2. 扬州大学动物科学与技术学院, 扬州 225009
2. College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China
在我国,苜蓿、燕麦草、玉米青贮、稻草、羊草等是奶牛生产中最常用的粗饲料[1]。虽然牧草品种资源丰富,但优质牧草较为缺乏,尤其是奶牛生产中优质粗饲料匮乏严重。国家奶牛产业技术体系信息中心数据显示,2013年我国苜蓿进口量达78万t,燕麦干草进口量达4万t,而实际需求量要多得多,这些进口量还远远不能满足奶业发展的需要。近年来,随着我国奶业不断蓬勃发展,牧草资源短缺问题也显得愈发突出,在实际生产中,合理高效地利用这些优质牧草不但可以保证动物健康,而且能够提高生产性能[2, 3]。我国进口的奶牛主要来自新西兰、澳大利亚、乌拉圭这3个国家,然而改良后的生产水平较发达国家相比仍有较大的差距。NRC(1989)[4]建议泌乳奶牛饲粮干物质中性洗涤纤维(neutral detergent fiber,NDF)水平在25%~30%,而且其中有19%来源于粗饲料,但没有给定最佳NDF水平。泌乳高峰期是奶牛泌乳的一个重要阶段,而一些优质的苜蓿、燕麦草对奶牛生产性能的提高尤为重要,由于我国牧草产业整体水平较为落后,奶牛养殖场主要依赖进口一些优质的干草以及国内自产的一部分粗饲料,我国《奶牛饲养标准》(NY/T 34—2004)还缺乏不同产奶阶段奶牛NDF营养需要量的参数,同时这些年我国奶牛饲粮结构和组成一直在改善,有必要建立完善我国《奶牛饲养标准》(NY/T 34—2004)饲粮干物质NDF需要量参数的研究。本试验研究饲粮NDF水平对泌乳高峰期奶牛生产性能、营养物质表观消化率及血清指标的影响,以期建立我国荷斯坦奶牛泌乳高峰期适宜的NDF需要量,从而为我国常规饲养条件下奶牛饲粮的配制提供数据支持。
1 材料与方法 1.1 试验时间与地点试验在北京市顺义区大孙各庄镇中地种畜良种奶牛科技园进行,试验期为2014年4月至2014年6月。
1.2 试验动物及其饲养管理选择8头体重为(600±25) kg、泌乳天数为(50±15) d、胎次为3胎的泌乳高峰期荷斯坦奶牛。试验牛集中在同一牛舍饲养,采用自动采食槽饲喂系统(Roughage Intake Control System,RIC,Insentec B.V.,荷兰)饲喂,每天饲喂全混合日粮(total mixed ration,TMR)2次,自由饮水,散放式管理,每天按时观察牛的食欲、反刍、精神、粪尿,以及是否有乳房炎发生等行为情况,并做记录。每天在挤奶厅挤奶3次。
1.3 试验饲粮试验以NRC(2001)为参照依据,以玉米青贮、苜蓿、羊草、燕麦草为主要NDF来源的饲料原料,等氮等能且固定精粗比为60 ∶ 40配制了4组试验饲粮,A、B、C、D组分别饲喂NDF水平为25.05%、28.05%、31.22%、34.19%的饲粮。国产苜蓿和进口苜蓿切割长度为4~6 cm,燕麦草切割长度为4~6 cm,羊草切割长度为6~8 cm。试验饲粮组成及营养水平见表1。
![]() | 表1 试验饲粮组成及营养水平(干物质基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the experimental diets(DM basis) |
试验按4×4拉丁方设计,进行4期饲养试验,每期21 d,其中预试期14 d,正试期7 d。
