蓝狐，又称北极狐，是珍贵的毛皮动物之一，其毛皮底绒丰厚，美观大方，被誉为毛皮中的“软黄金”，是世界三大裘皮产业之一。然而，蓝狐的驯化时间短，且现今毛皮动物营养调控技术的研究较为薄弱，使动物的生产性能无法得到充分发挥，从而影响了养殖户的经济效益^[1]。精氨酸是成年哺乳动物的条件性必需氨基酸，是幼龄和孕期哺乳动物的必需氨基酸，在促进生长、参与脂肪代谢、调节氮代谢和增强免疫机能等方面发挥着重要作用；精氨酸同时也是猫、犬、水貂等食肉动物维持生长的必需氨基酸^[2]。NRC(1982)^[3]狐貂营养需求标准及Leoschke等研究^[4]均指出，精氨酸对水貂等毛皮动物的毛发发育起着至关重要的作用。Damgaard^[5]研究发现，含1.7%精氨酸的低蛋白质饲粮可以有效防止仔貂高血氨症的发生。Kim等^[6]对哺乳仔猪的研究表明，与对照组相比，饲料中添加0.2%和0.4%的精氨酸后仔猪日增重分别提高28%和66%，体重分别增加15%和32%。张帝^[7]的研究表明，饲粮中添加精氨酸会显著影响妊娠母兔的食入氮和可消化氮，添加量达到0.4%时母兔血液中天门冬氨酸氨基转移酶的活性达到最高。目前以蓝狐作为试验动物进行精氨酸需要量的研究鲜有报道，国内尚未明确给出蓝狐饲粮中精氨酸的适宜水平。因此，本试验通过在蓝狐饲粮中添加不同水平的精氨酸，研究饲粮精氨酸水平对育成期雌性蓝狐生长性能、营养物质消化率、氮代谢及血清生化指标的影响，为完善我国蓝狐饲养标准提供科学依据，为探究精氨酸对蓝狐的营养调控机制奠定基础。

本试验所用精氨酸为L-精氨酸，购自无锡晶海氨基酸有限公司，含量≥99.0%。

本试验在中国农业科学院特产研究所动物试验基地进行。试验采用单因素随机试验设计，选取(60±5)日龄、体重相近的60只健康雌性蓝狐，随机分成6组，且同窝蓝狐不在同一组，以消除遗传因素带来的影响，每组10个重复，每个重复1只，各重复之间初始体重差异不显著(P＞0.05)。

参考NRC(1982)^[3]狐貂营养需求标准配制的基础饲粮，其组成及营养水平见表1。在基础饲粮基础上分别添加0(Ⅰ组)、0.2%(Ⅱ组)、0.4%(Ⅲ组)、0.6%(Ⅳ组)、0.8%(Ⅴ组)和1.0%(Ⅵ组)精氨酸，制成6种试验饲粮。预试期10 d，正试期63 d。试验全程在室外自然光照条件下进行，由专人饲喂。每天早、晚各饲喂1次，自由饮水。正试期开始后，每隔14 d于晨间空腹称重，每日观察试验蓝狐健康状况并做记录。

