饲料蛋白质是决定水产动物生长最关键的营养物质，同时也是影响饲料成本的主要因素^[1]，饲料蛋白质作为能量利用时还将伴随着氮的排泄而影响水体环境^[2]。因此，如何调控动物生长并提高水产动物饲料蛋白质的利用率成为国内外学者研究的重要课题。近年来，我国水产养殖业迅猛发展，水产养殖业已经成为我国农业生产的一大重要支柱产业。然而，随着水产养殖动物规模的扩大，饲料蛋白质日益匮乏。据估测，2015年我国的蛋白质资源缺口达到2520万 t^[3]。蛋白质饲料原料的短缺已成为水产养殖和饲料工业发展的主要限制因子。同时，高蛋白质饲料的使用将释放一部分氮到水体环境中，对水体环境造成负面影响^[3]。因此，在寻找新型饲料蛋白质源的同时，开展降低水产动物饲料蛋白质水平、提高饲料蛋白质利用效率的研究，对于降低水产动物养殖成本，缓解我国蛋白质资源短缺以及减少对环境污染等方面都有很大的积极意义。

目前，营养调控是提高动物生长性能和降低饲料蛋白质水平的主要手段之一。氨基酸是生命活动的物质基础，是动物营养学研究的热点。动物对蛋白质的需要，实际是对氨基酸的需要。饲料中适宜的氨基酸含量可以最大限度地调控动物的生长和饲料转化率。色氨酸作为一种功能性的氨基酸，在动物体组成、免疫、摄食、抗应激等方面发挥积极的作用^{[4, 5, 6, 7, 8, 9, 10]}。在畜禽动物的研究中发现，在低蛋白质饲料中添加色氨酸，可以提高摄食量、促进蛋白质沉积和营养物质的消化吸收，从而提高生长性能，可获得与高蛋白质饲料相似的生长性能^{[11, 12, 13, 14]}，但国内外对色氨酸在水产动物低蛋白质饲料中的研究尚未见报道。

凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)被公认为是世界上三大优良对虾种之一，具有适应盐度范围广、抗逆境能力强、肉质鲜美、营养价值较高等优点，该虾种自1988年引入我国后，其养殖迅速遍及全国，已成为我国水产养殖的支柱产业^[15]。据调查显示，2013年我国水产饲料产量为1 900万t，其中对虾料约136万t。在集约化养殖条件下，凡纳滨对虾一般使用高蛋白质、高鱼粉饲料。NRC(2011)推荐体重为0.1～5.0 g的凡纳滨对虾对蛋白质的需要量为40%。而近年来鱼粉价格不断上涨、品质不一，致使高比例的植物蛋白质源和低蛋白质饲料在对虾养殖中开始应用。然而，高比例植物蛋白质源饲料通常会出现对虾所需必需氨基酸的缺乏，而饲料蛋白质水平过低又会对对虾的生长和免疫抗病能力产生不良影响。色氨酸是对虾的必需氨基酸^[16]，Akiyama等^[17]和Forster等^[18]根据凡纳滨对虾肌肉的氨基酸组成得出凡纳滨对虾对饲料中色氨酸的需要量为0.8%。本课题组前期研究表明，在饲料中添加色氨酸可提高凡纳滨对虾的蛋白质效率和生长性能^[9]。

鉴于畜禽动物添加色氨酸使用低蛋白质饲料的效果，若可通过添加色氨酸改善对虾的生长性能，既可有效缓解对虾养殖饲料蛋白质资源短缺的问题，还可降低对虾饲料成本和减少水体氮排放。因此，本试验通过在凡纳滨对虾低蛋白质饲料中添加色氨酸，研究其对凡纳滨对虾生长性能、体组成和血清免疫和抗氧化指标的影响，为凡纳滨对虾色氨酸营养研究提供依据，并为探讨凡纳滨对虾低蛋白质饲料替代高蛋白质饲料在生产中应用的可行性提供一种新途径。

