2. 湖南新发展农牧科技有限公司,衡阳 421001
2. Hunan Xinfazhan Agriculture and Animal Husbandry Technology Co.,Ltd.,Hengyang 421001,China
在饲粮蛋白质水平降低的情况下,缬氨酸是猪常规饲粮中的第五限制性氨基酸,开展猪缬氨酸需要量的研究,对于猪氨基酸模型的建立和完善有着十分重要的意义[1]。但国内外有关育肥猪缬氨酸需要量的研究几乎没有,在最新的NRC(2012)[2]中总结的氨基酸需要量文献综述里,近10年来没有1篇关于育肥猪缬氨酸需要量的研究。由于国内外研究学者主要集中在对赖氨酸、蛋氨酸、色氨酸和苏氨酸的大量试验和论述,少有缬氨酸需要量的合理评估,特别是对于育肥猪缬氨酸的需要量评估需要做更多的研究工作。本研究采用玉米-豆粕型饲粮,以育肥猪为研究对象,以NRC(2012)[2]猪的营养需要推荐值为标准,探讨在我国养殖条件下育肥猪的最佳标准回肠可消化缬氨酸(SID Val)的需要量。
1 材料与方法 1.1 试验动物及饲粮试验采用单因素完全随机设计。试验1选用360头初始体重为(53.75±2.63) kg的杜×长×大三元杂交育肥猪,按体重相近、遗传基础相似的原则,随机分为5个处理,每个处理6个重复,每个重复(圈)12头猪,公、母各占1/2,试验期为50~80 kg阶段。以饲粮标准回肠可消化氨基酸为基础补充赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸满足NRC (2012)[2]推荐值,除缬氨酸外,其余养分满足或超过NRC(2012)[2]推荐值。试验配制了5种试验饲粮,饲粮的SID Val水平分别为0.50%、0.55%、0.60%、0.65%和0.70%。试验2选用360头初始体重为(83.67±2.92) kg的杜×长×大三元杂交育肥猪,试验分组方法与试验1相同,试验期为80~120 kg阶段。试验配制的5种试验饲粮的SID Val水平分别为0.43%、0.48%、0.53%、0.58%和0.63%。50~80 kg和80~120 kg阶段育肥猪试验饲粮组成及营养水平分别见表1和表2。
![]() | 表1 50~80 kg阶段育肥猪试验饲粮组成及营养水平(饲喂基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets for finisher pigs during 50 to 80 kg stage (as-fed basis) |
![]() | 表 2 80~120 kg阶段育肥猪试验饲粮组成及营养水平(饲喂基础) Table 2 Composition and nutrient levels of experimental diets for finisher pigs during 80 to 120 kg stage (as-fed basis) |
试验在湖南大有养殖发展有限公司湘乡猪场进行。试验猪饲养在封闭式猪舍内,一半地面为水泥漏缝地面,通风良好。试验期间每天上午和下午各加料1次,自由采食和饮水,按猪场常规程序进行消毒、驱虫和免疫。
1.3 检测指标和方法 1.3.1 饲粮成分饲粮干物质、粗蛋白质、钙和总磷含量分别参照中华人民共和国国家标准GB/T 6435—1986、GB/T 6432—1994、GB/T 6436—2002和GB/T 6437—2002推荐的方法测定。
饲粮样品在40目粉碎后,分别在110 ℃下6 mol/L盐酸水解24 h和0 ℃下过甲酸氧化16 h后经盐酸水解24 h用氨基酸自动分析仪(日立L-8800,日本)测定15种氨基酸和含硫氨基酸含量。
1.3.2 生长性能分别于每个试验开始和结束时早晨空腹个体称重,以重复(圈)为单位记录耗料量,计算平均日增重、平均日采食量和料重比。
1.3.3 血液指标在每个试验结束前2天,每圈按耳标固定2头猪(每个处理12头猪)进行空腹采血,用真空采血管从前腔静脉采血10 mL,采用肝素钠抗凝管,血液在室温下倾斜放置30 min,3 500 r/min离心10 min,分离血浆,置于-20 ℃冷冻保存。采用全自动生化分析仪(拜耳TECHNICON RA-1000,美国)及试剂盒(中生北控生物科技股份有限公司)方法测定血浆尿素氮含量。
