鸡肉粉完全替代鱼粉饲料中补充晶体氨基酸对凡纳滨对虾生长性能、体成分、血浆及肌肉游离氨基酸含量的影响

引用本文

林建伟, 张春晓, 孙云章, 翟少伟, 宋凯, 叶继丹. 鸡肉粉完全替代鱼粉饲料中补充晶体氨基酸对凡纳滨对虾生长性能、体成分、血浆及肌肉游离氨基酸含量的影响[J]. 动物营养学报, 2015, 27(6): 1709-1721. 复制到剪切板

LIN Jianwei, ZHANG Chunxiao, SUN Yunzhang, ZHAI Shaowei, SONG Kai, YE Jidan. Effects of Complete Replacement of Fish Meal with Poultry By-Product Meal and Supplemented with Crystalline Amino Acids in Diets on Growth Performance, Body Composition, Plasma and Muscle Free Amino Acid Contents of Pacific White Shrimp (Litopenaeus vannamei)[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2015, 27(6): 1709-1721. 复制到剪切板

鸡肉粉完全替代鱼粉饲料中补充晶体氨基酸对凡纳滨对虾生长性能、体成分、血浆及肌肉游离氨基酸含量的影响

林建伟¹, 张春晓^1,2, 孙云章^1,2, 翟少伟^1,2, 宋凯^1,2, 叶继丹^1,2

1. 厦门市饲料检测与安全评价重点实验室, 厦门 361021;
2. 农业部东海海水健康养殖重点实验室, 厦门 361021

收稿日期：2015-01-08

基金项目：国家公益性行业(农业)专项(201303053);厦门市科技计划项目(3502Z20130040)

作者简介：林建伟(1990—),男,福建南平人,硕士研究生,研究方向为水产动物营养与饲料。E-mail: linjianwei1013@163.com

通讯作者：叶继丹,研究员,硕士生导师,E-mail: yjdwk@sina.com

摘要：本试验旨在探讨鸡肉粉完全替代鱼粉时饲料氨基酸的平衡性与对虾生长性能、体成分、血浆及肌肉游离氨基酸含量的关系。试验设2个饲料蛋白质水平,分别为40%和31%,在每个蛋白质水平下分设鱼粉组(基础饲料)、鸡肉粉组(鸡肉粉完全替代基础饲料中鱼粉)、鸡肉粉+必需氨基酸(EAA)组(鸡肉粉完全替代基础饲料中鱼粉并补充晶体EAA)、鸡肉粉+EAA+非必需氨基酸(NEAA)(鸡肉粉完全替代基础饲料中鱼粉并补充晶体EAA+NEAA)。将平均体重为(0.37±0.01) g的凡纳滨对虾随机分配到32个圆桶(150 L)中,每桶30尾,每4个桶为1组,饲喂1种饲料,每天饱食投喂3次,进行为期56 d的饲养试验。结果表明:在每一饲料蛋白质水平下,鸡肉粉+EAA组、鸡肉粉+EAA+NEAA组对虾的增重率、特定生长率均比鸡肉粉组有显著提高(P<0.05),但仍显著低于鱼粉组(P<0.05),饲料系数的变化正好与之相反;鸡肉粉+EAA+NEAA组对虾的增重率、特定生长率和饲料系数与鸡肉粉+EAA组无显著差异(P>0.05)。饲喂40%蛋白质水平饲料较饲喂31%蛋白质饲料显著提高对虾的增重率和虾体粗蛋白质含量(P<0.05),但显著降低虾体粗脂肪含量(P<0.05)。凡纳滨对虾血浆游离EAA/NEAA与饲料EAA/NEAA呈正线性关系,且血浆游离赖氨酸和苯丙氨酸含量均与特定生长率呈正相关。鸡肉粉组血浆游离蛋氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸含量显著低于鱼粉组(P<0.05),各组对虾肌肉游离氨基酸含量无显著差异(P>0.05)。由此得出,在鸡肉粉完全替代鱼粉的饲料中补充晶体EAA可促进凡纳滨对虾的生长,但进一步补充晶体NEAA并没有进一步改善其生长性能。

关键词：凡纳滨对虾鸡肉粉氨基酸平衡生长性能游离氨基酸

Effects of Complete Replacement of Fish Meal with Poultry By-Product Meal and Supplemented with Crystalline Amino Acids in Diets on Growth Performance, Body Composition, Plasma and Muscle Free Amino Acid Contents of Pacific White Shrimp (Litopenaeus vannamei)

LIN Jianwei¹, ZHANG Chunxiao^1,2, SUN Yunzhang^1,2, ZHAI Shaowei^1,2, SONG Kai^1,2, YE Jidan^1,2

1. Xiamen Key Laboratory for Feed Quality Testing and Safety Evaluation, Xiamen 361021, China;
2. Key Laboratory of Healthy Mariculture for the East China Sea, Ministry of Agriculture, Xiamen 361021, China

Abstract: A 56-day feeding trial was carried out to determine the relationship between amino acid balance in complete replacement of fish meal (FM) with poultry by-product meal (PBM) in diets and growth performance, body composition, plasma and muscle free amino acid contents of Pacific white shrimp (Litopenaeus vannamei) was carried out in this experiment. Two dietary protein levels (31% and 40%, respectively) were designed, and four groups were arranged for each dietary protein level, which were FM group (basal diet), PBM group (complete replacement of fish meal by poultry by-product meal in the basal diet), PBM+essential amino acids (EAA) group (complete replacement of fish meal by poultry by-product meal in the basal diet supplemented with crystalline EAA) and PBM+EAA+non-essential amino acids (NEAA) group (complete replacement of fish meal by poultry by-product meal in the basal diet supplemented with crystalline EAA+NEAA), respectively. Pacific white shrimp with the average body weight of (0.37±0.01) g were randomly divided into 32 barrels (150 L) with each barrel with 30 shrimp, and 4 barrels as a group were one of eight diets. Shrimp were fed three times a day and fed to apparent satiation. The results showed as follows: for each dietary protein level, the weight gain rate (WGR) and specific gain rate (SGR) in PBM+EAA and PBM+EAA+NEAA groups were significantly higher than those in PBM group (P<0.05), but significantly lower than those in FM group (P<0.05); the feed conversion ratio (FCR) had the opposite result compared with WGR and SGR. No differences in WGR, SGR and FCR between PBM+EAA and PBM+EAA+NEAA groups were observed (P<0.05). The shrimp fed the diets containing 40% protein level had higher WGR (P<0.05), body crude protein content (P<0.05), but lower body crude lipid content (P<0.05) compared with those shrimp fed diets containing 31% protein level. Free plasma EAA/NEAA was positively linearly correlated with the dietary EAA/NEAA, and the SGR of shrimp was positively correlated with the contents of plasma free methionine or phenylalanine. Plasma free methionine, phenylalanine and lysine contents in PBM group were significantly lower than those in FM group (P<0.05), but there were no significant differences in muscle free amino acid contents among all groups (P>0.05). In conclusion, feeding a diet with FM complete replacement by PBM and supplementing crystalline EAA can promote the growth of Pacific white shrimp, but does not lead to a growth comparable to feeding the whole FM diet. The diets to further supplementing crystalline NEAA do not help in improving the growth of shrimp.

