2. 福建深纳生物工程有限公司, 福建 350700;
3. 辽宁德宝农牧集团有限公司, 沈阳 110171
2. Fujian Shenna Bio Engineering Co., Ltd., Fujian 350700, China;
3. Liaoning Debao Argi-animal Husbandry Co., Ltd., Shenyang 110171, China
近年来,广大畜牧生产者为了追求高额的利润与最大的生产效率往往通过滥用饲料添加剂及抗生素等药物来提高畜禽的抗病力与生长性能,但同时也造成饲料添加剂使用过量及病原菌产生抗药性和畜产品中药物残留等一系列问题。因此,研究与开发能够减少使用量、提高机体利用效率、从生理内分泌途径提高动物生长性能的绿色添加剂已成为21世纪全球养殖业发展的必然趋势。抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)由寡肽和和一些数量不同的氨基酸残基组成,在动植物或组织和细胞中分离、提取出来的具有生物活性的物质,具有广谱杀菌、抗病毒、抗真菌、抗肿瘤、抗寄生虫和提高免疫力等功能,是生物体中天然免疫系统所必不可少的组成部分[1]。研究表明,断奶仔猪饲粮中添加复合抗菌肽,能够提高断奶仔猪生长性能,并通过提高血清中细胞因子的含量来提高断奶仔猪的免疫功能[2]。断奶仔猪饲粮中药理剂量氧化锌的添加可效降低断奶仔猪腹泻率并促进仔猪生长。但高剂量氧化锌的长期使用会造成被毛粗且长乱、皮肤暗无光泽以及生长发育受影响等现象,高剂量氧化锌的吸收率很低,饲粮中无法消化吸收的氧化锌由粪便排出,造成锌源的浪费和环境污染。将氧化锌使用包被处理,可有效降低氧化锌在胃中的解离度,显著增加有效成分在肠道中所发挥的作用[3],包被氧化锌(coated ZnO,C-ZnO)具有生产成本相对较低、容易储存、便于运输等优点,展现出更广阔的发展前景。复合抗菌肽(compound antimicrobial peptides,C-AMPs)与C-ZnO是2种安全、环保的饲料添加剂,二者可通过生理调节途径达到促进动物生长的共同目的,但多数试验集中在单一物质的效果研究上,且二者在断奶仔猪上的应用尚缺乏系统的报道。因此,本试验旨在研究饲粮中添加C-AMPs与C-ZnO以及二者共同添加对断奶仔猪生长性能、血清生化指标、养分表观消化率以及粪中微生物菌群的影响,为二者在断奶仔猪上的应用提供科学依据。
1 材料与方法 1.1 试验材料C-ZnO由福建深纳生物工程有限公司提供,商品名“福康锌”,纯度30%。C-AMPs由四川华德生物工程有限公司提供,由猪防御素(37个氨基酸)、苍蝇抗菌肽(40个氨基酸)混合而成,各占50%。
1.2 试验设计及试验饲粮试验采用2×2因子完全随机化设计,选用160头平均体重为(6.98±0.05) kg的健康大白断奶仔猪,随机分为4组,每组4个重复,每个重复10头猪。4个组的初始平均体重组间差异不显著(P>0.05)。分别饲喂基础饲粮(对照组)、基础饲粮+0.5 mg/kg C-AMPs(C-AMPs组)、基础饲粮+1 800 mg/kg C-ZnO(C-ZnO组)、基础饲粮+0.5 mg/kg C-AMPs+1 800 mg/kg C-ZnO(C-AMPs+C-ZnO组),试验期28 d。参照NRC(1998)早期断奶仔猪营养需要配制成颗粒料,基础饲粮组成及营养水平见表1。
![]() |
表 1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) |
试验在辽宁德宝农牧集团艾德蒙种猪繁育场进行。仔猪在全封闭高床保育猪舍进行,试验期间采取自由采食、自由饮水。日常饲养管理和免疫按常规程序进行。
1.4 样品采集血样采集:试验第28天同一时间对试验仔猪进行采血,每个组随机选取4头仔猪采用前腔静脉采血法取10 mL血液,其中5 mL采用抗凝真空采血管采取,5 mL采用非抗凝采血管采取。采血完毕后立即进行离心,非抗凝血置于离心机3 000 r/min离心15 min,-20 ℃保存备用。
粪样采集:每个处理选取生长较好、体况相近的仔猪各4头,于试验结束前3天每日07:00至09:00间收集粪样,每头猪采集粪样2份,每份200 g,其中一份加入体积分数为10%的酒石酸水溶液20 mL,防止氨气挥发,用于营养物质分析。另外一份-20 ℃冷冻保存用于测定微生物。实验室测定之前,将每头猪3 d所采粪样混合均匀后取样进行测定。
