钙是构成骨骼的重要成分，同时对机体血液凝固、肌肉收缩全过程有重要作用，并维持体液酸碱平衡、心肌功能和神经系统的正常传导。饲粮钙水平过低肉鸭会患软骨病^{[1, 2]}，甚至不能站立，然而钙水平过高则降低肉鸭对其他微量元素的吸收和利用，抑制其采食和增重，进而影响生长性能^{[3, 4]}。因此，在肉鸭饲粮中补充满足其需要量的钙不仅能降低腿病发生率，而且对提高其生长性能有重要意义。NRC(1994)^[5]推荐北京鸭饲粮钙水平为：1～2周龄0.65%，2～7周龄0.60%。我国《肉鸭饲养标准》NY/T 2122—2012^[6]推荐不同生长阶段北京鸭饲粮钙水平为：育雏期(1～2周龄)0.90%，生长期(3～5周龄)0.85%，肥育期(6～7周龄)0.80%。番鸭饲粮钙水平为：育雏期(1～3周龄)0.90%，生长期(4～8周龄)0.85%，肥育期(9周至上市)0.80%，种鸭育成期(9～26周龄)0.80%。肉蛋兼用型肉鸭饲粮钙水平为：育雏期(1～3周龄)0.90%，生长期(4～7周龄)0.85%，肥育期(8周龄至上市)0.80%。谢明等^[7]以平均日增重作为评价指标，通过回归分析表明，3～6周龄北京鸭饲粮钙推荐量为0.72%。周中华等^[8]认为饲粮中钙水平为0.90%时，生长后期樱桃谷鸭能获得最佳生长性能。可见，不同品种和不同生长阶段的肉鸭对钙的需要量均不相同。临武鸭为肉蛋兼用型地方麻鸭品种，与北京鸭和樱桃谷鸭等大型品种相比，其体型较小，生长发育也较慢，对于钙的需要量可能存在较大差异。此外，临武鸭在7～11周龄阶段处于从生长期过渡至后备期的肥育期，机体对钙的吸收贮备关系到其后期生长性能，目前未见该阶段临武鸭钙需要量的研究报道。为此，本试验研究饲粮不同钙水平对7～11周龄临武鸭生长性能、胫骨发育及血清生化指标的影响，探讨临武鸭饲粮适宜钙需要量，以期为临武鸭饲料配方设计提供参考依据。

1日龄临武鸭由湖南临武舜华鸭业发展有限责任公司提供，雏鸭在湖南省畜牧兽医研究所水禽试验场统一饲养至48日龄。试验采用单因子随机区组设计，选择48日龄健康、体重相近的雌性临武鸭270只，随机分成5个组，每组6个重复，每个重复9只鸭。试验鸭采用网上平养，自由采食与饮水，定期免疫和消毒，其他按常规饲养操作规程进行，试验期28 d。

基础饲粮参照本研究室制订的《临武鸭营养需要》DB/T 898—2014^[9]配制。采用玉米-豆粕型基础饲粮，以石粉作为钙源，根据《中国饲料成分及营养价值表》(第15版)计算营养水平。5组试验饲粮钙水平分别为0.60%、0.70%、0.80%、0.90%和1.00%，其他营养水平基本一致(表1)。

表 1 (Table 1)

表 1 试验饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) % 项目 Items 饲粮钙水平 Dietary Ca level/% 0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 原料 Ingredients 玉米 Corns 56.86 56.86 56.86 56.86 56.86 豆粕 Soybean meal 22.53 22.53 22.53 22.53 22.53 次粉 Wheat middling 12.00 12.00 12.00 12.00 12.00 磷酸二氢钾 KH2PO4 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 预混料 Premix1) 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 食盐 NaCl 0.32 0.32 0.32 0.32 0.32 赖氨酸 Lys 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 DL-蛋氨酸 DL-Met 0.14 0.14 0.14 0.14 0.14 石粉 Limestone 1.10 1.42 1.70 2.03 2.34 沸石粉 Zeolite powder 4.99 4.67 4.39 4.06 3.75 合计 Total 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 营养水平 Nutrient levels2) 代谢能 ME/(MJ/kg) 11.30 11.30 11.30 11.30 11.30 粗蛋白质 CP 17.00 17.00 17.00 17.00 17.00 钙 Ca 0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 有效磷 AP 0.35 0.35 0.35 0.35 0.35 赖氨酸 Lys 0.90 0.90 0.90 0.90 0.90 蛋氨酸 Met 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 蛋氨酸+半胱氨酸 Met+Cys 0.79 0.79 0.79 0.79 0.79 苏氨酸 Thr 0.60 0.60 0.60 0.60 0.60  1)预混料为每千克饲粮提供The premix provides the following for per kg diets: VA 5 000 IU，VD 800 IU，VE 20 IU，VK 0.5 IU，烟酸 niacin 60 mg，泛酸 pantothenic acid 60 mg，吡哆醇 pyridoxine 2.5 mg，核黄素 riboflavin 4.0 mg，生物素 biotin 0.2 mg，叶酸 folic acid 0.6 mg，硫胺素 thiamine 2 mg，Cu 8 mg，Fe 80 mg，Mn 50 mg，Zn 60 mg，Se 0.20 mg，I 0.40 mg。  2)计算值 Calculated values。