晶体色氨酸(L-色氨酸，食品级，纯度≥98%，日本味之素产品)，购自广州市毅盈贸易有限公司。

对照组(HT₀)投喂含40.79%粗蛋白质、4.1 g/kg色氨酸(估测值)的高蛋白质饲料，试验组投喂含37.01%粗蛋白质、3.9 g/kg色氨酸(估测值)并分别添加0(LT₀)、1.20(LT₁)、2.50(LT₂)、5.00(LT₃)和10.00 g/kg(LT₄)色氨酸的低蛋白质饲料。高蛋白质饲料与低蛋白质饲料组成及营养水平见表1。原料经粉碎过80目筛，混合均匀后用SLX-80型双螺杆挤压机制成1.00 mm的颗粒饲料，55 ℃烘干，自然冷却后放入塑料自封袋中，置于-20 ℃冰箱中保存备用。实测HT₀、LT₀、LT₁、LT₂、LT₃、LT₄饲料中色氨酸含量分别为3.90、3.10、5.50、6.40、8.20、11.40 g/kg，试验饲料中其他氨基酸含量如表2所示。

表 1

Table 1

表 1(Table 1)

表 1 高蛋白质饲料与低蛋白质饲料组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of high protein diet and low protein diet (air-dry basis) % 项目 Items 高蛋白质饲料 High protein diet 低蛋白质饲料 Low protein diet 原料 Ingredients 鱼粉 Fish meal 24.00 21.00 豆粕 Soybean meal 15.50 18.50 花生粕 Peanut meal 18.50 13.00 玉米淀粉 Corn starch 5.00 5.00 高筋面粉 High strength flour 21.45 24.48 虾壳粉 Shrimp shell meal 4.00 4.00 磷酸二氢钙 Ca(H 2PO 4) 2 1.50 1.50 乌贼膏 Squid paste 5.00 5.00 磷脂酸 Phosphatidic acid 2.00 2.00 鱼油 Fish oil 2.00 2.47 氯化胆碱 Choline chloride 0.25 0.25 维生素预混料 Vitamin premix 1) 0.20 0.20 矿物质预混料 Mineral premix 2) 0.50 0.50 维生素C单磷酸 Vitamin C monophosphate 0.10 0.10 纤维素 Cellulose 2.00 合计 Total 100.00 100.00 营养水平 Nutrient levels 3) 粗蛋白质 CP 40.79 37.01 粗脂肪 EE 9.13 9.23 水分 Moisture 7.71 7.82 粗灰分 Ash 9.40 8.97 1)每千克维生素预混料含有Contained the following per kg of vitamin premix：VA 4 000 000 IU，VD3 2 000 000 IU，VE 30 g，VK3 10 g，VB1 5 g，VB2 15 g，VB6 8 g，VB12 0.02 g，泛酸钙 calcium pantothenate 25 g，叶酸 folic acid 2.5 g，生物素 biotin 0.08 g，烟酸 nicotinic acid 40 g，肌醇 inositol 150 g。 2)每千克矿物质预混料含有Contained the following per kg of mineral premix：MgSO4·H2O 12 g，KCl 90 g，Met-Cu 3 g，FeSO4·H2O 1 g，ZnSO4·H2O 10 g，Ca(IO3)2 0.06 g，Met-Co 0.16 g，NaSeO3 0.003 6 g。 3)营养水平为实测值。Nutrient levels were measured values.

表 1 高蛋白质饲料与低蛋白质饲料组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of high protein diet and low protein diet (air-dry basis)

表 2

Table 2

表 2(Table 2)

表 2 试验饲料氨基酸组成(风干基础) Table 2 Composition of amino acids in experimental diets (air-dry basis) % 氨基酸 Amino acids HT0 LT0 LT1 LT2 LT3 LT4 天门冬氨酸 Asp 3.85 3.59 3.57 3.44 3.56 3.45 谷氨酸 Glu 7.61 7.27 7.28 7.01 7.22 7.06 丝氨酸 Ser 2.02 1.89 1.88 1.78 1.86 1.79 组氨酸 His 0.89 0.85 0.84 0.82 0.82 0.82 甘氨酸 Gly 2.38 2.19 2.17 2.11 2.16 2.12 苏氨酸 Thr 1.46 1.40 1.39 1.31 1.29 1.33 精氨酸 Arg 3.12 2.74 2.73 2.55 2.77 2.63 丙氨酸 Ala 2.19 2.00 2.01 1.93 2.06 1.96 酪氨酸 Tyr 1.25 1.17 1.14 1.12 1.15 1.11 缬氨酸 Val 1.86 1.77 1.76 1.72 1.74 1.71 蛋氨酸 Met 0.60 0.58 0.58 0.57 0.53 0.57 苯丙氨酸 Phe 1.81 1.77 1.71 1.76 1.74 1.77 异亮氨酸 Ileu 1.63 1.56 1.55 1.49 1.55 1.51 亮氨酸 Leu 2.83 2.68 2.67 2.55 2.66 2.57 赖氨酸 Lys 2.28 2.16 2.13 1.87 1.95 1.87 氨基酸含量为采用高效液相色谱法测得的实测值。 Amino acids contents were measured values used by HPLC method.

