2. 农业部食物与营养发展研究所, 北京 100081;
3. 农业部饲料生物技术重点开放实验室, 北京 100081;
4. 淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心, 武汉 430070
2. Institute of Food and Nutrition Development, Ministry of Agriculture, Beijing 100081, China;
3. Key Laboratory of Feed Biotechnology, Ministry of Agriculture, Beijing 100081, China;
4. Freshwater Aquaculture Collaborative Innovation Center of Hubei Province, Wuhan 430070, China
鱼粉(fish meal,FM)作为传统的肉食性鱼类饲料中的主要蛋白质源,成为水产饲料成本的重要构成,近几年受海洋环境的恶化,渔业资源的短缺,鱼粉价格不断上涨,在肉食性鱼类上用植物蛋白质源替代鱼粉的研究成为趋势[1, 2, 3]。目前的研究主要集中在植物蛋白质源替代鱼粉后对鱼体生长代谢[4, 5, 6, 7]、健康免疫[8, 9]等的影响方面。挤压膨化工艺已经广泛应用在特种水产动物饲料加工中。不同蛋白质源在挤压膨化过程中具有不同的加工特性,例如,与鱼粉相比,植物蛋白质源容重较低、含有较高含量的碳水化合物[1],这些特性势必会对饲料加工质量产生较大的影响[10, 11, 12]。水产挤压膨化饲料的加工质量参数包括膨胀度、容重、硬度、水中稳定性、油脂吸附力等[13],质量好的膨化饲料要具备多孔性、高韧性、高水中稳定性,以便于油脂吸收、运输和储存以及减少对水体环境的污染,这些参数很大程度上受蛋白质源种类及配比的影响,因此研究蛋白质源的制粒特性对水产饲料的生产工艺具有重要意义。
棉籽浓缩蛋白(cottonseed protein concentrate,CPC)和发酵豆粕(fermented soybean meal,FSM)作为鱼粉替代蛋白质源,具有高蛋白质含量、高消化率、低抗营养因子及产品质量稳定的特点。目前有关大豆蛋白制粒特性的研究较多[14, 15, 16],而鲜有棉籽浓缩蛋白和发酵豆粕对饲料加工工艺参数影响的报道。随着水产养殖业的迅速发展,其对水产饲料的要求也越来越高,因此掌握不同原料的加工规律具有重要的现实意义。本文旨在通过研究鱼粉、棉籽浓缩蛋白、发酵豆粕3种蛋白质源对高蛋白质水产饲料膨化工艺参数和加工质量的影响,为植物蛋白质源替代鱼粉的实际应用提供参考。
1 材料与方法 1.1 原料及饲料生产工艺3种蛋白质源分别为低温干燥鱼粉(Triple-nine,丹麦)、发酵豆粕(北京金泰得生物科技股份公司)、棉籽浓缩蛋白(北京中唐瑞德生物科技有限公司),其营养成分及加工特征见表 1。
![]() | 表 1 鱼粉、发酵豆粕和棉籽浓缩蛋白的营养成分及加工特征 Table 1 Nutritional components and processing characteristics of FM, FSM and CPC |
