脂肪产能高，是饲粮中为动物提供能量的主要来源。饲粮中添加脂肪不仅能改善饲料的适口性，提供必需脂肪酸，促进脂溶性维生素的吸收，改善毛皮外观及光泽度，还能减少饲料加工中的粉尘并减少环境污染[1-2]。不同脂肪来源其脂肪酸组成不同，若将不同油脂按一定比例混合使用，可发挥脂肪酸互补效应，并满足动物对多种脂肪酸特别是必需脂肪酸的需要[3]。多不饱和脂肪酸(PUFA)作为脂肪的组成部分，对脂肪的利用和总营养价值有重要影响，从而直接影响动物生长性能[4]。有关添加不同油脂对畜禽生产性能及产品中脂肪酸含量的影响已有大量研究报道[5-12]，然而关于毛皮动物多数报道围绕在添加不同水平的同种油脂源，或添加相同水平不同油脂源对生产的影响研究[13-15]。有关添加混合油脂对蓝狐生长性能影响的研究报道较少，育成期是蓝狐骨骼、肌肉生长最快的阶段，添加适宜比例的油脂能显著提高其生长性能[5]，而油脂的营养作用主要体现在其PUFA的调控。因此，本文旨在研究饲粮不同n-6/n-3 PUFA配比对育成期雄性蓝狐生长性能、营养物质消化率及氮代谢的影响，以期明确蓝狐育成期饲粮中n-6和n-3 PUFA的适宜配比，为毛皮动物饲料的精准配制提供理论参考。
1 材料与方法 1.1 试验动物、试验设计与饲养管理试验在中国农业科学院特产研究所毛皮动物实验基地完成。选取102日龄平均体重为(2 370±24) g的健康雄性蓝狐48只，随机分成4组，每组12个重复，每个重复1只蓝狐。各组饲粮除油脂组成不同外，其他原料一致，Ⅰ组饲粮中添加鱼油和豆油，n-6/n-3为3.00；Ⅱ组饲粮中添加鱼油和玉米油，n-6/n-3为6.03；Ⅲ组饲粮中添加鱼油和玉米油，n-6/n-3为9.01；Ⅳ组饲粮中添加玉米油和豆油，n-6/n-3为18.04。
试验动物单笼饲养。试验从2014年8月12日开始至2014年9月26日结束，预试期7 d，正试验期46 d，整个试验阶段分为育成前期(102~125日龄)和育成后期(126~147日龄)，每天08：00和15：00各饲喂1次，自由饮水。
1.2 试验饲粮饲粮主要由膨化玉米、豆粕、鱼粉、肉粉等组成，通过饲粮中的油脂配比来调配脂肪酸的比例，试验饲粮组成、营养水平及脂肪酸含量详见表 1。
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表 1 试验饲粮组成、营养水平及脂肪酸含量(风干基础) Table 1 Composition, nutrient levels and fatty acid contents of experimental diets (air-dry basis) |
试验期每天准确称量、记录饲喂量和剩余料量以计算采食量，观察动物健康和采食状况。正试期第23天，每组选择8只采食和排便正常、体况接近的蓝狐进行消化代谢试验。采用全收粪法，利用自制粪盘和5 L尿桶连续收集4 d粪、尿。尿样收集前在尿桶中加入10 mL 10% H2SO4固氮，每只狐狸连续收集4 d尿样混匀后称重，滤纸过滤后保存备用。每只狐狸连续收集4 d的粪便样本混匀后称重，采集部分粪便样品加入少量10% H2SO4固氮，65 ℃烘干至恒重，测定初水分。粉碎后过40目筛用于各种营养成分测定。