表 2 试验饲料氨基酸组成(风干基础) Table 2 Composition of amino acids in experimental diets (air-dry basis)

饲养试验在广东省农业科学院动物科学研究所水产研究室室内循环水养殖系统(水体容积300 L)中进行。试验共有6组，每组4个重复，每个重复挑选健康活泼的凡纳滨对虾40尾并称重，初始体重为(2.00±0.01) g。每组随机投喂1种试验饲料，分别在08:00、14:30和20:00进行饱食投喂，饲养周期为8周。每天观察凡纳滨对虾的健康状况和吃食情况，记录摄食量、死亡虾数并称重。试验期间为自然光照，保持盐度5‰~7‰，水温为28.0~30.5 ℃，溶氧量≥5 mg/L，pH 7.8~8.2，氨氮浓度≤0.1 mg/L，亚硝态氮浓度≤0.01 mg/L。
1.4 样品采集与分析

饲养试验结束前停食24 h，捞取每个重复的虾进行计数，称重和测量体长；并随机挑选5尾虾，分别剥离肝胰腺后称重，计算摄食量(FI)、增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、饲料系数(FCR)、蛋白质效率(PER)、存活率(SR)、肝胰指数(HSI)；另每个重复随机取13尾虾，从围心腔取血，血液采集后静置4 h后，10 000 r/min离心10 min，取血清分装，将血清置于-80 ℃冰箱保存，用于血清免疫和抗氧化指标测定。血清碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量均采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒进行测定，测定方法按照试剂盒说明书进行。血清酚氧化物酶(phenol oxidase,PO)活性的测定参考Ashida^[19]的方法。

每个重复再取6尾虾用于虾体成分分析。其中，粗蛋白质含量采用凯氏定氮法(GB/T 6432—1994)、粗脂肪含量采用索氏抽提法(GB/T 6433—1994)、粗灰分含量采用550 ℃灼烧法(GB/T 6438—1992)、水分含量采用105 ℃烘箱干燥法(GB/T 6435—1986)进行测定。

式中：W₀为试验开始时虾体重(g)；W_t为试验结束时虾体重(g)；F为饲料摄入量(g)； t为试验天数(d)；N_f为终末尾数；N_i为初始尾数；W_h为肝胰脏重量(g)；P_f为饲料粗蛋白质含量(%)。

试验结果用平均值±标准差(mean±SD)表示，采用SPSS 17.0统计软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，利用Duncan氏法进行组间显著性分析，差异显著性水平为P < 0.05。

由表3可知，各组对虾初始体重均无显著差异(P>0.05)。LT₀、LT₁、LT₄终末体重、WGR、SGR与HT₀相比无显著差异(P>0.05)，但LT₂、LT₃显著高于HT₀(P < 0.05)。低蛋白质饲料中添加色氨酸可提高对虾的FI，其中，LT₁、LT₂、LT₃显著高于HT₀和LT₀(P < 0.05)，但HT₀、LT₀和LT₄之间无显著差异(P>0.05)。LT₁的FCR显著高于LT₀和HT₀(P < 0.05)，但HT₀、LT₀、LT₃、LT₄之间无显著差异(P>0.05)。LT₀、LT₃、LT₄的PER显著高于HT₀(P < 0.05)，而LT₁显著低于LT₀(P < 0.05)，但LT₀、LT₂、LT₃、LT₄之间均无显著差异(P>0.05)。除LT₁和LT₃的SR较低外，其他组间无显著差异(P>0.05)。各组HSI均无显著差异(P>0.05)。

