芽孢杆菌作为一种耗氧性革兰氏阳性杆菌，具有耐酸耐热等特性。芽孢杆菌进入动物体肠道内能够消耗氧气，使得大肠杆菌、沙门氏菌等耗氧有害菌难以生存，从而有利于动物健康生长[1]。有研究指出，芽孢杆菌进入动物体肠道以后能产生活性较强的脂肪酶、淀粉酶和蛋白酶等，对碳水化合物具有较强的降解能力，提高动物对营养物质的消化利用率[2]。巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium 1259，BM1259)是从土壤中分离、提取出来的一株具有除臭等独特作用的菌株。戴承镛[3]研究显示，饲粮中添加巨大芽孢杆菌不仅稳定性、安全性高，而且具有其他饲用芽孢杆菌的功用。目前，巨大芽孢杆菌在减少蛋鸡、猪等排泄物恶臭气体的挥发方面有一定的研究报道[4]，但是在动物机体生长性能方面研究较少，尤其在饲用于鹅的研究方面鲜有报道。本试验在饲粮中添加巨大芽孢杆菌，以研究其对仔鹅生长性能、屠宰性能、脏器指数及血清生化指标的影响，为巨大芽孢杆菌在鹅饲粮中的合理利用积累试验数据。
1 材料与方法 1.1 试验材料巨大芽孢杆菌1259制剂是由扬州大学动物科学与技术学院动物营养教研室“新型生物饲料添加剂-BM1259的研制”课题组研发的微生态制剂，其主要成分为BM1259(专利号ZL200510091277.0)，活菌数为1×1010 CFU/g。试验动物为1日龄扬州鹅公鹅，购自扬州市扬州鹅种鹅场。
1.2 试验设计与饲粮选用260只1日龄健康、体重相近的扬州鹅公鹅，采用单因子试验设计，随机分为4组，每组5个重复，每个重复13只。对照组(Ⅰ组)饲喂基础饲粮，试验组(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组)在基础饲粮中分别添加20、40、60 mg/kg巨大芽孢杆菌制剂(每克饲粮中含有的活菌数分别为2×105、4×105、6×105 CFU)，试验期为70 d。采用舍内网上平养，自由采食和饮水，自然光照。
试验饲粮主要参照本课题组历年的研究成果，以玉米、豆粕为基础原料，饲粮配制前测定原料代谢能值、粗蛋白质及粗纤维含量，基础饲粮组成及营养水平见表1。
 | 表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets(air-dry basis) |
分别在14、28、42、56、70日龄当天08:00对试验鹅进行空腹称重(停饲6 h)，准确记录采食量、剩料量，统计各组试验鹅日采食量、增重情况，计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)。
1.3.2 屠宰性能试验第70天从各重复选取2只接近平均体重的扬州鹅进行屠宰试验，测定指标包括：半净膛率、全净膛率、腿肌率、胸肌率、腹脂率，测定方法参照《家禽生产性能名词术语和度量统计方法》(NY/T823—2004)。
1.3.3 脏器指数将心脏、肝脏、脾脏、胸腺、法氏囊、腺胃以及剥离周围脂肪的肌胃(去除内容物及角质膜)、各肠段(去除内容物)分别迅速称重并计算脏器指数，计算公式如下：
脏器指数(%)=100×内脏器官重/活重。
1.3.4 血清生化指标试验第70天08:00从各重复选取2只接近平均体重的试验鹅，空腹翅静脉采血5 mL/只，经高速离心机离心后取血清。采用UniCel DxC-800 Synchron全自动生化分析系统(beckman coulter，美国)测定血清中甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、葡萄糖(GLU)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量。
