准确估算饲料真实能值非常重要,既能降低饲料配制成本,又能够满足动物实际生产的能量需要[1]。使用代谢能(ME)和消化能(DE)评定含纤维、蛋白质较多饲粮的能值时结果偏高,而评定含淀粉较多饲粮的能值时结果偏低[2-3]。当饲料含氮营养物质和纤维的含量差异较大时,动物肠道消化利用这些饲料的过程中产热(HP)并不相同[1]。因此与ME体系相比,净能(NE)体系能够更加准确地估计饲料的真实能值[4],它是唯一将动物能量需要量与饲料能量在同一水平上体现并且不受饲料差异影响的能量体系,并且使用NE体系配制动物饲粮还能够降低养殖成本[3]。目前已有玉米、豆粕的肉鸭NE的报道,但还未见肉鸭菜籽粕NE及其预测模型的相关研究;此外,通过动物试验实测NE技术难度大,耗时,所需经费大,能否通过数学分析方法构建其预测模型也是养分有效性评定的一个思路[5]。因此,本研究选择樱桃谷肉鸭为试验动物,通过动物试验测定出不同菜籽粕的NE,并探讨菜籽粕NE与其相应的常规组分之间的相关、回归关系,以期得到理想的肉鸭菜籽粕NE预测模型,从而为快速测定肉鸭菜籽粕NE提供依据。
1 材料与方法 1.1 菜籽粕原料采集及试验饲粮根据我国菜籽粕产地的区域分布和《饲料用菜籽粕》(GB/T 23736-2009)的菜籽粕分级指标,从全国各地收集31个菜籽粕样品。
参考NRC (1994)肉鸭的营养需要,配制基础饲粮1用于测定肉鸭菜籽粕的维持净能(NEm);配制基础饲粮2,将每种菜籽粕样品以15%的比例替代基础饲粮2配制成31个待测饲粮,用于测定菜籽粕的肉鸭沉积净能(NEp)。基础饲粮组成及营养水平见表 1,所有的饲粮均制成颗粒料。
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表 1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis) |
于四川农业大学动物遗传研究所购入1 000只1日龄樱桃谷肉鸭,正常饲养管理至6日龄,期间所有肉鸭饲喂基础饲粮1,在7日龄时所有的肉鸭经禁食24 h后,选取760只平均体重为(130.48±3.01) g的肉鸭,进入正式试验,试验期为8~14日龄,其中随机选择体重接近的20只肉鸭屠宰用于测定初始体成分,剩余的740只肉鸭分为2部分,分别用于测定菜籽粕NEm和NEp。用回归法测定菜籽粕的NEm,共使用100只樱桃谷肉鸭,饲喂水平的设定为自由采食、限饲15%、限饲25%、限饲35%和限饲45%,通过测定不同食入能量水平的HP外推到食入代谢能(MEI)为0时的HP即为禁食产热(fasting heat production, FHP);用比较屠宰法测定菜籽粕的NEp,试验共使用肉鸭640只,其中20只肉鸭用于测定基础饲粮2的NEp,剩余的620只肉鸭用于测定31种菜籽粕饲粮的NEp。NEm和NEp试验均是每个处理5个重复,每个重复4只肉鸭。
1.3 样品采集及实验室分析ME的测定根据Cao等[6]的描述采用全收粪法。每个代谢笼下方均放置集粪板,上面覆盖干净的塑料布,采用全收粪法每隔12 h收集1次排泄物,及时清理掉落的羽毛和饲料。将试验期间每个笼子收集的所有排泄物混合在一起,存放于-20 ℃的冰箱中,并测定其干物质(DM)含量和能量[7]。在试验开始(8日龄)和结束(15日龄)时试验鸭以重复为单位称重,统计试验全期采食量。以重复为单位计算平均日增重、平均日采食量和料重比。15日龄时肉鸭颈椎脱臼安乐死,迅速将胴体放置在-20 ℃冰箱中保存,冷冻胴体被解冻后分解,粗研磨,在混合器中充分混合,得到均匀样本,烘干的肉样细末粉碎后放于密封袋中做进一步的分析。试验饲粮、菜籽粕、肉样和排泄物能值的测定均使用氧弹测热仪(PARR-6400型)。菜籽粕常规组分的测定方法参照国标,具体对应方法如下:DM (GB/T 6435-2006)、粗蛋白质(CP)(GB/T 6432-1994)、粗纤维(CF)(GB/T 6434-2006)、中性洗涤纤维(NDF)(GB/T 20806-2006)、酸性洗涤纤维(ADF)(NY/T 1459-2007)、粗脂肪(EE)(GB/T 6433-2006)、粗灰分(Ash)(GB/T 6438-2007)。