Key words: Pacific white shrimp (Litopenaeus vannamei) poultry by-product meal amino acid balance growth performance free amino acids

鱼粉不仅必需氨基酸(essential amino acids,EAA)含量高，氨基酸平衡性好，且生物学价值高，是水产动物最为重要的蛋白质源，在大多数水产养殖种类的饲料配方中不可或缺。但鱼粉资源的稀缺性使得人们一直在不断努力地为其寻找适宜的替代品，鱼粉替代品及其技术已经成为当前水产饲料领域的研究热点之一。鸡肉粉其营养价值较高，并有一定产量，是潜在的鱼粉替代品^{[1, 2, 3, 4, 5, 6, 7]}。研究表明，凡纳滨对虾饲料中鸡肉粉替代鱼粉的最大比例为80%^{[1, 2]}。饲料蛋白质的质与量直接影响动物生长，而其质量的高低又反映在氨基酸平衡性上。Ye等^[8]尝试了通过调配饲料中赖氨酸和蛋氨酸平衡来降低凡纳滨对虾饲料中鱼粉比例的试验，获得了较好的结果。由于鸡肉粉蛋白质的质量不仅与EAA的丰缺程度和平衡性有关，甚至还可能受到非必需氨基酸(non-essential amino acids,NEAA)的影响。在以往的鱼粉替代研究中，鸡肉粉要么按一定比例直接替代鱼粉^{[1, 2]}，要么只考虑通过补充个别EAA来弥补替代鱼粉后的EAA的不足^{[9, 10]}，而较少考虑用鸡肉粉部分或全部替代鱼粉后饲料中所有氨基酸的平衡性问题。因此，本试验设计了2个不同蛋白质水平的参考饲料配方，并以参考配方的EAA和NEAA含量为标准，设计鸡肉粉完全替代鱼粉后饲料氨基酸含量不同的饲料配方，探讨饲料氨基酸的平衡性与凡纳滨对虾生长性能、体成分、血浆及肌肉游离氨基酸含量间的关系，为合理设计凡纳滨对虾高效、低鱼粉饲料配方提供理论依据。

1 材料与方法 1.1 试验饲料

本试验参考Ye等^[11]的试验设计，设2个饲料蛋白质水平(40%和31%)，每个蛋白质水平分设鱼粉组(对照组)、鸡肉粉组(鸡肉粉完全替代鱼粉组)、鸡肉粉+EAA组、鸡肉粉+EAA+NEAA组。在40%饲料蛋白质水平下，试验饲料分别记为D1、D2、D3、D4，其中D2不添加晶体氨基酸，D3补足相对于D1缺乏的EAA，D4补足相对于D1缺乏的EAA和NEAA；在31%饲料蛋白质水平下，试验饲料分别记为D5、D6、D7、D8，其中D6不添加晶体氨基酸，D7补足相对于D5缺乏的EAA，D8补足相对于D5缺乏的EAA和NEAA。试验饲料组成及营养水平见表1。

表1 试验饲料组成及营养水平(风干基础)

Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) g/kg

g/kg
项目 Items	饲料 Diets
项目 Items	D1	D2	D3	D4	D5	D6	D7	D8
原料 Ingredients
鱼粉 Fish meal¹⁾	378.0				283.5
豆粕 Soybean meal²⁾	200.0	200.0	200.0	200.0	150.0	150.0	150.0	150.0
虾头粉 Shrimp head meal²⁾	100.0	100.0	100.0	100.0	75.0	75.0	75.0	75.0
鸡肉粉 Poultry by-product meal²⁾		365.0	365.0	365.0		274.5	274.5	274.5
玉米淀粉 Corn starch	224.5	224.5	224.5	224.5	384.0	384.0	384.0	384.0
微晶纤维素 Crystalline cellulose		41.0	29.5	25.7		29.8	21.2	18.4
鱼油 Fish oil	16.0	2.0	2.0	2.0	21.0	10.6	10.6	10.6
豆油 Soybean oil	16.0	2.0	2.0	2.0	21.0	10.6	10.6	10.6
卵磷脂 Lecithin	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0
氯化胆碱 Choline chloride	2.5	2.5	2.5	2.5	2.5	2.5	2.5	2.5
胆固醇 Cholesterol	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
维生素预混料 Vitamin premix³⁾	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
矿物质预混料 Mineral premix⁴⁾	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
磷酸二氢钙 Ca(H₂PO₄)₂	15.0	15.0	15.0	15.0	15.0	15.0	15.0	15.0
海藻酸钠 Sodium alginate	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0
维生素C Vitamin C	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
晶体氨基酸混合物 Crystalline amino acid mix⁵⁾			11.5	15.3			8.6	11.4
营养水平 Nutrient levels
干物质 Dry matter	901.1	910.0	918.3	905.3	911.2	911.3	919.2	908.5
粗蛋白质 Crude protein	404.2	402.4	407.1	402.6	314.1	312.2	315.2	315.1
粗脂肪 Crude lipid	77.2	74.9	79.2	75.7	76.9	74.1	80.0	78.1
粗灰分 Ash	78.0	76.7	73.8	76.9	65.3	64.4	63.2	65.5
合计 Total	1 000.0	1 000.0	1 000.0	1 000.0	1 000.0	1 000.0	1 000.0	1 000.0
¹⁾由秘鲁Tecnológica de Alimentos S.A公司提供Obtained from Tecnológica de Alimentos S.A,Peru。 ²⁾由厦门百穗行科技股份有限公司提供Obtained from Baisuihang Technology Co.,Ltd.,Xiamen,China。 ³⁾维生素预混料为每千克提供Vitamin premix supplied the following per kg of diets：VA 10 mg,VD 10 mg,VC 1 000 mg，VK 40 mg，VE 500 mg，VB₁ 60 mg，VB₂ 70 mg，VB₆ 80 mg，VB₁₂ 0.4 mg，烟酸 nicotinic acid 200 mg，泛酸钙calcium pantothenate 200 mg，生物素 biotin 2 mg，肌醇 inositol 500 mg，叶酸 folic acid 8 mg，对氨基苯甲酸钠para-aminobenzoic acid sodium salt 90 mg，纤维素 cellulose 17 229.6 mg。 ⁴⁾矿物质预混料为每千克饲料提供Mineral premix supplied the following per kg of diets：Ca(H₂PO₄)₂·H₂O 20 000 mg，NaH₂PO₄·2H₂O 5 000 mg，KH₂PO₄ 8 000 mg，乳酸钙 calcium lactate 5 000 mg，KCl 1 000 mg，NaCl 1 000 mg，MgSO₄·7H₂O 6 000 mg，柠檬酸铁 ferric citrate 800 mg，CuSO₄·5H₂O 24 mg，ZnSO₄·7H₂O 190 mg，MnSO₄·4H₂O 100 mg，CoSO₄·7H₂O 50 mg，KI 8 mg，Na₂SeO₃ 2 mg，Al(SO₄)₃·18H₂O 25 mg，纤维素 cellulose 12 801 mg。 ⁵⁾由上海捷瑞生物工程有限公司提供(纯度>98.5%)Obtained from Geneary Biotech Co.,Ltd.,Shanghai,China (purity>98.5%)。晶体氨基酸混合物组成列于表2 Crystalline amino acid mix composition showed in Table 2。