1.4 数据统计分析试验数据采用SPSS 17.0中单因素方差分析(one-way ANOVA)进行分析，结果以“平均值±标准误”表示，差异显著后进行LSD多重比较，以P<0.01(差异极显著)，P<0.05(差异显著)作为差异显著性判断标准。
2 结 果 2.1 巨大芽孢杆菌对1~70日龄仔鹅体重及生长性能的影响由表2可知，饲粮中添加巨大芽孢杆菌对14、28、42、56日龄仔鹅体重均有不同程度的影响。与对照组相比，Ⅳ组14、56日龄仔鹅体重显著增加(P<0.05)；Ⅳ组28、42日龄仔鹅体重极显著增加(P<0.01)，其中Ⅱ组28、42日龄仔鹅体重与Ⅳ组相比差异显著(P<0.05)，Ⅲ组42日龄仔鹅体重与Ⅳ组相比差异显著(P<0.05)，巨大芽孢杆菌对70日龄仔鹅体重无显著影响(P>0.05)，但Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组与对照组相比有逐渐增加的趋势。
| 表2 巨大芽孢杆菌对1~70日龄仔鹅体重的影响 Table 2 Effects of Bacillus megatherium on body weight of geese from 1 to 70 days of age |
由表3可知，Ⅳ组1~28日龄仔鹅ADG与对照组相比极显著提高(P<0.01)，与Ⅱ组相比显著提高(P<0.05)，而Ⅳ组1~28日龄仔鹅F/G与对照组相比差异不显著(P>0.05)，与Ⅱ组相比显著降低(P<0.05)，与Ⅲ组相比极显著降低(P<0.01)。Ⅲ、Ⅳ组29~70日龄仔鹅ADFI与对照组相比显著提高(P<0.05)。巨大芽孢杆菌对1~70日龄仔鹅生长性能没有显著影响(P>0.05)，但ADFI、ADG与对照组相比呈逐渐增加的趋势。
2.2 巨大芽孢杆菌对70日龄仔鹅屠宰性能的影响由表4可知，与对照组相比，Ⅳ组70日龄仔鹅全净膛率、半净膛率显著提高(P<0.05)，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组腿肌率相比于对照组分别提高了1.35%、3.05%、5.67%，但差异不显著(P>0.05)，巨大芽孢杆菌对各组腹脂率没有显著影响(P>0.05)，但与对照组相比，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组腹脂率分别提高了13.86%、14.19%、16.83%。
| 表3 巨大芽孢杆菌对1~70日龄仔鹅生长性能的影响 Table 3 Effects of Bacillus megaterium on growth performance of geese from 1 to 70 days of age |
| 表4 巨大芽孢杆菌对70日龄仔鹅屠宰性能的影响 Table 4 Effects of Bacillus megaterium on slaughter performance of geese at 70 days of age |
