亚油酸(linoleic acid)属于多不饱和脂肪酸(PUFA)家族中n-6系列，因其对机体正常机能和健康具有重要的保护作用，且必须由膳食提供，因此被称为必需脂肪酸，是最早被确认的必需脂肪酸和重要的PUFA[1]。亚油酸作为n-6系列PUFA的原始成员，它可以在体内转化为多种、且在人体生理活动中起着重要作用的PUFA。n-6系列PUFA对高等哺乳动物和禽最为重要，然而对大多数动物来说，在动物营养中PUFA通常只考虑亚油酸[2]。Balnave[3]研究发现，雏鸡缺乏亚油酸时，生长迟缓，饮水量增加，对疾病的抵抗力降低，同时伴随肝脏脂肪含量提高而体积增大，许多组织中二十碳三烯酸的含量升高，亚油酸和花生四烯酸含量降低；公鸡睾丸变小，第二性征发育迟缓。Watkins[4]认为，亚油酸缺乏可引起家禽繁殖障碍，并且对传染病的敏感性提高，可能与有害类二十烷的增多有关。Menge[5]对蛋鸡饲喂以葡萄糖、大豆浓缩蛋白等为原料的饲粮32周，亚油酸含量为2%时，母鸡达到最大产蛋量。王宝维等[6]在基础饲粮不变的情况下，加入含亚油酸丰富的红花籽油2%、4%、6%，改善了鸡的生理状态和产蛋性能。迄今为止，关于家禽亚油酸添加水平的研究主要集中在蛋鸡产蛋性能上，国内外对鹅的亚油酸需要量的研究报道很少，所以NRC (1994)[7]仍然是鹅饲粮添加亚油酸最权威的参考标准。NRC (1994)[7]建议1~4周龄鹅亚油酸需要量为1%，4周龄以后为0.8%。NRC (1994)[7]提出的亚油酸需要量接近防止临床出现典型缺乏症的最低需要量，其推荐的亚油酸需要量虽能让鹅表现正常，但生长性能可能达不到最佳水平，尤其是在商业生产条件下。NRC (1994)[7]提供的亚油酸需要量是否满足鹅的生长，目前相关数据库还处于空白，需要我们进一步研究。为此，本试验以5~16周龄五龙鹅(豁眼鹅)为研究对象，通过研究饲粮中不同亚油酸水平对其生长性能、屠宰性能、肌肉品质、营养物质利用率的影响，旨在确定5~16周龄五龙鹅饲粮亚油酸的适宜水平，为我国肉鹅营养标准数据库提供理论依据。
1 材料与方法 1.1 试验动物与试验设计选择5周龄健康且体重大小基本一致的五龙鹅360只，采用随机分配编号法分为6组，每组6个重复，每个重复10只(公母各占1/2)。Ⅰ组为对照组，饲喂低亚油酸饲粮(亚油酸含量为0.52%)，Ⅱ~Ⅵ组饲粮亚油酸水平分别为0.72%、0.92%、1.12%、1.32%、1.52%。试验期12周。试验鹅由山东莱阳市五龙鹅原种繁育基地提供。
1.2 试验饲粮基础饲粮组成及营养水平参照NRC (1994)家禽营养需要量设计。采用小麦-豆粕型基础饲粮，检测饲料原料中亚油酸含量并根据实测值配制试验饲粮。基础饲粮中亚油酸含量为0.52%，以0.2%为梯度，利用玉米油、牛油和棕榈油调节饲粮中亚油酸含量。试验饲粮组成及营养水平见表 1。
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表 1 试验饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) |
试验前对鹅舍进行全面消毒。全期采取舍饲，地面厚垫料分栏饲养。试验鹅自由饮水和采食，少添喂勤，注意观察鹅群的生长状况。
1.4 测定指标及方法 1.4.1 生长性能16周龄末，分别以重复为单位对试验鹅进行空腹称重，计算5~16周龄的平均日增重(ADG)；每日统计饲粮消耗量，计算平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。每天记录各组死亡及淘汰情况，计算死淘率。