表1 试验饲料组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis)

表2 晶体氨基酸混合物组成(风干基础) Table 2 Composition of crystalline amino acid mix (air-dry basis)

将所有原料用粉碎机粉碎后过80目筛网，然后制成直径为1.5 mm的硬颗粒饲料，自然风干后于-20 ℃冰箱保存备用。试验饲料氨基酸组成和凡纳滨对虾必需氨基酸建议需要量列于表3。

表3 试验饲料氨基酸组成 Table 3 Amino acid composition of experimental diets¹⁾

%
氨基酸 AA	饲料 Diets								R²⁾
氨基酸 AA	D1	D2	D3	D4	D5	D6	D7	D8	R²⁾
必需氨基酸 EAA
苏氨酸 Thr	1.50(3.71)	1.40(3.48)	1.55(3.81)	1.54(3.83)	1.12(3.57)	1.08(3.46)	1.10(3.49)	1.18(3.74)	1.4(3.6)³⁾
缬氨酸 Val	1.79(4.43)	1.68(4.17)	1.75(4.30)	1.74(4.32)	1.38(4.39)	1.27(4.07)	1.36(4.31)	1.37(4.35)	1.5(3.4)⁴⁾
蛋氨酸 Met	0.95(2.35)	0.78(1.94)	0.92(2.26)	0.93(2.31)	0.71(2.26)	0.60(1.92)	0.75(2.38)	0.72(2.28)	0.9(2.2)³⁾
异亮氨酸 Ile	1.46(3.61)	1.38(3.43)	1.43(3.51)	1.43(3.55)	1.04(3.31)	1.00(3.20)	1.06(3.36)	1.04(3.30)	1.3(2.7)⁴⁾
亮氨酸 Leu	2.83(7.00)	2.69(6.68)	2.80(6.88)	2.85(7.08)	2.12(6.75)	1.98(6.34)	2.11(6.69)	2.15(6.82)	2.1(4.3)⁴⁾
苯丙氨酸+酪氨酸 Phe+Tyr	2.66(6.58)	2.45(6.08)	2.60(6.38)	2.68(6.21)	2.03(6.47)	1.93(6.18)	1.96(6.22)	2.01(6.38)	2.7(7.7)⁴⁾
组氨酸 His	0.97(2.40)	0.71(1.76)	0.91(2.24)	0.98(2.43)	0.68(2.16)	0.52(1.67)	0.65(2.06)	0.65(2.06)	0.8(2.1)³⁾
赖氨酸 Lys	2.68(6.63)	2.31(5.74)	2.65(6.51)	2.64(6.56)	2.01(6.40)	1.73(5.54)	2.01(6.38)	2.06(6.54)	2.0(5.3)³⁾
精氨酸 Arg	2.33(5.76)	2.52(6.26)	2.49(6.12)	2.55(6.33)	1.72(5.48)	1.82(5.83)	1.86(5.90)	1.82(5.78)	2.2(5.4)⁴⁾
色氨酸 Trp	0.42(1.04)	0.37(0.92)	0.49(1.20)	0.45(1.12)	0.31(0.99)	0.30(0.96)	0.31(0.98)	0.32(1.02)	0.3(0.7)⁵⁾
非必需氨基酸NEAA
天冬氨酸 Asp	3.54(8.76)	3.32(8.25)	3.44(8.45)	3.57(8.87)	2.61(8.31)	2.56(8.20)	2.55(8.09)	2.67(8.47)
丝氨酸 Ser	1.48(3.66)	1.53(3.80)	1.52(3.73)	1.55(3.85)	1.11(3.53)	1.16(3.72)	1.14(3.62)	1.15(3.65)
谷氨酸 Glu	4.64(11.5)	4.76(11.8)	4.72(11.6)	4.78(11.9)	3.46(11.0)	3.53(11.3)	3.56(11.3)	3.56(11.3)
脯氨酸 Pro	1.64(4.06)	2.19(5.44)	2.19(5.38)	2.16(5.37)	1.20(3.82)	1.69(5.41)	1.62(5.14)	1.68(5.33)
甘氨酸 Gly	2.18(5.39)	3.44(8.55)	3.29(8.08)	3.30(8.20)	1.62(5.16)	2.58(8.26)	2.53(8.03)	2.56(8.12)
丙氨酸 Ala	2.13(5.27)	2.23(5.54)	2.20(5.40)	2.28(5.66)	1.62(5.16)	1.73(5.54)	1.68(5.33)	1.70(5.40)
胱氨酸 Cys	3.62(8.96)	4.17(10.4)	4.15(10.2)	4.13(10.3)	2.70(8.60)	3.05(9.77)	2.98(9.45)	3.11(9.87)
酪氨酸 Tyr	1.16(2.87)	1.04(2.58)	1.10(2.70)	1.14(2.83)	0.85(2.71)	0.85(2.72)	0.83(2.63)	0.86(2.73)
牛磺酸 Tau	0.14(0.35)	0.05(0.12)	0.07(0.17)	0.12(0.30)	0.09(0.29)	0.03(0.10)	0.03(0.10)	0.07(0.22)
必需氨基酸/非必需氨基酸 EAA/NEAA	44/56	40/60	42/58	42/58	44/56	40/60	42/58	42/58
¹⁾括号内数值表示氨基酸占饲料蛋白质的百分比Values in parentheses were expressed as the percentage of amino acid of dietary protein。 ²⁾凡纳滨对虾必需氨基酸建议需要量Recommended requirements of essential amino acids for Pacific white shrimp。 ³⁾该值基于Akiyama^[12]Values were based on Akiyama^[12]。 ⁴⁾该值基于Wilson^[13] Values were based on Wilson^[13]。 ⁵⁾该值基于王用黎^[14]Values were based on Wang^[14]。

表3 试验饲料氨基酸组成 Table 3 Amino acid composition of experimental diets¹⁾

1.2 试验动物

从厦门当地养殖场购进健康凡纳滨对虾仔虾，放入2个1 000 L的安有循环水装置的圆桶内培育，1个月后仔虾规格达到0.3 g左右，选取较大规格的虾苗[平均体重(0.37±0.01) g]，随机分配到32个安有循环水装置的圆桶(150 L)中，每桶30尾，每4桶对虾饲喂1种试验饲料。