由表5可知，饲粮中添加巨大芽孢杆菌对70日龄仔鹅肌胃指数、空肠指数有一定的影响，其中Ⅳ组肌胃指数与对照组相比显著提高(P<0.05)， Ⅱ、Ⅲ组腺胃指数与对照组相比没有显著差异(P>0.05)，但有逐渐提高的趋势，Ⅳ组空肠指数显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(P<0.05)。而巨大芽孢杆菌对其他脏器指数无显著影响(P>0.05)。
| 表5 巨大芽孢杆菌对70日龄仔鹅脏器指数的影响 Table 5 Effects of Bacillus megaterium on viscera indices of geese at 70 days of age |
由表6可知，Ⅳ组高密度脂蛋白胆固醇含量与Ⅱ组相比降低了16.46%，差异显著(P<0.05)，同时Ⅱ组低密度脂蛋白胆固醇含量与对照组相比降低了42.76%，差异显著(P<0.05)；此外甘油三酯、葡萄糖、总胆固醇含量与对照组相比，差异均不显著(P>0.05)。
| 表6 巨大芽孢杆菌对70日龄仔鹅血清生化指标的影响 Table 6 Effects of Bacillus megaterium on serum biochemical parameters of geese at a 70 days of age mmol/L |
微生态制剂对消化道菌群主要是通过占位原理进行调节，在动物机体生长早期，消化道菌群还没定植完全，而是处于动态变化的状态，所以尽早使用微生态制剂能够促进动物机体建立更有利于健康的肠道微生物菌群，从而有利于动物生长[5, 6]。芽孢杆菌是需氧菌，能消耗肠道内大量的游离氧，使得需氧有害菌因缺氧而受到抑制，此外，芽孢杆菌在生长繁殖过程中能产生抗菌蛋白，对部分病菌具有抵抗作用[7]。从本次饲养试验中发现，添加巨大芽孢杆菌的各组仔鹅健康状况良好，没有发现明显的拉稀、饲料便、水便、西红柿样粪便等象征肠道菌群失调或肠道有害菌感染的异常症状。
在ADG方面，本试验研究发现巨大芽孢杆菌对仔鹅早期的生长性能影响显著，其中Ⅳ组(60 mg/kg巨大芽孢杆菌)对1~28日龄仔鹅ADG影响显著，与对照组相比极显著提高，与Ⅱ组(20 mg/kg巨大芽孢杆菌)相比显著提高，该结果显示巨大芽孢杆菌对仔鹅早期的生长速度有显著促进作用，而且在20~60 mg/kg的添加量范围内高浓度促生长效果高于低浓度添加量。与本结果相似，吕景旭等[8]在肉仔鸡的前期研究也发现，芽孢杆菌(凝结芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌)能显著提高肉鸡的1~3周龄ADG(提高4.9%)。陈家祥等[5]用地衣芽孢杆菌饲喂早期肉鸡，发现50 mg/kg地衣芽孢杆菌添加量效果最佳，与对照组相比，ADG显著提高了17.86%。本试验中添加巨大芽孢杆菌虽然对前期ADG影响显著，但对全期(1~70日龄)ADG影响不显著，与谭莉等[9]在肉鸡上的研究结果相似。本试验结果显示，扬州鹅前期饲料中添加60 mg/kg巨大芽孢杆菌可显著提高ADG。
在饲料转化效率方面，各试验组与对照组差异不显著，结果暗示，由于60 mg/kg巨大芽孢杆菌添加组在1~28日龄阶段体重显著增加而F/G与对照组无显著差异，说明巨大芽孢杆菌能够促进仔鹅快速增长，有可能使后期出栏时间提前，降低管理费用，提高经济效益。Ⅳ组1~28日龄仔鹅F/G与Ⅱ组相比显著降低，但与Ⅲ组(40 mg/kg巨大芽孢杆菌)相比极显著降低，该结果显示高浓度的巨大芽孢杆菌添加量具有改善仔鹅的饲料转化效率的作用。与本研究结果不同，刘磊等[7]在肉仔鸡饲粮中添加不同剂量的芽孢乳杆菌，研究结果显示，添加100 mg/kg芽孢乳杆菌对1~3周的F/G影响不显著。本试验中添加巨大芽孢杆菌对后期(29~70日龄)F/G无显著影响，与刘磊等[7]研究结果相似。而陈家祥等[5]发现添加50 mg/kg地衣芽孢杆菌使F/G显著降低了10.98%，与本试验研究结果不一致。这可能与不同芽孢杆菌增殖能力及其代谢活性的不同，以及动物品种不同有关，而对鹅的相关研究未见报道，巨大芽孢杆菌对1~28日龄仔鹅F/G的影响机制还需要进一步研究。