采用经典的茚三酮柱后衍生法原理应用氨基酸分析仪(Sykam S-433D,德国)锂柱系统测定血浆氨基酸含量。取1 mL血浆于高速离心机专用离心试管中,加入3 mL磺基水杨酸(10%)的锂缓冲溶液,充分振荡摇匀,置于4 ℃冰箱中存放5 min,取出后离心,4 ℃下50 000 r/min离心15 min,取上清液,通过锂离子交换色谱柱并与茚三酮在130 ℃下进行衍生反应,测定血浆游离氨基酸含量[3]。
1.4 统计分析试验数据用Excel软件进行初步处理后,采用SAS 8.2的GLM模型统计分析。在所有处理的方差分析中,采用ANOVA程序对饲粮SID Val水平进行分析,P<0.05作为差异显著性标准;同时采用线性模型和二次曲线模型对饲粮SID Val水平的影响进行评定,并用折线模型求得生长猪饲粮中最佳SID Val需要量。
2 结果与分析 2.1 饲粮SID Val水平对育肥猪生长性能的影响整个试验期间,猪群健康状况良好。
试验1:饲粮SID Val水平最低处理(饲粮SID Val水平为0.50%)的平均日增重最低,仅为882 g/d,随着饲粮SID Val水平的增加,试验猪的平均日增重先升高后降低,且呈线性和二次趋势(P<0.01),在饲粮SID Val水平为0.65%时试验猪的平均日增重最高,达到931 g/d;饲粮SID Val水平为0.60%、0.65%和0.70%的处理料重比相当,但均显著低于饲粮SID Val水平为0.50%的处理(P<0.05),且随着饲粮SID Val水平的增加呈线性和二次趋势(P<0.01),在饲粮SID Val水平为0.65%时试验猪的料重比最佳,仅为2.44(表3)。
![]() | 表 3 饲粮SID Val水平对育肥猪(50~80 kg阶段)生长性能的影响(试验1) Table 3 Effects of dietary SID Val level on growth performance of finisher pigs (50 to 80 kg stage) (experiment 1) |
试验2:饲粮SID Val水平最低处理(饲粮SID Val水平为0.43%)的平均日增重最低,仅为917 g/d,随着饲粮SID Val水平的增加,试验猪的平均日增重先升高后降低,且呈线性和二次趋势(P<0.01),在饲粮SID Val水平为0.53%时试验猪的平均日增重最高,达到960 g/d;饲粮SID Val水平为0.53%、0.58%和0.63%的处理料重比相当,但均显著低于饲粮SID Val水平为0.43%和0.48%的处理(P<0.05),且饲粮SID Val水平的增加呈线性和二次趋势(P<0.01),在饲粮SID Val水平为0.53%时试验猪的料重比最佳,仅为2.96(表4)。
![]() | 表 4 饲粮SID Val水平对育肥猪(80~120 kg阶段)生长性能的影响(试验2) Table 4 Effects of dietary SID Val level on growth performance of finisher pigs (80 to 120 kg stage) (experiment 2) |
饲粮SID Val水平对育肥猪血浆氨基酸和尿素氮含量的影响见表5和表6。
![]() | 表 5 饲粮SID Val水平对育肥猪(50~80 kg阶段)血浆氨基酸和尿素氮含量的影响(试验1) Table 5 Effects of dietary SID Val level on plasma amino acid and urea nitrogen contents of finisher pigs (50 to 80 kg stage) (experiment 1) |
![]() | 表 6 饲粮SID Val水平对育肥猪(80~120 kg阶段)血浆氨基酸和尿素氮含量的影响(试验2) Table 6 Effects of dietary SID Val level on plasma amino acid and urea nitrogen contents of finisher pigs (80 to 120 kg stage) (experiment 2) |
试验1:饲粮SID Val水平对血浆尿素氮含量无显著影响(P>0.05)。不同处理间血浆中各氨基酸含量方差分析均不显著(P>0.05),但苯丙氨酸含量随饲粮SID Val水平的增加呈现先降低后升高的二次趋势(P<0.05)。
试验2:饲粮SID Val水平对血浆尿素氮含量无显著影响(P>0.05)。除血浆谷氨酸和脯氨酸含量外,随饲粮SID Val水平的增加,血浆中所有必需氨基酸和其他非必需氨基酸含量均无显著变化(P>0.05)。血浆谷氨酸和脯氨酸含量均以饲粮SID Val水平为0.48%时最高,其中谷氨酸含量显著高于除饲粮SID Val水平为0.58%的其余处理(P<0.05),脯氨酸含量显著高于其他处理(P<0.05)。
