油脂是一种优质的能量饲料，不仅有效能值高，还能够促进饲料养分的消化吸收，提高生产性能^{[1, 2, 3]}。为了保证仔猪生产潜力得到最大限度的发挥，通常在断奶仔猪饲粮中添加脂肪，以提高饲粮能量水平^[4]。但有研究发现在仔猪断奶后早期饲粮中添加油脂并未提高仔猪生长性能^{[5, 6, 7]}，进一步分析原因发现仔猪断奶后脂肪酶活性急剧降低，2周后才能恢复到较高水平^[8]，导致仔猪对脂肪的消化率低^{[6, 7]}。因此，外源补充脂肪酶对提高断奶仔猪前期脂肪利用率具有重要意义。研究发现，添加脂肪酶可以补充断奶仔猪胰脂肪酶的活性，并且在一定程度减轻断奶应激对仔猪肠道组织形态的损伤，促进早期断奶仔猪对脂肪的利用，提高断奶仔猪的能量利用率和生长性能^{[9, 10, 11]}。此外，有研究表明在低营养水平饲粮中添加酶制剂可以获得正常营养水平饲粮相当的饲喂效果，甚至效果更佳^{[12, 13, 14]}。但是在不同能量水平的断奶仔猪饲粮中，脂肪酶的应用效果如何还不明确。因此，本试验探讨在不同能量水平下添加脂肪酶对断奶仔猪生长性能、养分表观消化率和血清生化指标的影响。

试验采用2×3因子试验设计：饲粮消化能水平分别为14.04、13.72和13.41 MJ/kg，脂肪酶添加量分别为0和2 U/g，试验分为6个处理(表1)。选用90头平均体重为(6.43±0.57) kg的28日龄健康“杜×长×大”断奶仔猪，按体重随机分为6个处理，每个处理5个重复，每个重复3头猪。试验期28 d。

表 1 (Table 1)

表 1 试验设计 Table 1 The design of experiment 脂肪酶添加量 Lipase supplemented level/(U/g) 饲粮消化能水平 Diet DE level/(MJ/kg) 14.04 0 13.72 13.41 14.04 2 13.72 13.41

表 1 试验设计 Table 1 The design of experiment

试验饲粮按NRC(2012)7～11 kg仔猪营养需要配制，为玉米-豆粕型饲粮。饲粮能量水平变化通过调节大豆油比例实现，粗蛋白质水平保持不变。试验饲粮组成及营养水平见表2。脂肪酶由绵阳禾本生物工程有限公司提供，活性为10 000 U/g。

试验在四川农业大学动物营养研究所科研基地进行。试验猪按照基地常规免疫消毒程序进行管理，每日喂料4次(08:00、12:00、16:00和20:00)，每次以猪吃饱后料槽内略有余料为宜，自由饮水。

平均日增重(ADG)：分别在试验第1和29天08:00对仔猪进行空腹称重，计算平均日增重。

平均日采食量(ADFI)：试验期间准确记录每天每栏采食量，计算平均日采食量。

料重比(F/G)：根据平均日增重和平均日采食量计算料重比。

表 2 (Table 2)