1.4 测定指标及方法测定基础饲粮中干物质、粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分、钙、磷含量及总能。测定粪样中干物质、粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分含量及总能。饲料及粪便样品中的碳水化合物含量采用计算方法求得。尿液中测定尿氮含量。干物质含量采用105 ℃烘干法测定，参照GB/T 6435—2006；粗蛋白质含量采用凯氏定氮法测定，参照GB/T 6432—1994；粗脂肪含量采用索氏抽提法测定，参照GB/T 6433—1994；粗灰分含量采用550 ℃灼烧法测定，参照GB/T 6438—1992；总能采用燃烧法测定，采用德国IKA C2000能量测热仪测试；钙含量采用乙二胺四乙酸(EDTA)络合滴定法测定，参照GB/T 6436—1992；磷含量采用钒钼酸铵比色法测定，参照GB/T 6437—1992。饲粮中的脂肪酸前处理采用甲酯化方法，参照GB/T 21514—2008，测试采用外标法。脂肪酸含量测定采用气质联用仪(Agilent 7890A-7000B)，色谱条件：色谱柱：DB-5MS(30 m×250 μm×0.25 μm)；柱温：初始55 ℃，保持2 min，以5 ℃/min速率升至200 ℃，保持1 min，再以2 ℃/min速率升至230 ℃，保持3 min，再以5 ℃/min速率升至270 ℃，保持10 min；进样口温度：250 ℃；载气：氦气(99.999%)1.0 mL/min；进样量1 μL；分流比为10∶1。质谱条件：电子轰击离子(EI)源；离子源温度230 ℃；电子能量70 eV；接口温度250 ℃；扫描质量范围为50～500 m/z。各计算公式如下：
平均日采食量(g/d)=试验期采食量/试验天数；
平均日增重(g/d)=(末重-初重)/试验天数；
料重比=平均日采食量/平均日增重；
营养物质消化率(%)=[(营养物质采食量-营养物质排出量)/营养物质采食量]×100;
氮沉积(g/d)=食入氮-粪氮-尿氮;
净蛋白质利用率(%)=(氮沉积/食入氮)×100;
蛋白质生物学价值(%)=[氮沉积/(食入氮-粪氮)]×100。
1.5 数据整理与统计分析试验数据采用Excel 2003进行整理试验数据，采用SPSS 9.13软件中GLM程序进行统计分析，多重比较采用Duncan氏法进行，其中P<0.01为差异极显著，P<0.05为差异显著，P>0.05为差异不显著，结果以平均值±标准差表示。
2 结 果 2.1 饲粮n-6/n-3 PUFA配比对育成期蓝狐生长性能的影响由表 2可知，饲粮n-6/n-3 PUFA配比对蓝狐 125日龄体重有显著影响(P<0.05)，Ⅲ组和Ⅳ组显著高于Ⅱ组(P<0.05)，Ⅰ组与Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组间差异不显著(P>0.05)。各组间蓝狐147日龄体重差异不显著(P>0.05)。饲粮n-6/n-3 PUFA配比对蓝狐102~125日龄平均日增重有极显著影响(P<0.01)，Ⅰ组、Ⅲ组和Ⅳ组均极显著高于Ⅱ组(P<0.01)，但Ⅰ组、Ⅲ组和Ⅳ组间差异不显著(P>0.05)。饲粮n-6/n-3 PUFA配比对蓝狐102~125日龄的平均日采食量和料重比有显著影响(P<0.05)，Ⅰ组和Ⅲ组平均日采食量显著高于Ⅱ组(P<0.05)，与Ⅳ组间差异不显著(P>0.05)，Ⅱ组与Ⅳ组间平均日采食量差异不显著(P>0.05)；Ⅰ组、Ⅲ组和Ⅳ组料重比均显著低于Ⅱ组(P<0.05)，Ⅰ组、Ⅲ组和Ⅳ组间料重比差异不显著(P>0.05)。125~147日龄，各组间蓝狐平均日采食量、平均日增重及料重比差异不显著(P>0.05)。
