2. 湖南杨林鸽业有限公司, 岳阳 414000
2. Hunan Yanglin Pigeon Industry Limited Liability Company, Yueyang 414000, China
硒是动物和人健康生长发育所必需的微量元素,作为体内多种酶的活性中心参与多种酶的合成与代谢。禽类缺硒会导致免疫力和产蛋量下降,严重时甚至会导致肌肉萎缩症、渗出性素质病、胚胎早期死亡,硒摄入过多则会导致中毒甚至死亡。低剂量的硒可以作为营养剂,具有提高机体免疫力、抗氧化、促进生长、延缓衰老及影响部分微量元素吸收代谢等作用。近年来,随着对动物饲粮中添加微量元素硒研究的深入,得知有机硒相对于无机硒具有更高的吸收率与生物安全性,纳米硒的Weinberg剂量-效应的适宜范围比酵母硒、硒代蛋氨酸和亚硒酸钠(Na2SeO3)宽,被证实是目前急性毒性最低的补硒剂[1]。Zhang等[2]报道,谷胱甘肽(GSH)与亚硒酸钠的反应速率是其与纳米硒反应速率的12.3倍,并得出纳米硒毒性比亚硒酸钠大为降低的结论。研究表明,2.5 mg/kg的纳米硒饲喂蛋鸡仍是安全的[3]。纳米硒对体外羟自由基的清除效率分别是有机硒和无机硒的2.5和5.0倍,可与维生素E协同发挥抗氧化作用,能有效促进畜禽的健康。作为高效安全的有机硒源,纳米硒做为畜禽饲料添加剂具有足够的优势,然而饲粮中添加纳米硒饲喂猪和肉鸡的研究都很多,但在蛋鸡及蛋用禽生产中的应用研究较少。本试验在蛋鸽的饲粮中添加不同水平的纳米硒,研究纳米硒对蛋鸽生产性能、蛋中硒含量及血清抗氧化指标的影响,并初步探讨其适宜添加剂量,为有机硒的进一步研究和在畜禽生产中的应用提供参考。
1 材料与方法 1.1 试验设计和饲养管理本试验于2014年4月5日至2014年5月18日在湖南杨林鸽业有限公司进行,选取180对180~210日龄、体重相近、健康和食欲正常的产蛋泰平王鸽,随机分为6组,每组6个重复,每个重复5对。对照组(A组)饲喂基础饲粮,试验组(B、C、D、E、F组)分别在基础饲粮中添加0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/kg的纳米硒。基础饲粮组成及营养水平见表1。
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表 1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) |
鸽舍为双笼式鸽舍,试验鸽分上、中、下3层进行笼养,一间鸽舍摆放2排鸽笼,鸽笼为单箱式鸽笼,每个鸽笼饲养2羽蛋鸽。日喂4次(08:00、11:00、14:00、16:00),饮水器为瓦盒式饮水杯,自由饮水。控制好鸽舍内的温度和相对湿度,按蛋鸽养殖场常规规定进行清扫、消毒、免疫驱虫。预试期7 d,正试期42 d。
1.2 试验材料试验用的有机硒为纳米硒(商品名喜来硒,有效成分硒含量1‰)。B、C、D、E、F组饲粮硒含量经检测分别为0.177、0.289、0.368、0.481、0.588 mg/kg。
1.3 测定指标与方法 1.3.1 生产性能试验期内每日以各组的重复为单位记录日采食量、产蛋数、蛋重、破软壳数,并计算平均蛋重、料蛋比。
1.3.2 蛋品质在试验期第21天和第42天采集各组所产蛋各9枚进行蛋品质测定。使用分析天平测定蛋重,游标卡尺测定蛋形指数、蛋黄指数(蛋黄高度/蛋黄直径)。用Orka Thchnology公司的Egg Shell Thickness、Egg Analyzer测定蛋壳厚度、蛋白高度、蛋黄色泽、蛋白高度和哈氏单位等。
1.3.3 蛋黄中硒、铁、锰、锌、铜含量试验第21天和第42天,分别从每组选取9枚鸽蛋置于4 ℃冰箱保存,用于测定蛋黄中硒、铁、锰、铜、锌含量。铁、锰、铜、锌含量参照GB/T 5009.90—2003[4]、GB/T 9695.20—2008[5]火焰原子吸收光谱法测定;硒含量参照邓士林等[6]的方法,采用流动注射氢化物发生原子吸收光谱法测定蛋黄中硒含量。
1.3.4 血清抗氧化指标试验第21天和第42天,分别从对每组随机选取10只蛋鸽静脉采血3 mL,倾斜采血管,静置30 min后,于3 000 r/min离心10 min,吸取上清液0.5~1.0 mL,注入1.5 mL离心管中,标记组别日期,置于-20 ℃冰箱保存,用于测定血清抗氧化指标。血清中的谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性及总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量使用南京建成生物工程研究所的试剂盒测定。