1.3 饲养管理

养殖过程中每天分别在08:00、14:00、20:00定时投喂饲料，每次投喂2～3轮至饱食，第1轮少量投喂，确保虾能够快速摄食无残饵，1 h后进行第2轮投喂，30 min后吸去残料和粪便，记下残料量，并换水。每天换水量约为1/3。养殖试验持续56 d。养殖期间水温25～28 ℃，盐度26‰～28‰，氨氮含量低于0.2 mg/L，溶氧量4.7～5.3 mg/L，pH 8.0～8.2。

1.4 样品采集

养殖试验结束后，对每桶虾称重，再将虾放回圆桶内稳定24 h。在饲喂后10 h，每桶取10尾虾，用经预冷抗凝剂(50 mmol/L柠檬酸钠+10 mmol/L EDTA·Na₂配制^[15])润湿后的1 mL注射器，从心脏取血，血样以4 000 r/min离心10 min，收集血浆，血浆样本保存在-80 ℃冰箱中待测。抽完血后，剥离虾壳留取肌肉，保存在-20 ℃冰箱中。

1.5 样品测定

饲料和全虾样品中水分含量采用105 ℃烘箱干燥法测定，粗蛋白质含量采用Foss凯氏定氮仪测定，粗脂肪含量采用索氏抽提法测定，粗灰分含量采用马福炉灼烧法测定。

饲料氨基酸组成的测定方法参照文献^[16]，具体如下：饲料样品先用6 mol/L HCl真空110 ℃水解22 h，再经0.45 μm滤膜过滤后，真空抽干，加入0.02 mol/L HCl，用日立L-8900氨基酸分析仪检测。测定饲料色氨酸时用4 mol/L NaOH水解样品。测定饲料含硫氨基酸时，样品先用过甲酸(88%甲酸与30%过氧化氢按9 ∶ 1的比例混合)氧化，再用6 mol/L HCl水解。

肌肉、血浆游离氨基酸含量的测定方法参照文献^[17]，具体如下：将肌肉或血浆样品与4%的磺基水杨酸按3:1的比例混合，超声波破碎匀质，13 000 r/min下离心沉淀蛋白质。取上清液经0.45 μm滤膜过滤，滤液用日立L-8900氨基酸分析仪检测。

1.6 计算公式

成活率(survival ratio,SR,%)=
100×(终末虾数量/初始虾数量)；

增重率(weight gain rate,WGR，%)=
100×(终末均重-初始均重)/初始均重；

特定生长率(specific growth rate,SGR，%/d)=
100×(ln终末均重-ln初始均重)/饲喂天数；

饲料系数(feed conversion ratio,FCR)=
进食总量/(终末虾重+死亡虾重-初始虾重)。

1.7 数据统计

所有试验数据采用SPSS 17.0统计软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)和双因素方差分析(two-way ANOVA)，若组间存在显著差异(P<0.05)，则采用Student-Newman-Keuls法进行多重比较分析，试验数据以平均值±标准差(mean±SD)的形式表示。

2 结果 2.1 生长性能

由表4可知，与31%饲料蛋白质水平相比，40%饲料蛋白质水平显著提高了对虾的WGR和SGR(P<0.05)，降低了FCR(P<0.05)。在每个饲料蛋白质水平下，对照组(D1、D5组)对虾的WGR、SGR均显著高于其余各组(P<0.05)，说明在鸡肉粉替代鱼粉的饲料中无论添加EAA还是添加EAA+NEAA，均不能完全达到对照组的生长性能水平。但在鸡肉粉替代鱼粉的饲料中添加晶体氨基酸比不添加晶体氨基酸能够显著地改善对虾的生长性能(WGR、SGR、FCR)(P<0.05)，然而，同时添加EAA和NEAA对对虾生长性能的改善作用不大(P>0.05)。对虾的存活率在各组间无显著性差异(P>0.05)。饲料的蛋白质水平和氨基酸平衡处理之间的交互作用不显著(P>0.05)。

表4 饲喂不同试验饲料的凡纳滨对虾的生长性能 Table 4 Growth performance of Pacific white shrimp fed different experimental diets

2.2 体成分

由表5可知，与31%饲料蛋白质水平相比，40%饲料蛋白质水平显著提高了凡纳滨对虾的虾体水分、粗蛋白质和粗灰分含量(P<0.05)，而显著降低了虾体粗脂肪含量(P<0.05)。在每个饲料蛋白质水平下，晶体氨基酸添加与否对凡纳滨对虾的体成分均没有显著的影响(P>0.05)。饲料的蛋白质水平和氨基酸平衡处理之间的交互作用不显著(P>0.05)。

表5 饲喂不同试验饲料的凡纳滨对虾的体成分(湿重基础) Table 5 Body composition of Pacific white shrimp fed different experimental diets (wet weight basis)

2.3 血浆游离氨基酸含量

饲料处理对凡纳滨对虾血浆游离氨基酸含量的影响总体不显著(除游离蛋氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸外)(P>0.05)(表6)。在每个饲料蛋白质水平下，不添加氨基酸的鸡肉粉组对虾血浆游离蛋氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸含量显著低于其他各组(P<0.05)。进一步对这3种血浆游离氨基酸含量与SGR进行拟合，结果(表7)发现，血浆游离蛋氨酸含量与SGR之间相关性很低，而血浆游离苯丙氨酸和赖氨酸含量与SGR之间均相关性明显；上述3种游离氨基酸含量之和与SGR则呈线性关系；此外，血浆游离EAA/NEAA与饲料EAA/NEAA也呈良好线性关系。

表6 饲喂不同试验饲料的凡纳滨对虾的血浆游离氨基酸含量 Table 6 Plasma free amino acid contents of Pacific white shrimp fed different experimental diets