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表 2 饲粮n-6/n-3 PUFA配比对育成期蓝狐生长性能的影响 Table 2 Effects of dietary ratio of n-6/n-3 PUFA on growth performance of blue fox during the growth period |
由表 3可知，饲粮n-6/n-3 PUFA配比对蓝狐干物质采食量有显著影响(P<0.05)，Ⅰ组和Ⅲ组显著高于Ⅱ组(P<0.05)，与Ⅳ组间差异不显著(P>0.05)，Ⅱ组与Ⅳ组间差异不显著(P>0.05)。饲粮n-6/n-3 PUFA配比对蓝狐干物质消化率、粗蛋白质消化率、总能消化率有显著或极显著影响(P<0.05或P<0.01)，Ⅰ组、Ⅲ组和Ⅳ组的干物质消化率显著高于Ⅱ组(P<0.05)，Ⅰ组、Ⅲ组、Ⅳ组间差异不显著(P>0.05)；Ⅲ组和Ⅳ组的粗蛋白质消化率极显著高于Ⅱ组(P<0.01)，Ⅰ组和Ⅲ组间差异不显著(P>0.05)，Ⅰ组与Ⅳ组间差异极显著(P<0.01)，Ⅰ组与Ⅱ组间差异不显著(P>0.05)；Ⅲ组和Ⅳ组总能消化率显著高于Ⅱ组(P<0.05)，与Ⅰ组差异不显著(P>0.05)，Ⅰ组与Ⅱ组间差异不显著(P>0.05)，Ⅲ组和Ⅳ组间差异不显著(P>0.05)。Ⅲ组粗脂肪消化率显著高于Ⅱ组(P<0.05)，与Ⅰ组和Ⅳ组差异不显著(P>0.05)，Ⅰ组、Ⅲ组、Ⅳ组间差异不显著(P>0.05)。各组间碳水化合物消化率差异不显著(P>0.05)。
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表 3 饲粮n-6/n-3 PUFA配比对育成期蓝狐营养物质消化率的影响 Table 3 Effects of dietary ratio of n-6/n-3 PUFA on nutrient digestibility of blue fox during the growing period |
由表 4可知，饲粮n-6/n-3 PUFA配比对蓝狐氮采食量有极显著影响(P<0.01)，Ⅰ组和Ⅲ组极显著高于Ⅱ组和Ⅳ组(P<0.01)，Ⅳ组极显著高于Ⅱ组(P<0.01)，Ⅰ组和Ⅲ组间差异不显著(P>0.05)。饲粮n-6/n-3 PUFA配比对蓝狐粪氮含量有显著影响(P<0.05)，其中Ⅰ组和Ⅱ组显著高于Ⅳ组(P<0.05)，与Ⅲ组间差异不显著(P>0.05)，Ⅰ组和Ⅱ组间差异不显著(P>0.05)。各组间尿氮含量、氮沉积、净蛋白质利用率及蛋白质生物学效价差异不显著(P>0.05)。
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表 4 饲粮n-6/n-3 PUFA配比对育成期蓝狐氮代谢的影响 Table 4 Effects of dietary ratio of n-6/n-3PUFA on N digestion of blue fox during the growing period |