表 3

Table 3

表 3(Table 3)

表 3 低蛋白质饲料中添加色氨酸对凡纳滨对虾生长性能的影响 Table 3 Effects of low protein diet supplemented with tryptophan on growth performance of Litopenaeus vannamei 项目 Items HT0 LT0 LT1 LT2 LT3 LT4 初始体重 IBW/g 2.01±0.01 2.00±0.01 2.00±0.01 2.01±0.00 2.00±0.00 2.00±0.01 终末体重 FBW/g 13.96±0.39 a 14.29±0.44 ab 14.35±0.25 ab 14.98±0.38 c 14.74±0.31 bc 14.32±0.20 ab 增重率 WGR/% 612.99±15.20a 615.57±19.05ab 617.49±13.59ab 649.04±19.47c 640.67±12.12bc 617.84±7.84ab 特定生长率 SGR/(%/d) 3.46±0.04 a 3.51±0.05 ab 3.52±0.03 ab 3.59±0.05 c 3.57±0.04 bc 3.52±0.02 ab 摄食量 FI/(g/尾) 17.57±0.47 a 17.71±0.30 a 18.87±0.20 c 18.88±0.54 c 18.58±0.35 bc 18.02±0.04 ab 蛋白质效率 PER/% 167.48±3.13 a 180.98±1.06 b 170.24±8.41 a 174.32±4.25ab 179.14±4.41 b 182.72±1.84 b 饲料系数 FCR 1.46±0.03 a 1.49±0.01 ab 1.58±0.08 c 1.55±0.04 bc 1.49±0.04 ab 1.48±0.01 ab 肝胰指数 HSI/% 5.23±0.15 5.18±0.30 5.16±0.05 4.93±0.19 5.27±0.16 5.21±0.26 存活率 SR/% 96.67±3.82 c 95.00±2.04abc 87.50±6.61ab 90.00±2.50abc 86.67±8.04 a 95.83±1.44bc 同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P < 0.05)。下表同。 Values in the same row with different small letter superscripts were significantly different (P < 0.05). The same as below.

表 3 低蛋白质饲料中添加色氨酸对凡纳滨对虾生长性能的影响 Table 3 Effects of low protein diet supplemented with tryptophan on growth performance of Litopenaeus vannamei

由表4可知，对虾全虾水分、粗灰分含量各组间无显著差异(P>0.05)。全虾粗蛋白质含量LT₂、LT₃、LT₄与相比HT₀无显著差异(P>0.05)，但LT₄显著高于LT₀和LT₁(P < 0.05)。全虾粗脂肪含量LT₀、LT₂、LT₃与HT₀相比无显著差异(P>0.05)，但LT₁、LT₄显著低于HT₀(P < 0.05)。

表 4

Table 4

表 4(Table 4)

表 4 低蛋白质饲料中添加色氨酸对凡纳滨对虾体组成的影响(干物质基础) Table 4 Effects of low protein diet supplemented with tryptophan on body composition of Litopenaeus vannamei (DM basis) % 项目 Items HT0 LT0 LT1 LT2 LT3 LT4 水分 Moisture 73.81±1.06 73.73±1.14 73.21±1.79 72.61±0.32 73.43±1.04 73.55±0.66 粗蛋白质 CP 70.23±0.75ab 69.31±0.40a 69.27±0.97a 70.33±0.81ab 70.07±0.17ab 70.79±0.32b 粗脂肪 EE 9.33±0.47c 8.78±0.41bc 8.42±0.48b 9.48±0.16c 8.84±0.44bc 7.25±0.40a 粗灰分 Ash 10.42±1.03 10.83±0.36 11.11±0.85 9.88±0.77 10.75±1.13 10.71±0.46

表 4 低蛋白质饲料中添加色氨酸对凡纳滨对虾体组成的影响(干物质基础) Table 4 Effects of low protein diet supplemented with tryptophan on body composition of Litopenaeus vannamei (DM basis)