以鱼粉饲料为对照,然后分别以棉籽浓缩蛋白、发酵豆粕及二者组合替代47%或100%的鱼粉,共配制出7种试验饲料(粗蛋白质含量45.45%~48.55%;总能18.11~20.33 MJ/kg),分别命名为FM、FM×CPC、FM×FSM、CPC、FM×CPC×FSM、FSM、CPC×FSM,试验饲料组成及营养水平见表 2。所有试验饲料均在国家饲料安全评价基地生产。饲料原料混合均匀后利用牧羊双螺杆挤压机(MY56×2A,模孔直径2.0 mm),设置典型沉性饲料加工参数范围后制成挤压膨化饲料,挤压膨化条件根据每组饲料挤出产品的表观性状进行自动调整,详细记录各加工环节的工艺参数,包括:挤压膨化腔温度、挤压温度、水流速率、螺杆转速、切刀转速、孔径面积、电流、电压、产量、生产总能耗等,其中挤压膨化腔温度、水流速率、螺杆转速通过中控传感器显示得到,挤压温度是采用红外测温仪测出的膨化机最后一区的温度,记录每组饲料做料过程中稳定时的电流,得出每组饲料的生产总能耗。为了保证每组饲料在挤压膨化过程中不受脂肪水平的影响,各组饲料的外加油脂部分和物料混合后直接挤压,每组5%的油脂由真空后喷涂机完成。加工成型饲料采用多点采样法取样用于加工质量指标分析。
![]() | 表 2 试验饲料组成及营养水平(干物质基础) Table 2 Composition and nutrient levels of experimental diets (DM basis) |
原料和饲料样品营养成分分析采用AOAC(1995)方法。其中,水分含量采用105 ℃常压干燥法测定;粗蛋白质含量采用凯氏定氮仪(FOSS KjeltecTM 2300,Denmark)测定;粗脂肪含量依据GB/T 6433—2006全脂肪测定法,样品经酸水解后,采用脂肪仪(FOSS SoxtecTM 2050,Denmark)测定。
饲料硬度采用质构分析仪(TA.XT2,Surrey,UK)测定,试验数据为随机采集20个样品的平均值。
膨胀度:包括径向膨胀度和轴向膨胀度,饲料的径向和轴向粒径如图 1所示,径向膨胀度是指膨化饲料的径向粒径与模孔直径(2 mm)的比值,轴向膨胀度是指各植物蛋白质替代组膨化饲料的轴向粒径与鱼粉组饲料的轴向粒径的比值。试验数据为随机采集30个样品的平均值。
![]() | 图 1 膨化饲料径向粒径和轴向粒径示意图 Fig. 1 The schematic diagram of extrusion feed radial and axial diameters |
耐久性指数:利用二箱式耐久性指数测试仪测定。
水中稳定性:根据水产行业标准SC/T 1077—2004[17]测定。
容重:根据单位体积的饲料重量进行统计。
淀粉糊化度:参照熊易强[18]的方法测定。
油脂吸附力:取1 000 g膨化饲料样品,置于真空喷涂机中,再将过量的(150 g)豆油通过喷涂机进行喷涂。油脂被吸收后,取出膨化饲料,多余的油脂用纸巾吸除。测定最终被膨化饲料吸收的油脂重量,得出油脂吸附力。
1.3 数据分析用统计软件SPSS 17.0对试验结果进行数据分析。试验数据采用平均值±标准误(mean±SE)表示,单因素方差分析(one-way ANOVA)通过Duncan氏法多重比较检验差异显著性,以P<0.05为差异显著性标准。由于饲料加工质量的不同变量单位不同,数据首先经过标准化处理,然后采用SPSS因子分析法对饲料加工质量参数之间的相关关系进行分析。
2 结果与分析 2.1 蛋白质源对膨化机主机制粒加工工艺参数的影响不同蛋白质源对膨化机主机制粒加工工艺参数的影响见表 3。7组饲料在制粒系统中挤压腔温度均以挤压腔2最高,然后依次是挤压腔1、挤压腔3、挤压腔4。 其中FM、FM×CPC、CPC×FSM组4个挤压腔温度均高于其余4组对应挤压腔温度。挤压温度测定结果接近挤压腔4温度,将FM、FM×CPC×FSM、CPC×FSM组的挤压温度进行相关性分析发现,随着植物蛋白质比例的增加,挤压温度降低,两者呈显著负相关,如图 2所示。FM×FSM、CPC、FSM、CPC×FSM组的螺杆转速高于其余3组。生产总能耗结果表明,FM和FM×CPC组较低,FSM和CPC×FSM组较高,即相比鱼粉,植物蛋白质作为蛋白质源会增加生产的能耗。