1.4.2 屠宰性能16周龄末，空腹称重，翅静脉采血后对各组试验鹅进行屠宰(共72只，每个重复取2只)；宰前禁食12 h，按照《家禽生产性能名词术语和度量统计方法》(NY/T 823-2004)测定屠体重、半净膛重、全净膛重、腹脂重、胸肌重和腿肌重，并计算屠宰率、全净膛率、半净膛率、腹脂率、腿肌率和胸肌率6项屠宰性能指标。
1.4.3 肌肉品质16周龄末，各重复随机选择2只鹅，6个组共72只，翅静脉采血，屠宰后采用《肉制品检测标准》(GB/T 9695.19-2008)测定肌肉品质。把整个胸肌从胸骨上剥离，取前端胸大肌作为肉样，用日本全自动色彩色差计测定胸肌肉色亮度(L*)、红度(a*)和黄度(b*)值，用物性测试仪(TA-XT PLUS)测定剪切力，用便携式酸度计(HANHA-HI9025)测定pH，用自然蒸发法(吊袋法)测滴水损失，用压力计测失水率。
1.4.4 营养消化代谢试验14周龄时，从各组随机抽取6只鹅(公母各占1/2)移入代谢笼(专利号：200720177297)进行饲养，试验阶段预试期4 d，禁食1 d，正试期3 d，自由饮水，每天分别饲喂100 g的试验饲粮。采用全收粪法连续收集4 d的排泄物。在代谢笼下放置集粪盘，每天定时收集，盐酸固氮，混合后取粪样。
待测饲料粉碎至40 mm，低温干燥保存。粪样在65~75 ℃烘箱中烘干，自然状态下回潮24 h，制成风干粪样，然后用小型万能粉碎机将干粪样粉碎。总能(GE)采用氧弹法进行测定；粗蛋白质(CP)含量采用的FOSS TECATOR QUALITY ASSUR-ANCE设备进行检测；钙(Ca)含量采用高锰酸钾法进行测定；磷(P)含量采用BioSpec-1610核酸蛋白测定仪以比色法进行检测；粗纤维(CF)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)含量采用ANKOM公司生产的ANKOM2000 Fiber Analyzer (NY14450)设备进行检测；粗脂肪(EE)含量采用乙醚浸提法进行测定。营养物质利用率计算公式参照文献[8]。
1.5 统计分析采用SPSS 17.0软件中单因素方差分析(one-way ANOVA)中的LSD法进行多重比较。试验数据以“平均值±标准差”表示。用不相关比较法(orthogonal)分析各指标随饲粮亚油酸水平的线性或曲线反应，采用曲线拟合法确定5~16周龄肉鹅饲粮中亚油酸的适宜水平。P < 0.05和P < 0.01分别为差异显著和极显著水平。
2 结果与分析 2.1 饲粮亚油酸水平对鹅生长性能的影响由表 2可知，Ⅲ组鹅体重、ADG显著高于对照组(P < 0.05)，Ⅳ组鹅体重、ADG极显著高于对照组(P < 0.01)。Ⅲ、Ⅳ组鹅F/G显著低于对照组(P < 0.05)，Ⅲ、Ⅳ组之间鹅F/G差异不显著(P > 0.05)。各组之间鹅ADFI和死淘率差异不显著(P > 0.05)。
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表 2 饲粮亚油酸水平对鹅生长性能的影响 Table 2 Effects of dietary linoleic acid level on growth performance of geese |
通过二次曲线拟合和回归方程分析发现，生长性能与饲粮亚油酸水平之间的曲线拟合不具有显著性(P > 0.05)。由以上结果可知，饲粮亚油酸水平为1.12%时，鹅获得最大体重和ADG；饲粮亚油酸水平为0.92%~1.12%时，鹅的F/G最低。从综合效益角度分析，建议获得最佳生长性能的饲粮亚油酸水平为0.92%~1.12%。