1.5 样品的采集与分析 1.5.1 饲料样品的采集与分析整个试验阶段,自动采食槽饲喂系统会自动记录每头奶牛采食量。正试期第5~7天,每天采集饲粮样和剩料样,所有饲料样品在65 ℃烘箱中烘干制备风干样品,粉碎后保存待测。根据张丽英[5]所描述的方法测定饲粮中的干物质(dry matter,DM)、有机物(organic matter,OM)、粗蛋白质(crude protein,CP)、粗脂肪(ether extract,EE)、NDF、酸性洗涤纤维(acid detergent fiber,ADF)、酸不溶灰分(acid insoluble ash,AIA)、钙(Ca)、磷(P)含量。
1.5.2 奶样的采集与分析试验正试期每天记录每头奶牛的早中晚产奶量,并于正试期第5、6天连续2 d进行奶样采集,早中晚奶样按4 ∶ 3 ∶ 3比例混合分成2份,每份50 mL,一份加重铬酸钾防腐,及时送至北京市奶牛中心,用多功能乳品分析仪进行乳成分测定;另一份-20 ℃冷冻保存。乳尿素氮(milk urea nitrogen,MUN)浓度采用试剂盒法测定,试剂盒购自南京建成生物工程研究所。
1.5.3 粪样的采集与分析试验每个正试期的第6~7天,采用直肠取粪法连续采集粪样300~500 g,将每头牛的粪样均匀混合后取样400 g左右,按照1/4粪重加入10%的酒石酸,混匀并于65 ℃烘干回潮,粉碎后保存待测,营养成分的分析方法同1.5.1。用粪和饲粮中的酸不溶灰分含量计算各营养物质的表观消化率[6],公式如下:
式中:Ad和Af分别为饲粮和粪中的AIA含量(g/kg);Nd和Nf分别为饲粮和粪中对应的某营养成分含量(g/ kg)。
1.5.4 血样的采集与分析试验在正试期第6天晨饲前利用真空采血管进行尾静脉采血,采集量为10 mL。血液样品(不加抗凝剂)在4 ℃离心(3 000 r/min,20 min),分离血清。用吸管取上层血清,分装于1.5 mL离心管中,置-20 ℃冰箱保存,以备测定血清指标。采用试剂盒法测定血清中葡糖糖(glucose,GLU)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、非酯化脂肪酸(non-esterified fatty acid,NEFA)、β-羟丁酸(β-hydroxybutyric acid,BHBA)、尿素氮(urea nitrogen,UN)、胰岛素(insulin,INS)浓度,试剂盒购自南京建成生物工程研究所。
1.6 数据分析按照重复4×4拉丁方设计,数据采用SAS 9.1软件包中的GLM混合模型进行方差分析。模型如下:
式中:Yijkl 为试验牛在不同饲粮下的因变量值;μ为总体均值;Pi为试验期效应(i=1,2,3,4);Cj(l)为第l拉丁方内第j试验牛的随机效应(j=1,2,3,…,8);Tk为饲粮k处理效应(k=1,2,3,4);Sl为拉丁方效应(l=1或2);STlk为拉丁方l与饲粮处理k的互作;Eijkl为误差项。多重比较采用Duncan氏法,以P<0.05作为差异显著性判断标准。
2 结果与分析 2.1 饲粮NDF水平对泌乳高峰期奶牛生产性能的 影响饲粮NDF水平对泌乳高峰期奶牛生产性能的影响见表2。随着饲粮NDF水平的提高,奶牛干物质采食量、产奶量、乳糖产量、乳蛋白产量和氮利用效率呈线性降低(P<0.05),其中乳糖产量B、C组与其他2组差异不显著(P>0.05),D组显著低于A组(P<0.05);乳脂率和乳尿素氮浓度线性增加(P<0.05),其中A组均显著低于D组(P<0.05);饲料转化效率和乳脂产量呈线性增加的趋势(P=0.05);乳蛋白率呈线性降低的趋势(P=0.08);而对4%标准乳产量、乳糖率无显著影响(P>0.05)。