1.5 指标测定 1.5.1 生长指标试验第1天和第28天清晨空腹称重、计算耗料量、平均日增重(average daily gain,ADG)、平均日采食量(average daily feed intake,ADFI)及料重比(feed/gain,F/G)。
1.5.2 血清生化指标通过放射免疫法测定血清生长激素(GH)含量。按照试剂盒说明书进行测定,试剂盒购自北京华英生物技术研究所。
采用连续监测法测定血清碱性磷酸酶(ALP)活性。按照试剂盒说明书进行测定,试剂盒购自中生北控生物科技股份有限公司。
采用比色法测定血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)含量。试剂盒购自中生北控生物科技股份有限公司,采用日本日立7160全自动生化仪测定。
采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测血清白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)、猪瘟抗体(CSF-Ab)含量。按照试剂盒说明书进行测定,试剂盒购于上海沪宇生物科技有限公司。
1.5.3 T淋巴转换率的测定取抗凝血3 mL,500 r/min离心10 min,小心去上层(血浆与红细胞之间的白色膜),用加Hank’s液2 mL,3 500 r/min,离心10 min,去上清,洗涤2次。用PRMI-1640稀释细胞用血球仪计数白细胞,使其密度为1×107个/mL的白细胞悬液。分装成2管,在一管中加10%的小牛血清和10%植物血凝素各100 μL。另一管(对照组)加10%小牛血清和PRMI-1640各100 μL混均。取上述100 μL加入96孔板细胞培养板内,设2个重复管,在5% CO2-0.04 mol/L HCl 100 μL,培养2 h后,取出,室温放置5 min。
1.5.4 养分表观消化率饲料和粪样中干物质(DM)、有机物(OM)、粗蛋白质(CP)、粗脂肪(EE)、钙(Ca)和磷(P)表观消化率用酸不溶灰分(AIA)内源指示剂法测定。
1.5.5 粪中微生物计数粪中微生物数量采用平板涂布法进行计数。
1.5.6 腹泻率每天清晨观察仔猪粪便软硬稀度,判断是否腹泻并且做好记录。按正常、稀软、黏稠、水样4个等级进行划分,分别用0、1、2、3分表示,最后统计各组腹泻指数。
腹泻率(%)=[(腹泻仔猪数×发病天数)/
(试验仔猪数×试验天数)]×100;
腹泻指数=腹泻总评分/仔猪头数。
试验数据采用SPSS 21.0软件的单因素方差分析(one-way ANOVA)程序进行分析,差异显著时采用Duncan氏法进行多重比较,同时采用GLM中的多因素方差分析,分析各因素的主效应以及交互作用效应,数学模型为xijl=μ+αi+βj+(αβ)j+εijl。P<0.05为差异显著,P<0.01为差异极显著,结果以“平均值±标准差”表示。
2 结果与分析 2.1 饲粮中添加C-AMPs与C-ZnO对断奶仔猪生长性能及腹泻率的影响由表2可见,单因素分析结果表明,与对照组相比,饲粮单独添加C-AMPs、C-ZnO显著提高断奶仔猪ADG(P<0.05),C-AMPs与C-ZnO共同添加极显著提高断奶仔猪ADG(P<0.01);饲粮单独添加C-AMPs、C-ZnO或C-AMPs与C-ZnO共同添加可极显著提高断奶仔猪的ADFI(P<0.01);饲粮单独添加C-AMPs、C-ZnO或C-AMPs与C-ZnO共同添加可极显著降低断奶仔猪腹泻率与腹泻指数(P<0.01)。F/G各组间无显著差异(P>0.05)。
![]() |
表 2 饲粮添加C-AMPs与C-ZnO对断奶仔猪生长性能和腹泻率的影响 Table 2 Effects of dietary C-AMPs and C-ZnO on growth performance of weaning piglets |
主效应分析结果表明,饲粮添加C-AMPs、C-ZnO及其交互作用均极显著提高断奶仔猪ADFI(P<0.01),极显著降低断奶仔猪腹泻率与腹泻指数(P<0.01)。饲粮中单独添加C-AMPs可极显著提高断奶仔猪ADG和降低F/G(P<0.01)。饲粮中单独添加C-ZnO可显著提高断奶仔猪ADG(P<0.05)。
2.2 饲粮中添加C-AMPs与C-ZnO对断奶仔猪养分表观消化率的影响由表3可见,单因素分析结果表明,与对照组相比,饲粮中单独添加C-ZnO极显著提高CP与EE表观消化率(P<0.01);饲粮中单独添加C-ZnO或C-AMPs与C-ZnO共同添加极显著提高OM表观消化率(P<0.01);饲粮中单独添加C-AMPs显著提高Ca、OM表观消化率(P<0.05)。
![]() |