mg/dL
氨基酸 AA	组别 Groups
氨基酸 AA	D1	D2	D3	D4	D5	D6	D7	D8
必需氨基酸EAA
苏氨酸 Thr	0.51±0.09	0.42±0.12	0.45±0.08	0.50±0.06	0.37±0.08	0.27±0.09	0.34±0.10	0.38±0.12
缬氨酸 Val	0.43±0.05	0.33±0.08	0.36±0.09	0.40±0.10	0.37±0.06	0.31±0.05	0.32±0.09	0.35±0.09
蛋氨酸 Met	2.66±0.17^b	2.23±0.21^a	2.70±0.09^b	2.63±0.14^b	2.65±0.12^b	2.35±0.12^a	2.68±0.13^b	2.62±0.13^b
异亮氨酸 Ile	1.49±0.10	1.45±0.07	1.46±0.20	1.57±0.17	1.31±0.10	1.45±0.10	1.42±0.12	1.38±0.13
亮氨酸 Leu	2.57±0.23	2.52±0.58	2.64±0.20	2.61±0.51	2.36±0.33	2.84±0.40	2.85±0.23	2.87±0.63
苯丙氨酸 Phe	1.58±0.05^b	1.14±0.21^a	1.49±0.11^b	1.48±0.18^b	1.44±0.12^b	1.08±0.03^a	1.29±0.10^ab	1.40±0.09^b
组氨酸 His	2.40±0.39	1.75±0.36	2.00±0.68	1.95±0.23	1.93±0.30	1.66±0.27	1.93±0.35	1.73±0.44
赖氨酸 Lys	2.52±0.33^c	1.50±0.27^ab	2.14±0.33^bc	2.30±0.44^c	2.24±0.14^c	1.25±0.21^a	1.55±0.35^ab	2.10±0.30^bc
精氨酸 Arg	4.64±0.60	4.86±0.49	4.82±0.41	4.17±0.27	4.66±0.32	4.97±0.74	5.02±0.60	4.30±0.48
色氨酸 Trp	—	—	—	—	—	—	—	—
非必需氨基酸 NEAA
天冬氨酸 Asp	0.25±0.02	0.24±0.02	0.21±0.03	0.26±0.02	0.26±0.03	0.24±0.03	0.26±0.05	0.29±0.05
丝氨酸 Ser	0.48±0.22	0.38±0.16	0.31±0.10	0.58±0.34	0.42±0.28	0.36±0.26	0.49±0.31	0.50±0.32
谷氨酸 Glu	0.31±0.04	0.31±0.06	0.32±0.02	0.37±0.06	0.35±0.03	0.35±0.03	0.35±0.04	0.37±0.04
脯氨酸 Pro	8.46±0.50	8.28±0.85	8.49±0.31	8.15±0.97	7.82±0.81	7.94±0.67	7.85±0.38	7.70±0.56
甘氨酸 Gly	5.37±0.60	5.61±0.62	4.97±0.79	5.13±0.67	4.38±0.41	5.33±0.58	4.95±0.10	5.14±0.37
丙氨酸 Ala	2.78±0.58	2.69±0.30	3.11±0.59	2.84±0.72	2.89±0.36	3.28±0.26	3.29±0.49	2.71±0.27
胱氨酸 Cys	0.99±0.14	0.97±0.12	0.93±0.13	0.96±0.10	0.98±0.11	0.95±0.13	0.97±0.18	0.98±0.15
酪氨酸 Tyr	1.26±0.10	1.01±0.13	1.13±0.05	0.95±0.16	0.95±0.08	0.99±0.12	0.93±0.21	0.93±0.13
牛磺酸 Tau	3.54±0.35	3.49±0.16	3.63±0.35	3.12±0.34	3.29±0.32	3.47±0.15	3.42±0.36	3.53±0.27
总游离氨基酸 TFAA	40.86±2.67	39.01±1.38	38.51±6.02	39.47±1.78	36.76±3.83	36.57±4.65	36.33±6.46	36.01±4.70
游离必需氨基酸/ 非必需氨基酸 Free EAA/NEAA	45/55	41/59	44/56	44/56	45/55	41/59	44/56	44/56
同行数据肩标小写字母不同表示差异显著(P＜0.05)。表8同。 Values in the same row with different small letter superscripts indicated significant difference (P＜0.05). The same as Table 8.

表6 饲喂不同试验饲料的凡纳滨对虾的血浆游离氨基酸含量 Table 6 Plasma free amino acid contents of Pacific white shrimp fed different experimental diets

表7 特定生长率与血浆游离氨基酸含量及血浆游离必需氨基酸/非必需氨基酸与饲料必需氨基酸/非必需氨基酸的关系 Table 7 Relationships between SGR and plasma free amino acid contents or between plasma free EAA/NEAA and dietary EAA/NEAA

2.4 肌肉游离氨基酸含量

各组对虾肌肉中各种游离氨基酸和总游离氨基酸含量均无显著性差异(P>0.05)(表8)。

表8 饲喂不同试验饲料的凡纳滨对虾的肌肉游离氨基酸含量的影响 Table 8 Muscle free amino acid concentrations of shrimp fed different experimental diets

×10^-2 mg/g
氨基酸 AA	D1	D2	D3	D4	D5	D6	D7	D8
必需氨基酸EAA
苏氨酸 Thr	130.8±5.5	129.7±9.1	131.1±7.5	134.1±8.8	130.1±3.6	132.0±9.7	132.9±7.9	128.7±5.1
缬氨酸 Val	9.31±0.71	8.88±0.25	8.89±0.51	9.16±0.54	9.03±1.08	9.10±0.51	9.49±1.12	9.10±0.25
蛋氨酸 Met	4.22±0.53	3.83±0.33	4.20±0.56	3.82±0.70	4.09±0.29	4.41±0.48	4.38±0.67	4.39±0.73
异亮氨酸 Ile	6.18±0.55	5.97±0.14	6.17±0.69	5.95±0.38	6.28±0.40	6.63±0.42	6.51±0.63	6.18±0.80
亮氨酸 Leu	14.62±0.62	13.58±0.66	15.02±0.72	15.02±0.73	14.88±1.29	13.98±1.39	13.69±1.46	14.57±1.29
苯丙氨酸 Phe	24.18±1.58	25.61±0.81	27.35±1.31	26.14±1.72	26.16±2.25	24.42±1.36	24.18±1.54	25.93±0.55
组氨酸 His	55.62±3.30	52.57±2.91	54.63±4.68	53.93±4.61	52.73±3.63	55.94±3.08	54.73±1.74	55.97±3.07
赖氨酸 Lys	33.82±4.64	32.29±1.84	36.08±5.07	34.05±1.40	36.92±2.83	36.01±2.77	35.08±2.56	34.64±2.23
精氨酸 Arg	276.1±9.6	287.8±24.2	270.1±4.7	259.7±3.8	242.9±16.0	242.0±21.0	250.8±24.1	243.2±12.8
色氨酸 Trp	3.58±0.58	3.20±0.23	3.91±0.82	3.71±0.58	3.59±0.26	3.57±0.40	3.59±0.39	3.76±0.42
非必需氨基酸 NEAA
天冬氨酸 Asp	0.92±0.06	0.68±0.17	0.77±0.08	0.76±0.24	0.78±0.16	0.86±0.10	0.74±0.14	0.85±0.10
丝氨酸 Ser	18.08±1.19	17.62±1.16	17.90±1.19	18.22±1.14	16.70±2.26	18.45±2.33	17.79±1.90	19.48±0.12
谷氨酸 Glu	158.6±9.4	149.2±6.9	152.2±11.6	149.9±5.0	156.8±6.3	163.5±4.9	155.3±10.0	159.9±5.9
脯氨酸 Pro	42.93±6.85	43.95±1.67	45.11±5.14	44.79±6.41	45.56±2.28	47.74±1.90	48.94±0.62	44.81±3.05
甘氨酸 Gly	142.0±5.3	150.8±4.3	149.1±5.7	150.2±6.6	144.8±9.1	150.8±6.6	141.1±4.1	147.2±8.3
丙氨酸 Ala	20.41±0.57	26.53±2.87	24.94±0.32	23.90±3.41	21.83±2.39	26.43±2.95	24.62±3.71	23.37±2.41
胱氨酸 Cys	53.87±3.83	57.84±1.71	53.78±4.51	58.89±5.24	53.89±2.45	49.91±5.33	48.44±2.76	53.72±5.15
酪氨酸 Tyr	1.68±0.10	1.57±0.11	1.61±0.11	1.63±0.04	1.66±0.08	1.63±0.13	1.58±0.16	1.66±0.08
牛磺酸 Tau	14.05±1.66	12.48±2.07	14.86±0.88	14.59±1.17	12.45±1.96	13.87±1.96	12.34±2.56	13.33±1.07
总游离氨基酸 TFAA	997.2±28.5	996.6±26.3	993.2±13.0	997.3±10.8	992.1±29.2	990.7±21.1	986.1±37.0	981.1±12.6
游离必需氨基酸/ 非必需氨基酸 Free EAA/NEAA	55/45	55/45	55/45	54/46	56/44	53/47	54/46	53/47

