现代动物营养研究已经从以静态为主描述营养物质的转化利用规律转向动态营养研究，动态营养是当前动物营养和饲料科学发展的必然趋势[1]。动态营养是满足动物在不同的生长阶段、环境、生产目的等条件下对营养物质的需要，通过精准饲粮配制和饲喂技术逼近动物对营养的真实需要。有关不同品种肉鸡应用不同动态细分饲粮营养供给方式的研究表明，采用适当的动态细分饲粮营养供给方式，可以在不影响肉鸡生产性能的基础上降低饲料成本，从而提高养殖效益[2-4]。目前关于动态细分饲粮营养供给的研究主要集中在其对肉鸡生产性能及生产成本的影响，而有关其对肉鸡肌肉品质、营养物质代谢率、血清生化指标影响的研究极少。此外，随着动态饲粮营养供给细分程度的提高，肉鸡的换料频率也会升高，因此有必要对动态细分饲粮营养供给对肉鸡应激指标的影响做进一步研究。本试验旨在通过对肉鸡生产性能、肉品质、氮、磷代谢率及血清生化指标的测定及分析，为动态营养在肉鸡上的应用提供理论依据。
1 材料与方法 1.1 试验动物试验动物为1日龄爱拔益加(AA)肉鸡，购于北京华都肉鸡公司，饲养试验于中国农业科学院昌平南口中试基地进行。
1.2 试验设计与饲养管理本试验采用单因素完全随机设计，选取1日龄健康AA肉鸡240只(公母各占1/2)，随机分为3个组，每组8个重复，每个重复10只鸡，各重复之间肉鸡体重差异不显著(P > 0.05)。按照饲粮动态细分程度逐渐降低的原则，设置A组：每3.5 d 1个营养标准(1~7日龄1个营养标准)；B组：每7 d 1个营养标准；C组：每14 d 1个营养标准。依据中国农业科学院饲料研究所研发的肉仔鸡动态营养需要和生产性能预测模型软件配制11种饲粮，饲粮组成及营养水平见表 1。整个试验过程中，为了保证饲粮营养水平按照梯度变化，饲粮配制使用的各种原料均为同一批次，试验期42 d。肉鸡饲喂饲粮按照如下方式进行：A组肉鸡1~7日龄饲喂1号饲粮，剩余35 d每3.5 d依次饲喂2~11号饲粮；B组肉鸡每7 d依次饲喂1、2、4、6、8、10号饲粮；C组肉鸡每14 d依次饲喂1、4、8号饲粮。肉鸡自由采食，充足饮水，按正常免疫程序进行免疫接种。
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表 1 饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of diets (air-dry basis) |
于肉鸡42日龄时，以重复为单位称重(停料12 h、不停水)，并统计耗料量，计算各组肉鸡的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)及料重比(F/G)。同时每组随机选取16只鸡(每个重复2只)，屠宰后在胸肌及腿肌的相同部位各取肌肉样品，45 min内采用便携式pH计测定肌肉pH；1~2 h内用高品质便携式NH-310色差仪测定肌肉亮度(L*)、红度(a*)和黄度(b*)值；滴水损失采用如下方法进行测定：肉样先称重，然后悬挂于纸杯内，杯口用保鲜膜密封以防止水分蒸发，将纸杯在4 ℃中放置48 h，再次称重肉样。
滴水损失(%)=100×(初始重-末重)/初始重。
1.3.2 氮、磷代谢率于肉鸡28日龄24:00进行截料，并于29日龄08:00给各组换上对应的8号饲粮，12:00在粪盘上铺上塑料布，以重复为单位进行收粪，每个重复连续收集新鲜粪样3 d，剔除毛屑杂物，每100 g新鲜粪样加入10 mL 10% H2SO4，充分混匀，于65~70 ℃全部烘干至恒重，回潮，粉碎后制成风干样。用凯氏定氮法测定氮的含量，用分光光度法测定磷的含量。用酸不溶灰分内源性标记法计算各组肉鸡的氮、磷代谢率。计算公式如下：