表 3 饲粮添加C-AMPs与C-ZnO对断奶仔猪养分表观消化率的影响 Table 3 Effects of dietary C-AMPs and C-ZnO on nutrient apparent digestibility of weaning piglets |
主效应分析结果表明,饲粮单独添加C-AMPs可显著提高Ca表观消化率(P<0.05);饲粮单独添加C-ZnO可极显著提高CP表观消化率(P<0.01),显著提高EE、OM表观消化率(P<0.05);C-AMPs与C-ZnO交互作用对各养分表观消化率无显著影响(P>0.05)。
2.3 饲粮中添加C-AMPs与C-ZnO对断奶仔猪粪便微生物数量的影响由表4可见,单因素分析结果表明,与对照组相比,饲粮中单独添加C-AMPs、C-ZnO或C-AMPs与C-ZnO共同添加极显著降低大肠杆菌数量(P<0.01),极显著增加双歧杆菌数量(P<0.01)。各组间乳酸杆菌数量无显著差异(P>0.05)。
![]() |
表 4 饲粮添加C-AMPs与C-ZnO对断奶仔猪粪便微生物数量的影响 Table 4 Effects of dietary C-AMPs and C-ZnO on feacal microflora numbers of weaning piglets lg(CFU/g) |
主效应分析结果表明,饲粮单独添加C-AMPs或C-ZnO可显著降低大肠杆菌数量(P<0.05),显著增加双歧杆菌数量(P<0.05);饲粮单独添加C-AMPs可显著增加乳酸杆菌数量(P<0.05);C-AMPs与C-ZnO交互作用可显著降低大肠杆菌数量(P<0.05),显著增加双歧杆菌数量(P<0.05)。
2.4 饲粮中添加C-AMPs与C-ZnO对断奶仔猪血清生化指标的影响由表5可见,单因素分析结果表明,与对照组相比,饲粮中单独添加C-AMPs、C-ZnO血清GH含量显著升高(P<0.05);单独添加C-AMPs、C-ZnO或C-AMPs与C-ZnO共同添加血清AKP活性显著降低(P<0.05);饲粮中单独添加C-AMPs血清IgG含量显著提高(P<0.05),血清IgM含量极显著提高(P<0.01);饲粮中单独添加C-ZnO血清IgG含量及T淋巴转换率显著提高(P<0.05);饲粮中C-AMPs与C-ZnO共同添加血清T淋巴转换率显著提高(P<0.05),血清GH、IgG、IL-2和IL-6含量极显著提高(P<0.01);饲粮中单独添加C-AMPs血清CSF-Ab含量极显著提高(P<0.01)。血清IgA、IFN-γ含量各组间差异不显著(P>0.05)。
![]() |
表 5 饲粮添加C-AMPs与C-ZnO对断奶仔猪血清生化指标的影响 Table 5 Effects of dietary C-AMPs and C-ZnO on serum biochemical indices of weaning piglets |
主效应分析结果表明,饲粮中单独添加C-AMPs或C-ZnO可显著提高血清GH、IgG含量(P<0.05)。饲粮中单独添加C-AMPs可显著降低血清AKP活性(P<0.05),可显著提高血清IgM、IL-2、CSF-Ab、IFN-γ含量(P<0.05),极显著提高血清IL-6含量(P<0.01)。饲粮单独C-ZnO可显著提高血清T淋巴转换率(P<0.05)。C-AMPs与C-ZnO交互作用可显著提高血清CSF-Ab含量(P<0.05)。
3 讨 论 3.1 饲粮中添加C-AMPs与C-ZnO对断奶仔猪生长性能和腹泻率的影响锌是动物必需的一种微量元素,动物体内有200多种酶含有锌,并有300多种酶活性与锌有关,锌参与动物体内蛋白质、DNA、RNA及其他物质的合成与代谢[4]。同时锌可提高食欲,促进采食量,影响体蛋白质合成而促进仔猪生长[5]。而抗菌肽本身是来源于动物自身的一种肽类,动物对其排异反应很低,且体内的很多蛋白酶能把抗菌肽降解,使机体吸收,促进机体生长。Smith等[6]和Hill等[7]研究表明,在仔猪饲粮中以氧化锌形式添加药理水平的锌,可以提高仔猪的生长性能及降低腹泻率。Xiong等[8]和王建华等[9]研究发现,饲粮中添加抗菌肽可显著提高断奶仔猪ADG和ADFI,极显著降低腹泻率。在本试验中,饲粮中单独添加C-AMPs、C-ZnO可显著提高断奶仔猪ADG,C-AMPs与C-ZnO共同添加可极显著提高断奶仔猪ADG,饲粮中添加C-AMPs、C-ZnO及其交互作用均极显著提高断奶仔猪ADFI,降低腹泻率。C-AMPs与C-ZnO共同添加产生交互效应的原因可能在于锌可以提高仔猪体内抗菌肽PR-39基因的表达量。赵燕飞等[10]研究表明,高剂量氧化锌可显著提高仔猪抗菌肽PR-39基因表达量,锌通过影响锌指蛋白Sp-1的功能,进而影响抗菌肽PR-39基因的表达,使其抗菌效果发挥作用的同时降低仔猪腹泻发生。而外源性抗菌肽的添加进一步促进抗菌肽在动物体内发挥效用。
