饲粮中的纤维成分由于不能在单胃动物小肠内消化和吸收,过去一直被认为是饲粮中的抗营养因子,然而,随着纤维对宿主生理功能研究的深入,特别是在人类营养上,纤维对血液胆固醇、葡萄糖含量以及肠道健康的调节逐渐被重视,纤维与人体的健康密切相关[1]。NRC(2012)[2]已明确提出使用磷的标准全肠道消化率(standardized total tract digestibility,STTD)来进行猪的饲粮配制,而准确评定饲料原料磷的STTD需要使用无磷饲粮(P-free diet,PFD)来对生长猪内源磷损失(endogenous phosphorus loss,EPL)进行估计。但早期不同研究所使用的PFD具有不同的纤维素水平,而饲粮纤维素水平对养分消化率和动物内源养分损失具有显著影响。虽然前期研究指出提高饲粮粗纤维水平显著抑制生长猪的养分消化率[3],但前期试验主要通过添加粗纤维水平较高的饲料原料提高饲粮粗纤维水平,如王诚等[4, 5]测定饲粮不同粗纤维水平和品种对生长猪养分表观消化率的影响时发现,饲粮粗纤维水平在较低的范围内(3%~6%),粗蛋白质消化率随着粗纤维水平的增加而提高,赖氨酸、蛋氨酸表观消化率则差异不显著。
前期研究通过添加粗纤维水平较高的饲料原料时不可避免地提高了饲粮中其他抗营养因子的含量,从而无法区分饲粮粗纤维水平和其他抗营养因子含量对养分消化率的影响。人工合成纤维的发展使得动物营养研究人员可在不改变饲粮抗营养因子含量的条件下调整饲粮纤维素水平,从而关注饲粮纤维素水平对磷消化率的影响。因此,本试验以人工合成纤维素作为纤维来源,研究饲粮纤维素添加水平对生长猪EPL和玉米-豆粕型饲粮中磷消化率评定的影响。完成本研究可为标准化测定饲料原料中磷的STTD提供参考数据。
1 材料与方法 1.1 试验材料纤维素购买于美国纤维销售开发公司(Fiber Sales Development Co.),中性洗涤纤维(NDF)含量测定值为55.96%。
1.2 试验设计和试验动物本研究选择28头平均体重为(25.1±2.0) kg的“杜×长×大”杂交去势公猪,按完全随机设计,分为4个组,每组7个重复,每个重复1头猪。试验1采用完全随机设计,4个组饲喂纤维素添加水平分别为0(对照)、3%、6%、9%的PFD,目的在于探讨饲粮纤维素添加水平对生长猪EPL测定的影响,饲粮组成及营养水平见表1。
![]() | 表1 试验1饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of diets in experiment 1 (air-dry basis) |
试验2采用完全随机设计,4个组饲喂纤维素添加水平分别为0(对照)、3%、6%、9%的玉米-豆粕型饲粮,玉米-豆粕混合物中玉米和豆粕的比例为3.1 ∶ 1.0,本试验研究目的在于探讨饲粮纤维素添加水平对生长猪磷标准消化率评定的影响,饲粮组成及营养水平见表2。试验动物及分组同试验1。
![]() | 表2 试验2饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 2 Composition and nutrient levels of diets in experiment 2 (air-dry basis) |
试验动物单独饲养于代谢笼内,麻醉后通过外科手术在回肠末端安装简单T型瘘管。手术后试验猪于代谢笼恢复2周,常规护理,待试验猪采食和排泄恢复正常并保持稳定后开始试验期,室内温度控制在18~22 ℃之间。试验动物日采食量根据生长猪体重的4%计算得出,分别在08:00和17:00分2次饲喂,饮水量按照3倍于动物采食量供给。试验在动物营养学国家重点实验室昌平试验基地进行。
1.3 样本收集和处理本试验分为5 d预试期、2 d收粪期和2 d食糜收集期。选择三氧化二铬作为指示剂,每天08:00给生长猪饲喂含有指示剂的试验饲粮,第5天清洗猪笼,第6天和第7天开始收集试验动物粪样,随机采集粪样,将每天所收集的粪样及时装入塑料袋中置于-20 ℃冰箱中保存。试验第8天和第9天开始收集回肠末端食糜,从08:00至18:00,连续收集10 h。收集时用橡皮筋将约250 mL的软质塑料袋固定于瘘管,当塑料袋样品装满时,立即取下置于-20 ℃冰箱中保存。试验结束后将每头猪的食糜和粪样分别混合均匀后置于65 ℃烘箱中干燥48 h,粉碎混匀后用自封袋低温冷藏保存待测。
1.4 测定指标与方法饲粮、食糜和粪样的干物质含量在105 ℃条件下干燥5 h后测定得出。比色法测定饲粮和食糜中铬和磷的含量[6]。饲粮中钙(Ca)含量按照GB/T 6436—2002方法测定;饲粮中纤维素水平按照GB/T 6434—1994方法测定。