每组分别选取7只采食与排便正常的健康蓝狐，于试验第19～22天进行消化代谢试验。采用全收粪法连续4 d收集粪和尿，尿样收集前在收集桶内加入20 mL 10%硫酸溶液以固氮，测定尿中含氮量。所收集粪样加入少量10%硫酸溶液固氮，经65℃烘干至恒重，测定初水分。将干粪样粉碎过40目筛，保存备用。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) % 项目 Items 含量 Content 原料 Ingredients 膨化玉米 Extrusion corn 39.70 豆粕 Soybean meal 15.00 玉米蛋白粉 Corn gluten meal 5.00 肉骨粉 Bone meat meal 15.00 鱼粉 Fish meal 12.00 豆油 Soybean oil 9.00 磷酸氢钙 CaHPO4 1.00 食盐 NaCl 0.50 L-赖氨酸 L-Lys 1.00 DL-蛋氨酸 DL-Met 0.80 预混料 Premix1) 1.00 合计 Total 100.00 营养水平 Nutrient levels2) 代谢能 ME/(MJ/kg) 14.03 粗蛋白质 CP 31.02 粗脂肪 EE 11.08 粗灰分 Ash 9.44 钙 Ca 1.98 总磷 TP 1.01 赖氨酸 Lys 1.45 蛋氨酸 Met 0.99 精氨酸 Arg 1.61     1)预混料为每千克饲粮提供The premix provided the following per kg of the diet：VA 10 000 IU，VD3 2 500 IU，VE 220 mg，VK3 0.5 mg，VB1 4 mg，VB2 5 mg，VB6 2 mg，VB12 0.042 mg，叶酸 folic acid 0.5 mg，泛酸 pantothenic acid 22 mg，生物素 biotin 16 mg，氯化胆碱 choline chloride 1.2 mg，VC 120 mg，Fe (as ferrous sulfate) 140 mg，Zn (as zinc sulfate) 32 mg，Mn (as manganese sulfate) 16 mg，I (as potassium iodide) 0.8 mg，Se (as sodium selenite) 0.12 mg，Cu (as copper selenite) 5 mg。     2)代谢能为计算值，其余为实测值。ME was a calculated value,while the others were measured values.

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis)

饲养试验结束后，每组分别选取7只健康蓝狐，于早饲前进行后肢静脉采血。每只采血5 mL，置于促凝固管中，静置待血清析出后3 500 r/min、4℃离心15 min，将分离出的血清分装在1.5 mL的离心管中，置于-80℃中保存备用。

测定基础饲粮、粪样等样品的干物质、粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分、钙、总磷含量^[8]。样品中碳水化合物含量通过计算求得。血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、尿素氮(urea nitrogen,UN)测定所用试剂盒全部购自中生北控生物科技股份有限公司，按照试剂盒说明书操作，使用Vitalab Selectra E全自动生化分析仪进行测定。基础饲粮中氨基酸含量采用盐酸水解法，使用日立L-8900型氨基酸自动分析仪测定。

碳水化合物含量=干物质含量-粗蛋白质

含量-粗脂肪含量-粗灰分含量；

料重比=干物质采食量/平均日增重；

干物质消化率(%)=[(干物质采食量-粪中

干物质总量)/干物质采食量]×100；

粗蛋白质消化率(%)=[(粗蛋白质摄入量-

粪中粗蛋白质总量)/粗蛋白质摄入量]×100；

粗脂肪消化率(%)=[(粗脂肪摄入量-

粪中粗脂肪总量)/粗脂肪摄入量]×100；

碳水化合物消化率(%)=[(碳水化合物摄入量-

粪中碳水化合物总量)/碳水化合物

摄入量]×100；

氮沉积(g/d)=食入氮量－粪氮排出量-

尿氮排出量；

净蛋白质利用率(%)=(氮沉积/

食入氮量)×100；

蛋白质生物学价值(%)=[氮沉积/

(食入氮量-粪氮排出量)]×100。

试验数据以平均值±标准差表示，数据用Excel 2003进行整理并用SPSS 19.0软件进行单因素方差分析，多重比较采用Duncan氏法进行差异显著性检验，P＜0.01为差异极显著，0.01＜P＜0.05为差异显著，P＞0.05为差异不显著。