![]() | 表2 饲粮NDF水平对泌乳高峰期奶牛生产性能的影响 Table 2 The effects of NDF levels in diet on milk performance during peak lactation period of dairy cows |
饲粮NDF水平对泌乳高峰期奶牛营养物质表观消化率的影响见表3。随着饲粮NDF水平的提高,干物质、有机物、粗蛋白质表观消化率逐渐降低,但变化都不显著(P>0.05);而NDF和ADF表观消化率线性增加(P<0.05),其中D组NDF表观消化率显著高于其他3组(P<0.05),D组ADF表观消化率显著高于A、B 2组(P<0.05)。
![]() | 表3 饲粮NDF水平对泌乳高峰期奶牛营养物质表观消化率的影响 Table 3 The effects of NDF levels in diet on nutrient apparent digestibility during peak lactation period of dairy cows |
饲粮NDF水平对泌乳高峰期奶牛血清指标的影响见表4。随着饲粮NDF水平的提高,各组奶牛血清葡萄糖和胰岛素浓度线性降低(P<0.05);血清非酯化脂肪酸、β-羟丁酸以及尿素氮浓度线性增加(P<0.05);其中A组血清葡萄糖、非酯化脂肪酸及胰岛素浓度与其他3组之间差异显著(P<0.05),其他3组之间差异不显著(P>0.05);血清β-羟丁酸浓度D组显著高于A、B组(P<0.05),C组显著高于A组(P<0.05),其他组之间差异不显著(P>0.05);A、B 2组血清尿素氮浓度显著低于C、D 2组(P<0.05);饲粮NDF水平对血清总胆固醇浓度无显著影响(P>0.05);甘油三酯(P=0.07)和皮质醇(P=0.06)浓度有随饲粮NDF水平增加而线性增加的趋势。
![]() | 表4 饲粮NDF水平对泌乳高峰期奶牛血清指标的影响 Table 4 The effects of NDF levels in diet on serum indices during peak lactation period of dairy cows |
本试验中,随着饲粮NDF水平的提高,奶牛干物质采食量线性降低,其中D组显著低于A、B 2组,这与前人的研究结果相一致。Grummer等[7]研究表明,饲粮NDF水平的提高会降低干物质采食量,这是因为奶牛摄入过高NDF水平的饲粮会增大奶牛瘤胃内食糜的体积,增强饱腹感,降低了奶牛的食欲,从而限制了奶牛的采食量,从而导致产奶量的降低,对奶牛生产性能产生不利的影响,Arelovich等[8]也得到类似的结论。Tjardes等[9]进一步研究发现,荷斯坦牛和安格斯牛饲喂高NDF的饲粮时,干物质采食量受限制程度会随牛体重的增加而增加。
饲粮的组成及营养水平对提高奶牛的产奶量和乳脂率起着决定性作用。能量摄入直接影响着高产奶牛产奶量的高低,而它是受饲粮的泌乳净能水平和干物质采食量决定的[10]。碳水化合物在瘤胃微生物的作用下产生大量的挥发性脂肪酸,可为奶牛提供能量需要量的70%~80%[11],乙酸和丙酸分别是乳脂和乳糖的重要前体物质,乙酸与丙酸的比值直接影响了乳脂率的高低。此外,增加饲粮中非纤维性碳水化合物时,可以增加瘤胃中快速利用能源,从而使得能氮释放同步化,提高氮的利用效率,促进微生物蛋白的合成,从而影响乳蛋白率及其产量[12]。