2.2 饲粮亚油酸水平对鹅屠宰性能的影响由表 3可知，5~16周龄，各亚油酸添加组屠宰率均高于对照组，其中Ⅲ、Ⅳ组屠宰率极显著高于对照组(P < 0.01)，Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ组显著高于对照组(P < 0.05)。Ⅳ、Ⅴ组胸肌率显著高于对照组(P < 0.05)。Ⅲ、Ⅳ组腹脂率显著或极显著低于对照组(P < 0.05或P < 0.01)。
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表 3 饲粮亚油酸水平对鹅屠宰性能的影响 Table 3 Effects of dietary linoleic acid level on slaughter performance of geese |
5~16周龄，由于Ⅴ、Ⅵ组之间鹅屠宰率无显著差异(P>0.05)，因此，以Ⅰ~Ⅴ组屠宰率(Y)与饲粮亚油酸水平(X)进行二次曲线拟合，建立回归方程如下：
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由上述曲线回归方程得出，饲粮亚油酸水平为1.09%时屠宰率最高。从综合效益角度分析，建议获得最佳屠宰性能的饲粮亚油酸水平为1.09%~1.12%。
2.3 饲粮亚油酸水平对鹅肌肉品质的影响由表 4可知，饲粮亚油酸水平显著或极显著影响了鹅肌肉L*值、a*值、剪切力、pH和失水率(P < 0.01或P < 0.01)。Ⅲ、Ⅳ组L*值显著高于对照组(P < 0.01)，Ⅴ、Ⅵ组L*值极显著高于对照组(P < 0.01)。Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ组a*值显著高于对照组(P < 0.01)，Ⅳ组极显著高于对照组(P < 0.01)。Ⅳ组剪切力显著低于对照组(P < 0.01)。Ⅳ~Ⅵ组pH显著高于对照组(P < 0.01)。Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ组失水率显著低于对照组(P < 0.01)，Ⅳ组极显著低于对照组(P < 0.01)。饲粮亚油酸水平对鹅肌肉b*值影响不显著(P > 0.05)。
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表 4 饲粮亚油酸水平对鹅肌肉品质的影响 Table 4 Effects of dietary linoleic acid level on meat quality of geese |
以上结果表明，饲粮中添加亚油酸能改善鹅的肌肉品质。
2.4 饲粮亚油酸水平对鹅营养物质利用率和能量利用率的影响由表 5可知，饲粮亚油酸水平显著或极显著影响鹅的CP、EE、钙和磷的利用率(P < 0.01或P < 0.01)。Ⅳ组CP、EE和钙的利用率极显著高于对照组(P < 0.01)。Ⅱ~Ⅵ组磷利用率显著高于对照组(P < 0.01)。饲粮亚油酸水平对鹅CF、NDF和ADF利用率的影响不显著(P > 0.05)。
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表 5 饲粮亚油酸水平对鹅营养物质利用率的影响 Table 5 Effects of dietary linoleic acid level on nutrient availabilities of geese |
