维生素B₆是维持动物机体正常代谢所必需的低分子有机化合物，包括吡哆醇(PN)、吡哆醛(PL)、吡哆胺(PM)以及三者相应的磷酸酯形式，其中磷酸吡哆醛(PLP)是维生素B₆的主要辅酶形式，为动物体内140多种辅酶的重要组成部分，参与多种代谢反应，尤其是蛋白质和氨基酸代谢。动物体内缺乏维生素B₆会引起厌食、生长迟缓、神经失调、贫血等症状，尤其会造成机体内蛋白质代谢异常,使机体对蛋白质的吸收和利用发生障碍^{[1, 2]}。植物和许多微生物能够由小分子代谢物从头合成PLP供机体需要，然而哺乳动物不能够自身从头合成PLP，需要通过吸收外源维生素B₆满足机体生理需要。现代规模化家兔生产方式下，饲粮中的营养水平提高以及加工过程原料中维生素的破坏，再加上家兔体内蛋白质周转率提高，维持体内PLP浓度的动态平衡的需求在家兔生产中尤为重要。Easter等^[3]发现，在妊娠青年母猪玉米-豆粕型饲粮中添加1 mg/kg维生素B₆时，窝产子数和断奶仔猪数增加；提高饲粮维生素B₆含量显著影响断奶仔猪的生长性能，可以改善断奶仔猪的日增重和饲料采食量。Weiss等^[4]发现，种鸡缺乏维生素B₆会立即出现食欲减退，接着孵化率下降，产蛋率下降。在已经孵化25 d的火鸡种蛋中注射维生素B₆提高了孵化率^[5]，但饲粮中添加维生素B₆则没有显著影响胚胎死亡率和孵化率^[6]。Chen等^[7]指出，鲍鱼饲料中添加维生素B₆可以提高增重。刘坤^[8]在研究水溶性维生素对鲶鱼生长的必要性时表明，维生素B₆明显地影响鲶鱼的生长、存活率。

目前，国内外对维生素B₆的研究在猪、禽、水产方面较多，在家兔上的研究基本处于空白。本 试验通过研究饲粮维生素B₆添加水平对生长獭 兔生长性能、皮张质量、肌肉品质及维生素B₆代谢的影响，探讨3~5月龄生长獭兔饲粮维生素B₆的适宜添加水平，为我国獭兔饲养标准的制订提供合理的依据。 1 材料与方法 1.1 试验材料

试验所用维生素B₆原料为江西泰森药业有限公司生产的维生素B₆饲料添加剂盐酸吡哆醇(纯度为98%)，生产批号为140504。 1.2 试验饲粮

基础饲粮参考NRC(1977)^[9]和De Blas等^[10]的生长兔饲养标准配制而成，其组成及营养水平见表1。在基础饲粮中分别添加0(对照)、5、10、20和40 mg/kg的维生素B₆，制成维生素B₆实测值分别为4.51、9.66、14.64、24.32和44.81 mg/kg的5种试验饲粮，并用制粒机将饲粮压制成直径为4~6 mm的颗粒饲料，在通风干燥避光处储存备用。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) % 原料 Ingredients 含量 Content 营养水平 Nutrient levels2) 含量 Content 玉米 Corn 15.0 消化能DE/(MJ/kg) 10.28 大豆粕 Soybean meal 10.0 粗蛋白质 CP 16.20 小麦麸 Wheat bran 12.0 粗纤维 CF 17.47 大麦(皮) Big wheat(skin) 10.0 粗灰分 Ash 11.75 花生秧 Peanut vine 30.0 粗脂肪 EE 2.79 葵花粕 Sunflower meal 8.0 赖氨酸 Lys 0.60 米糠 Rice bran 10.0 蛋氨酸 Met 0.27 预混料 Premix1) 5.0 钙 Ca 0.97 合计 Total 100.0 磷 P 0.43 1)预混料为每千克饲粮提供Premix provided the following per kg of the diet：VA 10 000 IU,VD3 2 000 IU,VE 50 mg,VK3 2.5 mg,VB1 5 mg,VB2 10 mg,VB3 20 mg,VB5 50 mg,VB11 2.5 mg,VB12 1 mg,Fe (as ferrous sulfate) 100 mg,Zn (as zinc sulfate) 50 mg,Cu (as copper sulfate) 40 mg,Mn (as manganese sulfate) 30 mg,I (as potassium iodide) 0.5 mg,Se (as sodium selenite) 0.05 mg,CaHPO4 15 000 mg,NaCl 5 000 mg,Lys 1 500 mg,蛋氨酸 Met 1 500 mg,50%氯化胆碱 50% choline chloride 400 mg,10%杆菌肽锌 10% bacitracin zinc 300 mg。 2)营养水平均为实测值。Nutrient levels were measured values.