Kanjanapruthipong等[13]给泌乳高峰期奶牛饲喂NDF水平分别为23%、25%、27%、29%的饲粮,发现随着饲粮NDF水平的提高,产奶量、4%标准乳产量、乳蛋白率及其产量、乳糖产量显著降低,乳脂率显著提高。马冬梅[14]给泌乳中期奶牛饲喂NDF水平分别为28%、30%、36%的饲粮,研究发现,36%组奶牛产奶量和乳脂率分别显著低于和高于其他2组,30%组奶牛4%标准乳产量显著高于36%组。范铤[10]给泌乳中期奶牛饲喂饲粮NDF水平分别为40%、43%、46%时,奶牛产奶量随着饲粮NDF水平的提高而降低,40%组奶牛乳脂率和乳蛋白产量分别显著低于和高于其他2组。本试验中,随着饲粮NDF水平的提高,奶牛产奶量、乳蛋白率及其产量、乳糖产量、氮利用效率逐渐降低,饲料转化效率、乳脂率及其产量以及乳尿素氮浓度逐渐提高,其中对产奶量、乳脂率、乳糖产量、乳蛋白产量、乳尿素氮浓度及氮利用效率存在线性关系。产奶量线性降低与奶牛干物质采食量相对应的。乳脂率线性增加,这与上述3项研究结果相一致,主要原因是饲喂不同NDF水平的饲粮,可能引起瘤胃发酵类型的改变,NDF水平越高,越有利于乙酸的合成,而乙酸是乳脂合成的前体物质,乙酸浓度越高,越有利于乳脂的形成。饲料转化效率和乳脂产量呈线性增加的趋势,可能与干物质采食量随着饲粮NDF水平的提高而降低有关。乳糖产量线性降低,这与瘤胃内丙酸浓度随着饲粮NDF水平的提高而下降相关,而丙酸是合成葡萄糖的前体物质。氮利用效率、乳蛋白率及其产量随饲粮NDF水平的提高而逐渐降低,其中氮利用效率和乳蛋白产量线性降低,这主要是因为随着饲粮NDF水平的提高,饲粮中非纤维性碳水化合物的比例在不断降低,降低了瘤胃中可快速利用的能源,使得能氮同步化程度降低,氮的利用效率也随之降低,从而导致乳蛋白率及其产量的降低。饲粮NDF对乳糖率没有显著影响,这与范铤[10]研究结果一致。乳尿素氮浓度随饲粮NDF水平的提高线性增加,这与氮的利用效率、乳蛋白产量相对应的,与Kendall等[15]研究结果相一致。
3.2 饲粮NDF水平对泌乳高峰期奶牛营养物质表观消化率的影响本试验中,随着饲粮NDF水平的提高,NDF和ADF的表观消化率线性增加,可能原因是随着饲粮NDF水平的提高,奶牛咀嚼和反刍时间延长,唾液分泌增多,使得瘤胃内pH增加,有利于纤维分解菌的大量繁殖,使得纤维酶活性提高,进而使得NDF和ADF表观消化率的提高,这与周汉林等[16]、Ruiz等[17]研究结果相一致。而本试验中,干物质、有机物、粗蛋白质表观消化率随着饲粮NDF水平的提高而降低,但差异不显著,这可能因为饲粮NDF水平增加会缩短饲料在瘤胃中的降解时间,加快了饲料在胃肠道的流通速度,影响了干物质、有机物、粗蛋白质在瘤胃中的降解速率,从而导致表观消化率的降低,这与易学武等[18]、Tjardes等[9]研究结果相一致。
3.3 饲粮NDF水平对泌乳高峰期奶牛血清指标的 影响奶牛血清葡萄糖浓度是机体对糖吸收、转运和代谢的一个动态平衡状态,可作为反映能量代谢水平的指标[19]。当血清葡萄糖浓度升高时,可直接刺激胰岛B细胞分泌胰岛素,抑制胰岛A细胞分泌胰岛血清葡萄糖素,促进体内糖原、蛋白质、核酸的合成和脂肪的沉积,从而达到降低血清葡萄糖的作用;而当血清葡萄糖浓度降低时作用相反,可直接促进分泌胰高血清葡萄糖素,抑制分泌胰岛素,促进糖原分解和糖异生,加快了体内脂肪代谢,从而达到提高血清葡萄糖浓度的作用[20]。Martinez等[21]研究表明,饲粮粗饲料水平从50%提高到60%时,可显著降低血清葡萄糖的浓度,胰岛素浓度具有下降的趋势。杨玉芬[22]研究表明,饲粮纤维具有降低血清葡萄糖浓度功能,但对血液中的胰岛素浓度没有显著影响。初汉平[23]得到了一致的结论,随着饲粮NDF水平的提高,肉兔血清葡萄糖浓度逐渐降低。本试验中,随着饲粮NDF水平的提高,A组血清葡萄糖浓度和胰岛素浓度显著高于其他3组,这与上述研究结果相一致,当饲粮NDF水平为25.05%时,饲粮能量供应过剩。