表 1 试验饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis)

试验开始和结束前1天20:00停料供水，次日08:00以重复为单位称重，并统计耗料量，计算平均日增重、平均日采食量和料重比。

试验鸭77日龄时，每个重复挑选接近平均体重的试验鸭1只，称活体重，翅静脉采血后，颈部放血致死，取两侧胫骨。胫骨灰分、钙和磷含量参照张丽英^[10]的方法进行。胫骨折断力采用电子万能材料试验机(HF-9005)测定，测试速度为20 mm/min。脱脂胫骨干重及其灰分中钙和磷含量的测定参照洪平等^[11]的方法进行。

在进行1.3.2操作的同时，翅静脉采血4 mL，静置1 h后，4 ℃下3 000 r/min离心15 min，制备血清。血清钙含量用邻甲酚酞络合酮比色法测定；血清磷含量用紫外法测定；血清碱性磷酸酶(AKP)活性采用速率法，使用全自动生化分析仪(罗氏P800)测定。

试验数据采用SPSS 19.0软件进行方差分析，并进行Duncan氏法多重比较。统计显著性水平为P<0.05。各组试验数据均以“平均值±标准差”表示。

由表2可见，饲粮钙水平对7～11周龄临武鸭平均日增重、平均日采食量和料重比均无显著影响(P>0.05)。随着饲粮钙水平升高，试验鸭平均日增重表现出先增加后降低的趋势，0.90%钙水平组获得最大平均日增重，分别比0.60%、0.70%、0.80%和1.00%钙水平组高6.08%、3.76%、0.20%和0.13%；随着饲粮钙水平升高料重比先降低再升高，0.90%钙水平组料重比最低，分别比0.60%、0.70%、0.80%和1.00%钙水平组低8.09%、3.61%、1.64%和0.98%。

表 2 (Table 2)

表 2 饲粮钙水平对7～11周龄临武鸭生长性能的影响 Table 2 Effects of dietary calcium level on growth performance of Linwu ducks aged from 7 to 11 weeks 项目 Items 饲粮钙水平 Dietary calcium level/% 0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 始重 IW/g 1 064.44±13.55 1 063.33±7.47 1 058.33±14.82 1 064.81±7.91 1 069.44±7.46 末重 FW/g 1 464.85±33.10 1 472.67±37.52 1 482.33±49.95 1 489.59±40.21 1 493.61±38.92 平均日增重 ADG/g 14.30±1.03 14.62±1.40 15.14±1.97 15.17±1.57 15.15±1.30 平均日采食量 ADFI/g 141.48±15.51 137.86±9.15 140.08±11.28 138.11±11.99 139.52±13.43 料重比 F/G 9.89±0.36 9.48±0.82 9.30±0.53 9.15±0.63 9.24±0.60  同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，相同或无字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。  In the same row,values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05),while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

表 2 饲粮钙水平对7～11周龄临武鸭生长性能的影响 Table 2 Effects of dietary calcium level on growth performance of Linwu ducks aged from 7 to 11 weeks

由图1可见，各组的试验鸭胫骨未见明显发育不良和形变，表明各组试验鸭胫骨发育均较正常。由表3可见，饲粮钙水平对7～11周龄临武鸭胫骨鲜重、脱脂重、灰分重、灰分含量、灰分钙含量、灰分磷含量、脱脂胫骨钙含量、脱脂胫骨磷含量、折断力均无显著影响(P>0.05)。0.70%钙水平组胫骨灰分含量最高，分别比0.60%、0.80%、0.90%和1.00%钙水平组高11.00%、10.25%、1.35%和6.97%；胫骨折断力以0.80%钙水平组最大，分别比0.60%、0.70%、0.90%和1.00%钙水平组高1.23%、3.13%、2.75%和1.48%。

由表4可见，饲粮钙水平对7～11周龄临武鸭血清中钙、磷含量均无显著影响(P>0.05)，但显著影响血清AKP活性(P<0.05)。1.00%钙水平组血清AKP活性分别比0.60%、0.70%、0.80%和0.90%钙水平组低25.50%(P<0.05)、20.91%(P<0.05)、3.01%(P>0.05)和2.82%(P>0.05)。回归分析表明，随着饲粮钙水平升高，试验鸭血清AKP活性呈降低趋势(P<0.05)，对比线性模型和二次曲线回归模型拟合度(R²=0.846 7，R²=0.924 0)，发现二次曲线回归模型拟合度较高。通过非线性 回归模型建立饲粮钙水平(x)与血清AKP活性(y)之间的二次曲线方程：y=456x²-908.14x+645.56 (R²=0.924 0，P<0.001)。二次曲线对应的最低点的横坐标为0.996%，即该模型估测饲粮中钙水平为0.996%时，试验鸭获得最低血清AKP活性。