2.3 育肥猪缬氨酸需要量的折线模型和回归分析
对试验1数据进行整理,分别以平均日增重和料重比数据作折线模型和二次回归分析,得出图1和图2。图1中显示平均日增重的折点在饲粮SID Val水平为0.65%时(平台值为927 g/d,R2=0.96),平均日增重(Y)二次曲线最大值出现在饲粮SID Val水平(X)为0.66%时(Y=-457.1X2+812.6X+586.5,R2=0.91)。图2中显示料重比的折点在饲粮SID Val水平为0.61%时(平台值为2.46,R2=0.98),料重比(Y)二次曲线最小值出现在饲粮SID Val水平(X)为0.66%(Y=3.73X2-4.92X+4.07,R2=0.99)。
![]() | 图1 饲粮SID Val水平与育肥猪(50 to 80 kg阶段)平均日增重的折线和二次回归趋势 Fig. 1Broken-line and quadratic regression trends of between dietary SID Val level and ADG of finisher pigs (50 to 80 kg stage) |
![]() | 图2 饲粮SID Val水平与育肥猪(50 to 80 kg阶段)料重比的折线和二次回归趋势 Fig. 2 Broken-line and quadratic regression trends of between dietary SID Val level and F/G of finisher pigs (50 to 80 kg stage) |
对试验2数据进行整理,分别以平均日增重和料重比数据作折线模型和二次回归分析,得出图3和图4。图3显示平均日增重的折点在饲粮SID Val水平为0.52%时(平台值为960 g/d,R2=0.98),平均日增重(Y)二次曲线最大值出现在饲粮SID Val水平(X)为0.55%时(Y=-3071.7X2+3372.3X+33.86,R2=0.96)。图4显示料重比的折点在饲粮SID Val水平为0.53%时(平台值为2.99,R2 = 0.93),料重比(Y)二次曲线最小值出现在饲粮SID Val水平(X)为0.56%时(Y=9.19X2-10.24X+5.83,R2=0.88)。
![]() | 图3 饲粮SID Val水平与育肥猪(80 to 120 kg阶段)平均日增重的折线和二次回归趋势 Fig. 3 Broken-line and quadratic regression trends of between dietary SID Val level and ADG of finisher pigs (80 to 120 kg stage) |
![]() | 图4 饲粮SID Val水平与育肥猪(80 to 120 kg阶段)料重比的折线和二次回归趋势 Fig. 4 Broken-line and quadratic regression trends of between dietary SID Val level and F/G of finisher pigs (80 to 120 kg stage) |
自1995年以来对于缬氨酸需要量的研究主要集中在仔猪[4]和生长猪[5]上,育肥猪前期缬氨酸需要量的文献研究仅有Lewis等[6]和Liu等[7]2篇文献。Lewis等[6]给67~80 kg育肥猪饲喂由玉米+玉米淀粉+明胶配制的半纯合饲粮,其研究发现67~80 kg育肥猪饲粮中赖氨酸含量为0.64%,代谢能为14.80 MJ/kg时,饲粮缬氨酸需要量为0.45%,SID Val需要量为0.38%,育肥猪采食11.25 g/d缬氨酸即可满足生长需要。之后,Liu等[7]研究发现,给初始体重为59.8 kg的育肥猪饲喂玉米豆粕型饲粮后,在真可消化赖氨酸水平为0.70%时,真可消化缬氨酸需要量为0.37%,且育 肥猪采食11.4 g/d缬氨酸即可满足生长需要,这与Lewis等[6]报道的结果相近,也与NRC(1998)[8] 推荐的育肥猪前期缬氨酸需要量为11.6 g/d相近。在最新版的NRC(2012)[2]中,50~75 kg阶段的育肥猪SID Val的推荐量为0.55%,远远高于Lewis等[6]和NRC(1998)[8]的0.45%及Liu等[7]的0.37%,但NRC(2012)[2]的SID Val:赖氨酸的推荐值为65%,与NRC(1998)[8]推荐的68%相近,远远高于Liu等[7]报道的52%。