1.4 计算肉鸭菜籽粕NEMEI (MJ/kg)=(食入总能-排泄物总能)/采食量。
计算菜籽粕的NE是将肉鸭菜籽粕NE剖分为NEp和NEm然后求和得到[3],测定肉鸭菜籽粕NEm,用NRC (1981)和Souza等[7]方法计算肉鸭FHP:
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式中:RE为生产能(recovered energy,RE),a、b为常数。
计算FHP,将HP和ME回归推导维持代谢能为0时的MEI即为FHP。
计算肉鸭菜籽粕NEp是初始体内沉积能量与试验末体内沉积能量的差值。
饲粮NE=(NEm×W0.75×7+NEp)/7(W0.75:试验期平均代谢体重)[7-8];
菜籽粕NE=(基础饲粮2的NE-基础饲粮1的NE×0.85)/0.15[7-8]。
1.5 数据处理试验数据用Excel整理后,采用SPSS 22.0软件进行描述性统计,结果以平均值±标准差来表示。不同处理得到的MEI、RE、HP采用单因素方差分析,以P < 0.05作为显著性标准。将菜籽粕NE与其常规组分进行相关性分析,然后用SPSS 22.0对31个菜籽粕样品NE与其常规组分和表观代谢能(AME)进行逐步回归分析,建立菜籽粕NE与其常规组分结合AME的预测模型。
2 结果 2.1 菜籽粕的常规组分含量测定结果实验室测定31种菜籽粕的总能为16.09~19.02 MJ/kg,CP、DM、EE、CF、NDF和ADF含量分别为35.05%~46.33%、88.39%~91.97%、0.42%~3.03%、11.72%~17.82%、25.02%~50.32%、14.46%~19.38%,各常规组分含量情况见图 1,从图可知,31种菜籽粕的常规组分符合《饲料用菜籽粕》(GB/T 23736-2009)标准,并且菜籽粕常规组分之间存在差异。
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图 1 菜籽粕的常规组分(风干基础) Figure 1 Conventional composition of rapeseed meals (air-dry basis) |
FHP试验5个处理樱桃谷肉鸭的MEI、RE、HP见表 2,各组之间HP差异不显著(P > 0.05),除自由采食组与限饲15%组、限饲15%组与限饲25%组的RE差异不显著(P > 0.05)外,其余均差异显著(P < 0.05)。
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表 2 不同饲喂水平下MEI、RE、HP和生产性能 Table 2 The MEI, RE, HP and performance in different feeding levels |
以MEI为自变量,以5个处理相应的HP的对数logHP为因变量进行一元线性回归,得到相应的回归方程和FHP:
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根据关系式,当MEI=0时,FHP为0.557 MJ/kg (W0.75·d)。
2.3 菜籽粕提供给肉鸭的NEm、NEp和NE由表 3可见,通过代谢试验和比较屠宰试验,菜籽粕顶替饲粮提供给樱桃谷肉鸭的NEp为(3.24±1.54) MJ/kg,NEm为(2.11±0.07) MJ/kg,经套算法得到的NE为4.18~6.05 MJ/kg DM,NE/AME为0.56±0.06。
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表 3 基础饲粮1和菜籽粕替代饲粮的NEm、NEp和NE (风干基础) Table 3 The NEm, NEp and NE of basal diet 1 and rapeseed replaced diet (air-dry basis) |
