编者按: 现代动物营养学正朝着营养与免疫、营养与应激乃至营养与遗传育种等相邻学科的边缘地带互相渗透 与拓宽，并取得了许多可喜的进展。近年来为了保证畜禽的健康饲养，防止化学合成药物或抗生素添加剂对 畜产品和环境的污染，一些科技工作者对中草药添加剂的应用效果进行了试验研究。现发表一篇有关杜仲 叶提取物方面的来稿，供读者参考。但值得注意的是我国中草药资源有限，如何科学合理利用中草药资源、 缓解人畜对中草药资源需求的矛盾及监控中草药饲料添加剂的质量等对中草药添加剂的开发利用将是十分 重要的。

杜仲作为中药在我国已有2 000多年的药用历史。现代医学研究表明杜仲中含有多种活性有效成分，包括黄酮类、多糖类、环烯醚萜类、木脂素类、苯丙素类、杜仲胶以及氨基酸及微量元素等。在禽类、水产、小鼠以及肉牛等动物上的研究表明，杜仲具有促进动物生长，提高机体免疫力及抗氧化能力，改善动物对糖、脂肪及蛋白质的代谢，改善动物产品品质和风味的作用^[1]。Lee等^[2]研究发现，杜仲叶添加剂影响生长猪和肥育猪的生长性能、血液参数以及肉品质；同时血清总蛋白、三磷酸鸟苷、总胆固醇和甘油三酯含量下降。Liu等^[3]研究发现，杜仲叶提取物能降低镉诱导的肝损伤小鼠肾脏的氧化应激，杜仲中的京尼平以及京尼平甙能有效抑制一氧化氮(NO)的生成。但是任何药物都具有两面性，杜仲也不例外，高剂量的杜仲添加于动物饲料中会使动物产生不良反应，因此开展杜仲的安全性研究试验将对实际生产具有非常重要的指导意义。目前国内外关于杜仲在奶牛上的应用研究相对较少，而且仅限于对其功能的研究^{[1, 4, 5]}，没有对其安全性进行研究。为了保障饲料和养殖环节质量安全，本试验依据《饲料和饲料添加剂畜禽靶动物耐受性评价试验指南(试行)》，以泌乳奶牛为靶动物，开展杜仲的安全性研究试验，确定其在泌乳奶牛上的安全使用剂量。

试验所用杜仲叶提取物来自张家界恒兴生物科技有限公司。试验前，随机取样，送往张家界市产(商)品质量监督检验所进行样品成分析，杜仲叶提取物主要成分含量如表1。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 杜仲叶提取物主要成分含量 Table 1 Main component contents of Eucommia ulmoides leaf extract 项目 Items 含量 Content 水分 Moisture/% 2.80 粗灰分 Ash/% 3.89 绿原酸 Chlorogenic acid/% 4.85 总糖 Total sugar/% 42.10 黄酮类化合物 Flavonoids/% 16.20 铅 Pb/(mg/kg) 1.78 砷 As/(mg/kg) 1.07 细菌总数 Total bacterial count/(个/g) 100 霉菌总数 Molds count/(×103个/g) 21 沙门氏菌 Salmonella UN UN:未检出 Non-detected。

表1 杜仲叶提取物主要成分含量 Table 1 Main component contents of Eucommia ulmoides leaf extract