表8 饲喂不同试验饲料的凡纳滨对虾的肌肉游离氨基酸含量的影响 Table 8 Muscle free amino acid concentrations of shrimp fed different experimental diets

3 讨论

本试验结果表明，高的饲料蛋白质水平明显促进凡纳滨对虾的生长和饲料利用率。Ye等^[11]的结果也表明38%饲料蛋白质水平比33%饲料蛋白质水平更有利于凡纳滨对虾生长，说明凡纳滨对虾在快速生长阶段仍需要较高的饲料蛋白质水平以满足其生长发育的需要。饲料氨基酸平衡性将关系到水产动物能否正常生长^{[18, 19]}。Gaylord等^[20]在以鸡肉粉为主要蛋白质源的饲料中补充几种EAA，使饲料EAA组成与杂交条纹鲈肌肉氨基酸组成相近，结果发现，在饲料中补充赖氨酸没有促进鲈鱼的生长，而在饲料中补充赖氨酸+蛋氨酸能明显提高鲈鱼生长和饲料效率，但在饲料中补充赖氨酸+蛋氨酸+苏氨酸后鲈鱼的生长与饲料效率又有所下降，而在饲料中补充赖氨酸+蛋氨酸+苏氨酸+亮氨酸相比于补充赖氨酸+蛋氨酸+苏氨酸，鲈鱼生长性能又有所提高。Gaylord等^[20]认为，添加的苏氨酸可能与支链氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸)在肠道产生运输竞争，使亮氨酸成为限制性氨基酸，因此降低了鲈鱼的生长。Fraga等^[21]研究了¹⁴C亮氨酸在小鼠与人体肠道上皮细胞的吸收转运过程，证实了亮氨酸与支链氨基酸、芳香族氨基酸、蛋氨酸、组氨酸及色氨酸之间均存在运输竞争。上述研究表明，只注重个别氨基酸的平衡可能会竞争性抑制其他氨基酸的吸收，从而产生新的限制性氨基酸，引起新的饲料氨基酸不平衡性问题。在本试验中，通过在鸡肉粉替代鱼粉的饲料中添加晶体EAA或同时添加晶体EAA和NEAA，使饲料中的EAA或EAA和NEAA含量与鱼粉组的一致，以期获得理想饲喂效果，结果表明，无论在高还是低的饲料蛋白质水平下，添加晶体氨基酸的试验组凡纳滨对虾的生长速度均比鱼粉组的低，说明即使用晶体氨基酸直接补齐鸡肉粉完全替代鱼粉饲料中EAA或EAA和NEAA的不足，并且满足凡纳滨对虾生长的需求(表3)，但也未必能够获得理想的饲喂效果，因此，通过采取在鸡肉粉替代鱼粉的饲料中直接添加晶体氨基酸来平衡饲料氨基酸——这一方式对凡纳滨对虾的生长促进作用是有限的。由于晶体氨基酸的生理活性不如蛋白质水解的氨基酸^[22]，这使得养殖动物，尤其是鱼虾，不能很好地利用添加到饲料中的晶体氨基酸^[8]。目前普遍认可的鱼虾利用晶体氨基酸差的原因是晶体氨基酸在消化道中吸收速度快于完整蛋白质降解的氨基酸，二者通过血液进入组织存在时间差^[23]，在组织中的代谢周转也不是同步地进行，从而降低了氨基酸利用率。有研究指出，饲料中过高的鱼粉蛋白质替代水平不利于鱼虾对晶体氨基酸的利用^[24]。在本试验中，鸡肉粉全部替代鱼粉蛋白质同样会降低凡纳滨对虾对饲料中晶体氨基酸的利用率。由于试验饲料中对鱼粉蛋白质的替代水平为100%，因此，作为试验饲料主要蛋白质源的鸡肉粉势必会影响饲料的适口性^{[1, 25]}，这与鸡肉粉以大比例替代鱼粉后饲料中饱和脂肪酸的含量增加而多不饱和脂肪酸含量相应下降有关^[26]。可见，试验饲料适口性的下降导致凡纳滨对虾摄食量减少，从而降低了生长速度。此外，尽管各试验组饲料的EAA含量与鱼粉组饲料一致，但由于鸡肉粉的氨基酸利用率低于鱼粉，因此试验组饲料中实际用于鱼生长的EAA量有限^[27]，这也是鸡肉粉以大比例替代鱼粉造成凡纳滨对虾生长不佳的一个原因。

除了饲料氨基酸含量要满足对虾需要之外，氨基酸之间的平衡性也在一定程度上影响饲喂效果。本试验表明，鸡肉粉+EAA组、鸡肉粉+EAA+NEAA组对虾生长速度明显比鸡肉粉组的快，饲料利用率明显改善。但在饲料中进一步补充晶体NEAA并未起到进一步提高凡纳滨对虾生长性能的作用，这可能与饲料中EAA/NEAA有关。Peres等^[28]报道，饲料中EAA/NEAA为60/40时，欧洲海鲈获得最大的饲料利用率。当饲料中EAA/NEAA为57/43时，虹鳟获得最大氮沉积与最小氮排泄^[29]。本试验中，鱼粉组饲料中EAA/NEAA为44/56，鸡肉粉+EAA组和鸡肉粉+EAA+NEAA组饲料中EAA/NEAA均为42/58，鸡肉粉组饲料中EAA/NEAA为40/60，以鸡肉粉组饲料中EAA/NEAA为最低，这也与凡纳滨对虾生长性能的结果一致。通过平衡饲料氨基酸来改善饲料效率反过来又可以减少饲料蛋白质浪费，从而达到在不影响生长性能的前提下降低饲料蛋白质水平的目的^[19]。