将得到的菜籽粕的NE、AME和常规组分进行相关分析,得到的相关关系见表 4。从表中可以看到NE和AME、NDF、EE和ADF具有极显著的相关关系(P < 0.01)。进一步使用多元线性逐步回归对NE、AME和常规组分进行回归分析,得到的结果见表 5。用菜籽粕NE与常规组分进行逐步回归时,只有NDF、ADF和EE作为进入变量参与模型的构成,而其他的变量则因相关性太低而未进入。使用NE结合AME得到的预测模型的相关性更高。即引入AME后,R2增加到0.901,RSD降低到0.06。
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表 4 菜籽粕NE与AME和常规组分(风干基础)的相关系数 Table 4 The correlation coefficient between NE with AME and conventional composition (air-dry basis) of rapeseed meal |
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表 5 菜籽粕NE的常规组分(风干基础)预测模型 Table 5 The prediction models of conventional composition (air-dry basis) of rapeseed meal NE |
NEm是估计饲料原料NE的关键点之一[9]。NEm的实测是通过不同能量水平下的HP来外推计算得到FHP。目前FHP的测定主要采用呼吸测热室测定或者是NRC (1981)以及Souza等[7]提出的回归公式推导。本试验中得到logHP=0.001MEI+2.115 (R2=0.984),模型的可靠程度较高。本研究得到樱桃谷肉鸭在26~28 ℃的NEm为545.5 kJ/(kg W0.75·d),李杰等[10]运用回归法试验测定天府肉鸭NEm为598.251 kJ/(kg W0.75·d),于乐晓等[11]采用相同的方法得到2~3周龄天府肉鸭的NEm为577.03 kJ/(kg W0.75·d),郑灿[12]采用回归公式测得1~21日龄樱桃谷肉鸭28~32 ℃的FHP为410.3 kJ/(kg W0.75·d)。这些结果表明肉鸭NEm的大小在410.3~598.3 kJ/(kg W0.75·d)。本试验结果与前人结果相近,但与郑灿[12]结果有差异。Kil等[13]研究发现猪NEm的大小在很大程度上受到性别、年龄、环境、基因、生理状态、饲喂水平等的影响。Palander等[14]、Knap[15]、Verstegen[16]发现NEm的大小受到机体体温调节、免疫系统的激活、疾病和应激条件等的影响。Longo等[17]测得13、23和32 ℃时肉仔鸡的NEm分别为667.06、486.27和538.55 kJ/(kg W0.75·d)。Sakomura等[18]研究也发现罗曼蛋鸡的NEm随着试验验温度的升高而降低。由此可见温度的变化会对动物的NEm有明显的影响,另外,而本试验的温度为26~28 ℃,低于郑灿[12]试验温度28~32 ℃。同时,NEm的测定结果会受到试验过程中的动物活动量的影响。Filho等[19]在研究笼养和平养条件下鹌鹑NEm的影响,测得笼养时鹌鹑的NEm低于平养,其原因是平养时动物活动量大,导致HP增加从而增加NEm。Buskirk等[9]测定牛的NEm时发现,特定试验条件会限制动物的活动量从而降低NEm,NRC (1998)推荐优质牧场牛的NEm比试验条件下高10%,而贫瘠牧场的牛的NEm要提高20%。本试验条件肉鸭分笼以及收集排泄物过程造成肉鸭应激导致活动量增大。
综上所述,机体的FHP会受到环境温度、动物活动量等因素的影响,导致测定动物的NEm在一个动态范围内变化,也说明本试验测得的NEm是准确的。