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis)

本试验选取平均体重为(1 682±40) g的3月龄健康状况良好的生长獭兔200只，公母各占1/2，按性别和体重随机分为5组，每组40个重复，每个重复1只试验兔。试验兔单笼饲养，试验期间每天饲喂2次。采用常规饲养管理和免疫程序，自然采光和通风，自由采食和饮水。饲养时间为2014年10月4日至2014年12月4日，预试期7 d，正试期54 d。 1.4 样品采集与制备

饲养试验结束前7天，每组随机抽取8只试验兔，转移到经消毒处理的代谢笼内，单笼饲养，并饲喂相应的试验饲粮，自由采食和饮水。预试期3 d，预试期后连续4 d收集每只试验兔全天的尿样，4 ℃密封保存，用于检测尿液维生素B₆含量。试验结束当天，清晨空腹称重，每组随机抽取8只试验兔，心脏采血10 mL，室温避光静置15 min后，3 000 r/min离心10 min，分离所得血清分装于Eppendorf管中，置于-20 ℃下冷冻保存,用于血清维生素B₆含量检测。将采血后的试验兔剥皮，用于皮张质量分析，同时采集肝脏和背腰最长肌装入冻存管内液氮冻存，用于肝脏和肌肉维生素B₆含量的测定。 1.5 测定指标和方法 1.5.1 生长性能指标的测定

称量并记录试验开始和试验结束时试验兔的体重，并统计试验期内的喂料量，计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。 1.5.2 皮张质量指标的测定

将剥下的獭兔皮称重，腹部正中剪开，然后用软尺测量其长度和宽度，长度量取颈部至尾根处，宽度量取腹中部最窄处，并计算皮张面积；用游标卡尺测量其皮张厚度，用直尺测量被毛长度。 1.5.3 肌肉品质指标的测定

pH：于宰后立即用Mettler MP120型酸碱度计测背腰最长肌第5肋骨处的pH，将探头插入肌肉3 mm读数。

失水率：屠宰后4 h，取眼肌，沿样品肌纤维方向切成3 cm×1 cm长条后称重，记为M₁，用铁丝钩住肉条的一端，悬空挂于纸杯中，用保鲜膜将纸杯口密封(肉样不得与纸杯壁接触)，置于4 ℃冰箱中24 h，取出样品进行称重，记为M₂，通过下面公式计算失水率。

失水率(%)=100×(M₁-M₂)/M₁。

剪切力：采集的新鲜背腰最长肌放于0～4 ℃冰箱经48 h贮存熟化后取出，将温度计插入肌肉中心部位，于恒温水浴锅内80 ℃加热，肌肉中心的温度达到60 ℃时停止加热，取出肉样，将肉样沿着肌肉纤维的方向修剪成直径为1.12 cm的圆柱形肌肉块，用C-LM型肌肉嫩度计测定剪切力。

肉色：用日本产CR-10型号色差仪，利用CIE-Lab输出模式，从背腰最长肌处切开3个切面，分别记录亮度值(L^*)、红度值(a^*)、黄度值(b^*)。 1.5.4 维生素B₆含量的测定

饲料和尿液中维生素B₆含量采用德国拜发生产的微孔板形式的微生物法定量检测维生素B₆试剂盒测定；血清、肝脏及肌肉中维生素B₆含量采用LADON生产的兔维生素B₆酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒测定。 1.6 数据处理

用SAS 9.1.3统计软件中的GLM程序进行数据的方差分析，用Duncan氏法进行数据的多重比较。 2 结果与分析 2.1 饲粮维生素B₆添加水平对生长獭兔生长性能的影响