在ADFI方面，添加40、60 mg/kg巨大芽孢杆菌能显著提高29~70日龄仔鹅ADFI，这与陆银等[10]研究结果不同。原因可能是巨大芽孢杆菌引起仔鹅体重上的差异，需要加大采食量来满足机体生长，也可能与菌种不同有关，具体机制还需进一步研究。
此外，虽然巨大芽孢杆菌对全期生长性能无显著影响，但对1~56日龄的体重均有显著影响，说明巨大芽孢杆菌对仔鹅的生长具有一定的促进作用。而70日龄仔鹅体重各组之间差异不显著，原因可能是饲养期最后2周是夏季闷热多雨的时候，温度在31~35 ℃之间，影响了鹅后2周的采食量，从而在一定程度上阻碍了鹅的生长发育。
芽孢杆菌改善生长性能的主要原因可能是其在动物肠道内生长繁殖能够产生多种营养物质及各种酶类，从而提高肠道内蛋白质、能量及脂肪的水解及利用效率[11]。李小刚[12]在蛋鸡饲粮中添加巨大芽孢杆菌，发现添加量为40 mg/kg时能显著提高饲粮中能量、钙、粗蛋白质及多种氨基酸的代谢率，这也验证了巨大芽孢杆菌的促生长机制。
3.2 巨大芽孢杆菌对70日龄仔鹅屠宰性能的影响屠宰性能是评定肉用动物生长性能的重要指标，它反映了营养物质在不同组织及同一组织不同部位中沉积量的差异。本试验研究结果表明，巨大芽孢杆菌添加量达到60 mg/kg时，70日龄仔鹅全净膛率、半净膛率显著提高。崔宇等[13]在肉鸡饲粮中添加枯草芽孢杆菌，发现全净膛率、半净膛率显著提高了3.38%、1.83%，这与本试验结果相似。此外，本试验中虽然各组间腿肌率没有显著差异，但呈现逐渐上升的趋势，这与陆银等[10]研究结果相似。本试验结果说明添加巨大芽孢杆菌能显著提高扬州鹅的产肉性能，原因可能是巨大芽孢杆菌能分泌如蛋白酶、淀粉酶等消化酶，从而降解食入饲粮中蛋白质及多肽产生游离氨基酸，提高蛋白质利用率，促进动物机体内蛋白质合成[12]，而蛋白质是促进肌肉生长的物质基础，肌肉中蛋白质含量高达80%以上[14]。周立强等[15]研究发现，添加0.15 g/kg枯草芽孢杆菌能极显著提高粗蛋白质的吸收利用率。有研究指出，蛋白质水平或其利用率的提高，动物机体的产肉性能得到改善，全净膛率、半净膛率显著提高[16, 17, 18]。
本试验中腹脂率没有显著差异，但呈现逐渐上升的趋势。原因可能是添加益生菌提高了饲粮中能量的利用率，从而导致腹部脂肪沉积量增加，腹脂率提高。Sen等[19]研究表明，在肉鸡饲粮中添加0.3%枯草芽孢杆菌，其饲粮中总能的利用率显著提高。李小刚[12]研究指出，巨大芽孢杆菌添加量达到40 mg/kg时，饲粮中总能代谢率显著提高。孙小沛[20]在肉鸡颗粒饲粮中分别添加3种不同类型芽孢杆菌制剂，结果发现，能量利用率分别显著提高了6.61%、5.99%、9.45%。刘蒙等[21]研究发现当饲粮中代谢能水平由12.122 MJ/kg提高到13.376 MJ/kg时，北京油鸡的腹脂率由0.21%显著提高到0.56%。众多研究表明，腹部脂肪沉积随着能量水平增加或能量利用率提高而显著增加。本研究中随着巨大芽孢杆菌添加量增加，腹脂率提高，可能暗示了巨大芽孢杆菌提高了饲粮中能量的利用率。芽孢杆菌对屠宰性能的不同影响可能与动物品种、益生菌的种类、添加量及其活性成分含量的不同有关。