由表 6可知，Ⅲ~Ⅵ组粪便氮排泄量显著或极显著低于对照组(P < 0.01或P < 0.01)，沉积氮和氮利用率显著或极显著高于对照组(P < 0.01或P < 0.01)。饲粮亚油酸水平对鹅食入氮的影响不显著(P < 0.05)。
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表 6 饲粮亚油酸水平对鹅氮利用率的影响 Table 6 Effects of dietary linoleic acid level on nitrogen availability of geese |
由表 7可知，各组食入GE、粪便GE排泄量、内源能值、表观代谢能、真代谢能和GE利用率无显著差异(P>0.05)。
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表 7 饲粮亚油酸水平对鹅能量利用率的影响 Table 7 Effects of dietary linoleic acid level on energy availability of geese |
亚油酸是最早被确认的必需脂肪酸和重要的不饱和脂肪酸，但是关于其对动物生长性能方面的研究较少，结果也并不一致。夏中生等[9]报道，在蛋鸡词粮中添加脂肪酸饱和程度和双键位置不同的油脂，对蛋鸡的采食量、产蛋率、蛋重和体重等均无显著影响。Friedman等[10]研究表明，PUFA对肉仔鸡生长性能没有显著影响。Fébel等[11]研究表明，饲粮中添加红花油、豆油、亚麻油、猪油并不影响肉鸡的生长性能。王爽等[12]研究发现，亚油酸水平分别为0.55%、0.75%、0.95%、1.15%、1.35%、1.55%的饲粮，对产蛋初期蛋鸭产蛋性能影响不显著，但饲粮亚油酸水平为0.95%时，产蛋率最高，蛋重及日产蛋重最大，料蛋比最低。张哲等[13]研究表明，在饲粮中添加不同水平PUFA (0、150、250、350 mg/kg)，能够提高肉鸡饲料转化率，降低料重比。本试验结果表明，5~16周龄饲粮亚油酸水平为0.92%~1.12%时，能显著或极显著提高五龙鹅的体重和ADG，显著降低料重比。以上结果表明，亚油酸对鹅促进生长的作用并不是通过提高采食量来实现的，而是通过提高饲料利用率实现的。亚油酸对各种动物生长性能的研究结果和机理有待进一步的研究。
3.2 饲粮亚油酸水平对鹅屠宰性能的影响屠宰率是一个产肉指标，能很好地衡量产肉性能。贾汝敏等[14]认为屠宰率在80%以上产肉性能良好。五龙鹅的屠宰率均在80%以上，说明五龙鹅的产肉性能良好。胸肌率、胸肌率表征家禽的产肉性能，品种、饲粮、饲粮的均衡度对产肉性能都有影响。Pinchasov等[15]研究认为n-6和n-3 PUFA对肉鸡腹脂沉积的影响无显著差异。大量研究表明，肉鸡采食含不饱和脂肪酸的饲粮比饱和脂肪酸相比，可提高肉鸡生长性能，同时减少脂肪沉积。肉鸡脂肪沉积易受饲粮油脂类型的影响，饲喂高水平PUFA的饲粮，肉鸡腹脂沉积减少，且随着腹脂沉积的减少，其他部位脂肪的沉积也随之减少[16-17]。Cortinas等[18]发现增加饲粮PUFA含量，肉鸡皮下脂肪含量降低。王远孝等[19]对黄羽肉鸡屠宰性能的研究表明，在饲粮中添加猪油和豆油混合油脂中，猪油比例分别为0、25%、50%、75%和100%，各组间屠体率、半净膛率和全净膛率均无显著差异；50%组胸肌率比75%组高15.1%，50%组腹脂率比100%组低42.4%。本试验结果表明，亚油酸添加水平为1.09%~1.12%时，能显著提高鹅的屠宰率和胸肌率，降低鹅的腹脂率。虽然各添加组对鹅的半净膛、全净膛和腿肌率影响不显著，但是相比对照组均有增加趋势。大量研究表明，PUFA可明显降低腹脂沉积[20-22]，与本试验研究结果一致，但是关于专门研究亚油酸对五龙鹅屠宰性能的研究尚未见报道，亚油酸影响屠宰性能的机理还有待进一步研究。