3.2 樱桃谷肉鸭菜籽粕NE和NE/AME在肉鸭上饲料NE的数据还较少[10-11, 20],关于不同动物的菜籽粕NE数据仅有Nair等[21]的结果(12.64 MJ/kg),法国能量体系给出生长猪和育肥猪的菜籽粕NE分别为8.6和9.1 MJ/kg DM。甘维熊等[22]测得生长猪菜籽粕的NE为6.55 MJ/kg DM,已有结果表明动物菜籽粕的NE在6.55~12.8.1 MJ/kg DM之间。本试验得到菜籽粕的樱桃谷肉鸭NE为4.18~6.05 MJ/kg DM,这个结果与猪、牛的结果有一定差异,这可能与动物对菜籽粕的利用效率有关,此外可能与菜籽粕常规组分的不同也有关系。目前还没见关于肉鸭菜籽粕NE的报道,本研究的结果与张琼莲等[23]报道的1~3周龄黄羽肉鸡菜籽粕NE为5.22 MJ/kg DM、李再山等[24]报道的艾微茵肉鸡菜籽粕NE为4.72~7.22 MJ/kg DM基本相当。由于菜籽粕纤维含量较高[15],且与家禽相比,反刍动物和单胃动物大肠消化饲料纤维的能力更强,导致有更高的HP,因此其NE值也较高。本试验测得菜籽粕的AME为8.31~10.44 MJ/kg DM,在反刍动物、猪、蛋鸡、火鸡和肉鸡的菜籽粕ME分别为11.7~13.4 MJ/kg、10.41~16.06 MJ/kg、7.50~9.35 MJ/kg、8.31~10.06 MJ/kg和7.41~10.09 MJ/kg[25],表明本试验获得的菜籽粕NE的数据与相关研究具有一致性。
NE/AME是反映饲料真正被利用的程度,本研究得到的NE/AME为0.56±0.06。李再山等[24]测得艾维茵肉鸡菜籽粕NE/AME为0.59~0.62,Sauvant等[26]和NRC (1998)给出了生长猪菜籽粕的NE/AME为0.61~0.64。Sarmiento-Franco等[27]研究发现家禽饲粮组成能够影响饲料原料NE/AME。De Lange等[28]研究指出,家禽(肉鸭)饲粮中可消化养分变化很小,因此降低了饲料AME转化为NE的效率的变异。Swick等[29]研究发现,饲料中脂肪含量增高会提高NE/AME,而纤维和CP含量的升高则降低NE/AME,Noblet等[30]也报道高蛋白质水平和纤维水平会降低NE/AME,由于本试验菜籽粕添加水平以及CP、NDF含量相对较高,均对试验结果有一定影响。本试验参照Enami等[31]和De Goey等[32]的结果,用15%的菜籽粕代替基础饲粮2配制待测饲粮,从而应用套算法而得到菜籽粕的NE,这种方法会受到替代比例的影响,从而导致菜籽粕NE测定值的变化。本试验的设计和测定方法是参考Dietz等[8]、Souza等[7]和李再山等[24]的研究,研究结果也与他们的结果基本一致,表明运用比较屠宰法结合套算法测定菜籽粕这类高蛋白质、高纤维饲料的NE是可行的。
3.3 菜籽粕NE和其常规组分之间的关系本研究还探讨了菜籽粕NE与其常规组分之间的关系,Noblet等[30]研究指出,通过采用饲料的常规组分可以准确地预测生长猪的DE和ME,同时还表明NDF为最佳的预测因子,本研究发现菜籽粕的NE与其NDF、EE、ADF含量高度相关,并具有显著的回归关系。多元线性逐步回归后发现以AME结合NDF、ADF和CP能最可靠、准确地预测菜籽粕的NE (R2和RSD分别为0.985和0.088)。Noblet等[30]指出ME体系可以比较好地评定富含蛋白质和纤维饲料原料的能值,张欣欣等[33]的结果表明肉鸭饼粕类饲料ME预测模型的最佳预测因子为ADF。孙献忠等[34]也指出在使用常规组分建立饲料有效能值的估计模型时,使用NDF和ADF的预测准确性优于CF。Atkinson等[35]指出肉鸭仅能消化小部分纤维,纤维在肉鸭营养上具有阻碍营养物质吸收的作用。因此,在肉鸭饲料能值的预测模型中,可能是肉鸭对纤维消化能力较弱的特点使其成为最佳的预测因子。本研究发现菜籽粕常规组分中NDF含量较高,且变异较大,这可能也是NDF最为最佳单一预测因子的原因之一。以上研究表明本研究得到的预测方程的预测因子和他人的研究结果基本相同,从而表明使用常规组分建立樱桃谷肉鸭菜籽粕NE的预测模型是可行的。
4 结论① 不同菜籽粕的常规常规组分具有较大的差异,对樱桃谷肉鸭而言,菜籽粕NE为4.18~6.05 MJ/kg DM,NE/AME为0.56±0.06。
② 菜籽粕的NE与其常规组分相关,并具有回归关系,回归方程如下:
NE=0.416AME+0.041CP-0.020NDF+ 0.110CF-1.093 (R2为0.901,RSD为0.06,P < 0.01)。
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