从表2可以看出，试验第1～14天、第15～28天，各组之间平均日增重差异不显著(P＞0.05)；试验第29～42天，Ⅱ组蓝狐的平均日增重最高，显著高于Ⅵ组(P＜0.05)；试验第43～56天，Ⅵ组的平均日增重极显著高于Ⅱ组和Ⅴ组(P＜0.01)，显著高于Ⅲ组(P＜0.05)，以Ⅱ组蓝狐的平均日增重最低；试验第57～63天，Ⅲ组的平均日增重极显著高于Ⅱ组(P＜0.01)，显著高于Ⅰ组(P＜0.05)。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 饲粮精氨酸水平对育成期雌性蓝狐不同阶段平均日增重的影响Table 2 Effects of dietary arginine level on ADG in different stages of female blue foxes in growing period g 项目 Items 组别 Groups P值 P-value Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ 第1～14天 The 1st to 14th day 34.08±6.12 33.10±4.93 29.59±6.69 31.68±7.89 34.13±3.41 30.01±4.13 0.071 第15～28天 The 15th to 28th day 40.57±8.18 43.57±5.39 40.50±4.37 40.43±4.37 44.83±2.58 43.31±4.29 0.066 第29～42天 The 29th to 42nd day 47.39±3.11ab 51.13±4.63a 49.86±3.99ab 49.57±7.19ab 48.74±2.54ab 45.72±3.74b 0.041 第43～56天 The 43rd to 56th day 39.07±7.42ABabc 34.43±4.97Bc 37.68±6.26ABbc 41.00±4.95ABab 36.86±3.31Bbc 43.65±3.84Aa ＜0.001 第57～63天 The 57th to 63rd day 36.73±4.85ABb 35.95±4.65Bb 46.25±6.19Aa 39.43±4.89ABab 39.52±5.03ABab 41.97±4.98ABab 0.005     同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著(P＞0.05)，不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)，不同大写字母表示差异极显著(P＜0.01)。下表同。     In the same row,values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P＞0.05),while with different small letter superscripts mean significant difference (P＜0.05),and with different capital letter superscripts mean significant difference (P＜0.01). The same as below.

表2 饲粮精氨酸水平对育成期雌性蓝狐不同阶段平均日增重的影响Table 2 Effects of dietary arginine level on ADG in different stages of female blue foxes in growing period

从表3可以看出，育成期阶段，平均日增重以Ⅴ组最高，且极显著高于Ⅰ组(P＜0.01)，显著高于Ⅱ组和Ⅲ组(P＜0.05)；干物质采食量以Ⅰ组最高，Ⅴ组最低，Ⅴ组和Ⅵ组的干物质采食量极显著低于Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组(P＜0.01)；料重比以Ⅴ组最低，Ⅴ组和Ⅵ组的料重比极显著低于Ⅰ组(P＜0.01)。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 饲粮精氨酸水平对育成期雌性蓝狐平均日增重、干物质采食量和料重比的影响Table 3 Effects of dietary arginine level on ADG,DMI and F/G of female blue foxes in growing period 项目 Items 组别 Groups P值 P-value Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ 平均日增重 ADG/g 39.88±0.63Bc 40.04±0.80ABc 40.17±0.52ABbc 40.53±0.97ABabc 40.96±0.85Aa 40.82±0.62Aab ＜0.001 干物质采食量 DMI/g 178.93±0.68Aa 178.50±1.17ABa 177.50±0.65BCb 176.43±1.29CDc 175.57±0.35Dc 176.11±0.78Dc ＜0.001 料重比 F/G 4.53±0.10Aa 4.45±0.10ABa 4.45±0.15ABa 4.44±0.15ABab 4.32±0.10Bb 4.33±0.08Bb 0.009

表3 饲粮精氨酸水平对育成期雌性蓝狐平均日增重、干物质采食量和料重比的影响Table 3 Effects of dietary arginine level on ADG,DMI and F/G of female blue foxes in growing period