![]() | 表 3 饲料膨化工艺参数 Table 3 Extrusion processing parameters of the diets |
![]() | 图 2 植物蛋白质比例与挤压温度的关系 Fig. 2 The relationship between plant protein proportion and extrusion temperature |
不同蛋白源对挤压膨化高蛋白质水产饲料的容重、硬度、膨胀度、水中稳定性、耐久性指数、淀粉糊化度、油脂吸附力等加工质量指标均产生了影响,结果见表 4。
![]() | 表 4 不同蛋白质源对膨化饲料加工质量的影响 Table 4 Effects of different protein sources on processing quality of extrusion feed |
7组饲料的容重在426.7~604.7 g/L之间,FM组显著高于其余6组(P<0.05);而CPC组最低,显著低于其余6组(P<0.05)。
7组饲料中,硬度在FSM组最高(P<0.05),显著高于其他各组(P<0.05);在CPC×FSM组最低,但与FM、FM×CPC×FSM组之间无显著差异(P>0.05)。将添加发酵豆粕作为蛋白质源的4组饲料进行一元线性回归分析,结果表明硬度随发酵豆粕添加量的增加而升高,呈显著正相关,如图 3所示。
![]() | 图 3 发酵豆粕添加量与硬度的关系 Fig. 3 The relationship between fermented soybean meal supplementation and hardness |
在相同切刀转速下,径向膨胀度在CPC组最高,显著高于其余各组(P<0.05);在CPC×FSM组 最低,显著低于其余各组(P<0.05)。轴向膨胀度在FM×FSM组最高,显著高于其余各组(P<0.05);在FM组最低,显著低于其余各组(P<0.05)。在3种单一蛋白质源饲料(FM、FSM、CPC组)中,FM组的径向膨胀度和轴向膨胀度均显著低于其余2组(P<0.05)。
饲料水中稳定性以FM组最高,显著高于含有植物蛋白质源的各组(P<0.05),以FSM组最低,但与CPC×FSM组无显著差异(P>0.05)。
FM×FSM和CPC组淀粉糊化度达到100%,但FM×CPC×FSM组的淀粉糊化度也很高(达到91.04%),与上述2个淀粉全糊化组无显著差别(P>0.05)。7组饲料中,CPC×FSM组淀粉糊化度最低,但与FM、FM×CPC、FSM组无显著差异(P>0.05)。饲料耐久性指数在各组之间差别较小,均在99.808%~99.968%之间,相互之间无显著差异(P>0.05),但以CPC组最高,CPC×FSM组最低。
对4种纯植物或纯动物蛋白质源饲料(FM、CPC、FSM、CPC×FSM组)进行油脂吸附力的测定,结果表明,CPC组最高,其次为CPC×FSM组,两者无显著差异(P>0.05);FM组最低,显著低于CPC、CPC×FSM组(P<0.05);FSM与其余3组均无显著差异(P>0.05)。
