2. 重庆市水产技术推广站, 重庆 401147;
3. 通威股份有限公司, 成都 610041
2. Fisheries Technology Extension Station of Chongqing, Chongqing 401147, China;
3. Tongwei Co., Ltd., Chengdu 610041, China
杂交鳢(Channa spp.)因其生长速度快、经济价值高而成为世界上快速发展的重要淡水水产养殖品种[1]。近年来，我国杂交鳢养殖产业发展迅猛，年产量在20万t左右。由于杂交鳢缺乏可靠的营养与饲料参数，加之鱼粉资源短缺，养殖效益下滑，致使植物蛋白质的大量使用，导致杂交鳢饲料适口性差，在养殖实践中出现吐料现象。饲料中植物蛋白质的大量使用会降低饲料的适口性，进而影响鱼类的摄食量，从而影响其正常的生长[2]。如何提高水产动物对饲料的摄食量是动物营养学家长期面临的难题，也是提高动物对植物蛋白质利用的一个重要途径[2]。目前，饲料生产企业通常采用添加外源性诱食剂来提高水产动物的摄食量。研究证实，饲料中添加诱食剂可以改善饲料的适口性[2]。氨基酸[2]、甜菜碱[2]、核苷酸[2]、鱼溶浆[3]、酵母膏[4]、二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)[5]和牛磺酸[6]等通常被认为是行之有效的鱼虾类诱食剂。但也有研究认为，单一诱食剂的诱食效果不如复合诱食剂[7-8]。有关改善杂交鳢饲料适口性的研究较少[9]，而现实生产中又急需解决杂交鳢摄食量的问题。因此，本试验在对单一诱食剂进行迷宫诱食筛选试验的基础上，进一步对4种作用效果较好的诱食剂进行杂交鳢的生长试验，以期为杂交鳢的养殖生产和饲料配制提供理论依据。
1 材料与方法 1.1 试验饲料以鱼粉、豆粕、棉籽蛋白和菜籽粕作为蛋白质源配制基础饲料(表 1)，然后在基础饲料中分别添加2.0%鱼溶浆、2.0%酵母膏、0.1%DMPT和0.1%复合诱食剂配制成4种试验饲料，其中复合诱食剂由酵母核苷酸、牛磺酸、甜菜碱和氨基酸按3 : 1 : 2 : 1的质量比配合而成。5种饲料等氮等能(粗蛋白质42%，总能18 MJ/kg)。所有饲料原料粉碎后过245μm筛，采取逐级扩大法混合均匀，用洋工TSE65S型双螺杆湿法膨化机(北京现代洋工机械科技发展有限公司)制成粒径为3.0 mm的膨化颗粒饲料，自然干燥，4℃冰箱中保存备用。
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表 1 基础饲料组成及营养水平(干物质基础) Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (DM basis) |
试验用杂交鳢(杂交鳢×斑鳢)购自重庆永川区鱼种场，驯食适应环境10 d后，取健康、规格整齐、初始均重为(17.30±0.03)g的杂交鳢450尾，随机分成5个组，每个组设3个重复，每个重复30尾鱼。对照组饲喂基础饲料，其他4组随机饲喂1种添加了诱食剂的试验饲料。杂交鳢在室内淡水循环水族缸(有效容积为300 L)中饲养8周，日投饵量为鱼体重的3%～5%，每天08:30、13:30和18:30各投喂1次。试验期间水温为26～29℃，溶解氧浓度7～8 mg/L，氨氮浓度< 0.48 mg/L，亚硝酸盐氮浓度< 0.07 mg/L，pH为7.2～7.6。
1.3 样品采集与指标测定饲养试验结束，禁食24 h后以重复为单位称重计数。每个重复随机取4尾鱼，用MS-222麻醉后，称重后分离出内脏、肝脏、脾脏，并分别称重；每个重复另随机取4尾鱼于尾静脉取血，于4℃条件下3 000×g离心10 min，收集血清，-20℃保存备用。
杂交鳢的摄食、生长和形态学指标参照以下公式计算：