由表4可以得知，育成期雌性蓝狐饲粮中添加不同水平的精氨酸对干物质消化率和碳水化合物消化率无显著影响(P＞0.05)。饲粮精氨酸添加 水平对蓝狐粗脂肪消化率存在极显著影响(P＜0.01)，表现为Ⅵ组极显著低于其他各组(P＜0.01)，较Ⅰ组降低了5.66%。Ⅴ组蓝狐粗蛋白质消化率最高，与Ⅰ组相比提高了5.76%(P＜0.05)。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 饲粮精氨酸水平对育成期雌性蓝狐营养物质消化率的影响Table 4 Effects of dietary arginine level on nutrient digestibility of female blue foxes in growing period % 项目 Items 组别 Groups P值 P-value Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ 干物质消化率 DM digestibility 70.12±2.04 70.27±3.96 70.40±1.08 70.42±0.68 71.49±0.72 71.12±1.92 0.726 粗蛋白质 消化率 CP digestibility 63.55±3.11b 64.09±4.79ab 65.41±1.38ab 65.74±2.35ab 67.21±1.40a 65.67±3.08ab 0.022 粗脂肪消化率 EE digestibility 92.76±1.66Aa 91.17±1.17ABb 90.09±0.51Bb 90.00±1.64Bb 89.95±0.82Bb 87.51±2.45Cc ＜0.001 碳水化合物 消化率 Carbohydrate digestibility 77.08±2.10 77.28±4.55 77.30±1.61 78.08±2.73 78.81±1.36 79.45±1.70 0.423

表4 饲粮精氨酸水平对育成期雌性蓝狐营养物质消化率的影响Table 4 Effects of dietary arginine level on nutrient digestibility of female blue foxes in growing period

由表5可知，食入氮量方面，Ⅰ组极显著高于除Ⅱ组外的其他各组(P＜0.01)，以Ⅴ组蓝狐的食入氮量最低。粪氮排出量以Ⅰ组最高，Ⅴ组显著低于Ⅰ组和Ⅱ组(P＜0.05)。尿氮排出量在各组蓝狐间差异不显著(P＞0.05)。氮沉积以Ⅴ组最高，较Ⅰ组提高了20.54%(P＜0.05)。Ⅴ组蓝狐的净蛋白质利用率极显著高于Ⅰ组(P＜0.01)，显著高于Ⅱ组(P＜0.05)。蛋白质生物学价值以Ⅴ组最高，Ⅴ组和Ⅵ组显著高于Ⅰ组(P＜0.05)。

表5

Table 5

表5(Table 5)

表5 饲粮精氨酸水平对育成期雌性蓝狐氮代谢的影响Table 5 Effects of dietary arginine level on nitrogen metabolism of female blue foxes in growing period 项目 Items 组别 Groups P值 P-value Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ 食入氮量 IN/(g/d) 8.88±0.03Aa 8.86±0.06ABa 8.81±0.03BCb 8.76±0.07CDc 8.71±0.02Dc 8.74±0.04Dc ＜0.001 粪氮排出量 FN output/(g/d) 3.24±0.28a 3.18±0.43a 3.00±0.15ab 2.98±0.11ab 2.86±0.12b 3.00±0.27ab 0.049 尿氮排出量 UN output/(g/d) 3.06±0.37 3.02±0.24 2.92±0.48 2.77±0.46 2.75±0.28 2.72±0.37 0.321 氮沉积 RN/(g/d) 2.58±0.26c 2.66±0.24bc 2.89±0.51abc 3.01±0.48ab 3.11±0.19a 3.02±0.32ab 0.039 净蛋白质利用率 NPU/% 29.08±2.85Bb 30.05±2.80ABb 32.83±5.80ABab 34.33±5.47ABa 35.66±2.10Aa 34.57±3.70ABa 0.005 蛋白质生物学价值 BV of protein/% 45.87±5.07b 46.86±2.13ab 49.76±8.45ab 52.06±8.08ab 53.12±4.01a 52.71±5.60a 0.021

表5 饲粮精氨酸水平对育成期雌性蓝狐氮代谢的影响Table 5 Effects of dietary arginine level on nitrogen metabolism of female blue foxes in growing period

由表6可知，Ⅳ组血清ALP活性最高，极显著高于其他各组(P＜0.01)。Ⅴ组和Ⅵ组血清尿素氮 含量极显著低于Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组(P＜0.01)，以Ⅰ组血清尿素氮含量最高。各组间血清ALT和AST活性差异不显著(P＞0.05)。

表6

Table 6

表6(Table 6)