氮、磷代谢率(%)=100×(粪中氮、磷含量×饲粮酸不溶灰分含量)/(饲粮氮、磷含量×粪中酸不溶灰分含量)。
1.3.3 血清生化指标于肉鸡14、28和42日龄时，每组随机选取与平均体重相近的8只鸡(每个重复1只)，颈静脉采血10 mL，4 ℃、3 000 r/min离心15 min分离血清，用全自动生化分析仪测定血清尿素氮(UREA)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)含量；采用r-911全自动放免计数仪测定血清皮质酮(CORT)含量，采用UV-1700紫外分光光度计测定血清总抗氧化能力(T-AOC)，试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
1.4 数据统计分析试验数据用平均值±标准差表示，采用SPSS 19.0软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，检验组间差异显著性，Duncan氏法进行各组间多重比较，P < 0.05为差异显著。
2 结果 2.1 动态细分饲粮营养供给对肉鸡生产性能及肉品质的影响动态细分饲粮营养供给对肉鸡生产性能的影响见表 2。由表可知，C组肉鸡的ADG显著高于A、B组(P < 0.05)，F/G显著低于A组(P < 0.05)。A、B组肉鸡生产性能指标差异均不显著(P > 0.05)。
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表 2 动态细分饲粮营养供给对肉鸡生产性能的影响 Table 2 Effects of dynamic segmentation dietary nutrient supply on performance of broilers |
动态细分饲粮营养供给对肉鸡胸肌、腿肌肉品质的影响见表 3。由表可知，各组肉鸡胸肌、腿肌的L*、a*和b*值及pH和滴水损失差异均不显著(P > 0.05)。
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表 3 动态细分饲粮营养供给对肉鸡胸肌、腿肌肉品质的影响 Table 3 Effects of dynamic segmentation dietary nutrient supply on breast muscle and leg muscle qualities of broilers |
动态细分饲粮营养供给对肉鸡氮、磷代谢率的影响见表 4。由表可知，各组肉鸡的氮、磷代谢率差异不显著(P > 0.05)。
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表 4 动态细分饲粮营养供给对肉鸡氮、磷代谢率的影响 Table 4 Effects of dynamic segmentation dietary nutrient supply on the utilization of nitrogen and phosphorus of broilers |
动态细分饲粮营养供给对肉鸡血清生化指标的影响见表 5。由表可知，肉鸡14日龄时，各组肉鸡血清生化指标差异均不显著(P > 0.05)；28日龄时，C组肉鸡血清UREA含量显著高于A组(P < 0.05)，但与B组差异不显著(P > 0.05)；42日龄时，C组肉鸡血清UREA含量显著高于A、B组(P < 0.05)，但A、B组肉鸡血清UREA含量差异不显著(P > 0.05)。
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表 5 动态细分饲粮营养供给对肉鸡血清生化指标的影响 Table 5 Effects of dynamic segmentation dietary nutrient supply on the serum biochemical indexes of broilers |