毛皮动物育成期是骨骼和肌肉增长最快的时期，因此需要外源饲粮供应大量的蛋白质、脂肪等营养物质来满足其生长发育需要，本试验将整个试验期分成2个阶段，即育成前期(2014年8月12日—2014年9月4日)和育成后期(2014年9月5日—2014年9月26日)，饲粮n-6/n-3 PUFA配比对育成前期蓝狐体重增长影响显著，Ⅲ组分别比Ⅱ组平均日增重高出23.92%，Ⅲ组料重比比Ⅱ组低25.93%。Ⅱ组和Ⅲ组饲粮是由相同的油源鱼油和玉米油组成，但其配比不同，导致了n-6/n-3不同。由于Ⅲ组平均干物质采食量显著高于Ⅱ组，且饲粮不同脂肪酸配比影响了体内营养物质的吸收消化，这可能导致了2组在体重和料重比上的差异。Ⅰ组和Ⅳ组比Ⅱ组平均日增重分别高14.90%和19.60%，Ⅰ组和Ⅳ组料重比比Ⅱ组分别低17.20%、23.14%，说明饲粮不同的油源组成和n-6/n-3 PUFA配比对育成前期蓝狐生长产生了显著影响，本试验Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组的生长趋势与周继术[16]和涂玮[17]在鱼上的研究报道一致，即随着n-6/n-3比例增大，生长性能各项指标高于低比例组。饲粮n-6/n-3 PUFA配比对育成后期蓝狐的生长性能未产生显著影响，这与在肉鸡和仔猪上的文献报道[18-19]相一致，可能由于育成后期幼狐生长相对缓慢，动物不同生长阶段添加油脂，生长效果不同。
3.2 饲粮n-6/n-3 PUFA配比对育成期蓝狐营养物质消化率的影响研究表明，植物性油脂与动物性油脂混合使用可提高动物性油脂的消化率，并且在动物机体内能够发挥协同效应，饲粮中添加一定配比的油脂能够减缓食糜的流通速度，增加消化时间，从而改善碳水化合物和蛋白质在十二指肠的消化和吸收[20]。畜禽必须依靠消化道中的消化酶将蛋白质、脂肪等大分子物质分解成小分子物质后方能加以吸收利用，因此消化酶的活性和饲料在消化道中的停留时间决定了动物对营养物质的消化吸收率[21]。本试验结果与上述文献报道一致，不同油脂配比后对粗蛋白质消化率、粗脂肪消化率均产生了显著影响。饲粮n-6/n-3 PUFA配比影响了蓝狐对蛋白质的吸收利用，主要因为油脂的添加可以促进氨基酸的消化吸收，以肉粉和肉骨粉为主的饲粮，能提高氨基酸的消化率[22]。氨基酸是饲料蛋白质在动物机体内的分解形式，氨基酸消化率提高即蛋白质消化率增加。脂肪酸组成分析结果显示，试验选用的3种油脂均属于长链脂肪酸，Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组分别是鱼油与豆油和玉米油的混合油脂，Ⅳ组是玉米油和豆油混合油脂，不同的油脂配比影响了饲粮的适口性，造成了组间干物质采食量上的差异。从试验结果可知，Ⅱ组的大部分营养物质消化率均显著低于Ⅲ组和Ⅳ组；Ⅰ组与Ⅲ组和Ⅳ组间大部分营养物质消化率差异不显著，但均低于Ⅲ组和Ⅳ组，这可能由于鱼油比例过高会影响营养物质吸收，说明饲粮脂肪酸组成合理不仅可以促进脂肪的消化吸收，还可改善蛋白质和能量的利用效果，促进畜禽生长发育[23-24]，饲粮n-6/n-3 PUFA配比影响了营养物质在蓝狐体内的代谢，造成了组间营养物质消化率的差异。
3.3 饲粮n-6/n-3 PUFA配比对育成期蓝狐氮代谢的影响饲粮n-6/n-3 PUFA配比显著影响了育成期蓝狐氮采食量和粪氮含量，而对尿氮含量未产生显著影响，最终导致各组间氮沉积差异不显著，净蛋白质利用率和蛋白质生物学效价也呈现出相同的变化趋势，这说明在蓝狐机体内饲喂相同脂肪水平的饲粮，饲粮n-6/n-3 PUFA配比会引起脂质代谢的变化，n-6和n-3脂肪酸的平衡对动物机体内环境的稳定和正常生长有重要作用，可以减少心血管疾病和高血脂类疾病的发生[25]，而对蓝狐蛋白质沉积未产生直接影响。
4 结 论饲粮n-6/n-3 PUFA为9.01或18.04时，蓝狐可获得较优的生长性能，但从饲料成本和贮存稳定性考虑，玉米油与豆油混合组更佳。
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