表6 饲粮精氨酸水平对育成期雌性蓝狐血清生化指标的影响Table 6 Effects of dietary arginine level on serum biochemical indexes of female blue foxes in growing period 项目 Items 组别 Groups P值 P-value Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ 丙氨酸氨基转移酶 ALT/(U/L) 153.29±51.08 153.90±56.29 117.78±54.67 172.78±62.13 119.00±37.14 143.19±48.73 0.100 天门冬氨酸 氨基转移酶 AST/(U/L) 59.50±19.72 56.45±16.03 56.59±12.51 58.60±8.72 50.65±8.39 49.00±23.26 0.219 碱性磷酸酶 ALP/(U/L) 171.48±9.62Bc 177.26±10.39Bbc 181.21±10.62Bbc 221.29±10.29Aa 182.70±8.15Bb 182.29±6.88Bb ＜0.001 尿素氮 UN/(mmol/L) 6.21±0.17Aa 6.05±0.22ABa 5.94±0.29ABab 5.58±0.62BCbc 5.30±0.62Cc 5.30±0.19Cc ＜0.001

表6 饲粮精氨酸水平对育成期雌性蓝狐血清生化指标的影响Table 6 Effects of dietary arginine level on serum biochemical indexes of female blue foxes in growing period

精氨酸对动物生长性能的影响主要来自2个方面因素：首先，精氨酸可以抑制生长抑素的释放，促进生长激素、胰岛素的释放，进而促进动物生长^[9]；其次，精氨酸已被证实具备促进动物肠道生长发育和修复肠黏膜损伤的作用，从而维护肠道健康，增加营养物质的吸收^[10]。姚康等^[11]研究表明，与对照组相比，饲粮中添加0.6%和0.8%精氨酸可以使哺乳仔猪生长激素和胰岛素的浓度提升24%～27%，平均日增重分别提高42.2%和41.4%，说明精氨酸可以促进动物生长激素和胰岛素的分泌，提高生长性能。伍烽等^[12]通过对大鼠肠道细胞的体外培养发现，添加精氨酸可以促进肠道上皮细胞的生长，说明精氨酸具有促进动物肠道生长发育的作用。麻名文^[13]研究发现，在断奶至2月龄生长肉兔饲粮中添加精氨酸可显著提高平均日增重。综合以上研究结果，说明精氨酸能够提高动物的日增重，与本试验结果相符。本试验结果表明，在饲粮中添加精氨酸会影响育成期雌性蓝狐的平均日增重，尤其对育成中后期效果明显，出现此现象的原因可能与精氨酸对平均日增重影响的作用时间相关，其机理还有待进一步研究。

精氨酸在体内一氧化氮合酶的作用下可被分解为一氧化氮(NO)，是体内NO的唯一供体，并与NO协同作用对采食行为进行调控。然而，NO具有两面性，适量的NO具有生理信使的作用，过量的NO则对体内细胞存在毒性，可能因此影响动物的采食行为。黄新球等^[14]研究发现，高剂量添加精氨酸可以降低小鼠的采食量，降低料重比，提高生产性能。本试验结果表明，在育成期雌性蓝狐饲料中添加0.8%～1.0%的精氨酸明显抑制了蓝狐的采食量，这可能与精氨酸在体内代谢产生的过量NO有关。