1.5 计算方法饲粮磷的表观消化率按照如下公式计算:
磷的表观消化率(%)=100-(饲粮中铬含量/食糜中铬含量)×(食糜中磷含量/饲粮中磷含量)×100。
食糜中磷的排泄量和可消化磷按照如下公式计算:
食糜中磷的排泄量(mg/kg)=食糜中磷含量×饲粮中铬含量/食糜中铬含量;
可消化磷(mg/kg)=总磷摄入量-食糜中磷的排泄量。
粪中磷的排泄量按照如下公式计算:
粪中磷的排泄量(mg/kg)=粪中磷含量×饲粮中铬含量/粪中铬含量。
使用线性回归法测定豆粕中磷的标准回肠消化率(standardized ileal digestibility,SID)按照如下公式计算:
回肠内源磷流量=食糜中磷含量×饲粮铬含量/食糜中铬含量;
SID(%)=磷的表观回肠消化率(AID,%)+(回肠内源磷流量/饲粮磷含量)×100。
1.6 数据统计与分析使用SAS 9.3统计分析软件中的一般线性模型(GLM)分析试验数据,试验结果以平均值±标准误表示,P<0.05为差异显著。
2 结果与分析试验期间所有生长猪健康状况正常,未表现出明显的磷缺乏症,并按照相应的采食量采食完所有试验饲粮。
2.1 饲粮纤维素添加水平对PFD干物质消化率和 磷排泄量的影响由表3可知,饲粮纤维素添加水平对采食量、干物质摄入量、回肠食糜磷排泄量、全肠道干物质消化率的影响不显著(P>0.05)。随PFD纤维素添加水平的增加,回肠干物质消化率、全肠道磷排泄量均呈线性降低(P<0.05),说明饲粮纤维素添加水平的增加显著降低了回肠干物质消化率和全肠道磷排泄量。纤维素添加水平为0、3%、6%、9%时全肠道干物质消化率分别为88.99%、89.74%、88.86%、88.55%,其中纤维素添加水平为3%时全肠道干物质消化率最高。纤维素添加水平为0、3%、6%、9%时,回肠干物质消化率分别是89.77%、82.95%、78.51%、80.53%,其中对照组回肠干物质消化率最高,说明饲粮纤维素添加水平的增加降低了回肠干物质消化率。纤维素添加水平为9%组的全肠道磷排泄量为1 210 mg/kg,在各组中最低;对照组全肠道磷排泄量为1 799 mg/kg,在各组中最高。生长猪全肠道磷排泄量随着纤维素添加水平的增加而线性降低,则说明生长猪EPL随饲粮纤维素添加水平提高而线性降低。
![]() | 表3 饲粮纤维素水平对无磷饲粮干物质消化率和磷排泄量的影响 Table 3 Effects of dietary fiber supplemented level on digestibility of dry matter and P output in P-free diet |
由表4可知,全肠道磷排泄量、磷的ATTD不受饲粮纤维素添加水平的影响,线性变化不显著(P>0.05)。随着饲粮纤维素添加水平的增加,干物质摄入量比较稳定,变化不显著(P>0.05)。随着饲粮纤维素添加水平的增加,回肠干物质消化率线性减小(P<0.01),说明饲粮纤维素添加水平的增加显著降低了回肠干物质消化率。随着饲粮纤维素添加水平的增加,回肠食糜磷排泄量线性增加(P<0.01),说明饲粮纤维素添加水平的增加极显著的提高了回肠食糜磷排泄量。全肠道干物质消化率及磷AID、SID和STTD,随着纤维素添加水平的增加而线性减小(P<0.05或P<0.01)。然而随着饲粮纤维素添加水平增加,全肠道磷排泄量和磷的ATTD呈二次函数变化,与其他组比较,纤维素添加水平为9%组全肠道磷排泄量最大;与其他组比较,对照组生长猪磷的ATTD最大。饲粮纤维素添加水平在0~3%、6%~9%范围内,全肠道磷排泄量随着纤维素添加水平增加逐渐增加;饲粮纤维素添加水平在3%~6%范围内,全肠道磷排泄量随着纤维素添加水平的增加逐渐 减小。纤维素添加水平为9%组磷的ATTD和STTD最低,对照组磷的ATTD和STTD最高。饲粮纤维素添加水平在0~3%、6%~9%范围内,磷的ATTD和STTD随着饲粮纤维素添加水平的增加而逐渐减小;饲粮纤维素添加水平在3%~6%范围内,磷的ATTD随着饲粮纤维素添加水平的增加而逐渐增加。
![]() | 表4 饲粮纤维素水平对玉米-豆粕型饲粮干物质消化率和磷消化率的影响 Table 4 Effects of dietary fiber supplemented level on digestibility of dry matter and P in corn-soybean meal diet |