由表4可知，各试验组对虾血清PO、AKP、T-SOD活性及T-AOC与HT₀相比均无显著差异(P>0.05)。LT₂血清CAT活性显著高于LT₀(P < 0.05)，其他组间无显著差异(P>0.05)。LT₂、LT₃和LT₄血清MDA含量显著低于LT₀(P < 0.05)，但与HT₀相比没有显著差异(P>0.05)。

表 4

Table 4

表 4(Table 4)

表 4 低蛋白质饲料中添加色氨酸对凡纳滨对虾血清免疫和抗氧化指标的影响 Table 4 Effects of low protein diet supplemented with tryptophan on immunity and antioxidant indexes in serum of Litopenaeus vannamei 项目 Items HT0 LT0 LT1 LT2 LT3 LT4 酚氧化酶 PO/(U/mL) 2.87±1.12 2.17±0.81 2.07±0.21 2.80±0.62 2.80±0.26 2.53±0.50 碱性磷酸酶 AKP/(金氏单位/dL) 13.09±1.21 12.09±2.23 13.19±2.92 15.89±5.74 11.75±2.87 14.11±3.07 总抗氧化能力 T-AOC/(U/mL) 9.30±3.69 9.59±1.38 10.35±2.24 10.20±2.15 9.19±0.97 10.32±1.13 过氧化氢酶 CAT/(U/mL) 4.16±1.35ab 3.45±1.15a 4.57±2.03ab 6.70±0.88b 5.59±1.37ab 4.88±1.10ab 总超氧化物歧化酶 T-SOD/(U/mL) 117.90±6.47 115.61±7.15 112.12±9.24 117.47±3.68 123.00±4.18 122.39±8.58 丙二醛 MDA/(nmol/mL) 14.04±1.06a 20.43±4.24b 16.83±0.7ab 16.34±2.48a 15.80±1.90a 14.59±0.68a

表 4 低蛋白质饲料中添加色氨酸对凡纳滨对虾血清免疫和抗氧化指标的影响 Table 4 Effects of low protein diet supplemented with tryptophan on immunity and antioxidant indexes in serum of Litopenaeus vannamei

抛物线模型拟合回归方程分析得出，低蛋白质饲料中色氨酸含量与对虾WGR和血清CAT活性之间的关系曲线分别见图1和图2，并分别获得方程y=-1.373 9x²+20.681x+561.37(R²=0.578 2)(y表示凡纳滨对虾WGR，x表示低蛋白质饲料中色氨酸含量)、y=-0.105 3x²+1.694 1x-0.828 2(R²=0.705 0)(y表示凡纳滨对虾血清CAT活性，x表示低蛋白质饲料中色氨酸含量)。以凡纳滨对虾WGR和血清CAT活性为评价指标，通过回归方程计算得出本试验条件下低蛋白质饲料中色氨酸的适宜含量分别为7.53和8.04 g/kg。

图 1(Figure 1)

Fig. 1

图 1 低蛋白质饲料中色氨酸含量与凡纳滨对虾增重率的关系 Fig. 1 Relationship between tryptophan content in the low protein diet and WGR of Litopenaeus vannamei

图 2(Figure 2)

Fig. 2

图 2 低蛋白质饲料中色氨酸含量与凡纳滨对虾过氧化氢酶活性的关系 Fig. 2 Relationship between tryptophan content in the low protein diet and serum CAT activity of Litopenaeus vannamei

蛋白质是对虾饲料中必需的核心营养物质，蛋白质不足影响对虾的生长性能和SR。本研究结果表明，在低蛋白质饲料(含37.01%粗蛋白质)中添加适量色氨酸可显著地提高凡纳滨对虾的WGR、SGR，获得比高蛋白质饲料(含40.79%粗蛋白质)更好的生长性能。王荣发等^[11]研究表明，将(23.60±2.17) kg生长猪饲粮的蛋白质水平降低4%，补充0.146%的色氨酸后，并不影响猪的生长性能。也有研究发现将22 kg左右仔猪饲粮的粗蛋白质含量降低3%，补充赖氨酸、蛋氨酸和苏氨酸以及在此基础上继续添加色氨酸，对仔猪的生长性能均没有产生显著不利的影响^[12]。苏有健等^[13]研究仔猪低蛋白质饲粮时发现，在蛋白质水平降低3%的饲粮中补充0.06%的色氨酸以后，与高蛋白质饲粮组的生长性能没有显著差异。梁福广^[14]研究发现，将生长猪的基础饲粮的蛋白质水平降低4%，并使可消化色氨酸水平达到0.41%，可取得较好的生长性能，本试验的结果与以上研究一致，表明饲料中添加适宜色氨酸可提高凡纳滨对虾的生长性能，从而降低饲料中蛋白质水平，达到节约饲料成本的目的。本试验中，WGR和SGR在HT₀和LT₀之间无显著差异，这可能与投喂方式、养殖环境等有关^[20]，但具体原因还有待进一步研究。