精氨酸分解产生的NO能促进脂肪组织的脂解和脂肪酸氧化作用，从而减少动物白色脂肪的沉积^[15]，增加褐色脂肪质量^[16]。此外，由精氨酸诱导产生的生长激素能够调节机体大部分组织中的蛋白质、碳水化合物、脂肪和核酸的代谢，对机体营养物质的消化吸收产生影响。张帝^[7]对172～214日龄泌乳母兔的研究表明，随着饲粮精氨酸水平的增加，脂肪表观消化率呈下降趋势，而其他时期繁殖母兔脂肪表观消化率不显著。在对环江香猪的研究中发现，在饲粮中外源添加0.83%精氨酸后，可提高环江香猪的平均日增重和瘦肉率，降低脂肪率和背最长肌粗脂肪含量^[17]。以上研究结果证明，精氨酸不仅可以降低动物的脂肪消化率，也可以降低脂肪沉积。这与本试验结果相近，即高剂量的精氨酸会显著抑制育成期雌性蓝狐对脂肪的消化吸收。其作用机理还有待进一步研究，可能与动物性别或所处生长时期有关。本试验结果发现，随着饲粮精氨酸水平的提高，粗蛋白质消化率也出现升高趋势，添加水平达到0.8%时粗蛋白质消化率最高。曾黎明^[18]的研究发现，添加精氨酸可以促进体外猪肠道上皮细胞相关碱性氨基酸转运载体的表达。因此，精氨酸可能由此提高肠道内部分氨基酸的吸收率，从而提高粗蛋白质消化率。

精氨酸是动物机体内携带氮最多的氨基酸，在氮代谢过程中发挥着重要作用。本试验结果表明，饲粮中添加精氨酸能减少蓝狐粪氮排出量，增加氮沉积，在添加水平达到0.8%时氮沉积最高。同时，由于高水平的精氨酸会导致蓝狐采食量减少，食入氮量也因此随之降低。以上结果与麻名文^[13]在2～3月龄肉兔上的研究结果相一致。净蛋白质利用率和蛋白质生物学价值都是用来评价蛋白质被利用情况的指标^[19]。在本试验中，饲粮中添加不同水平的精氨酸均提高了育成期雌性蓝狐的净蛋白质利用率和蛋白质生物学价值，且均以添加水平为0.8%组最高。这可能与精氨酸促进蛋白质的消化吸收，参与体内氮代谢，促进氮沉积有关。

血清尿素氮含量是衡量动物体内蛋白质代谢和氨基酸平衡的重要指标，较低水平的血清尿素氮含量表明氨基酸平衡较好，机体的蛋白质合成率较高^[20]，本试验结果同样证明了这一观点。当血清中出现过高的尿素氮时，则会降低机体对氮的利用率，所以，血清尿素氮含量也是衡量氮沉积的重要指标^[21]。精氨酸可促进肝脏内尿素循环，使血氨转化为尿素排出，避免因血氨过量而导致代谢紊乱，在肝脏解毒过程中发挥着重要作用。因此，动物机体精氨酸缺乏时常常表现为血浆中氨和尿素含量的上升^[22]。本试验中，当精氨酸添加水平达到0.8%～1.0%时，血清中尿素氮含量明显降低，与氮沉积结果趋势接近，说明精氨酸可以促进蓝狐体内氮沉积，降低血清尿素氮含量，调节氮代谢，维持体内氮平衡，提升动物健康水平，也说明基础饲粮的精氨酸水平并不能充分满足育成期雌性蓝狐的生长需要，饲粮中添加精氨酸能起到调节氨基酸平衡的作用。

ALP活性是一项重要血清生化指标，ALP可加速体内营养物质的获取和转运，促进蛋白质合成，提高动物生长速度。杨公社等^[23]研究发现，血液中ALP的活性与长白猪的日增重、饲料转化率及胴体瘦肉率呈正相关。潘杰等^[24]研究发现，仔猪饲喂添加1.0%精氨酸的饲粮后，血清中尿素氮含量及ALP、ALT活性均高于对照组。以上研究结果与本试验的结果存在部分差异，产生此结果的原因可能与不同种属动物及不同生长时期有关，其相关机制待进一步研究。

在本试验条件下，综合生长性能、营养物质消化率、氮代谢及血清生化指标的结果，在育成期雌性蓝狐饲粮中添加0.8%的精氨酸(饲粮总精氨酸水平为2.41%)可以提高平均日增重，降低料重比，减少血清尿素氮含量，从而提高蓝狐的生长性能，并利于动物机体健康。建议育成期每只雌性蓝狐精氨酸摄入量在4.22～4.24 g/d之间。