试验于北京中地种畜有限公司养殖场进行。将60头日产奶量(36.7±3.6) kg荷斯坦泌乳奶牛按体重、胎次、泌乳天数和产奶量相同或相近的原则进行配对，随机分为4组，每组15个重复，每个重复1头牛。4组奶牛饲粮除了杜仲叶提取物添加量不同外，其他营养水平保持一致。基础饲粮参照我国《奶牛饲养标准》(NY/T 34—2004)^[6]配制，其组成及营养水平见表2。对照组饲喂基础饲粮，试验组分别在基础饲粮上添加20、100和200 g/(d·头)杜仲叶提取物，混合均匀后添加到供试牛饲粮中，确保奶牛完全采食。预试期10 d，正试期60 d。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 基础饲粮组成及营养水平(干物质基础) Table 2 Compositions and nutrient levels of the basal diet (DM basis) % 项目 Items 含量 Content 原料 Ingredients 苜蓿 Alfalfa 7.00 玉米青贮 Corn silage 50.51 燕麦草 Oat grass 0.27 玉米 Corn 5.44 干酒糟及其可溶物 DDGS 5.44 压片玉米 Steam-flaked corn 10.06 豆粕 Soybean meal 6.97 膨化大豆 Extruded soybean 1.06 菜籽粕 Rapeseed meal 0.82 苹果粕 Apple pomace 1.09 甜菜粕 Beet pulp 3.13 棉籽粕 Cottonseed meal 4.08 百事美 Bergafat1) 1.01 益康XP Yi Kang XP1) 0.40 百霉克 Mycofix select1) 0.03 食盐 NaCl 0.22 石粉 Limestone 0.68 小苏打 NaHCO3 0.82 碳酸氢钾 KHCO3 0.52 预混料 Premix2) 0.32 氧化镁 MgO 0.13 合计 Total 100.00 营养水平 Nutrient levels3) 干物质 DM 55.99 粗蛋白质 CP 17.94 粗脂肪 EE 4.93 中性洗涤纤维 NDF 29.05 酸性洗涤现为 ADF 18.75 粗灰分 Ash 9.23 钙 Ca 0.76 磷 P 0.38 产奶净能 NEL/(MJ/kg) 7.53 精料 Concentrate 34.50 粗料 Roughage 21.24 精粗比 Ratio of concentrate to roughage 1.62   1)百事美是一种瘤胃保护性脂肪粉；益康XP是一种酵母培养物；百霉克是一种防霉剂。Bergafat is a kind of rumen-undegraded fat powder; Yi Kang XP is a kind of yeast culture product; Mycofix select is a kind of mycotoxin removement agent.   2)每千克预混料含有 One kg of premix containes the followings: VA 700 000 IU，VD3 200 000 IU，VE 2 200 mg，Fe 3 000 mg，Cu 1 600 mg，Zn 10 000 mg，Mn 3 500 mg，Se 60 mg，I 70 mg，Co 45 mg。   3)泌乳净能根据我国《奶牛饲养标准》(NY/T 34—2004)[6]计算，其余为测定值。NEL is calculated according to Feeding Standard of Dairy Cows(NY/T 34—2004)[6],while the others are measured values.

表2 基础饲粮组成及营养水平(干物质基础) Table 2 Compositions and nutrient levels of the basal diet (DM basis)

杜仲叶提取物剂量设定的根据如下：湖南张家界恒兴生物科技有限公司推荐奶牛饲粮中添加剂量为20 g/(d·头)，按照《饲料和饲料添加剂畜禽靶动物耐受性评价试验指南(试行)》，本试验设定该推荐剂量的5倍即100 g/(d·头)作为有效剂量组，该推荐剂量的10倍即200 g/(d·头)作为多倍剂量组。

试验牛集中在同一牛舍，散栏饲养，全混合日粮(TMR)饲喂，自由饮水。采用荷兰进口奶牛自动采食槽(roughage intake control，RIC)进行饲喂，采食量由采食槽自动测定得出。每天随时观察牛的食欲、反刍、精神、粪尿以及是否有乳房炎发生等行为情况，做好每一项记录。

用RIC测定各组每头牛每天的干物质采食量。

试验于第1天、第15天、第30天、第45天、第60天记录产奶量，同时收集所有试验牛的奶样，送北京奶牛中心分析乳脂率、乳蛋白率、乳糖含量、体细胞数。

于正试期最后7 d进行消化试验，每组随机选5头牛，连续3 d采用全收粪法收集饲料样品和粪样，用以计算干物质、粗蛋白质(CP)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)消化率。根据美国分析化学家协会(AOAC)(1990)所描述的方法测定饲料中常规指标。

试验第1天、第15天、第30天、第45天、第60天，每组随机抽检9头奶牛，于晨饲后2 h利用真空采血管进行尾静脉采血，4 ℃离心(911×g，20 min)，分离血清，置-20 ℃冰箱保存，用于血液生化指标的测定；全血样品加抗凝剂后冰浴条件下送中国农业大学动物医院进行血液生理指标的检测。