摄食是动物生长的前提和物质基础，与生长、发育、繁殖等生产性能密切相关，但低蛋白质饲料可对动物的摄食产生不良的影响。色氨酸是一种较早被发现具有摄食调控作用的氨基酸。有研究表明，色氨酸提高动物的生长性能可能与其提高动物的摄食量有关^{[21, 22, 23, 24]}。魏宗友等^[21]在扬州鹅饲粮中添加高、中、低水平的色氨酸后，与高、低色氨酸组相比，中色氨酸组扬州鹅的采食量和日增重率显著增加。Tang等^[22]在建鲤饲料添加不同水平色氨酸以后，随着色氨酸含量的提高，建鲤的FI和WGR同步提高。Basic等^[23]和Wen等^[24]分别在大西洋鲟(Acipenser sturio)和草鱼中也得出类似的结论。从本试验结果可以看出，当在饲料中添加0.25%的色氨酸时，对虾的FI达到最大，而WGR与FI的此规律一致，即添加0.25%色氨酸的LT₂高于HT₀、LT₀、LT₄。这表明色氨酸可能通过调控对虾的摄食提高其生长性能，但其调控机理有待进一步研究。

FCR是衡量虾对饲料利用效果的重要指标，FCR的高低除与饲料质量有关外，还与虾对饲料的消化、吸收以及代谢有关^[20]。在饲料蛋白质水平较低的情况下，对虾为了获得足够的营养，会摄取更多的饲料来满足生长而导致FCR升高^{[2, 25]}，本试验结果与此相似。本试验过程中，LT₁、LT₃个别重复因虾蜕皮不完全造成虾死亡，引起死亡率升高，尽管SR均大于80%，但还是对试验结果产生了一定影响。本试验中，投喂低蛋白质饲料对虾的SR较投喂高蛋白质饲料的降低，这与以往研究结果^{[2, 26]}相似，证明了低蛋白质饲料会导致对虾SR下降。除LT₁、LT₃外，低蛋白质饲料中添加色氨酸后可提高SR，与添加色氨酸后可明显提高虹鳟SR的报道^[27]一致，也与当饲料中含有0.7%～1.0%色氨酸时，锯缘青蟹(Scylla serrate)SR最高的结果^[28]一致。这进一步证实了饲料中添加色氨酸对提高动物SR具有一定的作用。有研究者推测，色氨酸提高动物SR与色氨酸衍生的5-羟色胺(5-HT)调控有关^[29]。

许多学者研究发现，饲料中色氨酸缺乏导致试验鱼生长缓慢，鱼体蛋白质合成降低，表现为蛋白质沉积下降，但添加色氨酸后则明显改善上述状况^{[8, 30]}。本试验结果表明，在低蛋白质饲料中添加适量色氨酸后能够显著提高全虾粗蛋白质含量，且与投喂高蛋白质饲料对虾相比没有显著差异。研究认为，这可能主要是由于色氨酸可通过5-HT对能量物质如蛋白质等的代谢比例分配调节具有决定性意义^[30]。此外，色氨酸还能参与脂肪代谢。本试验中，在低蛋白质饲料中添加色氨酸，凡纳滨对虾全虾粗脂肪含量呈下降趋势，与饲料中添加色氨酸可降低印度鲮^[8]和凡纳滨对虾^[9]体脂肪含量的结果相似。Ahmed等^[8]在印度鲮饲料中添加不同水平的色氨酸后，全鱼脂肪含量呈上升趋势，当饲料中的色氨酸含量达到0.36%时，全鱼脂肪含量达到最低。本试验中LT₄的全虾粗蛋白质含量达到最大，但粗脂肪含量显著低于其他各组，与Ahmed等^[8]的研究结果相似，说明过高的色氨酸含量会影响降低体脂肪的沉积。这可能与色氨酸的不断累积和肝胰腺及神经组织中5-HT水平升高对脂质过氧化作用产生影响有关。因此，添加色氨酸可减少肝脏脂肪(尤其是甘油三酯)的含量，而且随着添加水平增加，机体脂肪的积累也将逐渐减少。有关色氨酸调节对虾体组成的机理相对复杂，有待进一步深入研究。