1.4 数据统计与分析应用SAS 9.0软件进行方差分析,然后通过Duncan氏法进行多重比较。试验各组之间的数据以平均值±标准差表示,P<0.05表示差异显著,P<0.01表示差异极显著。
2 结 果 2.1 纳米硒对蛋鸽生产性能的影响由表2和表3可知,蛋鸽饲粮中添加纳米硒对蛋鸽的平均蛋重、产蛋数、料蛋比均无显著影响(P>0.05),但试验第42天相对于第21天,各组的平均蛋重略有提高,料蛋比略有下降。
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表 2 纳米硒对第21天蛋鸽生产性能的影响 Table 2 Effects of nano-selenium on performance of pigeons in the 21st days |
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表 3 纳米硒对第42天蛋鸽生产性能的影响 Table 3 Effects of nano-selenium on performance of pigeons in the 42nd days |
由表4和表5可知,蛋鸽饲粮中添加纳米硒对鸽蛋的蛋壳厚度和蛋形指数无显著影响(P>0.05)。试验第21天,与对照组相比,C组的蛋黄指数提高了8.57%(P<0.05),其余各试验组有所提高,但差异不显著(P>0.05);E和F组的蛋黄色泽分别提高了35.19%、43.92%(P<0.01)。试验第42天,与对照组相比,D、E、F组的蛋黄指数有所提高,但差异不显著(P>0.05);C组的哈氏单位提高了1.75%(P>0.05);C、D、E、F组蛋黄色泽分别提高了10.95%(P>0.05)、13.38%(P>0.05)、10.95%(P>0.05)、29.93%(P<0.01)。
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表 4 纳米硒对第21天蛋鸽蛋品质的影响 Table 4 Effects of nano-selenium on egg quality of pigeons in the 21st days |
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表 5 纳米硒对第42天蛋鸽蛋品质的影响 Table 5 Effects of nano-selenium on egg quality of pigeons in the 42nd days |
由表6可知,试验第21天,E、F组蛋黄中的硒含量极显著高于对照组(P<0.01),分别提高了111.83%、96.49%,B、C、D组比对照组也分别提高了27.84%、8.28%、37.43%(P>0.05)。试验第42天,E、F组的蛋黄硒含量显著高于对照组(P<0.05),分别提高了79.08%、88.81%,B、C、D组比对照组有所提高,但差异不显著(P>0.05),随着纳米硒添加水平的增加,蛋黄硒含量呈明显的递增趋势,且各组蛋黄硒含量相对于第21天有很大的提高。
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表 6 纳米硒对蛋鸽蛋黄中硒含量的影响 Table 6 Effects of nano-selenium on yolk selenium content of pigeons |
由表7和表8可知,试验第21天,D、F组蛋黄铁含量与对照组相比显著提高(P<0.05),F组锌含量相比于C组显著降低(P<0.05),各试验组与对照组间的锰、铜的含量均无显著差异(P>0.05);试验第42天,试验组与对照组间的铁、锰、铜、锌含量均无显著差异(P>0.05)。
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表 7 纳米硒对第21天蛋鸽蛋黄中铁、锰、锌、铜含量的影响 Table 7 Effects of nano-selenium on contents of Fe,Mn,Zn and Cu in yolk of pigeons in the 21st days |