血液生理指标主要包括白细胞(WBC)数、红细胞(RBC)数、血红蛋白(HGB)浓度、红细胞比积(HCT)、血小板(PLT)数等指标。血液生理指标由Abbott CELL-DYN 3700血液分析仪(美国雅培公司)进行测定。

生化指标主要指谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总蛋白(TPRO)、白蛋白(ALB)、尿素氮(UN)、总胆红素(TBILI)、非酯化脂肪酸(NEFA)、β-羟基丁酸(BHBA)等指标。血液生化指标由贝克曼LX20全自动生化分析仪(美国贝克曼库尔特公司)进行测定。

数据采用Excel 2007进行整理。采用SPSS 19.0进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，方差齐性时采用Duncan氏法多重比较；试验数据统计结果表示为平均值±标准误，P<0.05表示差异显著。

由表3可见，试验全期(1～60 d)，与对照组相比，20 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组和100 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的干物质采食量与对照组相比差异不显著(P＞0.05)，但是100 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的干物质采食量比对照组降低0.78%；200 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的干物质采食量显著低于其他3组(P＜0.05)，且比对照组降低3.42%，说明添加高剂量杜仲叶提取物[(100和200 g/(d·头)]由于适口性较差，降低了奶牛的干物质采食量。20 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的产奶量显著高于其他3组(P＜0.05)；100 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的产奶量比对照组降低1.38%(P＞0.05)。添加杜仲叶提取物对各组乳糖含量没有显著影响(P＞0.05)。20 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的乳蛋白含量较其他3组有提高，但是未达到显著水平(P＞0.05)。20 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的乳脂含量显著高于200 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组(P＜0.05)，高于对照组和100 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组(P＞0.05)。 对照组、20 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组和 100 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的体细胞数均显著低于200 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组(P＜0.05)[试验起始时各组体细胞数一致，无显著差异(P＞0.05)]，体细胞数随杜仲叶提取物添加剂量的变化具有较好的二次曲线拟合度，拟合曲线为：Y=133.578-99.059X+24.795X²(Y=体细胞数，X=杜仲叶提取物添加剂量，P＜0.05，R²=0.468)，结果说明杜仲叶提取物添加量并非越高越好，而且高剂量添加[(200 g/(d·头)]反而使体细胞数升高。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 杜仲叶提取物对泌乳奶牛生产性能的影响 Table 3 Effects of Eucommia ulmoides leaf extract on performance of lactating dairy cows 项目Items 添加水平 Supplemental levels/[g/(d·头)] 标准误SEM P值 P-value 0 20 100 200 杜仲叶提取物Eucommia ulmoides leaf extract 一次 Linear 二次 Quadratic 干物质采食量Dry matter intake/[kg/(d·头)] 23.13±0.27b 23.30±0.21b 22.95±0.19b 22.34±0.16a 0.11 0.010 0.005 0.003 产奶量 Milk yield/[kg/(d·头)] 32.59±0.45a 34.55±0.37b 32.14±0.40a 32.63±0.44a 0.22 0.000 0.246 0.128 乳糖含量 Milk sugar content/% 5.01±0.03 4.99±0.04 5.00±0.04 4.98±0.02 0.02 0.944 0.601 0.876 乳蛋白率 Milk protein ratio/% 3.35±0.12 3.39±0.12 3.35±0.12 3.33±0.12 0.05 0.990 0.861 0.964 乳脂含量 Milk fat content/% 4.78±0.10ab 4.97±0.08b 4.82±0.03ab 4.72±0.05a 0.04 0.102 0.336 0.091 体细胞数 Sometic cell number/(×103个/mL) 56.72±4.68a 42.42±3.12a 51.78±8.88a 136.65±37.91b 12.51 0.013 0.021 0.005   同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)，相同或无字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。   In the same row,values with different small letter superscripts mean significant difference (P＜0.05),while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

表3 杜仲叶提取物对泌乳奶牛生产性能的影响 Table 3 Effects of Eucommia ulmoides leaf extract on performance of lactating dairy cows