2.3 饲料加工质量各参数的相关关系饲料加工质量各参数具有很高的相关性。由7组饲料加工质量参数采用因子分析得到的矩阵见表 5。相关系数大于0.6被认为相关性显著。因此,容重与径向膨胀度、淀粉糊化度呈显著负相关;硬度与径向膨胀度、轴向膨胀度、淀粉糊化度和耐久性指数均呈显著正相关;径向膨胀度与淀粉糊化度和耐久性指数具有显著正相关性,而轴向膨胀度与水中稳定性具有显著负相关;油脂吸附力与容重呈显著负相关,与轴向膨胀度呈显著正相关。
![]() | 表 5 膨化饲料加工质量参数之间的相关关系 Table 5 Correlation coefficients between processing quality parameters of extrusion feed |
通过优化原料加工工艺和蛋白质源的合理配比,开发高比例替代鱼粉的植物蛋白质源是未来水产饲料发展的重点。本研究评估了鱼粉、棉籽浓缩蛋白、发酵豆粕3种蛋白质源对高蛋白质水产饲料湿法膨化系统膨化工艺参数和加工质量的影响。植物蛋白质源替代鱼粉后对膨化机工艺参数和饲料加工质量产生了显著影响。物料在挤压腔内经挤压、剪切、摩擦、混合、挤出使饲料中的淀粉糊化、蛋白质变性,物料之间的各组分产生强烈的物理和化学反应,物料在宏观和微观结构上都产生重大变化。该试验所用膨化机分为4个挤压腔,分别包括供料区、揉和区、熟化区、膨胀区,每个腔可实施分别控制,调节、平衡前后腔的温度,用于不同物性饲料加工不同阶段所需温度的调节。供料区段的主要作用是物料输送以及对物料的初步压缩,在揉和区段,物料滞留时间最长,物料经强烈搅拌、混合、剪切等作用,逐渐熟化或熔化;再进入熟化区段,物料得到进一步的熟化,淀粉进一步糊化,蛋白质完全变性,最后进入挤压腔体的最后一区,挤压腔温度下降,熔融的物料由于温度和压力的突然下降,水蒸汽迅速膨胀和散失,使产品形成多孔结构。分析该试验结果,7组饲料的挤压腔温度变化规律为挤压腔2>挤压腔1>挤压腔3>挤压腔4,说明混合、剪切、熟化以及糊化过程主要在前3个区完成,最后一区主要负责温度下降形成饲料多孔结构。
据Ilo等[19]报道,大豆浓缩蛋白组与挤压温度值之间具有显著的正相关性是由于转矩增加和黏性耗散的间接作用,而本试验中植物蛋白质比例与挤压温度之间呈显著负相关,很可能是由于挤压温度测定结果与挤压腔温度有关,数值上接近挤压腔4,而植物蛋白质源替代鱼粉后,更有利于膨胀,因此所需挤压腔温度随替代比例的增加呈降低趋势。本试验中,植物蛋白质原料的吸水性大于鱼粉(鱼粉:1.43±0.02;棉籽浓缩蛋白:2.26±0.07;发酵豆粕:1.98±0.01),而原料吸水性强会引起饲料黏度的增加[15,20],进而导致植物蛋白质作为蛋白源相比鱼粉会增加生产的能耗。也有研究表明高含量的豆粕会增加能耗,过世东等[21]研究豆粕部分替代鱼粉、菜籽粕、棉籽粕对水产饲料的影响后发现,随着豆粕替代比例的增加,电耗升高。电耗升高的主要原因是原料具有较大的摩擦阻力,但原料的摩擦阻力尚未见有人进行系统的测定。
水产饲料的膨胀度是一项重要指标,它会影响饲料的容重、硬度、油脂吸附力等[22]。饲料膨胀的主要原因分别来自压模膨胀和水的骤蒸发,后者引起的膨胀更明显。目前,对于不同淀粉源引起膨胀度变化的研究较多[23, 24, 25, 26],而对蛋白质源的研究相对较少。本试验中,FM组的径向膨胀度和轴向膨胀度均显著低于添加了棉籽浓缩蛋白和发酵豆粕的组,主要由于鱼粉的淀粉含量低于植物蛋白质源。径向膨胀度以CPC组最高,可能由于棉籽浓缩蛋白原料的容重低,利于膨胀,而发酵豆粕则主要是轴向膨胀,大豆蛋白倾向于形成纤维性结构的特性可能是导致添加了大豆浓缩蛋白的组径向膨胀度低于添加了棉籽浓缩蛋白的组的原因[15]。而本试验轴向膨胀度的结果差异除了与植物蛋白质源的膨胀特性有关外,也与饲料生产过程中人为调节切刀转速有关,切刀转速增加会导致轴向膨胀度减小。因为在实际的生产过程中,不同蛋白质源在相同的膨化工艺条件下并不能得到理想长度的膨化料产品,因此需要根据实际出料情况进行人为调整。