动态细分饲粮营养供给对肉鸡血清CORT含量及T-AOC的影响见表 6。由表可知，各组肉鸡血清CORT含量及T-AOC差异均不显著(P > 0.05)。
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表 6 动态细分饲粮营养供给对肉鸡血清CORT含量及T-AOC的影响 Table 6 Effects of dynamic segmentation dietary nutrient supply on the serum CORT content and T-AOC of broilers |
邱殿锐等[2]研究表明，14 d动态细分饲粮营养供给能够显著提高罗斯308肉鸡的ADG，显著降低F/G，与本试验研究结果一致。然而Warren等[3]报道，不同动态细分饲粮营养供给方式对科宝肉鸡ADG的影响差异不显著。Brewer等[4]对不同品种肉鸡的研究表明，不同动态细分饲粮营养供给方式对肉鸡ADG的影响差异均不显著，但是能够显著降低其中2个品种肉鸡的F/G。不同动态细分饲粮营养供给方式对肉鸡生产性能的影响有所差异，原因可能是饲粮细分时参考的标准和肉鸡品种不同。
营养水平不仅能影响肉鸡的生产性能，同时也能影响肉品质[5]。pH是评定肌肉品质的重要指标之一，不仅是肌肉酸度的直观表现，而且对肌肉品质有重要的影响[6]。肉色是肌肉外观评定的重要指标，是肌肉的生理学、生化学和微生物学变化的外在表现；a*值表示肌肉从红色到绿色的变化，a*值越大肉质越好；b*值表示肌肉从黄色到蓝色的变化，b*值越小肉质越好；L*值表示肉的亮度，0表示黑色，100表示白色。滴水损失表示肌肉蛋白质保持其内含水分的能力[7]。关于动态细分饲粮营养供给对肉鸡肌肉品质的影响，相关研究报道较少。本试验中，饲粮营养水平除代谢能水平随料号的增加而升高外，其他营养水平均随料号的增加而降低；根据本试验中各组肉鸡的饲粮设置可知，A、B、C组肉鸡同一时期采食饲粮的代谢能水平依次降低，而其他营养水平则依次升高。汤建平[8]研究表明，饲粮能量水平未对肉仔鸡的胸肌、腿肌pH造成显著影响，与本试验研究结果一致。赵景鹏等[9]报道，饲粮营养水平对AA肉鸡胸肌a*、L*和b*值的影响差异不显著，而腿肌a*、b*值随营养水平的升高而降低；饲粮营养水平对肌肉滴水损失的影响具有品种特异性，高营养水平饲粮降低了胸肌和腿肌的滴水损失，与本研究的结果存在一定差异。本试验中，不同的动态细分饲粮营养供给方式未对AA肉鸡胸肌、腿肌的L、a和b值及pH和滴水损失产生显著影响。原因可能是本试验各组间饲粮能量、蛋白质水平变化幅度与赵景鹏等[9]相比较小；也可能是由于赵景鹏等[9]试验中各组肉鸡饲粮保持了恒定的能蛋比，即采食高营养水平饲粮的肉鸡，采食的能量、蛋白质水平均较高，而本试验中采食饲粮代谢能水平较高的肉鸡，采食的蛋白质水平则相对较低。具体原因还有待进一步研究。
3.2 动态细分饲粮营养供给对肉鸡氮、磷代谢率的影响肉鸡对饲粮氮、磷代谢率的提高有助于降低粪便中氮、磷对环境造成的不良影响。陈燕[10]研究表明，饲粮粗蛋白质水平对肉鸡35和42日龄时磷代谢率无显著影响；张永刚等[11]报道，饲粮有效磷含量不影响饲粮氮的代谢率；与本试验研究结果一致。本试验在各组肉鸡采食相同营养水平的饲粮时对营养物质代谢率进行测定，旨在评价不同动态细分饲粮营养供给方式对肉鸡氮、磷代谢率的影响，研究结果表明各组肉鸡的氮、磷代谢率无显著差异。