图1(Figure 1)

Fig. 1

图1 77日龄临武鸭胫骨图片 Fig. 1 The pictures of tibia of Linwu ducks aged of 77 days

表 3 (Table 3)

表 3 饲粮钙水平对77 d临武鸭胫骨指标的影响 Table 3 Effects of dietary calcium level on tibia indeices of Linwu ducks aged of 77 days 项目 Items 饲粮钙水平 Dietary calcium level/% 0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 鲜重 Fresh weight/g 4.92±0.31 4.82±0.36 4.88±0.51 4.53±0.25 4.81±0.46 脱脂重 Defatted weight/g 2.68±0.17 2.85±0.30 2.60±0.30 2.68±0.15 2.63±0.34 灰分重 Ash weight/g 1.59±0.10 1.73±0.19 1.58±0.18 1.61±0.09 1.62±0.25 灰分含量 Ash content/% 32.36±2.19 35.92±3.20 32.58±3.18 35.44±1.90 33.58±3.08 灰分钙含量 Calcium content in ash/% 37.19±1.18 36.14±2.30 38.32±2.08 36.16±3.06 37.11±1.70 灰分磷含量 Phosphorus content in ash/% 18.05±1.33 17.43±2.25 18.74±2.13 18.99±1.83 19.46±3.12 脱脂胫骨钙含量 Calcium content in defatted tibia/% 22.09±0.36 21.97±1.56 23.36±1.19 21.68±1.70 22.75±0.75 脱脂胫骨磷含量 Phosphorus content in defatted tibia/% 10.74±0.95 10.57±1.22 11.43±1.32 11.39±1.13 11.91±1.78 折断力 Broking strength/N 162.60±6.11 159.60±7.06 164.60±7.06 160.20±6.57 162.20±7.29

表 3 饲粮钙水平对77 d临武鸭胫骨指标的影响 Table 3 Effects of dietary calcium level on tibia indeices of Linwu ducks aged of 77 days

表 4 (Table 4)

表 4 饲粮钙水平对7～11周龄临武鸭血清生化指标的影响 Table 4 Effects of dietary calcium level on serum biochemical parameters of Linwu ducks aged from 7 to 11 weeks 项目 Items 饲粮钙水平 Dietary calcium level/% P值 P-value 0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 组间 Groups 线性 Linear 二次 Quadratic 钙 Calcium/ (mmol/L) 2.15±0.23 2.17±0.13 1.97±0.43 2.20±0.24 2.24±0.10 0.432 磷 Phosphorus/ (mmol/L) 1.82±0.52 2.61±0.70 1.65±0.30 2.94±2.32 1.90±0.32 0.265 碱性磷酸酶 AKP/(U/L) 260.55±56.91a 245.44±28.74a 200.15±11.60b 199.76±4.80b 194.12±11.52b 0.001 <0.001 <0.001

表 4 饲粮钙水平对7～11周龄临武鸭血清生化指标的影响 Table 4 Effects of dietary calcium level on serum biochemical parameters of Linwu ducks aged from 7 to 11 weeks

通常用平均日增重和料重比来衡量饲粮钙水平对家禽生长性能的影响。文娟等^[12]认为钙水平在一定范围内变化对肉鸭生长性能各项指标的影响不显著，张艳娜^[13]和廖生荣^[14]关于骡鸭钙水平的研究证实了这点。本试验的结果表明，饲粮钙水平对7～11周龄临武鸭的生长性能无显著影响，与上述观点一致。这是由于肥育期临武鸭生长速度变慢，钙的沉积速度有所降低，同时机体调节能力的增强，降低了对饲粮钙水平的敏感度所致。另外，本试验发现，随着饲粮钙水平从0.60%增加到1.00%，试验鸭的平均日增重表现出先增加后降低的趋势，0.90%时平均日增重最大，料重比最低。由于本试验饲粮钙水平对试验鸭平均日增重、料重比无显著影响，二者与饲粮钙水平之间均不存在线性相关，饲粮0.90%钙水平最适宜临武鸭生长发育需要。但本试验的钙水平梯度下限为0.60%时与0.90%水平梯度的平均日增重和料重比无显著差异，所以0.60%即可满足临武鸭生长发育需要。该结果与Dean等^[1]和Robert^[15]对北京鸭和杂交雏鸭的研究结果(0.60%)一致，低于周中华等^[7]对4～7周樱桃谷肉鸭的研究结果(0.90%)，但高于Chen^[16]对4～10周龄杂交鸭的研究结果(0.55%)。不同研究报道的结果不一致，原因可能与试验动物品种、饲粮组成、生长阶段及环境不同有关。不同品种动物的其消化能力强弱有别，对饲料中营养物质的吸收与利用率各异；另外，饲粮组成、营养水平或钙的来源不同也能影响试验动物对钙的吸收利用率。本试验以石粉为钙的来源，通过沸石粉辅助调节饲粮钙水平，由于沸石粉对NH⁺₄、K⁺、Na⁺、Ca²⁺、Mg²⁺、Cu²⁺等阳离子具有可逆的吸附和交换作用^{[17, 18]}，对于饲料中有效钙的含量和试验鸭对钙的吸收代谢有一定影响，这也可能是钙需要量较低的原因之一，但其具体影响机制还有待于进一步研究。