3.2 饲粮中添加C-AMPs与C-ZnO对断奶仔猪养分表观消化率的影响C-ZnO对EE表观消化率的影响,可能与影响阿朴脂蛋白A-Ⅰ和脂肪酸结合蛋白有关[11]。羧肽酶A、B均为重要的含锌酶,可对具重要作用的CP进行充分消化吸收。C-AMPs是一类生物活性肽,不同于传统抗生素的抑菌机制,它可以在细菌细胞膜上穿孔而形成离子通道,引起细菌细胞膜结构破坏,造成细胞内的水溶性物质大量渗出,导致细菌死亡。Yoon等[12]研究表明,饲粮中抗菌肽使断奶仔猪的CP和OM表观消化率显著增加。张晓杰等[13]研究表明,添加天蚕素能显著地提高仔猪养分消化利用率。在本试验中,饲粮中单独添加C-ZnO极显著提高CP、EE表观消化率;饲粮中单独添加C-ZnO或C-AMPs与C-ZnO共同添加极显著提高OM表观消化率;单独添加C-AMPs极显著提高Ca表观消化率,显著提高OM表观消化率,与以上报道基本一致。
3.3 饲粮中添加C-AMPs与C-ZnO对断奶仔猪粪便微生物数量的影响研究表明,在2个有大肠杆菌腹泻历史的农场中通过对试验仔猪饲粮中添加高锌(3 100 mg/kg,ZnO),使其腹泻病得到了完全控制,试验验证了高锌在抗仔猪腹泻方面的显著效果,这一效果与粪中大肠杆菌数量显著降低有着密切的联系,锌离子可通过抑制大肠杆菌的呼吸链而降低其有害作用[14]。抗菌肽是广谱抗菌性物质,其不仅对真菌以及病原虫有着广泛的杀菌作用,同时还可以对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌起到抑制的作用。一般抗菌肽可以很有效地抑制动物肠道内有害菌群的生长和繁殖,如大肠杆菌和沙门氏菌等[1]。在本试验中,饲粮中单独添加C-AMPs、C-ZnO或C-AMPs与C-ZnO共同添加大肠杆菌数量极显著减少,双歧杆菌数量极显著增加,但对乳酸杆菌数量影响不显著。C-AMPs与C-ZnO及二者交互作用使大肠杆菌及双歧杆菌数量显著降低。C-AMPs与C-ZnO共同添加产生交互作用的原因可能在于锌可以提高仔猪体内抗菌肽PR-39的表达量,PR-39在骨髓中表达,在肠道中分泌。Agerberth等[15, 16]和Andersson等[17]从猪小肠分离出3种抗菌肽,即PR-39、肽3910和NK-lysin,这3种肽对大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌和伤寒杆菌都具有很好的杀菌效果,其中对大肠杆菌作用效果最佳,提示猪肠道有可能主要依靠了抗菌肽的高抗菌活性来保护肠道黏膜和微生物菌群平衡[18]。
3.4 饲粮中添加C-AMPs与C-ZnO对断奶仔猪血清生化指标的影响GH对调节动物生长具有着重要作用,能够直接促进动物生长,提高氨基酸的摄取,促进葡萄糖吸收、蛋白质和核酸的合成和脂肪分解。本试验表明,单独添加C-ZnO或C-AMPs与C-ZnO共同添加血清中GH含量比对照组极显著升高,说明饲粮中添加C-ZnO可以促进GH的分泌量,促进仔猪生长。血清AKP活性高低反映动物的生长情况,血清AKP的活性与猪的ADG呈负相关。本试验结果显示,C-AMPs组与对照组相比血清AKP活性显著降低,这与ADG增加这一试验结果相吻合。在动物体体液免疫中,血清IgA、IgG和IgM含量的大小与免疫能力呈正相关。本试验研究表明,饲粮中单独添加C-ZnO或C-AMPs能显著提高血清IgG、IgM含量,这说明添加C-ZnO和C-AMPs可以提高仔猪的体液免疫能力。IL-2由Thl细胞合成,是猪体内早期促炎因子,能调节其他细胞因子的合成[19]。IL-6在机体免疫调节、应激反应、造血干细胞分化和防御机制中起关键作用[20]。IFN-γ具有广谱的抗病毒、影响细胞生长和分化、调节免疫功能等多种生物活性。本试验中,饲粮中添加C-AMPs与C-ZnO共同添加与对照组相比较血清IL-2、IL-6含量极显著增高。血清CSF-Ab含量高低反映动物机体的免疫情况,马文峰等[21]研究表明,饲粮中添加抗菌肽显著提高仔猪ADG与血清CSF-Ab含量,本试验结果与之一致。在细胞免疫功能方面,T淋巴细胞转化率是一个极其重要的指标,当机体受到外界抗原的刺激时,在短时间内细胞表面的电荷发生迅速的变化,细胞内酶活化后导致DNA的合成启动,从而产生一系列的变化,如染色质疏松、淋巴细胞变成母细胞等。机体细胞的免疫水平可以通过T淋巴细胞转化率和白细胞吞噬率的高低来进行衡量。本试验中,饲粮中单独添加C-AMPs显著提高血清T淋巴细胞转化率,饲粮中单独添加C-ZnO或C-AMPs、C-ZnO共同添加极显著提高血清T淋巴细胞转化率。