在试验1中,当饲粮中标准回肠可消化赖氨酸(SID Lys)水平为0.85%时,以平均日增重和料重比作为评价指标时,得到育肥猪前期(50~80 kg阶段)饲粮SID Val需要量范围值为0.61%~0.66%,考虑到50~80 kg阶段的育肥猪在实际养殖中和生长猪一样,一般均以生长速度作为最佳评判指标,且综合表3的方差分析数据,即饲粮SID Val水平超过0.61%时料重比依然没有出现显著增加,反而在饲粮SID Val水平达到0.65%时料重比最佳,仅为2.44,这与平均日增重的数据分析中的折点0.65%一致。因此,以满足生长性能的最低饲粮SID Val水平0.65%作为育肥猪前期(50~80 kg阶段)SID Val的最低需要量更为适宜。
本试验得到育肥猪前期(50~80 kg阶段)SID Val需要量为0.65%,远远高于NRC(1998)[8]推荐的0.45%和NRC(2012)[2]推荐的0.55%。由于NRC(1998,2012)[2, 8]的营养需要量主要是依据前人研究文献总结或推算得出,如前所述,对于育肥猪前期缬氨酸需要量的相关研究仅2篇,且研究年份均已超过10年之久,随着养殖饲养水平的提高,品种、环境、饲养方式的改变,之前所述的2篇研究估测值可能偏低。这从最近2版NRC推荐数值的改变就可以看出,NRC(1998)[8]推荐的育肥猪前期SID Val为0.45%,但NRC(2012)[2]则提高到了0.55%,日采食量也从11.6 g/d增加到12.3 g/d。这表明NRC的编写者已经考虑之前的研究数值存在偏低的问题。此外,NSNG(2010)[9]中推荐的高生长速度瘦肉型猪(25~120 kg平均日增重为800 g/d左右)的SID Val需要量为0.60%(公猪)和0.63%(母猪),与本研究得到的0.65%相近,这表明本次试验结果是符合当前饲养条件下育肥猪的SID Val需要的。
同时,在当前养殖条件下,按照NRC(2012)[2]推荐的氨基酸需要量配制的饲粮并不能满足当前的育肥猪前期生产需要(表3中的饲粮SID Val水平为0.55%的处理与最佳处理相比,平均日增重显著降低),这表明NRC(2012)[2]推荐的氨基酸含量并不一定可以满足我国当前生产条件下的育肥猪前期(50~80 kg阶段)的最佳生产效益需求。
3.2 饲粮SID Val水平对育肥猪后期生长性能的影响目前暂未见育肥猪后期(80~120 kg阶段)饲粮SID Val需要量的相关报道。这其中的原因可能是2个方面:一方面是在20世纪末,一般条件下生长育肥猪的上市体重推荐为90~100 kg,这样才能获得生产效益的最大化[10],因此很少有关于育肥猪后期的相关试验研究;另一方面是在2000年以前,单一氨基酸的添加成本昂贵,尤其是蛋氨酸、色氨酸、缬氨酸等价格居高不下,对于利用氨基酸平衡来降低饲粮蛋白质水平的研究仅停留在理论研究阶段,很少有规模养殖生产上的应用。上述这2个方面在近10年来均有了极大的改变,育肥猪的上市体重已经从100 kg增加到了116 kg甚至130 kg都不会影响到生产效益,相反还会有利于改善肉的品质[11, 12];单一氨基酸的商业化生产工艺技术得到提高,不仅使蛋氨酸、色氨酸等添加成本显著降低,甚至缬氨酸、精氨酸和异亮氨酸等添加成本也在大幅度下降[13]。因此,有必要利用合成氨基酸进行育肥猪后期的氨基酸需要量的研究,以期为养猪生产提供更多的参考数据和降低饲料配制成本。
在试验2中,当饲粮SID Lys水平为0.74%时,以平均日增重和料重比作为评价指标时,得到育肥猪后期(80~120 kg阶段)饲粮SID Val需要量范围值为0.52%~0.56%,考虑到80~120 kg阶段的育肥猪在实际养殖条件下一般以料重比作为最佳评判指标,且综合表4的方差分析数据,即饲粮SID Val水平超过0.52%时,平均日增重依然没有出现下降,反而在饲粮SID Val水平达到0.53%时,平均日增重最佳,达到964 g/d,这与料重比的数据分析中的折点0.53%一致。因此,满足饲料最佳报酬的最低饲粮SID Val水平0.53%作为育肥猪后期(80~120 kg阶段)SID Val的最低需要量更为适宜。