随着饲粮纤维素添加水平的增加,磷的SID和STTD线性减小(P<0.01)。对照组磷的SID和STTD最高,分别为61.04%和85.78%。随着纤维素的添加水平增加,磷的SID由61.04%降到了57.88%;磷的STTD由85.78%降到了59.61%。
3 讨 论 3.1 饲粮纤维素添加水平对EPL的影响关于生长育肥猪对纤维素的消化吸收及纤维素对饲粮中其他养分的影响,国内外的学者已进行了大量的研究。Sève等[7]研究表明,饲喂无氮饲粮的猪随饲粮中纤维水平从3.0%增加到6.0%,内源氨基酸排泄量显著升高,当饲粮中纤维水平达到6%后趋于平缓。Furuya等[8]用纯纤维素所做的试验结果表明,中性洗涤纤维从3.0%增加到15.0%,内源氨基酸排泄量有增加的趋势但未达到显著水平。本试验研究了饲粮纤维素添加水平对EPL的影响,而测定饲粮磷标准消化率的关键是内源磷排泄量的确定。由于矿物质元素在体内代谢交换速度快和在消化道的重吸收等原因,所以对内源磷的准确测定相对困难,目前内源磷大多采用估计值,如NRC(1998)[9]认为粪EPL为0.02 g/(kg·d),尿EPL很少,可忽略不计;Georgeobskii等[10]研究表明,生长猪仅有一小部分磷通过肾排出,只占饲粮摄入总量的百分之几,粪中内源磷通常不超过磷总摄入量的10%;Jongbloed等[11]研究也表明,猪排泄内源磷为8~10 mg/kg。内源磷排泄量是动物生命活动过程中不可避免的磷最低损耗,是研究饲料可消化磷的前提和基础。准确估测内源磷排泄量是磷标准消化率评定研究中众所关注的问题。本试验研究结果表明,纤维素添加水平为9%的试验组全肠道磷排泄量为1 210 mg/kg,在各组中最低;对照组全肠道磷排泄量为1 799 mg/kg,在各组中最高。生长猪全肠道磷排泄量随着纤维素添加水平的增加而线性降低,生长猪EPL随饲粮纤维素添加水平提高而线性降低。原因可能是纤维素刺激了大肠对内源磷的重吸收,每日总需要的磷大部分在猪体内胃肠道被循环吸收利用,这与Fan等[12]报道相一致。排泄到胃肠道的总内源磷包括唾液、胃肠道、胆汁、胰液以及小肠壁脱落细胞和死亡细胞中的磷。
3.2 饲粮纤维素添加水平对磷标准消化率的影响磷的表观消化率由于受到动物内源磷排泄量的影响,无法真实准确地反映动物对饲粮中磷的利用效率。准确测定饲粮磷的标准消化率是提高猪对磷利用效率的主要途径之一。标准消化率由于考虑了动物内源磷排泄量,因而评定出的生物学效价更加接近动物的实际利用情况。
本试验结果显示,随着饲粮中纤维素添加水平的提高,饲粮中磷的表观消化率显著降低,这与有关研究中得出的普遍结论相符合。由于饲粮纤维具有很强的阳离子交换能力,可以吸附很多矿物质,造成矿物质利用率降低,Moore等[13]分别测定了纤维素对矿物质(如铜、钙、磷)消化吸收的影响,均证实纤维素对矿物质的消化具有抑制作用。
用基础EPL对磷表观全肠道消化率(ATTD)进行校正,得到磷STTD。本试验结果表明,对照组磷的SID和STTD最高,分别为61.04%和85.78%,显著高于纤其他组。随着纤维素的添加水平增加,磷的SID由61.04%降到了57.88%;磷的STTD由85.78%降到了59.61%。结果显示,随着饲粮纤维素添加水平的提高,磷的SID逐渐降低且差异显著,这与大家有关纤维素营养的研究得出的普遍结论相符合。究其原因可能是较高的饲粮纤维素水平意味着饲粮的难消化组分比例增加,消化能浓度下降,加上体积膨大的影响,易加重消化道负担,导致能量摄入不足,从而降低了磷的SID和STTD;同时,由于增加纤维素水平可提高胃肠蠕动速度,从而加快食糜流通速率并降低食糜与消化酶的接触时间,最终降低养分的消化率。Cherbut等[14]研究表明,饲粮纤维素倾向于减少食糜在消化道内的滞留时间,增加流通速度,从而降低了养分的消化率。Jorgensen等[15]研究证实,猪采食高纤维素水平饲粮后,其消化道食糜在回肠末端的通过速度提高了5~6倍。Wilfart等[16]在研究麦麸纤维对食糜在消化道不同部位贮留时间的影响时也发现,高纤维素水平可降低食糜中固体部分在小肠的停留时间。因此,配合饲料中使用STTD数据能够更好地估测饲粮各原料中可消化磷的含量,进而获得数据更精准的饲粮配方。
4 结 论① 提高饲粮纤维素添加水平显著降低饲喂PFD生长猪的全肠道EPL。在本试验条件下,猪PFD纤维素适宜的添加水平为3%~6%。
② 玉米-豆粕型饲粮中磷的SID和STTD随饲粮纤维素添加水平提高而显著降低。
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