本试验结果显示，饲料蛋白质水平影响虾体成分，高饲料蛋白质水平促进凡纳滨对虾虾体蛋白质和粗灰分的沉积，该结果与Ye等^[11]报道的结果一致，相反，高饲料蛋白质水平降低虾体脂肪的沉积，该结果与Ye等^[11]和Mu等^[30]的结果一致。低饲料蛋白质水平导致虾体蛋白质沉积降低而脂肪沉积增加，原因可能是，低的饲料蛋白质水平更易出现氨基酸平衡失衡问题，尤其是EAA的失衡(表3)，因此，部分EAA被用于能量代谢，过多能量会转化为脂肪并以体脂的形式沉积，而相应地减少了氨基酸用于蛋白质的沉积。Xie等^[31]研究表明，饲料赖氨酸含量从1.44%升到1.99%时，凡纳滨对虾虾体的蛋白质含量变化不明显，而当饲料赖氨酸含量增加到2.23%时，虾体蛋白质含量出现明显增加。他们认为，饲料赖氨酸的缺乏可能增加了其他EAA的氧化，降低了氨基酸的沉积。在每一个饲料蛋白质水平下，外源添加氨基酸与否并不影响凡纳滨对虾的体成分，可见，凡纳滨对虾的体成分不受饲料氨基酸平衡性的影响。

水产动物体内游离氨基酸水平能够在一定程度上反映不同饲料蛋白质的利用程度^{[32, 33]}。在本试验中，尽管鸡肉粉组的饲料苏氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸和组氨酸含量低于凡纳滨对虾需求量，而赖氨酸则满足需求(表3)，但饲养试验结果表明，只有该组凡纳滨对虾仅血浆游离赖氨酸、蛋氨酸和苯丙氨酸含量低于鱼粉组的水平，血浆游离苏氨酸和组氨酸含量并没有出现不足。由此可见，饲料赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸在进入凡纳滨对虾外周血液循环过程中极易造成缺乏，可能与消化吸收过程中氨基酸之间的拮抗作用有关，但具体的机制还不清楚。Berge等^[34]报道，赖氨酸与精氨酸在大西洋鲑肠道中竞争相同转运载体，低浓度的赖氨酸能够促进精氨酸的吸收，高浓度的赖氨酸则抑制精氨酸的吸收，而精氨酸在任何浓度下都会阻碍肠道对赖氨酸的吸收。Berge等^[35]的体外研究结果表明，培养液中低浓度的蛋氨酸在大西洋鲑肠道中的吸收会被其他氨基酸所抑制，然而当蛋氨酸浓度提高到一定水平，这种抑制作用又会被解除，当培养液中缺乏某些氨基酸时，也会降低肠道对蛋氨酸的吸收。当饲喂添加晶体EAA或晶体EAA+NEAA的鸡肉粉替代鱼粉的饲料后，对虾血浆游离赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸含量恢复到鱼粉组的水平，这与通过添加氨基酸使鱼粉替代饲料的氨基酸平衡性得到改善有关。凡纳滨对虾生长与其血浆游离赖氨酸或苯丙氨酸含量变化密切相关，且对虾的SGR随其血浆赖氨酸或苯丙氨酸含量的上升而增加。这说明饲料中某些EAA的缺乏或饲料氨基酸不平衡都可能会减少凡纳滨对虾对某些EAA的吸收，降低其在血浆中的含量，导致凡纳滨对虾的生长变慢^{[31, 36]}。凡纳滨对虾肌肉中游离氨基酸含量在各组间无显著变化，这可能是因为肌肉组织中的蛋白质分解与合成处于相对平衡的状态。Mente等^[16]的研究证实，凡纳滨对虾肌肉组织细胞内游离氨基酸的运输是依靠主动的跨膜运输来调节。本试验还发现，所有组对虾血浆中游离EAA/NEAA均比肌肉中游离EAA/NEAA低，可能反映了不同组织对EAA和NEAA代谢强度的不同^[37]。由于凡纳滨对虾血浆游离EAA/NEAA与饲料EAA/NEAA之间呈正线性关系，其变化直接与饲料氨基酸丰度与平衡性关系密切^[38]，因此，血浆游离氨基酸起到了动物机体氨基酸代谢的中转库作用。

4 结论

① 在鸡肉粉完全替代鱼粉的饲料中添加晶体EAA比不添加晶体EAA对凡纳滨对虾的生长促进效果明显，但仍达不到鱼粉组的饲喂效果。在添加了晶体EAA的鸡肉粉饲料中进一步补充晶体NEAA对凡纳滨对虾的生长没有明显促进作用。