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式中：t为饲养天数(d)；N始为初始尾数(尾)；N末为终末尾数(尾)；Wp为饲料的粗蛋白质含量(%)；Wf为总摄食饲料的干重(g)；W末为终末均重(g)；W始为初始均重(g)；W内为内脏重(g)；W肝为肝脏重(g)；W脾为脾脏重(g)；W为体重(g)。
采用全自动生化分析仪(日立7100)测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、碱性磷酸酶(ALP)活性以及胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、总蛋白(TP)、球蛋白(GLOB)、丙二醛(MDA)含量。
1.4 数据处理与分析采用SPSS 23.0软件对所得数据进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，若差异显著(P < 0.05)，再进行Tukey’s多重比较。除成活率外，数据均以平均值±标准误表示。
2 结果 2.1 杂交鳢的摄食和生长性能指标由表 2可知，饲料中添加诱食剂的杂交鳢的终末均重、WGR、SGR显著高于对照组(P < 0.05)，而酵母膏组和复合诱食剂组杂交鳢的终末均重、WGR、SGR和FI显著高于鱼溶浆组和DMPT组(P < 0.05)。各组PER和FCR无显著差异(P>0.05)。试验期间，各组杂交鳢的成活率均为100%。
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表 2 杂交鳢的摄食和生长性能指标 Table 2 Feed intake and growth performance indices of hybrid snakehead |
由表 3可知，与对照组相比，鱼溶浆组、酵母膏组和复合诱食剂组杂交鳢的HSI显著降低(P < 0.05)，SSI显著升高(P < 0.05)，而DMPT组杂交鳢的VSI和SSI与对照组无显著差异(P>0.05)。复合诱食剂组杂交鳢的VSI最低，显著低于其他各组(P < 0.05)。
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表 3 杂交鳢的形态学指标 Table 3 Morphology indices of hybrid snakehead |
由表 4可知，与对照组相比，鱼溶浆组、酵母膏组和复合诱食剂组杂交鳢的血清CHO含量显著降低(P < 0.05)，血清TP含量显著升高(P < 0.05)。鱼溶浆组、酵母膏组和复合诱食剂组杂交鳢的血清MDA含量显著低于对照组(P < 0.05)，而血清SOD、CAT活性则显著高于对照组(P < 0.05)。各组杂交鳢血清TG、GLOB含量和ALP活性无显著差异(P>0.05)。
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表 4 杂交鳢的血清生化指标 Table 4 Serum biochemical indices of hybrid snakehead |
本试验结果表明，饲料中添加外源性诱食剂能够促进杂交鳢的生长，这与在其他鱼[8-10]、虾[11-12]上的研究结果一致。从本试验结果来看，酵母膏和复合诱食剂的作用效果最佳。已有的研究也证明，酵母膏对异育银鲫[4]、凡纳滨对虾[12]有较好的诱食效果。不同的动物对不同的促摄食物质的反应敏感程度不同。同样是甜菜碱，被证明对多佛鳎鱼[13]有显著的诱食效果，而牙鲆[6]和大口黑鲈[14]对其不敏感。同一浓度的不同氨基酸，对黄鳝的促摄引诱作用不同[15]。