由表2可知，在初始体重无显著差异(P=1.000 0)的情况下，饲粮维生素B₆添加水平对ADG有显著影响(P=0.017 8)，随着维生素B₆添加水平的升高，ADG先升高后降低，在维生素B₆添加水平为20 mg/kg时达到最高值，显著高于对照组(P<0.05)。饲粮维生素B₆添加水平对ADFI有极显著影响(P=0.000 4)，4个维生素B₆添加组的ADFI极显著高于对照组(P<0.01)。随着维生素B₆添加水平的升高，F/G有先降低后升高趋势，并在维生素B₆添加水平为20 mg/kg时达到最低值。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 饲粮维生素B6添加水平对生长獭兔生长性能的影响 Table 2 Effects of dietary vitamin B6 supplemental level on growth performance of growing Rex rabbits (n=40) 项目 Items 饲粮维生素B6添加水平 Dietary vitamin B6 supplemental level/(mg/kg) 均方根误差 R-MSE P值 P-value 0 5 10 20 40 初始体重 IBW/g 1 683.50 1 680.13 1 682.88 1 684.00 1 682.25 208.074 6 1.000 0 平均日增重 ADG/(g/d) 13.22b 16.43ab 16.88ab 19.51a 19.50a 3.966 6 0.017 8 平均日采食量 ADFI/(g/d) 142.74Cc 143.60BCbc 146.45Bb 149.53Aa 145.00BCbc 31.300 7 0.000 4 料重比 F/G 10.34 8.80 8.09 7.75 7.79 2.194 3 0.092 0 同行数据肩标相同或无字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。下表同。 In the same row,values with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05),while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05),and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as below.

表2 饲粮维生素B6添加水平对生长獭兔生长性能的影响 Table 2 Effects of dietary vitamin B6 supplemental level on growth performance of growing Rex rabbits

由表3可知，饲粮维生素B₆添加水平对皮张厚度和被毛长度均无显著影响(P=0.478 0和P=0.756 2)，但对皮张面积有极显著影响(P=0.001 6)。随着维生素B₆添加水平的升高，皮张面积先增大后降低，并在添加水平为20 mg/kg时达到最大值。饲粮维生素B₆添加水平显著影响皮张重量(P=0.040 0)，其中20 mg/kg添加组显著高于对照组(P＜0.05)。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 饲粮维生素B6添加水平对生长獭兔皮张质量的影响Table 3 Effects of dietary vitamin B6 supplemental level on fur quality of growing Rex rabbits (n=8) 项目 Items 饲粮维生素B6添加水平 Dietary vitamin B6 supplemental level/(mg/kg) 均方根误差 R-MSE P值 P-value 0 5 10 20 40 皮张面积 Fur area/cm2 1 139.02Bb 1 267.23Aa 1 262.53Aa 1 274.83Aa 1 204.82ABab 69.981 6 0.001 6 皮张重量 Fur weight/g 355.63b 383.75ab 376.88ab 401.88a 355.63b 0.206 9 0.040 0 皮张厚度 Fur thickness/mm 2.70 2.73 2.76 2.84 2.77 0.159 2 0.478 0 被毛长度 Wool length/cm 2.26 2.28 2.30 2.34 2.30 0.128 8 0.756 2

表3 饲粮维生素B6添加水平对生长獭兔皮张质量的影响Table 3 Effects of dietary vitamin B6 supplemental level on fur quality of growing Rex rabbits

由表4可知，饲粮维生素B₆添加水平对肌肉pH有显著影响(P=0.039 4)，其中20和40 mg/kg添加组显著高于对照组(P＜0.05)。饲粮维生素B₆添加水平显著或极影响肌肉的a^*(P=0.013 1)、b^*(P=0.023 9)和L^*(P=0.002 5)，其中20 mg/kg添加组的L^*极显著低于对照组(P＜0.01)，b^*显著低于对照组(P＜0.05)，a^*显著高于对照组(P＜0.05)。饲粮维生素B₆添加水平对肌肉失水率和剪切力无显著影响(P=0.216 1和P=0.825 9)。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 饲粮维生素B6添加水平对生长獭兔肌肉品质的影响Table 4 Effects of dietary vitamin B6 supplemental level on muscle quality of growing Rex rabbits (n=8) 项目 Items 饲粮维生素B6添加水平 Dietary vitamin B6 supplemental level/(mg/kg) 均方根误差 R-MSE P值 P-value 0 5 10 20 40 pH 6.51b 6.52b 6.55b 6.71a 6.59ab 0.133 1 0.039 4 失水率 Water loss rate/% 9.17 8.32 8.16 7.63 7.29 1.648 9 0.216 1 剪切力 Shear force/kgf 2.75 2.78 2.74 2.69 2.74 0.147 5 0.825 9 亮度值 L* 36.00Aa 33.81Aa 32.86Aa 27.63Bb 31.11ABab 2.936 7 0.002 5 红度值 a* 36.51b 41.68a 43.56a 44.61a 42.53a 2.626 2 0.013 1 黄度值 b* -7.29a -8.49b -8.69b -8.91b -8.78b 1.587 2 0.023 9