同育肥猪前期一样,国内外对于育肥猪后期缬氨酸需要量的相关研究缺乏,而NRC(1998)[8]引用的文献研究年份已超过15年,随着饲养水平的提高,品种、环境、饲养方式的改变,其推荐值(0.35%)可能偏低。NRC(2012)[2]对75~100 kg阶段育肥猪SID Val的推荐量为0.48%,100~135 kg阶段育肥猪的推荐量为0.41%,与NSNG(2010)[9]分别推荐的0.51%(母猪)、0.47%(阉公猪)和0.45%(母猪)、0.41%(阉公猪)相近,本次研究得到育肥猪后期(80~120 kg阶段)的SID Val需要量为0.53%,与NSNG(2010)[9]推荐的80~100 kg母猪SID Val需要量(0.51%)比较接近,略高于NRC(2012)[2]对75~100 kg育肥猪的推荐值(0.48%)。
由于本试验为80~120 kg阶段的育肥猪,参考的营养标准为NRC(2012)[2]推荐的75~100 kg阶段的需要量数据,没有在100 kg体重的时候再分阶段重新设计试验饲粮,导致100~120 kg的SID Lys与80~100 kg阶段的含量一样,提高了100~120 kg阶段育肥猪饲粮SID Lys的含量,可能引起了该阶段育肥猪SID Val需要量的相应增加,从而可能高估了整个阶段育肥猪SID Val的需要量。如果进一步细分育肥猪的试验阶段,是否会得到与NRC(2012)[2]推荐量相一致的数据,这需要进一步的研究。
同时按照NRC(2012)[2]推荐的氨基酸需要量配制的饲粮并不能满足当前的养猪生产需要表4中的饲粮SID Val水平为0.48%的处理与最佳处理相比,平均日增重相近(942 g/d vs. 964 g/d),料重比则显著增加],这表明NRC(2012)[2]推荐的氨基酸含量可以满足当前养殖条件下的育肥猪后期(80~120 kg阶段)的生长需求,但并不一定达到最佳生产效益。当然,正如上所述,由于试验过程体重阶段划分的差异性可能影响到猪的饲料效益计算,因此需要进一步的研究才能确定。
3.3 饲粮SID Val水平对育肥猪血浆氨基酸和尿素氮含量的影响血浆尿素氮和游离氨基酸已确定是氨基酸需要量的重要衡量指标并且已广泛应用[14, 15]。Coma等[14]报道指出,瘦肉组织的增长与血浆尿素氮、游离氨基酸的含量呈负相关,但大多数研究表明饲粮中蛋白质的质量和水平影响血液中的尿素氮和游离氨基酸的含量。试验1和试验2中饲粮SID Val水平的增加对血浆尿素氮和游离必需氨基酸含量的影响几乎均不显著,试验中参考的氨基酸模型是依据NRC(2012)[2]推荐的理想蛋白质模型,这说明本试验中饲粮SID Val的水平设置比较合理,并没有因为过高或过低而对育肥猪体内氨基酸利用率产生不良影响。
4 结 论在50~80 kg、80~120 kg阶段的育肥猪生产中,当饲粮中SID Lys水平分别为0.85%和0.74%时,以平均日增重及料重比作为评价指标,采用折线和二次回归模型分析,得到2个阶段育肥猪的饲粮SID Val需要量范围值为0.52%~0.56%,最佳需要量分别为0.65%和0.53%。同时,在本试验条件下,参照NRC(2012)推荐的氨基酸需要量模型配制的饲粮并不能较好的满足当前的育肥猪生产需要。
[1] | FIGUEROA J L,LEWIS A J,MILLER P S,et al.Growth,carcass traits,and plasma amino acid concentrations of gilts fed low-protein diets supplemented with amino acids including histidine,isoleucine,and valine[J]. Journal of Animal Science,2003,81(6):1529-1537. (![]() |
[2] | NRC.Nutrient requirements of swine[S]. Washington,D.C.:National Academies Press,2012. (![]() |
[3] | JONES B N,GILLIGAN J P.O-phthaldialdehyde precolumn derivatization and reversed-phase high-performance liquid chromatography of polypeptide hydrolysates and physiological fluids[J]. Journal of Chromatography A,1983,266:471-482. (![]() |