甚至同一类鱼对同样来源的诱食物质反应有相同性也有差异性，如红大马哈鱼(Oncorhynchus nerka)对脯氨酸的味觉、电生理反应都很强烈，但对丙氨酸的反应强度就有所不同[16]。另外，红大马哈鱼还对苯丙氨酸、亮氨酸和甜菜碱反应强烈，而其他几种鱼却没有反应[16]。此外，在研究中发现，鱼虾类对于大多数动物提取物的反应是基于多种小分子物质的复合反应，而很少只对其中的1种或2种物质敏感[7]。这可能是目前生产中使用单一诱食剂的效果不及复合诱食剂的原因，因为单一诱食剂往往只对鱼类形成单一的刺激，而未形成强烈的综合诱食刺激[8]。本试验结果也支持这一说法。在牙鲆[8]、条纹鲈[10]和黄鳝[15]上同样发现，复合诱食剂各组分可以协同增效，弥补单一诱食剂成分的缺陷。研究指出，氨基酸可以增强肌苷-5′-单磷酸盐(IMP)对黄狮鱼稚鱼的促摄食作用[17]。这些研究结果表明，不同鱼类具有不同的摄食习性，对诱食剂种类和诱食活性成分含量的需求不同，甚至同种鱼也有可能对不同的化合物感兴趣。
采食量通常是评价饲料适口性好坏的一个有效指标。通过长期摄食生长试验来评定促摄食物质的效果是一种更为有效的研究方法。本试验结果显示，饲料中添加酵母膏和复合诱食剂能够显著促进杂交鳢的摄食，且不影响饲料效率，并能促进生长，这表明促进摄食是促进杂交鳢生长的有效途径。在牙鲆[6]、条纹鲈[10]、黄鳝[15]和异育银鲫[18]上同样证实，饲料中添加诱食剂可以提高鱼类的摄食量，进而促进其生长。鱼类摄食行为及其对饲料(包括天然饵料)的嗜好性是一个相当复杂的问题，它有着各种内、外因素的相互深刻的关联，因此，要探明鱼类的摄食机制并非易事。
本试验结果表明，饲料中添加外源性诱食剂能降低杂交鳢血清CHO含量，其中以酵母膏和复合诱食剂的作用效果最为显著。而在凡纳滨对虾[11]的研究中发现，诱食剂可以增加血清CHO和TG含量，且肝脏机能良好。这些研究结果的差异可能与动物的种类或试验目的不同有关。通常底层鱼类在体腔或内脏组织中储存脂肪，而上层鱼类把脂肪储存在肌肉中[19]。本试验中除DMPT外，其余诱食剂均可显著降低杂交鳢的HSI，且复合诱食剂还可以显著降低杂交鳢的VSI。这表明诱食剂可以改善脂肪在杂交鳢内脏组织中的附着和沉积，有利于提高鱼体机能，与以前在杂交鳢[9]上的研究结果一致。
血液中的许多生化指标可反映动物机体的生理状况[20]。血清TP含量的高低能反映动物的免疫应激状态，胁迫和疾病等应激因素均可以导致鱼类血清TP含量降低[21-22]。脾脏在机体的免疫中也发挥重要作用，通常SSI可直观地反映鱼体的免疫机能[23]。本试验结果表明，饲料中添加诱食剂能够显著提高杂交鳢血清TP含量和SSI，酵母膏的作用效果最为显著，表明外源性诱食剂可以增强杂交鳢机体的免疫能力。这种免疫能力的提高可能与酵母膏中含有的β-葡聚糖和甘露寡糖有关。研究证实，在饲料中添加β-葡聚糖和甘露寡糖可以增强水产动物的抗病力和免疫力[24-25]。
血清中酶绝大部分来自动物的各种组织器官，其活性高低能够反映机体代谢和物质转化的状况[26]。SOD能清除生物氧化过程中产生的超氧阴离子自由基，在清除超氧阴离子自由基的同时生成的过氧化氢(H2O2)又可被CAT清除生成水(H2O)和氧气(O2)[27]。MDA是脂肪酸过氧化产物之一，其含量的多寡可反映机体内脂质过氧化的程度[28]。本试验结果显示，饲料中添加外源性诱食剂能提高杂交鳢血清中SOD和CAT活性，降低MDA含量，表明诱食剂可以显著改善机体的抗氧化能力。有关诱食剂对鱼体抗氧化能力影响方面的研究资料较为匮乏，其作用机制还有待深入研究。
4 结论饲料中添加诱食剂可以提高杂交鳢的摄食量，降低血脂水平，同时提高机体的免疫力和抗氧化能力，进而促进其生长，以酵母膏和复合诱食剂的效果较佳。
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