甲壳动物不具有特异性免疫功能，主要通过非特异性免疫发挥功能。酚氧化酶原激活系是甲壳动物重要的防御和识别系统，由丝氨酸蛋白酶和其他相关因子组成。酚氧化酶原激活系与脊椎动物的补体系统相似，在识别异物、提供调理素，促进血细胞的吞噬作用、包囊作用和结节的形成以及介导凝集和凝固产生杀菌物质等免疫功能方面发挥重要作用^{[31, 32]}。PO是酚氧化酶原激活系统的产物，是衡量机体免疫功能的重要指标。本研究表明，在低蛋白质饲料中添加色氨酸能够在一定程度提高血清PO活性，与高蛋白质饲料相比没有显著差异。在氨基酸促进PO活性方面，Zhou等^[33]报道在凡纳滨对虾饲料中添加苏氨酸显著提高对虾血清PO活性，但关于氨基酸提高血清PO活性的机理尚未见报道。

AKP是一种能催化磷酸单脂水解酶及磷酸基团转移反应的磷酸单酯酶类，是动物体内重要免疫相关酶，与体内营养物质的消化、吸收、利用和转运有关。在甲壳动物体内，AKP还与动物对海水中钙质吸取、磷酸钙沉积、甲壳素分泌及形成直接相关。甲壳动物在生长过程都要经历蜕壳过程，该酶对于虾的生存具有特别重要的意义^[34]。王用黎^[10]在凡纳滨对虾饲料中添加色氨酸以后，显著提高了血清AKP活性，Tang等^[22]在建鲤中也得出相似的结论。本试验结果也发现在低蛋白质饲料中添加色氨酸能够在一定程度上提高凡纳滨对虾血清AKP活性。

T-AOC在体内被分成抗氧化酶系统和非酶促系统2个部分，是反映机体抗氧化能力的综合性指标，其主要作用是分解和清除机体内代谢过程产生的活性氧。T-SOD和CAT是生物体内一类重要的抗氧化酶，具有特殊的生理活性，在生物体的自我防御系统以及免疫系统中起非常重要的作用^{[35, 36]}。MDA是机体被自由基氧化的产物之一，其含量的多少不仅可以反映出膜脂质过氧化的程度，也可间接的反映机体抗氧化作用的强弱。有研究表明，色氨酸在机体抗氧化方面发挥积极的作用。魏宗友等^[21]研究表明，与低色氨酸组相比，中、高色氨酸组扬州鹅血清SOD活性和T-AOC显著升高，MDA含量有降低的趋势。在斑鸠上的研究发现，色氨酸可增强血清SOD活性，并降低血清MDA含量^[37]。周斌^[38]研究表明，饲粮中适量添加色氨酸，蛋鸡血清中MDA含量显著降低。本试验研究发现，在低蛋白质饲料中适量添加色氨酸能显著提高凡纳滨对虾血清CAT活性，同时对血清T-AOC和T-SOD活性也有一定程度地提高，血清MDA含量则显著降低，与上述研究结果相似。这可能与低蛋白质饲料添加色氨酸后，对虾摄食了较多色氨酸，导致过多的色氨酸降解，从而使动物机体中的抗氧化能力提高。

① 在含37.01%粗蛋白质的低蛋白质饲料中适量添加色氨酸可改善凡纳滨对虾的营养物质沉积，增强免疫和抗氧化能力，获得比含40.79%粗蛋白质的高蛋白质饲料更好的生长性能。

② 本试验条件下，以WGR和血清CAT活性为评价指标，通过回归方程得出含37.01%粗蛋白质的低蛋白质饲料中色氨酸的适宜含量分别为7.53和8.04 g/kg。