表 2 试验饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 2 Compositions and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) % 项目 Items 消化能 DE/(MJ/kg) 14.04 13.72 13.41 脂肪酶 Lipase/(U/g) 脂肪酶 Lipase/(U/g) 脂肪酶 Lipase/(U/g) 0 2 0 2 0 2 原料 Ingredients 膨化玉米 Expanded corn (CP 7.8%) 28.25 28.25 28.25 28.25 28.25 28.25 玉米 Corn (CP 7.8%) 30.00 30.00 30.00 30.00 30.00 30.00 低蛋白乳清粉 Low protein whey powder 3.00 3.00 3.00 3.00 3.00 3.00 麦麸 Wheat bran 4.00 3.98 4.00 3.98 4.00 3.98 去皮豆粕 Dehulled soybean meal (CP 44.2%) 23.50 23.5 23.50 23.50 23.50 23.50 鱼粉 Fish meal 4.10 4.10 4.10 4.10 4.10 4.10 大豆浓缩蛋白 Soybean protein concentrate 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 豆油 Soybean oil 2.00 2.00 1.14 1.14 0.28 0.28 沸石粉 Zeolite 1.18 1.18 2.04 2.04 2.90 2.90 磷酸氢钙 CaHPO4 0.89 0.89 0.89 0.89 0.89 0.89 石粉 Limestone 0.86 0.86 0.86 0.86 0.86 0.86 L-赖氨酸盐酸盐 L-Lys·HCl (78%) 0.33 0.33 0.33 0.33 0.33 0.33 DL-蛋氨酸 DL-Met 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 0.12 苏氨酸 Thr 0.04 0.04 0.04 0.04 0.04 0.04 食盐 NaCl 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 氯化胆碱 Choline chloride 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 复合多维 Complex multi-vitamin1) 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 矿物元素预混料 Mineral premix2) 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 脂肪酶 Lipase 0.02 0.02 0.02 合计 Total 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 营养水平 Nutrient levels3) 消化能 DE/(MJ/kg) 14.04 14.04 13.72 13.72 13.41 13.41 粗蛋白质 CP 19.75 19.75 19.75 19.75 19.75 19.75 粗脂肪 EE 4.74 4.74 3.90 3.90 3.06 3.06 钙 Ca 0.80 0.80 0.80 0.80 0.80 0.80 总磷 TP 0.66 0.66 0.66 0.66 0.66 0.66 有效磷 AP 0.43 0.43 0.43 0.43 0.43 0.43 赖氨酸 Lys 1.36 1.36 1.36 1.36 1.36 1.36 蛋氨酸 Met 0.44 0.44 0.44 0.44 0.44 0.44 蛋氨酸+半胱氨酸 Met+Cys 0.74 0.74 0.74 0.74 0.74 0.74 苏氨酸 Thr 0.80 0.80 0.80 0.80 0.80 0.80 色氨酸 Trp 0.23 0.23 0.23 0.23 0.23 0.23  1)复合多维可为每千克饲粮提供The complex multi-vitamin provides following per kg of diets：VA 10 000 IU，VD3 2 000 IU，VE 20 IU，VK3 1 mg，VB1 1.5 mg，VB2 3.7 mg，VB6 3.0 mg，VB12 30 μg，叶酸 folic acid 0.5 mg，烟酸 nicotinic acid 20 mg，D-泛酸 D-pantothenic acid 15 mg。  2)矿物元素预混料可为每千克饲粮提供The mineral premix provides following per kg of diets：Fe 146.0 mg，Cu 17.0 mg，Mn 25.0 mg，Zn 106.0 mg，I 0.3 mg，Se 0.2 mg。  3)计算值 Calculated values。

表 2 试验饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 2 Compositions and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis)

消化试验采用内源指示剂收粪法，收集试验第25~28天试验猪只部分粪便。使用盐酸不溶灰分(AIA)作为指示剂，测定方法参考GB/T 23742—2009。饲料及粪便中的干物质、粗蛋白质和总能含量的检测参照《饲料分析及饲料质量检测技术》^[15]。饲粮养分表观消化率的计算公式如下：

在试验第29天，每个重复选1头接近平均体重的猪，空腹，前腔静脉采血10 mL，3 500 r/min离心10 min，分离血清，-20 ℃保存待测血清生化指标。血清总胆固醇(TC)含量采用试剂盒(CHOD-PAP法)测定；高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量采用硫酸葡聚糖镁沉淀法(PTA-Mg²⁺)测定；低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量采用聚乙烯硫酸盐(PVS)一步沉淀法测定；甘油三酯(TG)含量采用血清TG试剂盒(GPO-PAP法)测定。上述所有试剂盒均购自于南京建成生物工程研究所，指标测定均按说明书进行。

试验数据采用Excel 2007进行整理。采用SAS 9.2软件中的GLM程序进行双因素分析，模型主效应包括酶和能量以及二者之间的交互作用。P<0.01为差异极显著水平，P<0.05为差异显著水平，0.05<P<0.10为有变化的趋势。