4 结 论① 饲粮单独添加C-AMPs、C-ZnO或二者共同添加能够显著提高断奶仔猪的ADG和ADFI。饲粮单独添加AMPs、C-ZnO显著提高断奶仔猪对饲料中蛋白质和脂肪的消化吸收。
② 饲粮单独添加C-AMPs、C-ZnO或二者共同添加能够显著降低肠道中大肠杆菌数量,显著增加双歧杆菌数量。饲粮单独添加C-AMPs或C-ZnO显著提高血清IgG、IgM含量,饲粮单独添加C-AMPs、C-ZnO或二者共同添加极显著提高血清T淋巴细胞转化率及IL-2、IL-6和CSF-Ab含量,增强断奶仔猪的机体免疫力。
③ 推荐在断奶仔猪饲粮中共同添加C-AMPs和C-ZnO。
[1] | BROGDEN K A.Antimicrobial peptides:pore formers or metabolic inhibitors in bacteria?[J]. Nature Reviews Microbiology,2005,3(3):238-250. (![]() |
[2] | 袁威,任志华,邓又天,等.复合抗菌肽对断奶仔猪生长性能及血清细胞因子含量的影响[J]. 动物营养学报,2015,27(3):885-892. (![]() |
[3] | SINGH D P.Synthesis and growth of ZnO nanowires[J]. Science of Advanced Materials,2010,2(3):245-272. (![]() |
[4] | VALLEE B L,FALCHUK K H.The biochemical basis of zinc physiology[J]. Physiological Reviews,1993,73(1):79-118. (![]() |
[5] | DAVIS M E,BROWN D C,MAXWELL C V,et al.Effect of phosphorylated mannans and pharmacological additions of zinc oxide growth and immunocompetence of weanling pigs[J]. Journal of Animal Science,2004,82(2):581-587. (![]() |
[6] | SMITH J W,TOKACH M D,GOODBAND R D,et al.Effects of the interrelationship between zinc oxide and copper sulfate on growth performance of early-weaned pigs[J]. Journal of Animal Science,1997,75(7):1861-1866. (![]() |
[7] | HILL G M,GROMWELL G L,CRENSHAW T D,et al.Growth promotion effects and plasma changes from feeding high dietary concentrations of zinc and copper to weanling pigs (regional study)[J]. Journal of Animal Science,2000,78(4):1010-1016. (![]() |
[8] | XIONG X,YANG H S,LI L,et al.Effects of antimicrobial peptides in nursery diets on growth performance of pigs reared on five different farms[J]. Livestock Science,2014,167(9):206-210. (![]() |
[9] | 王建华,伍淳操.抗菌肽和蛋氨酸锌对断奶仔猪部分血液常规指标的影响[J]. 贵州农业科学,2010,38(3):127-130. (![]() |
[10] | 赵燕飞,汪以真,林文学.锌对断奶后不同阶段仔猪抗菌肽PR-39 mRNA表达的影响[J]. 中国兽医杂志,2005,41(4):10-13. (![]() |