由表4可见，200 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的干物质消化率显著低于其他3组(P＜0.05)，且比对照组、20 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组和100 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组分别降低4.21%、4.45%和4.31%，而对照组、20 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组和100 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组3组之间的差异不显著(P＞0.05)。200 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的粗蛋白质消化率显著低于20 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组和100 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组(P＜0.05)，且比对照组降低8.59%(P＞0.05)。200 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的中性洗涤纤维消化率显著低于其他3组(P＜0.05)，且比对照组、20 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组和100 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组分别降低10.83%、12.59%和11.81%。200 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的酸性洗涤纤维消化率显著低于20 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组和100 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组(P＜0.05)，而且比对照组降低15.98%(P＞0.05)。20 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组和100 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的干物质、粗 蛋白质、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维消化率均高于对照组，但是差异不显著(P＞0.05)。以上结果说明，添加20和100 g/(d·头)杜仲叶提取物对奶牛营养物质的消化率有促进作用，但是添加200 g/(d·头)杜仲叶提取物对营养物质的消化具有抑制作用。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 杜仲叶提取物对泌乳奶牛营养物质消化率的影响 Table 4 Effects of Eucommia ulmoides leaf extract on nutrient digestibility of lactating dairy cows % 项目Items 添加水平 Supplemental levels/[g/(d·头)] 标准误SEM P值 P-value 0 20 100 200 杜仲叶提取物 Eucommia ulmoidesleaf extract 一次 Linear 二次 Quadratic 干物质消化率DM digestibility 79.39±0.37b 79.59±0.34b 79.47±0.28b 76.05±1.07a 0.47 0.003 0.010 0.001 粗蛋白质消化率 CP digestibility 65.97±1.13ab 66.96±1.47b 68.14±0.92b 60.30±3.38a 1.17 0.068 0.138 0.043 中性洗涤纤维消化率NDF digestibility 68.61±1.34b 69.99±0.42b 69.37±0.76b 61.18±3.55a 1.27 0.026 0.038 0.009 酸性洗涤纤维消化率ADF digestibility 55.98±2.13ab 57.99±1.23b 58.52±1.48b 47.03±5.55a 1.84 0.077 0.112 0.038

表4 杜仲叶提取物对泌乳奶牛营养物质消化率的影响 Table 4 Effects of Eucommia ulmoides leaf extract on nutrient digestibility of lactating dairy cows

由表5可见，各组的白细胞数较对照组都高，但未达到显著水平(P＞0.05)。20 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的红细胞数显著低于其他3组(P＜0.05)。100 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组和200 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的血红蛋白浓度显著高于对照组(P＜0.05)。200 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的红细胞比积显著高于对照组(P＜0.05)。各组血小板数、谷氨酸氨基转移酶活性及总胆红素、 总蛋白、白蛋白、β-羟丁酸含量差异不显著(P＞0.05)。20 g/(d·头) 杜仲叶提取物试验组的天门冬氨酸氨基转移酶活性高于其他3组，且显著高于100 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组和200 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组(P＜0.05)。20 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的尿素氮显著高于对照组和100 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组(P＜0.05)。20 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的游离脂肪酸显著高于200 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组(P＜0.05)。

由表5中结果可见，随着杜仲叶提取物剂量的增加，各组血液生理指标和生化指标均在正常值范围内，说明添加杜仲叶提取物并未引发泌乳奶牛血液生理和生化指标发生严重的代谢异常，出现病理表现。