3.3 动态细分饲粮营养供给对肉鸡血清生化指标的影响陈德志[12]研究表明，血清的常规生化指标可反映机体各组织器官的功能和机体营养代谢情况。万家余等[13]报道，血清UREA含量能反映机体蛋白质和氨基酸的代谢状况，并可作为蛋白质沉积的一个指标。氨基酸平衡良好时，血清UREA含量下降；UREA含量直接反映动物体内蛋白质的分解代谢水平。瞿明仁等[14]研究发现，当饲粮蛋氨酸水平低于拐点0.44%时，随饲粮蛋氨酸水平的提高，1~4周龄泰和乌骨鸡血清UREA含量下降；饲粮蛋氨酸水平继续上升，血清UREA含量则升高。宋华慧等[15]研究表明，饲粮蛋氨酸水平在0.24%~0.39%时，未对新杨绿壳蛋鸡血清UREA含量产生显著影响。本试验研究结果与以上研究结果部分一致，本试验中，饲粮蛋氨酸水平随着料号的增加而降低，根据本试验中各组肉鸡的饲粮设置可知，A、B、C组肉鸡在同一时期采食的饲粮蛋氨酸水平依次升高，可能是由于3组肉鸡采食的饲粮蛋氨酸水平均在拐点之后，因此导致42日龄时A、B组肉鸡血清UREA含量显著低于C组。由此说明，增加饲粮动态细分程度能更好地满足肉鸡饲粮氨基酸平衡。
血清TP含量反映了机体蛋白质的代谢状况，TP含量高表明畜禽机体蛋白质代谢加强。ALB是血清中含量最高的蛋白质，具有增加抗体、提高免疫力等作用[16]。血清GLB在一定程度上反映了动物机体免疫功能的好坏。崔玉铭[17]研究表明，饲粮粗蛋白质水平降低1.5%对21和42日龄试验鸡的血清TP、ALB和GLB含量无显著影响。罗洪明[18]试验发现，饲粮蛋白质水平对仔猪血清中TP、ALB含量以及ALB与GLB的比值(ALB/GLB)均无显著影响。本试验结果与以上研究结果一致，动态细分饲粮营养供给未对肉鸡血清TP、ALB和GLB含量造成显著影响。
血清TC和TG含量则反映体内脂类代谢情况，脂类在体内运输发生障碍时，血脂含量会升高。雷秋霞[19]研究表明，饲粮蛋白质水平过高会造成血清TC含量的大幅度上升。报道也表明，随着饲粮蛋白质水平的降低，肉仔鸡血清中TC和TG含量呈下降趋势，其中蛋白质水平降低3%的饲粮组血清TC含量显著低于对照组[17]。本研究结果表明，动态细分饲粮营养供给未对肉鸡血清TC和TG含量造成显著影响，与以上研究结果存在差异，原因可能是本试验各组肉鸡采食饲粮蛋白质水平的差异未达到能够引起血清TC和TG含量出现显著变化的阈值。
3.4 动态细分饲粮营养供给对肉鸡血清CORT含量及T-AOC的影响应激是机体对内外环境的各种刺激所产生的非特异性应答反应的总和[20]。闫峰等[21]研究表明，急剧地变更饲粮与营养水平能够导致畜禽产生应激，在一定范围内换料次数和奶牛产奶量之间呈强负相关。邱殿锐等[2]报道，三阶段饲养能更好地过渡饲料更换产生的应激，有利于预防一些代谢性疾病，保证肉鸡的健康。
本研究中，不同动态细分饲粮营养供给方式换料的次数不相同，为了探究其对肉鸡应激状态的影响，选择血清中CORT含量和T-AOC进行测定。胡骁飞等[22]研究表明，动物血清中CORT含量的升高是反映动物产生应激的一个主要指标。高晶[23]报道，应激能够影响家禽的肉品质量，而氧化损伤是应激不利影响的内在原因之一。张亚茹等[24]研究表明，T-AOC可反映机体酶类以及非酶类的抗氧化防御系统对于外界刺激的代偿性作用以及自由基的代谢状态，是评估机体抗氧化功能的综合性指标。本研究中，不同动态细分饲粮营养供给方式并未对血清CORT含量及T-AOC造成显著影响，可能是由于肉鸡本身具有一定的调节能力，能够对一定范围内的应激进行调节适应。
4 结论① 每14 d 1个营养标准可使肉鸡的生产性能达到最佳。
② 增加动态饲粮营养供给的细分程度，能够降低肉鸡血清UREA含量。从实际操作的复杂性考虑，每7 d 1个营养标准可更好地满足饲粮氨基酸的平衡。
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