[11] | SHAY N F,COUSINS R J.Cloning of rat intestinal mRNAs affected by zinc deficiency[J]. The Journal of Nutrition,1993,123(1):35-41. (![]() |
[12] | YOON J H,INGALE S L,KIM J S,et al.Effects of dietary supplementation with antimicrobial peptide-P5 on growth performance,apparent total tract digestibility,faecal and intestinal microflora and intestinal morphology of weanling pigs[J]. Journal of the Science of Food and Agriculture,2013,93(3):587-592. (![]() |
[13] | 张晓杰,李玉侠,卢志勇.日粮中添加不同种类抗菌肽对仔猪生产性能的影响[J]. 饲料博览,2013(2):25-27. (![]() |
[14] | YOUSEF J M,DANIAL E N.In vitro antibacterial activity and minimum inhibitory concentration of zinc oxide and nano-particle zinc oxide against pathogenic strains[J]. Journal of Health Sciences,2012,2(4):38-42. (![]() |
[15] | AGERBERTH B,LEE J Y,BERGMAN T,et al.Amino acid sequence of PR-39[J]. European Journal of Biochemistry,1991,202(3):849-854. (![]() |
[16] | AGERBERTH B,BOMAN A,ANDERSSON M,et al.Isolation of three antibacterial peptides from pig intestine:gastric inhibitory polypeptide (7-42),diazepam-binding inhibitor (32-86) and a novel factor,peptide 3910[J]. European Journal of Biochemistry,1993,216(2):623-629. (![]() |
[17] | ANDERSSON M,GUNNE H,AGERBERTH B,et al.NK-lysin,a novel effector peptide of cytotoxic T and NK cells.Structure and cDNA cloning of the porcine form,induction by interleukin 2,antibacterial and antitumour activity[J]. The EMBO Journal,1995,14(8):1615-1625. (![]() |
[18] | LEE J Y,BOMAN A,SUN C X,et al.Antibacterial peptides from pig intestine:isolation of a mammalian cecropin[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,1989,86(23):9159-9162. (![]() |
[19] | 邵斌,张彩霞,赵茹茜,等.运输对仔猪抗氧化功能和促炎细胞因子产生的影响[J]. 畜牧兽医学报,2009,40(10):1545-1549. (![]() |
[20] | COMA J,ZIMMERMAN D R,CARRION D.Relationship of rate of lean tissue growth and other factors to concentration of urea in plasma of pigs[J]. Journal of Animal Science,1995,73(12):3649-3656. (![]() |
[21] | 马文锋,焦喜兰,李振田,等.抗菌肽替代氧化锌对仔猪生产性能及血清猪瘟抗体水平的影响[J]. 中国饲料,2011(19):22-24. (![]() |