由表3可知，仔猪饲粮添加脂肪酶显著降低料重比(P<0.05)，对平均日采食量和平均日增重无显著影响(P>0.05)；降低仔猪饲粮能量水平显著提高了平均日增重和平均日采食量(P<0.05)。能量水平和脂肪酶对断奶仔猪生长性能的影响无显著交互作用(P>0.05)。

由表4可知，降低仔猪饲粮能量水平极显著降低干物质的表观消化率(P<0.01)，显著降低总能表观消化率(P<0.05)。仔猪饲粮添加脂肪酶有提高干物质、粗蛋白质和总能表观消化率的趋势(0.05<P<0.10)。脂肪酶和能量水平对断奶仔猪养分表观消化率的影响无显著交互作用(P>0.05)。

表 3 (Table 3)

表 3 不同能量水平饲粮中添加脂肪酶对断奶仔猪生长性能的影响 Table 3 Effects of lipase supplemented in different energy level diets on growth performance of weaned piglets 项目 Items 消化能 DE/(MJ/kg) SEM P值 P-value 14.04 13.72 13.41 脂肪酶 Lipase 消化能 DE 脂肪酶× 消化能 Lipase× DE 脂肪酶 Lipase/(U/g) 脂肪酶 Lipase/(U/g) 脂肪酶 Lipase/(U/g) 0 2 0 2 0 2 平均日采食量ADFI/g 482.51 495.30 554.56 517.42 565.17 577.97 11.00 0.84 0.01 0.48 平均日增重ADG/g 284.85 314.60 324.83 303.62 336.60 359.50 7.29 0.42 0.02 0.23 料重比F/G 1.69 1.58 1.71 1.71 1.68 1.61 0.02 0.03 0.07 0.26

表 3 不同能量水平饲粮中添加脂肪酶对断奶仔猪生长性能的影响 Table 3 Effects of lipase supplemented in different energy level diets on growth performance of weaned piglets

表 4 (Table 4)

表 4 不同能量水平饲粮中添加脂肪酶对断奶仔猪养分表观消化率的影响 Table 4 Effects of lipase supplemented in different energy level diets on nutrient apparent digestibility of weaned piglets % 项目 Items 消化能 DE/(MJ/kg) SEM P值 P-value 14.04 13.72 13.41 脂肪酶 Lipase 消化能 DE 脂肪酶× 消化能 Lipase× DE 脂肪酶 Lipase/(U/g) 脂肪酶 Lipase/(U/g) 脂肪酶 Lipase/(U/g) 0 2 0 2 0 2 干物质DM 82.70 83.74 81.03 83.34 78.95 79.51 0.48 0.09 <0.01 0.61 粗蛋白质CP 78.54 79.36 77.15 80.55 75.64 77.11 0.54 0.07 0.08 0.55 总能GE 83.35 84.18 82.19 84.19 80.56 81.64 0.41 0.08 0.01 0.79

表 4 不同能量水平饲粮中添加脂肪酶对断奶仔猪养分表观消化率的影响 Table 4 Effects of lipase supplemented in different energy level diets on nutrient apparent digestibility of weaned piglets

由表5可知，仔猪饲粮添加脂肪酶极显著降低血清低密度脂蛋白胆固醇含量(P<0.01)，显著降低血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇含量(P<0.05)。降低仔猪饲粮能量水平对血清 总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量无显著影响(P>0.05)。能量水平和脂肪酶对断奶仔猪的血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量的影响无显著交互作用(P>0.05)。

表 5 (Table 5)