钙是组成畜禽骨骼的重要成分，目前常用胫骨灰分率和胫骨折断力评价钙、磷对胫骨性能影响。研究表明，低钙水平饲粮会抑制或降低胫骨灰分比率^[19]，而钙水平添加过高会造成钙、磷比例失调，从而降低胫骨性能^[20]。试验结果表明，饲粮钙水平对7～11周龄临武鸭所有胫骨指标均无显著影响，胫骨指标与饲粮钙水平之间均不存在线性相关。这与周中华等^[8]关于7周龄之后肉鸭钙需要量的研究结果基本一致。本试验选用7～11周龄临武鸭，该阶段生长速度变慢，胫骨已基本发育完全，对钙的需求降低，导致饲粮钙水平对胫骨发育的敏感度降低，这可能是钙水平对此阶段胫骨发育没有显著影响的主要原因。另外，以获得最高胫骨灰分率为指标时，饲粮0.70%钙水平最适宜临武鸭胫骨发育；以胫骨折断力为指标时，0.80%钙水平组获得最大胫骨折断力，最适宜胫骨发育。但本试验0.60%钙水平组试验鸭的胫骨灰分率和胫骨折断力均与其他组无显著差异，这说明0.60%钙水平已能满足7～11周龄临武鸭胫骨发育的需要。该结果与熊昌学等^[2]关于7周龄杂交肉鸭(天府肉鸭×建昌鸭)钙需要量的研究结果(0.60%)一致；低于王顺祥^[19]对3～6周北京鸭的研究结果(0.90%)。由于生长阶段不同，满足肉鸭生长发育的钙需要量有别，这也可能是不同学者研究结果出现差异的原因。另外，试验饲粮的钙磷比不同也会造成结果差异，国内外学者进行了大量有关钙磷比对家禽钙吸收的影响，认为饲粮钙磷比不仅要满足家禽生长需要，同时还要维持适合的比例，比例不当或不同会影响钙的吸收和沉积，从而影响动物的生长及发育^[21]。

血清中的钙、磷维持相对稳定对动物机体具有最要作用。有研究表明饲粮钙水平在适宜范围内，对肉鸭血清中钙和磷含量的影响不显著^{[2, 8, 22]}。张艳娜^[13]和王顺祥^[19]的研究也证实了上述理论。本研究结果显示，饲粮钙水平对临武鸭血清中钙和磷含量影响不显著，与上述研究结果相同。这说明本试验设置的钙水平(0.60%～1.00%)在合理范围之内，机体钙调控系统能够维持血清钙、磷含量的相对稳定。在畜禽钙、磷营养研究中，常用血清AKP的活性来衡量机体钙磷的吸收状况。血液中50%的AKP来自骨组织，当钙、磷缺乏或者不平衡时，成骨细胞活性增强释放大量AKP进入血液，AKP的活性升高^[23]，表明AKP可以作为衡量钙水平的灵敏指标。王顺祥^[19]研究认为，在饲粮非植酸磷0.17%水平下，肉鸭生长后期饲粮钙水平升高显著影响血清AKP活性。廖生荣^[14]对公骡鸭及刘源等^[24]对犬的研究认为，随饲粮钙水平增加，血清AKP活性逐渐降低。本试验中血清AKP活性随着饲粮钙水平的升高而显著降低，对血清AKP活性与饲粮钙水平进行回归分析发现，饲粮钙水平与血清AKP活性具有显著的二次曲线相关。通过求导得出，7～11周龄临武鸭获得最低血清AKP活性时饲粮钙水平为0.996%，即以血清AKP活性为判定指标，数学模型分析所得的钙需要量高于我国肉鸭饲养标准的推荐量(0.80%)^[6]。

在本试验条件下，饲粮0.60%钙水平即可满足7～11周龄临武鸭生长性能和胫骨指标，获得最低血清AKP活性的饲粮钙水平为0.996%。