合微量元素的0、12.5%、25%和37.5%的比例替换生长猪基础饲粮中相应无机微量元素的0、25%、50%和75%，其各组之间血清中Fe、Mn、Zn、Cu的含量无显著性差异。然而本试验发现，虽然不同微量元素的供给形式未能影响Cu、Zn、Mn的血清含量，但却显著影响了血清Fe含量，其中70%有机组血清中Fe的含量达到最高，远高于其他各组。该结果提示，可能适当比例的有机Fe替代无机Fe更有利于Fe的吸收。

机体内部存在严密的内稳衡机制，控制组织微量元素含量在一定范围内保持相对稳定^[21]。动物消化道内吸收的Fe和Cu，与其他组织相比，贮存于肝脏和脾脏中的比例较高；Mn在动物体内含量少，但是在肝脏中很稳定，如果Mn在腿肌中缺乏会导致禽类的滑腱症^[22]；对于Zn来说，肝脏是Zn的快速交换场所，如果饲粮缺Zn，Zn很快从这些组织中动员释放，保证Zn的供给^[21]。本试验发现，使用OTM代替ITM显著提高肝脏Cu含量，但70%OTM替代显著低于其他替代比例；高比例OTM替代显著降低肝脏Mn含量，而低比例替代似乎更有利于肝脏Mn沉积；肝脏Fe和Zn含量也未受OTM替代比例的影响。此外，虽然不同替代比例的OTM对肌肉Cu、Zn、Mn沉积没有显著影响，但50%OTM替代时Fe含量明显高于对照组。微量元素供给形式对元素组织沉积影响的不一致可能与元素之间的互作相关^{[22, 23]}。

SOD是一种广泛存在于动物体的一类金属酶，催化超氧阴离子(O^-₂·)发生歧化反应生成水(H₂O)和氧气(O₂)，从而清除O^-₂·^{[24, 25]}，在维持生物体内超氧阴离子自由基的产生与清除的动态平衡中发挥重要作用^[26]。由于SOD含有Cu、Zn和Mn等离子，所以将其作为衡量微量元素Cu、Zn、Mn营养状况的主要指标^[27]。钟映梅等^[28]发现，Zn的含量变化会影响鹅的CuZn-SOD活性。Luo等^[29]指出，心肌Mn-SOD活性是评价Mn的生物利用率的敏感指标。李素芬等^[30]试验表明，肉鸡心肌线粒体中Mn-SOD的活性与Mn来源与Mn水平密切相关，心肌Mn-SOD活性比通常所使用的骨骼Mn含量更能反映不同Mn来源的生物利用率。杨斌^[31]的试验表明，肉鸡心肌Mn-SOD活性随氨基酸螯合锰添加水平提高而升高，呈明显的剂量效应关系，且添加有机Mn时Mn-SOD活性显著高于等量的无机Mn。易立冬^[32]报道，70%OTM(Zn、Cu、Mn)+30%ITM(Zn、Cu、Mn)能够显著增加蛋鸡肝脏组织的总抗氧化能力，降低脂质过氧化物丙二醛的含量。本研究与前人的试验结果一致。本研究表明，50%OTM替代时心肌Mn-SOD和CuZn-SOD活性最高，与饲料转化率有相似的变化趋势。

动物对Zn、Mn营养状态最敏感的组织是骨骼。相比肝脏Mn和肾脏Mn含量，用胫骨无脂干重Mn含量作为评价Mn利用率的指标更敏感^{[33, 34]}。Bao等^[35]研究表明，Zn和Mn对胫骨长度有重要影响，随着饲粮中有机Zn和Mn含量的增加，胫骨长度线性增加，并且有机Zn在胫骨中的沉积比无机Zn更多。本试验中不同比例的ITM和OTM并没有对胫骨长度、胫骨强度、胫骨粗灰分产生显著的影响，但30%OTM替代比例的胫骨强度和胫骨粗灰分有提高的趋势。此外还发现，30%和70%OTM替代比例的骨骼Mn含量显著地低于对照组，而骨骼Zn含量未受处理影响，这显然与以往针对单一元素的研究结论不一致。王思佳^[36]试验得出添加有机Zn组胫骨中Zn含量显著高于无机Zn组，杨斌等^[11]试验得出有机Mn(氨基酸螯合锰A)组肉仔鸡胫骨中Mn的沉积量显著高于无机Mn(硫酸锰)组。这可能是由于本试验中同时添加4种有机微量元素，其间复杂的互作关系影响了元素在骨骼中的沉积^{[23, 37]}，因此进一步研究微量元素之间的相互作用机理显得尤为重要。

用蛋氨酸螯合铜、蛋氨酸螯合锌、蛋氨酸螯合锰和甘氨酸螯合铁替代肉仔鸡饲粮中相应比列的无机微量元素，可显著降低肉仔鸡4~6周和1~6周料重比、提高肉仔鸡肝脏中Cu、Mn、血铁蛋白的含量和心肌中SOD的活性、减少无机微量元素使用量、节约饲料成本，提高饲养经济效益。尤其是以50%的蛋氨酸螯合铜、蛋氨酸螯合锌、蛋氨酸螯合锰和甘氨酸螯合铁替代肉仔鸡饲粮中50%的相应无机微量元素效果最理想。