杜仲对动物生产性能的影响已有报道，多数研究结果显示其对动物具有促生长作用，同时可改善动物产品品质；但是国内外未见对杜仲的安全性研究。王建辉等^[10]在研究杜仲提取物在猪生产中作用发现，杜仲素能显著提高20～60 kg猪群的平均日增重，降低20～90 kg猪群的料重比；王福明等^[11]对建昌鸭的屠宰试验表明，饲粮中添加9 g/kg杜仲粉能显著提高肉用仔鸭的生长速度，改善肉质品质；邹吉祥等^[4]研究表明，添加杜仲益生素可使试验组奶牛平均日产奶量比对照组增加2.07 kg，比对照组高13.0%，同时乳蛋白率有所提高；孙玉丽等^[5]通过给试验组奶牛每日灌服20 g杜仲素后发现，杜仲素的添加对奶牛采食量无明显影响，对产奶量基本没有影响，对乳脂率有提高作用。在本研究中，20 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的奶牛采食量和产奶量都高于其他3组，说明添加该剂量的杜仲叶提取物促进了奶牛的采食，提高了产奶量，与邹吉祥等^[4]的结果一致；同时20 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组的牛奶乳脂率有升高趋势，与孙玉丽等^[5]的结果一致，可能是因为杜仲叶提取物中含有的多种营养物质，促进饲粮养分的吸收，提高了机体内乳脂的合成。但添加100和200 g/(d·头)杜仲叶提取物时奶牛干物质采食量低于对照组，同时添加100 g/(d·头)杜仲叶提取物时奶牛产奶量比对照组降低1.38%，主要原因在于添加高剂量的杜仲叶提取物[100和200 g/(d·头)杜仲叶提取物]导致奶牛适口性较差，降低饲粮采食量，进而影响产奶量。

表5

Table 5

表5(Table 5)

表5 杜仲叶提取物对泌乳奶牛血液指标的影响 Table 5 Effects of Eucommia ulmoides leaf extract on blood indices of lactating dairy cows 项目 Items 添加水平 Supplemental levels/[g/(d·头)] 标准误SEM P值P-value 正常值范围Range of normal values[7, 8, 9] 0 20 100 200 生理指标 Physiological indices 白细胞 WBC/(×109个/L) 8.17±0.46 10.25±1.30 9.19±0.42 9.84±0.98 0.44 0.384 5.6～12.7 红细胞 RBC/(×1012个/L) 6.41±0.11b 5.97±0.11a 6.66±0.13b 6.44±0.17b 0.08 0.015 5.0～7.2 血红蛋白 HGB/(g/L) 86.45±0.66a 89.85±1.00ab 91.61±1.37b 93.71±2.05b 0.88 0.012 75.90～93.42 红细胞比积 HCT 28.29±0.37a 29.40±0.48ab 29.96±0.57ab 31.03±0.83b 0.35 0.032 23.1～31.7 血小板 PLT/(×109个/L) 426.30±15.33 461.97±36.77 512.90±23.37 439.43±32.91 15.06 0.168 396.9～892.9 生化指标 Biochemical indices 谷氨酸氨基转移酶 ALT/(U/L) 16.77±0.56 16.78±0.54 15.88±0.52 15.92±0.66 0.29 0.527 11～39 天门冬氨酸氨基转移酶 AST/(U/L) 32.28±1.13bc 34.10±0.99c 30.82±0.70b 28.11±1.05a 0.51 0.000 12.9～104.2 总胆红素 TBILI/(μmol/L) 3.52±0.33 3.18±0.38 3.43±0.19 3.40±0.26 0.14 0.883 0.2～17.1 总蛋白 TPRO/(g/L) 75.55±0.82 69.99±1.87 71.09±1.69 72.49±0.54 0.69 0.328 62～82 白蛋白 ALB/(g/L) 35.15±1.25 36.98±1.03 35.84±0.73 35.78±1.06 0.50 0.844 28～39 尿素氮 UN/(mmol/L) 5.59±0.13ab 6.02±0.16c 5.27±0.14a 5.79±0.09bc 0.07 0.001 2.8～8.8 β-羟丁酸 BHBA/(mmol/L) 0.55±0.03 0.61±0.03 0.61±0.03 0.60±0.03 0.02 0.594 <1 游离脂肪酸 NEFA/(mmol/L) 0.22±0.02ab 0.24±0.03b 0.22±0.02ab 0.18±0.01a 0.01 0.141 0.019 5～0.491 7

表5 杜仲叶提取物对泌乳奶牛血液指标的影响 Table 5 Effects of Eucommia ulmoides leaf extract on blood indices of lactating dairy cows