② 饲喂高蛋白质水平(40%)的饲料比饲喂低蛋白质水平(31%)的饲料更能促进凡纳滨对虾的生长，且高饲料蛋白质水平增加凡纳滨对虾的体蛋白质沉积，减少体脂肪沉积。

参考文献

[1]	CRUZ-SUÁREZ L E,NIETO-LÓPEZ M,GUAJARDO-BARBOSA C,et al.Replacement of fish meal with poultry by-product meal in practical diets for Litopenaeus vannamei,and digestibility of the tested ingredients and diets[J]. Aquaculture,2007,272(1/2/3/4):466-476. (4)
[2]	CHI S Y,TAN B P,MAI K S,et al.Growth and feed efficiency of juvenile shrimp Litopenaeus vannamei fed formulated diets containing different levels of poultry by-product meal[J]. Journal of Ocean University of China,2009,8(4):399-403. (3)
[3]	ZHU W,MAI K S,ZHANG B G,et al.A study on the meat and bone meal and poultry by-product meal as protein substitutes of fish meal in practical diets for Litopenaeus vannamei juveniles[J]. Journal of Ocean University of China,2004,3(2):157-160. (1)
[4]	SAMOCHA T M,DAVIS D A,SAOUD I P,et al.Substitution of fish meal by co-extruded soybean poultry by-product meal in practical diets for the Pacific white shrimp,Litopenaeus vannamei[J]. Aquaculture,2004,231(1/2/3/4):197-203. (1)
[5]	DAVIS D A,ARNOLD C R.Replacement of fish meal in practical diets for the Pacific white shrimp,Litopenaeus vannamei[J]. Aquaculture,2000,185(3/4):291-298. (1)
[6]	CHENG Z J,BEHNKE K C,DOMINY W G.Effects of poultry by-product meal as a substitute for fish meal in diets on growth and body composition of juvenile Pacific white shrimp,Litopenaeus vannamei[J]. Journal of Applied Aquaculture,2002,12(1):71-83. (1)
[7]	SAOUD I P,RODGERS L J,DAVIS D A,et al.Replacement of fish meal with poultry by-product meal in practical diets for redclaw crayfish (Cherax quadricarinatus)[J]. Aquaculture Nutrition,2008,14(2):139-142. (1)
[8]	YE J D,LIU X H,KONG J H,et al.The evaluation of practical diets on a basis of digestible crude protein,lysine and methionine for Litopenaeus vannamei[J]. Aquaculture Nutrition,2012,18(6):651-661. (2)
[9]	EL-SAIDY D M S D,GABER M M A.Complete replacement of fish meal by soybean meal with dietary L-lysine supplementation for Nile tilapia,Oreochromis niloticus (L.) fingerlings[J]. Journal of the World Aquaculture Society,2002,33(3):297-306. (1)
[10]	HU M H,WANG Y J,WANG Q,et al.Replacement of fish meal by rendered animal protein ingredients with lysine and methionine supplementation to practical diets for gibel carp,Carassius auratus gibelio[J]. Aquaculture,2008,275(1/2/3/4):260-265. (1)
[11]	YE J D,WANG K,LI F D,et al.Incorporation of a mixture of meat and bone meal,poultry by-product meal,blood meal and corn gluten meal as a replacement for fish meal in practical diets of Pacific white shrimp Litopenaeus vannamei at two dietary protein levels[J]. Aquaculture Nutrition,2011,17(2):e337-e347. (4)
[12]	AKIYAMA D M.Future considerations for shrimp nutrition and the aquaculture feed industry[C]//WYBAN J.Proceedings of the special session on shrimp farming.Baton Rouge:World Aquaculture Society,1992:198-205. (1)
[13]	WILSON R P.Amino acid requirements of finfish and crustaceans[M]//D’MELLO J P F.Amino acids in animal nutrition.2nd ed.Oxon:CAB International,2003:427-447. (1)
[14]	王用黎.凡纳滨对虾幼虾对苏氨酸、亮氨酸、色氨酸和缬氨酸需要量的研究[D]. 硕士毕业论文.湛江:广东海洋大学,2013. (1)
[15]	蒋琼,王雷,罗日祥.中国对虾血淋巴抗凝剂的筛选[J]. 水产学报,2001,25(4):359-362. (1)
[16]	MENTE E,COUTTEAU P,HOULIHAN D,et al.Protein turnover,amino acid profile and amino acid flux in juvenile shrimp Litopenaeus vannamei:effects of dietary protein source[J]. Journal of Experimental Biology,2002,205(20):3107-3122. (2)
[17]	FINDLEY A M,STICKLE W B.Effects of salinity fluctuation on the hemolymph composition of the blue crab Callinectes sapidus[J]. Marine Biology,1978,46(1):9-15. (1)
[18]	GATLIN D M III,BARROWS F T,BROWN P,et al.Expanding the utilization of sustainable plant products in aquafeeds:a review[J]. Aquaculture Research,2007,38(6):551-579. (1)
[19]	GAYLORD T G,BARROWS F T.Multiple amino acid supplementations to reduce dietary protein in plant-based rainbow trout,Oncorhynchus mykiss,feeds[J]. Aquaculture,2009,287(1/2):180-184. (2)
[20]	GAYLORD T G,RAWLES S D.The Modification of poultry by-product meal for use in hybrid striped bass Morone chrysops×M.saxatilis diets[J]. Journal of the World Aquaculture Society,2005,36(3):363-374. (2)
[21]	FRAGA S,SERRÀO M P,SOARES-DA-SILVA P.L-type amino acid transporters in two intestinal epithelial cell lines function as exchangers with neutral amino acids[J]. Journal of Nutrition,2002,132(4):733-738. (1)
[22]	PERES H,OLIVA-TELES A.Effect of the dietary essential amino acid pattern on growth,feed utilization and nitrogen metabolism of European sea bass (Dicentrarchus labrax)[J]. Aquaculture,2007,267(1/2/3/4):119-128. (1)
[23]	麦康森,李爱杰,尹左芬.对虾对饵料蛋白质及氨基酸吸收利用的研究[J]. 海洋学报,1987,9(4):489-495. (1)
[24]	迟淑艳.低鱼粉饲料中添加微胶囊蛋氨酸或晶体蛋氨酸对军曹鱼和凡纳滨对虾生长性能的影响[D]. 博士学位论文.青岛:中国海洋大学,2009. (1)
[25]	董纯.蛋白源适口性对大菱鲆幼鱼生长、体组成和表观消化率的影响[D]. 硕士学位论文.青岛:中国海洋大学,2014. (1)
[26]	MILLAMENA O M.Replacement of fish meal by animal by-product meals in a practical diet for grow-out culture of grouper Epinephelus coioides[J]. Aquaculture,2002,204(1/2):75-84. (1)
[27]	SUBHADRA B,LOCHMANN R,RAWLES S,et al.Effect of fish-meal replacement with poultry by-product meal on the growth,tissue composition and hematological parameters of largemouth bass (Micropterus salmoides) fed diets containing different lipids[J]. Aquaculture,2006,260(1/2/3/4):221-231. (1)
[28]	PERES H,OLIVA-TELES A.Effect of the dietary essential to non-essential amino acid ratio on growth,feed utilization and nitrogen metabolism of European sea bass (Dicentrarchus labrax)[J]. Aquaculture,2006,256(1/2/3/4):395-402. (1)
[29]	GREEN J A,HARDY R W,BRANNON E L.The optimum dietary essential:nonessential amino acid ratio for rainbow trout (Oncorhynchus mykiss),which maximizes nitrogen retention and minimizes nitrogen excretion[J]. Fish Physiology and Biochemistry,2002,27(1/2):109-115. (1)
[30]	MU Y Y,SHIM K F,GUO J Y.Effects of protein level in isocaloric diets on growth performance of the juvenile Chinese hairy crab,Eriocheir sinensis[J]. Aquaculture,1998,165(1/2):139-148. (1)
[31]	XIE F J,ZENG W P,ZHOU Q C,et al.Dietary lysine requirement of juvenile Pacific white shrimp,Litopenaeus vannamei[J]. Aquaculture,2012,358-359:116-121. (2)
[32]	冷向军,王冠,李小勤,等.饲料中添加晶体或包膜氨基酸对异育银鲫生长和血清游离氨基酸水平的影响[J]. 水产学报,2007,31(6):743-748. (1)
[33]	SEGOVIA-QUINTERO M A,REIGH R C.Coating crystalline methionine with tripalmitin-polyvinyl alcohol slows its absorption in the intestine of Nile tilapia,Oreochromis niloticus[J]. Aquaculture,2004,238(1/2/3/4):355-367. (1)
[34]	BERGE G E,BAKKE-MCKELLEP A M,LIED E.In vitro uptake and interaction between arginine and lysine in the intestine of Atlantic salmon (Salmo salar)[J]. Aquaculture,1999,179(1/2/3/4):181-193. (1)
[35]	BERGE G E,GOODMAN M,ESPE M,et al.Intestinal absorption of amino acids in fish:kinetics and interaction of the in vitro uptake of L-methionine in Atlantic salmon (Salmo salar L.)[J]. Aquaculture,2004,229(1/2/3/4):265-273. (1)
[36]	曾雯娉.凡纳滨对虾幼虾对赖氨酸、蛋氨酸、精氨酸和苯丙氨酸需要量的研究[D]. 硕士学位论文.湛江:广东海洋大学,2012. (1)
[37]	GUNASEKERA R M,SHIM K F,LAM T J.Influence of dietary protein content on the distribution of amino acids in oocytes,serum and muscle of Nile tilapia,Oreochromis niloticus (L.)[J]. Aquaculture,1997,152(1/2/3/4):205-221. (1)
[38]	YOUNG V R,ZAMORA J.Effects of altering the proportions of essential to nonessential amino acids on growth and plasma amino acid levels in the rat[J]. Journal of Nutrition,1968,96(1):21-27. (1)


动物营养学报 2015, Vol. 27 Issue (6): 1709-1721	PDF (1180 KB)