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表 8 纳米硒对第42天蛋鸽蛋黄中铁、锰、铜、锌的影响 Table 8 Effects of nano-selenium on contents of Fe,Mn,Zn and Cu in yolk of pigeons in the 42nd days |
由表9和表10可知,蛋鸽饲粮中添加纳米硒提高了蛋鸽血清GSH-Px活性,降低了血清MDA含量,对蛋鸽血清抗氧化指标有明显的改善。与对照组相比,D、E、F组的血清GSH-Px活性显著或极显著提高(P<0.05或P<0.01),血清MDA含量极显著降低(P<0.01)。试验第21天,蛋鸽饲粮中添加纳米硒对T-AOC和T-SOD活性无显著影响(P>0.05)。试验第42天,与对照组相比,E、F组的T-AOC和T-SOD活性显著提高(P<0.05)。
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表 9 纳米硒对第21天蛋鸽血清抗氧化性的影响 Table 9 Effects of nano-selenium on serum antioxidant indices of pigeons in the 21st days |
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表 10 第42天纳米硒对蛋鸽血清抗氧化性的影响 Table 10 Effects of nano-selenium on serum antioxidant indices of pigeons in the 42nd days |
目前,关于纳米硒对动物生产性能影响的研究结论并不一致。有报道表明,低剂量补硒时,各硒源对动物生产性能的提高并无显著差异,高剂量补硒时纳米硒和酵母硒明显优于亚硒酸钠[7]。Yoon等[8]报道,添加0.1~0.3 mg/kg的酵母硒,对肉鸡生产性能无显著影响。胥保华[9]报道,添加水平均为0.1~0.5 mg/kg的纳米硒、硒代蛋氨酸和亚硒酸钠均对肉鸡生长性能无显著影响。本研究表明,0.1~0.5 mg/kg水平的纳米硒对蛋鸽的生产性能无显著影响。李宝春等[10]研究表明,0.2和0.4 mg/kg纳米硒能显著提高26~36日龄蛋雏鸡的生长性能,作用效果显著高于相应水平的亚硒酸钠组。曲湘勇等[11]研究表明,在鹌鹑的饲粮中添加0.2 mg/kg的纳米硒能显著提高平均蛋重、产蛋率,显著降低料蛋比,对鹌鹑的生产性能有一定的促进作用,且0.2 mg/kg的纳米硒添加组的产蛋率显著高于0.2 mg/kg酵母硒添加组,料蛋比显 著低于0.4 mg/kg酵母硒添加组。曽礼华等[12]的研究表明,纳米硒与碘对免疫接种蛋鸡的产蛋性能的影响有明显的互作效应,并得出添加量分别为0.45和4.00 mg/kg时获得最佳生产性能的结论。以上研究结论不同,可能是试验动物、饲养阶段、使用的纳米硒添加剂不同及饲粮中其他微量元素产生互作效果不同导致的。
3.2 纳米硒对蛋鸽蛋品质的影响Oishi等[13]研究表明,一定剂量的硒能提高蛋鸡的蛋品质。李士平等[14]研究表明,添加0.2 mg/kg水平的硒可使蛋黄颜色提高一个等级。郭云霞等[15]研究表明,蛋鸡饲粮中添加酵母硒对蛋形指数无显著作用,但能显著提高蛋白高度和哈氏单位。曲湘勇等[16]研究表明,在鹌鹑饲粮中添加纳米硒对其产蛋后期的蛋形指数、蛋壳厚度和蛋黄指数没有显著影响;0.4 mg/kg的纳米硒组的蛋黄色泽相比于对照组提高了71.25%,0.2和0.4 mg/kg纳米硒组的哈氏单位分别提高了25.37%和15.74%,且与同等水平的酵母硒相比,差异不显著。本研究表明,在蛋鸽饲粮中添加纳米硒能有效改善蛋黄颜色,提高蛋黄指数,并对蛋黄指数和哈氏单位有一定的影响,可在一定程度上提高蛋鸽的蛋品质,与以上研究结论基本一致。何柳青等[17]在蛋鸡饲粮中添加0.25、0.50 mg/kg水平的酵母硒,极显著减缓了储存过程中蛋白质的下降,鸡蛋在常温储存15 d后,哈氏单位分别比对照组提高了13.18%和9.63%。曲湘勇等[16]研究表明,酵母硒和纳米硒能极显著提高储存30 d后鹌鹑蛋的哈氏单位。由此可知,纳米硒不仅能增加蛋黄色泽,提高蛋品质,还能延长蛋的保鲜期,对于禽蛋生产有很重要的意义。