表4 饲粮维生素B6添加水平对生长獭兔肌肉品质的影响Table 4 Effects of dietary vitamin B6 supplemental level on muscle quality of growing Rex rabbits

由表5可知，饲粮维生素B₆添加水平对肌肉中维生素B₆含量有显著影响(P=0.028 3)，其中10、20和40 mg/kg添加组显著高于对照组(P＜0.05)。饲粮维生素B₆添加水平极显著影响肝脏中维生素B₆含量(P=0.000 1)，4个维生素B₆添 加组均极显著高于对照组(P＜0.01)。饲粮维生素B₆添加水平对尿液中维生素B₆含量也有极显著影响(P=0.008 1)，随着饲粮维生素B₆添加水平的升高，尿液中维生素B₆含量随之增大。饲粮维生素B₆添加水平对血清维生素B₆含量无显著影响(P=0.112 9)。

表5

Table 5

表5(Table 5)

表5 饲粮维生素B6添加水平对生长獭兔维生素B6代谢的影响Table 5 Effects of dietary vitamin B6 supplemental level on vitamin B6 metabolism of growing Rex rabbits (n=8) 项目 Items 饲粮维生素B6添加水平 Dietary vitamin B6 supplemental level/(mg/kg) 均方根误差 R-MSE P值 P-value 0 5 10 20 40 血清 Serum/(ng/mL) 61.07 67.02 68.47 83.48 72.41 14.123 5 0.112 9 肝脏 Liver/(ng/g) 392.73Cc 394.55Bb 408.44Bb 564.62Aa 518.61Aa 65.253 3 0.000 1 肌肉 Muscle/(ng/g) 420.90b 438.00ab 491.18a 575.68a 522.23a 69.583 1 0.028 3 尿液Urine/(ng/mL) 100.54Bb 104.22Bb 113.19ABab 114.49ABab 130.91Aa 36.966 3 0.008 1

表5 饲粮维生素B6添加水平对生长獭兔维生素B6代谢的影响Table 5 Effects of dietary vitamin B6 supplemental level on vitamin B6 metabolism of growing Rex rabbits

维生素B₆作为B族维生素的一种，是动物生长过程所必需的，向饲粮中添加适量的维生素B₆能起到良好的饲养效果。堪萨斯州大学的研究者研究了饲料中添加维生素B₆对饲喂玉米-豆粕型饲粮的断奶仔猪生长性能的影响，试验表明，随着维生素B₆添加水平的增加，断奶仔猪的ADG和ADFI有增加趋势，但对F/G的影响不显著，并且发现1～14日龄的断奶仔猪添加3.3 mg/kg的维生素B₆可以获得最佳的生长性能^[11]。Mohamed^[12]指出，印度河鲶饲粮中添加3.4 mg/kg维生素B₆时达到最大增重。王军霞等^[13]指出，凡纳滨对虾饲料中添加维生素B₆ 80～160 mg/kg，其增长率和增重率显著提高。张春晓^[14]研究发现，饲料中添加4.1 mg/kg的维生素B₆能显著提高大黄鱼的特定生长率和存活率。本试验研究表明，饲粮维生素B₆添加水平对生长獭兔的ADG和ADFI影响显著，对F/G有先降低后升高的趋势，其中在维生素B₆添加水平为20 mg/kg时达到最小值，这与上述研究结果相似。 3.2 饲粮维生素B₆添加水平与生长獭兔皮张质量的关系