3.3 巨大芽孢杆菌对70日龄仔鹅脏器指数的影响脏器指数是动物机体内脏器官与活体质量的比值，常用来表示内脏器官的生长发育状况，而内脏器官的充分发育能够保证营养物质在器官中的有效沉积。脏器指数主要受品种及营养等因素的影响。本试验结果中，添加60 mg/kg巨大芽孢杆菌显著提高肌胃指数及空肠指数。任永军等[22]研究指出，复合芽孢杆菌制剂对肉兔肠道发育具有促进作用，特别对十二指肠、空肠、回肠绒毛高度和隐窝深度的比值具有显著影响。张相伟[23]研究饲用芽孢杆菌对鸡肠道发育的影响，结果显示，芽孢杆菌促进了肠道黏膜的生长发育，增强了小肠对营养物质的吸收功能。以上试验结果说明益生菌进入动物消化道后，对肠道黏膜进行不断刺激，促进黏膜发育，增加肠道绒毛高度及其上皮细胞数量，同时，益生菌通过竞争抑制、产生代谢产物等方式抑制有害菌在动物胃肠道内定植，从而间接促进胃肠道发育[24]。
3.4 巨大芽孢杆菌对70日龄仔鹅血清生化指标的 影响在动物机体脂肪代谢过程中，高密度脂蛋白(HDL)是颗粒大小、功能及组成不均一的一类脂蛋白，通过前β-HDL、HDL3、HDL2递交代谢过程而逐渐成熟[25]，其作用是将胆固醇从肝外组织转运到肝脏进行代谢，而低密度脂蛋白是将肝脏合成的内源性胆固醇运送到肝外组织供机体需要。HDL增多，有助于清除血管内多余的胆固醇，有利于心血管健康[26]。而血清中低密度脂蛋白含量升高是动脉粥样硬化心脑血管疾病的主要危险因子[27]。本试验中，添加20 mg/kg巨大芽孢杆菌能显著降低血清中低密度脂蛋白胆固醇含量，20 mg/kg巨大芽孢杆菌添加组，其高密度脂蛋白胆固醇含量显著高于60 mg/kg添加组，说明巨大芽孢杆菌添加量较多反而降低了血清中高密度脂蛋白胆固醇含量，分析其原因可能是添加巨大芽孢杆菌引起血液中甘油三酯水平上升，当甘油三酯水平升高时，血清中HDL2含量下降[28]，而颜丙玉等[29]研究发现HDL2含量与高密度脂蛋白胆固醇含量呈显著正相关关系，当HDL2含量下降时，会导致高密度脂蛋白胆固醇含量降低，但其具体原因还需进一步研究。
通过试验结果发现，20 mg/kg巨大芽孢杆菌添加组总胆固醇含量最高，随着添加比例的增加，总胆固醇含量反而降低，辛娜等[30]研究发现，芽孢杆菌对蛋鸡血清中胆固醇含量无显著影响，胆固醇含量降低了11.29%，这与本试验结果相似。有关研究报道指出，血清中胆固醇含量受到关键酶--羟甲基戊二酸单酰辅酶A活性的影响，而益生菌能抑制胆固醇合成过程中关键酶的活性，所以添加一定量的芽孢杆菌能够降低血清中胆固醇的含量。
本试验中添加巨大芽孢杆菌对血清低密度脂蛋白胆固醇含量具有显著影响，这与Fukushim等[31]研究结果相似。出现本试验结果的原因可能是巨大芽孢杆菌能降低血清中尿酸含量[12]，而Gouri等[32]研究指出，血清中尿酸含量降低，其低密度脂蛋白胆固醇含量也会减少，但具体原因还需要进一步研究。
4 结 论① 添加60 mg/kg巨大芽孢杆菌对1~28日龄扬州鹅生长性能影响显著，且显著增加56日龄体重，提前出栏时间，提高经济效益。
② 添加60 mg/kg巨大芽孢杆菌对70日龄扬州鹅屠宰性能影响显著。
③ 添加20 mg/kg巨大芽孢杆菌显著提高70日龄扬州鹅血清中高密度脂蛋白胆固醇含量，显著降低低密度脂蛋白胆固醇含量，其具体作用机制有待进一步研究。
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