体细胞主要是白细胞和少量乳腺组织脱落的上皮细胞。在正常的生理状态下，乳腺分泌液中含有一定数量的体细胞。当乳腺受到外来影响，主要是有害细菌进入乳房内，就会产生白细胞对抗有害菌，保护乳腺的健康，所以体细胞数可直接反映乳腺的健康状况。从本试验结果看，20 g/(d·头)杜仲叶提取物试验组体细胞数明显低于其他3组，可能是由于奶牛饲粮中适量的添加杜仲叶提取物[20 g/(d·头)]能提高机体的免疫力和乳腺组织的修复能力，但是添加高剂量杜仲叶提取物[200 g/(d·头)]抑制了奶牛对饲粮的采食，奶牛整体健康状况变差，导致体细胞数降低。

杜仲叶提取物对泌乳奶牛营养物质消化率的影响未见报道。本试验研究发现，在泌乳奶牛饲粮中添加20和100 g/(d·头)杜仲叶提取物对奶牛营养物质的消化率有促进作用，但是添加200 g/(d·头)杜仲叶提取物对营养物质的消化具有抑制作用。产生以上结果的主要原因是杜仲叶提取物中含有绿原酸、多糖、维生素及矿物质等多种活性物质，因此适量添加杜仲叶提取物[20 g/(d·头)]促进了奶牛饲料中粗蛋白质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维等营养物质降解，进而提高了这些营养物质的消化率；但是高剂量添加杜仲叶提取物[200 g/(d·头)]时由于奶牛适口性降低，反而不利于营养物质的采食，进而降低营养物质消化率。

白细胞是细胞系统疾病的重要指示细胞，本试验对照组的白细胞值稍低于其他3组，但各组均在合理范围之内，说明群体并未感染严重炎症。谷氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶主要分布在肝脏的肝细胞内，肝细胞坏死时谷氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶就会升高，其升高的程度与肝细胞受损的程度相一致^[11]；本试验结果显示添加杜仲叶提取物后各试验组谷氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶均未出现显著升高，且都在标准值范围。胆红素是血液循环中衰老红细胞在肝脏、脾脏及骨髓的单核一吞噬细胞系统中分解和破坏的产物。若机体内生成胆红素过多超过了肝细胞处理胆红素的能力，或者肝细胞处理胆红素的能力下降，以及胆红素排泄障碍等均可使血中胆红素含量增高^[12]；本试验中添加杜仲叶提取物后各组胆红素含量都在正常范围内且差异不显著。由于大部分血浆蛋白均由肝脏合成，当肝细胞受损时血浆蛋白合成减少，一旦肝脏合成功能下降，总蛋白、白蛋白等指标在血液中浓度随之降低，其降低程度与肝脏合成功能损害程度呈正相关，特别是白蛋白明显减少；本试验中总蛋白和白蛋白的含量并未出现明显变化。另有研究表明，总蛋白低于正常值就表明奶牛营养及吸收有障碍，而高于正常值则表明有感染的发生^[13]；从测得的数值来看，各组都在正常值范围内，未发生异常。尿素氮含量反映了肾脏功能与体内蛋白质分解代谢的状况；其含量升高，表明肾功能受到损伤以及内源蛋白质分解加快^[14]；本试验中各组都在正常值范围内。血液中β-羟丁酸和游离脂肪酸含量是反映奶牛能量代谢及平衡情况的关键指标。β-羟丁酸的是导致酮症的主要物质，正常值小于1.0 mmol/L，当其在1.0～2.5 mmol/L时为亚临床型酮病；当奶牛体内的葡萄糖消耗量过大，机体就会动员体脂，将脂肪脂解生成甘油和脂肪酸，大量游离脂肪酸进入血液，成为游离脂肪酸^[15]。所以亚临床酮病和能量负平衡条件下，血液中的游离脂肪酸水平会提高；本试验中β-羟丁酸值均小于1.0 mmol/L，游离脂肪酸均处于正常值范围，说明添加杜仲叶提取物对奶牛能量代谢没有影响。

综上所述，同时结合生产实际，推荐以100 g/(d·头)杜仲叶提取物作为奶牛最高安全使用剂量。