獭兔是典型的皮用型兔，其皮张具有很高的经济价值，皮张品质除了品种、疾病、宰杀与剥皮、加工方法等因素外，饲料营养也是一重要因素。皮张质量可以从皮张重量、皮张面积、皮张厚度等诸多指标进行综合评定。吴金山^[15]提出鉴定獭兔皮质量的办法，从兔皮绒毛密度、色泽、板质优劣及兔皮面积几方面来进行评定。张福勋^[16]通过研究发现，充足的营养水平与采食量能够明显的提高獭兔皮张品质。朱晓强等^[17]研究表明，饲粮维生素A添加水平对生长獭兔皮张重量和皮张面积的影响极显著，皮张重量及皮张面积都随饲粮维生素A添加水平的增加呈先升高后降低的变化，10 000 IU/kg维生素A添加组获得最大值。本试验结果表明，饲粮维生素B₆添加水平同样对皮张面积和皮张重量影响显著，并在维生素B₆添加水平为20 mg/kg时达到最大值。在饲粮中添加维生素B₆有利于生长獭兔毛皮的发育，可能是由于PLP提高獭兔机体蛋白质的合成效率，但其具体分子机理还有待于进一步探究。 3.3 饲粮维生素B₆添加水平与生长獭兔肌肉品质的关系

兔肉具有高蛋白质、高赖氨酸、高烟酸、高消化率、低脂肪、低胆固醇、低能量密度等优点,被专家称为美容肉、益智肉，越来越受消费者的青睐^[18]。Strydom^[19]的研究表明，除了肉品安全因素外，其他属性如肉色、风味、滋味和嫩度等也是消费者判断肉品营养价值和质量的指标。肌肉的pH、系水力、嫩度及肉色是评定肌肉品质优劣的主要指标。维生素是维持和调节机体正常代谢的重要物质，主要以辅酶的形式参与机体的代谢反应，并对肉品质的改善有重要意义。肉品颜色虽然与其食用品质(嫩度、风味和多汁性等)无直接关系，但它却是肌肉内部的生理学、生物化学和微生物学变化的外部表现，也是消费者判断肉质和鲜度的主要依据。王显慧等^[20]研究结果显示，饲粮中添加维生素C可显著提高胸肌肉b^*，降低腿肌肉L^*，对腿肌的系水力和嫩度也有显著改善作用；并且，还可改善免疫机能，提高机体及肌肉的抗氧化性能，延缓鸡肉在保藏过程中的脂质过氧化，延长肉品货架期。孟俊英等^[21]试验结果表明，维生素C和维生素E在增加肌肉嫩度方面均存在显著的剂量效应，在增强肉色方面存在极显著的互作效应。本试验研究表明，饲粮中添加维生素B₆对肌肉品质的改善同样具有重要意义。 3.4 饲粮维生素B₆添加水平与生长獭兔维生素B₆ 代谢的关系

饲粮维生素添加水平与体内维生素的状况密切相关，维生素的体内代谢受饲粮中维生素含量的影响很大，血清和肝脏维生素含量是监测动物机体维生素的营养状况的常用指标。饲粮中的PLP、磷酸吡哆醇(PNP)和磷酸吡哆胺(PMP)在磷酸酶作用下，转化为游离的PL、PN和PM在空肠以被动扩散形式吸收。血浆和红细胞均参与维生素B₆的运输，维生素B₆以PLP和PMP的形式储存于机体各种组织，但储存量很少，肌肉是维生素B₆主要储存器官。Leklem^[22]报道，在正常情况下，动物机体维生素B₆排泄形式为4-吡哆酸，占尿中维生素B₆的50%，仅有少量PN和PL，而肝脏是维生素B₆代谢的主要场所，也是PLP分解为4-吡哆酸的主要器官；饲喂大剂量维生素B₆时，随尿排出的PN和PL的量增加，当给予极高剂量PN时，大部分以没有改变的原型随尿排出。梁鸿雁等^[23]以獭兔为研究对象发现，血清维生素A含量随饲粮维生素A添加水平的增加而有升高的趋势。朱晓强等^[17]研究发现，饲粮维生素A添加水平对肝脏中维生素A含量影响显著，随饲粮维生素A添加水平的增加，肝脏维生素A含量呈升高趋势，且二者呈现线性关系。本试验研究发现，饲粮维生素B₆添加水平对血清维生素B₆含量无显著影响，这可能与机体内环境稳态的自我调节有关；随着饲粮维生素B₆添加水平提高，肝脏和肌肉中维生素B₆含量呈现先增高后趋于稳定，这可能与肝脏和肌肉代谢沉积维生素B₆能力有关；然而，40 mg/kg添加组组尿液中维生素B₆含量远高于对照组，这可能与其添加过量有关。 4 结 论

饲粮添加维生素B₆能够促进生长獭兔生长，提高皮张质量，改善兔肉品质。综合本试验测定指标，3～5月龄生长獭兔饲粮适宜的维生素B₆添加水平为20 mg/kg。