高蛋白质水产饲料分沉性和浮性饲料两大类,前者主要适用于鲟鱼、鲑鳟类等品种,后者广泛应用于鲈鱼、真鲷及石斑鱼等高档海水鱼,还有部分品种如大口黑鲈适宜投喂悬浮性颗粒饲料。水产饲料的容重直接影响饲料的沉浮性。Glencross等[27]研究表明,对于水产饲料,容重小于525 g/L的饲料呈浮性。本试验7组配方饲料中,CPC组容重最低,为(426.7±2.7) g/L,显著低于其余6组,为浮性饲料,这与3种蛋白质原料中棉籽浓缩蛋白的容重最低(表 1)有关。其次,FM×FSM组的容重为(461.3±2.7) g/L,也为浮性饲料,而容重最高的为FM组,达到600 g/L以上,为绝对沉性饲料,其余几组容重均在500~600 g/L之间,为悬浮性饲料。容重与膨胀度呈显著负相关[28],径向膨胀度是直接影响饲料浮性或者沉性的,膨胀度越高,则容重越低。在单一蛋白质源条件下,FM组的膨胀度低于CPC和FSM组,说明植物蛋白质源部分替代鱼粉有利于降低饲料容重,便于浮性饲料的生产,动物蛋白质有利于生产沉性饲料,原料容重与饲料容重直接相关。棉籽浓缩蛋白适合在悬浮性和浮性高档海水鱼饲料中应用,而生产快沉性饲料则需要容重较高的动物蛋白质原料。
膨化料的硬度和耐久性指数是为了保证在运输和储存过程中的物料完整性,硬度太小、耐久性指数太低均会产生过多碎料[29]。本试验的7组配方饲料中,FSM组的硬度最大,且发酵豆粕的添加量与硬度呈显著正相关,本试验的结果与前人的观点[15, 16]一致。对本试验7组配方饲料的相关性分析表明,硬度与径向膨胀度呈显著正相关,该结果与Srensen等[30]的报道一致。耐久性指数的结果分析表明,各组饲料的耐久性指数均较高,各组之间无显著差异。
水中稳定性是指饲料入水浸泡一定时间后保持组成成分不被溶解和不散失的性能。稳定性差的饲料容易在水中发生溶解、溶胀和溃散[31]。因此,水中稳定性是水产饲料特有的衡量水产饲料质量的一项重要指标。本试验的7组饲料中,以纯鱼粉饲料的水中稳定性最高,而添加发酵豆粕会降低饲料的水中稳定性。据报道,常用原料加工后水中稳定性由强到弱依次为面粉、棉籽粕、小麦、鱼粉、菜籽粕、豆粕、蚕蛹、麸皮、玉米黄粉、玉米、米糠。此外,蛋白质原料的种类也是影响饲料水中稳定性的重要因素,一般新鲜优质原料的黏结能力强[32]。本试验所用鱼粉为丹麦进口鱼粉,采用低温干燥技术制备,高质量鱼粉本身的加工功能性较高是其所配制饲料水中稳定性最高的主要原因。
膨化饲料干燥后进行油脂的后喷涂有利于产品能够快速地吸收油脂,以满足鱼类对能量的需求以及减少在加工过程中对热敏性组分的损失,并且极大提高了饲料的外观价值。真空喷涂工艺主要是通过真空系统管路抽出混合腔内的空气,包括膨化料中的气体,以保证压入外界大气后喷进的油脂更多深入饲料内部,使油脂在膨化料内外均匀分布。由此可以看出,饲料的膨胀度越高,比表面积越大,对油脂的吸附越充分。本试验对单一蛋白质源的饲料进行了油脂吸附力的测定,结果表明,不同蛋白质源、不同膨胀度饲料对油脂吸附力会产生显著影响,膨胀度越高,油脂吸附力越大,二者呈显著正相关。
4 结 论相比鱼粉,发酵豆粕和棉籽浓缩蛋白均增加了膨化饲料的径向膨胀度,使加工能耗增加显著;且棉籽浓缩蛋白的容重低于发酵豆粕和鱼粉,利于加工浮性饲料,不利于加工沉性饲料。
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