血液中总胆固醇是机体最重要的固醇类化合物,其浓度是血脂浓度的一个指标,其大部分来自肝脏的合成,其次来自饲料。甘油三酯主要作为血液中脂肪酸与白蛋白结合的贮存形式[24],通过运输到其他组织中而被利用。Grummer等[25]研究表明,提高饲粮精粗比对总胆固醇浓度无显著影响。Kanjanapruthipong等[13]在泌乳高峰期奶牛中还研究表明,饲粮NDF水平对奶牛血清总胆固醇和甘油三酯也无显著影响。本试验中,也得到了与上述一致的结论,随着饲粮NDF水平提高,血清总胆固醇浓度在各组间差异不显著,而甘油三酯浓度有线性增加的趋势,这可能与体内能量代谢相关,由于反刍动物具有较强的调节能力,使得这一变化差异不显著。
血液中的非酯化脂肪酸作为能量代谢平衡的另一指标,与血清葡萄糖浓度相比,更广泛地参与机体循环代谢,其浓度的提高是机体动用体脂的重要标志,同时也伴随了甘油三酯浓度的增加。血清中β-羟丁酸一部分由非酯化脂肪酸在肝脏中氧化而合成,另外以丁酸作为前体物质合成,同样对能量平衡进行评价。Kanjanapruthipong等[26]研究粗饲料NDF对奶牛产前和产后干物质采食量和代谢情况的研究表明,随着粗饲料NDF水平的提高,奶牛产前和产后血清非酯化脂肪酸浓度和血浆β-羟丁酸浓度显著提高。本试验结果表明,随着饲粮NDF水平的提高,血清非酯化脂肪酸和β-羟丁酸浓度线性增加,这说明,与A组相比,D组饲粮NDF水平为34.19%时,能量明显供应不足,机体通过动员体脂来维持对能量的需求。虽然饲粮是等氮等能的,但是饲粮中非纤维性碳水化合物比例是逐渐降低的,使得能氮同步化程度降低。血清中皮质醇水平的提高可导致血清葡萄糖[27]、β-羟丁酸[13]浓度的上升,在本试验得到类似的结果,血清中皮质醇浓度随着饲粮NDF水平的提高而线性增加的趋势,这与机体处于能氮不平衡状态相关,通过提高皮质醇浓度来缓解血清葡萄糖浓度的降低,同时也伴随了β-羟丁酸浓度的提高。
反刍动物血液尿素氮一部分来自于机体组织蛋白质的分解,另一部分来自于瘤胃壁对氨氮吸收,它是机体内蛋白质代谢产物,尿素氮浓度的高低可较为准确的反映动物体内蛋白质代谢和饲粮氨基酸平衡状况,其水平越低说明氮的利用率越高[28]。本试验的结果得出,随着饲粮NDF水平的提高,血清中尿素氮浓度线性增加,这与乳尿素氮浓度显著提高相一致。主要原因是随着饲粮NDF水平的提高,容易造成蛋白质和能量利用不平衡,微生物不能完全利用蛋白质或氨,奶牛体内造成氨的积累,过量的氨经过肝脏和肾脏转变为尿素,尿素很容易扩散到血液和奶中,造成血清尿素氮和乳尿素氮浓度的提高此试验结果,这与Kanjanapruthipong等[13]研究结果相一致。
4 结 论在本试验条件下,当泌乳高峰期奶牛饲粮NDF水平为25.05%时,饲料转化效率、乳脂率、NDF和ADF的表观消化率较低,血清葡萄糖和胰岛素浓度较高,容易造成能量的浪费;当NDF水平为34.19%时,干物质采食量、产奶量、乳糖和乳蛋白产量较低,乳尿素氮和血清尿素氮浓度较高,容易造成能量的不足和蛋白质的浪费。NDF水平为28.05%的饲粮比31.22%的饲粮能氮利用更为合理,生产性能更佳,建议泌乳高峰期奶牛饲粮NDF水平为28.05%。
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