表 5 不同能量水平饲粮中添加脂肪酶对断奶仔猪血清生化指标的影响 Table 5 Effects of lipase supplemented in different energy level diets on serum biochemical indexes of weaned piglets mmol/L 项目 Items 消化能 DE/(MJ/kg) SEM P值 P-value 14.04 13.72 13.41 脂肪酶 Lipase 消化能 DE 脂肪酶× 消化能 Lipase× DE 脂肪酶 Lipase/(U/g) 脂肪酶 Lipase/(U/g) 脂肪酶 Lipase/(U/g) 0 2 0 2 0 2 总胆固醇 TC 1.91 1.64 1.85 1.61 1.88 1.48 0.05 0.01 0.73 0.08 甘油三酯 TG 0.52 0.47 0.52 0.38 0.49 0.38 0.02 0.02 0.44 0.55 高密度脂蛋白胆固醇 HDL-C 0.76 0.69 0.72 0.62 0.75 0.54 0.03 0.02 0.43 0.54 低密度脂蛋白胆固醇 LDL-C 1.25 0.99 1.16 1.02 1.25 0.99 0.04 <0.01 0.92 0.73

表 5 不同能量水平饲粮中添加脂肪酶对断奶仔猪血清生化指标的影响 Table 5 Effects of lipase supplemented in different energy level diets on serum biochemical indexes of weaned piglets

动物具有“为能而食”的特性，饲粮能量水平提高的情况下，动物的采食量会降低，以确保较为恒定的能量摄入^[16]。前人研究还发现，饲粮能量水平提高使得平均日增重提高，料重比下降^{[17, 18]}。本试验的研究结果表明猪的平均日采食量随着饲粮能量水平的降低而提高，与前人研究结果一致。但是在本试验条件下随着能量水平的降低，平均日增重提高，料重比无显著差异。分析原因可能是本试验中随着能量水平的降低，平均日采食量显著提高，而平均日增重和平均日采食量有着极显著的直线相关，平均日增重随着平均日采食量的增加而升高^[19]。近几年在肉鸡上研究发现，饲粮中添加脂肪酶显著提高了平均日增重，降低了料重比^{[20, 21, 22]}。刘桂武^[9]在断奶仔猪上也有类似发现。与前人研究一致的是，在本试验条件下，饲粮中添加脂肪酶降低了料重比。然而，本试验中脂肪酶的添加并未影响平均日增重。

值得注意的是，虽然本试验条件下能量水平的降低，提高了平均日增重，但是随着能量水平的降低，总能和干物质的表观消化率极显著降低，粗蛋白质的表观消化率具有降低趋势。这也与前人试验研究结果类似^{[5, 23, 24, 25, 26]}。Brenes等^[20]和马卿山^[22]研究认为，外源脂肪酶的添加提高了肉鸡的养分表观利用率。刘桂武^[9]和刘献英^[10]在断奶仔猪上的研究也发现，饲粮中添加脂肪酶提高养分表观消化率。Dierick等^[27]也发现在生长猪饲粮中添加0.05%脂肪酶显著提高了粗蛋白质、总能和干物质的表观消化率。与之类似，本试验不同能量水平饲粮添加脂肪酶后具有提高断奶仔猪粗蛋白质、总能和干物质的表观消化率的趋势。

血脂的主要成分是甘油三酯和胆固醇，其含量可以反映体内脂质代谢情况^[28]。Kim等^[17]研究表明能量水平(13.7和14.0 MJ/kg)变化对血清甘油三酯和总胆固醇含量无影响。本试验结果与之一致。饲料中添加脂肪酶后，总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量极显著低于未添加的，甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇含量显著低于未添加的。叶慧等^[21]研究指出，添加脂肪酶可以降低后期黄羽肉公鸡血清中总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇的含量。谷金皇等^[29]在瓦氏黄颡鱼饲粮中添加100、300和500 mg/kg脂肪酶时，血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇的含量显著下降。苏继影^[11]发现添加脂肪酶可以提高肝脏丙酮的含量，促进肝脏进行脂质代谢。综上可见，随着脂肪酶的加入，有利于机体的脂肪代谢，起到了加强脂肪动员和抑制脂肪合成的效果，促进了机体对脂肪的利用，从而降低了血脂的含量。

在本试验条件下，仔猪饲粮中添加2 U/g脂肪酶降低了料重比，促进了脂质代谢，具有提高粗蛋白质、干物质和总能表观消化率的趋势；能量水平降低0.32和0.63 MJ/kg对脂肪酶的应用效果无显著显著影响。