[4] | 易孟霞,易学武,贺喜,等.仔猪缬氨酸需要量的研究进展[J]. 动物营养学报,2014,26(3):578-584. (![]() |
[5] | 易孟霞,易学武,贺喜,等.标准回肠可消化缬氨酸水平对生长猪生长性能、血浆氨基酸和尿素氮含量的影响[J]. 动物营养学报,2014,26(8):2085-2092. (![]() |
[6] | LEWIS A J,NISHIMURA N.Valine requirement of the finishing pig[J]. Journal of Animal Science,1995,73(8):2315-2318. (![]() |
[7] | LIU H,ALLEE G L,TOUCHETTE K J,et al.Effect of reducing protein and adding amino acids on performance,carcass characteristics,and nitrogen excretion,and the valine requirement of early-finishing barrows[J]. Journal of Animal Science,2000,78(Suppl.2):66. (![]() |
[8] | NRC.Nutrient requirements of swine[S]. Washington,D.C.:National Academies Press,1998. (![]() |
[9] | NSNG.National swine nutrition guide[S]. Ames:U.S.Pork Center of Excellence,2010. (![]() |
[10] | ELLIS M,WEBB A J,AVERY P J,et al.The influence of terminal sire genotype,sex,slaughter weight,feeding regime and slaughter-house on growth performance and carcass and meat quality in pigs and on the organoleptic properties of fresh pork[J]. Animal Science,1996,62(3):521-530. (![]() |
[11] | LATORRE M A,RIPOLL G,GARCÍA-BELENGUER E,et al.The effect of gender and slaughter weight on loin and fat characteristics of pigs intended for Teruel dry-cured ham production[J]. Spanish Journal of Agricultural Research,2009,7(2):407-416. (![]() |
[12] | LATORRE M A,LÁZARO R,VALENCIA D G,et al.The effects of gender and slaughter weight on the growth performance,carcass traits,and meat quality characteristics of heavy pigs[J]. Journal of Animal Science,2004,82(2):526-533. (![]() |
[13] | 易学武.生长育肥猪低蛋白日粮净能需要量的研究[D]. 博士学位论文.北京:中国农业大学,2009.(![]() |
[14] | COMA J,ZIMMERMAN D R,CARRION D.Relationship of rate of lean tissue growth and other factors to concentration of urea in plasma of pigs[J]. Journal of Animal Science,1995,73(12):3649-3656. (![]() |
[15] | GUZIK A C,SOUTHERN L L,BIDNER T D,et al.The tryptophan requirement of nursery pigs[J]. Journal of Animal Science,2002,80(10):2646-2655. (![]() |