3.3 纳米硒对蛋鸽蛋黄中硒、铁、锌、铜、锰含量的 影响研究表明,有机硒和无机硒均能提高鸡蛋中硒含量,且有机硒比相同水平的无机硒沉积效果好[18]。目前,在蛋鸡方面,纳米硒的研究比较少。曲湘勇等[16]等研究表明,0.2和0.4 mg/kg的纳米硒能提高鹌鹑胸肌和鹌鹑蛋中的硒含量,且硒沉积效果优于相应水平的酵母硒。纳米硒作为复合硒产品具有高效低毒的特性,研究表明,纳米硒为体重的113 mg/kg才会导致中毒,是无机硒的7.5倍,有机硒的3~4倍[19]。朱风华等[20, 21]在蛋鸡饲粮中添加高水平纳米硒,试验30 d时,添加2.5、5.0、10.0 mg/kg纳米硒能显著提高蛋鸡肝脏中的硒含量,试验60 d时各试验组与对照组之间蛋鸡肝脏中的硒含量差异不显著,但能显著提高全血硒的含量。Hu等[22]对肉鸡口服和静脉注射纳米硒,并对硒进行放射性标记的研究表明,纳米硒中的硒在全身的吸收率达到41.2%和63.3%,在肝脏中分别为17.5%和13.4%,极显著高于亚硒酸钠组,并得出纳米硒的吸收率和肉鸡机体中硒沉积率都比亚硒酸钠的效果好的结论。Zhang等[23]研究表明,山羊饲粮中添加0.3 mg/kg的纳米硒,试验至第90天,血液、血清中硒含量分别为0.374 6、0.210 7 μg/mL,组织中硒含量以肝脏和肾脏中最高,分别为3.117 3和4.289 9 μg/g,显著高于亚硒酸钠和富硒酵母组。本研究表明,在蛋鸽饲粮中添加纳米硒,饲喂至第21天,各试验组蛋黄中的硒含量相对于对照组均有显著提高,且0.4、0.5 mg/kg水平添加组达到了极显著水平,试验第42天,0.4、0.5 mg/kg水平添加组的蛋黄硒含量显著高于对照组,分别提高了79.08%、88.81%,其余各组相对于对照组有所提高但差异不显著。由此可知,随着纳米硒添加水平的提高,蛋黄中硒沉积量越高,随着饲喂期的延长,蛋黄中硒含量有所增加,但各试验组与对照组之间硒含量的增长幅度有所降低,且以0.4、0.5 mg/kg水平的纳米硒添加组效果最好。
硒与锰和锌之间有拮抗和协同的作用,可降低锰的毒性作用,与锌协同保护胰腺的过氧化损伤[24, 25]。李士平等[14]研究表明,蛋鸡饲粮中添加0.1、0.2 mg/kg的硒对蛋黄中铁、锰、锌、铜沉积量的影响差异不显著。本研究表明,添加纳米硒对蛋黄中铁、锰、锌、铜含量并无不利影响,因此鸽蛋富含硒的同时不影响这几种微量元素的沉积,可以使其更好的发挥营养功能,富硒蛋、富硒肉作为补硒食品,对硒的沉积效果及补硒剂的安全性有很高的要求,纳米硒具有足够的优势作为新型补硒剂的研究对象,其在畜禽方面应用效果需要更多的研究和探讨。
3.4 纳米硒对蛋鸽血清抗氧化指标的影响研究表明,硒能提高GSH-Px DNA修复酶的活力和细胞的抗突变能力,防止GSH-Px mRNA的降解,缺硒会导致动物组织中GSH-Px的活性及mRNA丰度的下降[26, 27]。宋保强等[28]针对肉鸡的研究表明,添加0.2、0.3、0.4和0.5 mg/kg水平的纳米硒均能显著提高肝脏GSH-Px mRNA丰度和活性。由此可知,纳米硒能从抗氧化基因水平上调控畜禽机体的抗氧活性。王娜等[29]的研究表明,用硒含量均为0.3 mg/kg的亚硒酸钠、纳米硒、酵母硒饲喂肉鹅,均能显著提高血清中GSH-Px和T-SOD活性,显著降低MDA含量,其中酵母硒比纳米硒和亚硒酸钠的效果更为明显。王福香等[30]在肉鸡饲粮中添加纳米硒的研究表明,添加0.15~1.20 mg/kg水平的纳米硒,能显著提高14、28日龄肉鸡血浆中的GSH-Px活性,降低MDA含量,对于42日龄的肉鸡血浆中的T-AOC和GSH-Px、 T-SOD活性及抑制·OH清除能力均显著提高,MDA、一氧化氮(NO)含量均显著降低。可见0.15~1.20 mg/kg水平的纳米硒能很好地提高42日龄肉鸡的抗氧化能力。本研究表明,添加不同水平的纳米硒,对试验第21天的蛋鸽血清T-AOC和T-SOD活性均无显著影响;试验第42天,E、F组的T-AOC及GSH-Px、T-SOD活性均显著提高,MDA含量显著降低。
4 结 论综合考虑,基础饲粮中纳米硒的适宜添加量为0.4 mg/kg,饲喂42 d效果更为明显。
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