3.3 饲粮亚油酸水平对鹅肌肉品质的影响肉色是反映肌肉生理、生化和微生物学变化的综合指标，一般认为肉鸡肌肉的L*值 > 53表示过亮；48 < L*值 < 53表示正常；L*值 < 46表示黑[19]。肉色是由肌红蛋白和少量残留的血红蛋白引起的。肉色还受肌血红蛋白含量、氧化状态和表面的光线反射能力的影响[23]。本试验研究表明，当饲粮亚油酸水平为0.72%~1.12%时，L*值处于正常范围，在亚油酸水平超过1.12%时，鹅肌肉a*值最大。这说明亚油酸可以有效改善肌肉肉色，接近人们平时的选择。
肌肉的剪切力是客观评价肌肉嫩度的主要指标之一，是衡量消费者对肌肉口感满意程度的重要指标，剪切力值愈小肉质愈细嫩，数值愈大肉质则愈粗[24]。肉的嫩度主要取决于肌肉内的肌原纤维和结缔组织，而肌内脂肪通过影响肌原纤维和结缔组织的状态和数量，改善肌肉嫩度，脂肪含量与嫩度呈正相关，当不饱和脂肪酸过多时嫩度也会减小。本试验研究结果表明，饲粮亚油酸水平在1.12%时剪切力最小，当饲粮亚油酸水平过高时，剪切力反而会增大。因此，考虑肌肉嫩度，不适宜加过多亚油酸。
失水率是系水力的重要指标。系水力是肌肉品质的一项重要指标，它不仅影响肌肉的色、香、味、营养成分、多汁性，嫩度等食用品质，而且有着重要的经济价值[25-26]。pH不仅是肌肉酸度的直观表现，而且对肌肉的耐热性、烹煮损失和加工性能有直接的影响，并成为肉品质最重要的指标之一[27]。活体肌肉的pH比中性稍微偏高一些，为7.2左右，屠宰后，肌肉的pH下降，这是由于乳酸的生成引起的[28]。饲粮中亚油酸水平为1.12%时，鹅肌肉失水率显著降低；饲粮中亚油酸水平超过1.12%时，pH的变化范围为6.19~6.22，说明鹅肌肉的持水性较好。
3.4 饲粮亚油酸水平对鹅营养物质利用率和能量利用率的影响油脂本身具能量高、易吸收、易于利用的特性，饲粮添加油脂后减缓了食糜的流通速度，增加了消化时间，从而改善碳水化合物和蛋白质在十二指肠的消化和吸收[29]。脂肪酸消化吸收速度与不饱和程度呈高度相关。Freeman等[30]研究表明，不饱和脂肪酸比饱和脂肪酸更容易消化吸收。Gera等[31]研究表明，含亚油酸丰富的玉米油比猪油脂或牛羊油脂更易被仔猪消化，断奶后周平均消化率分别为84.2%、77.0%、75.4%。Ketels等[32]研究表明，随着动物油脂饱和脂肪酸添加水平的提高，反而会降低它的消化率，不饱和度的脂肪酸越高则代谢能值越高。如果不饱和脂肪酸占主要地位，那么添加的不饱和脂肪酸和基础饲粮中的饱和脂肪酸之问的协同作用会影响脂肪利用率。含不饱和脂肪酸较多的植物油比含饱和脂肪酸多的动物油能量损失要少，相应的其代谢能高于动物油。Alao等[33]试验结果表明，含不饱和脂肪酸较多的植物油比含饱和脂肪酸多的动物油粪能损失要少，相应的其代谢能高于动物油。研究证实，PUFA和长链饱和脂肪酸互作会影响其能值，会产生额外的代谢能，称为协同作用[34]，协同作用会影响脂肪利用率。钙吸收量取决于食物中钙的存在形式以及饮食中抑制及促进吸收的因素，饲粮中添加长链的饱和脂肪酸会限制钙的吸收[35]。有研究表明，花生四烯酸、油酸和亚油酸可刺激肌网释放钙，但在钙离子(Ca2+)富集前加进脂肪酸，则会抑制钙的吸收[36]。饱和脂肪酸可与钙形成不溶性皂类物质(钙皂)而影响钙的吸收。本试验研究表明，当亚油酸水平为0.92%~1.12%时，能显著提高鹅的CP、EE、钙和磷的利用率，降低粪便氮，提高沉积氮和氮利用率，这与前人研究结果基本一致。以上结果说明，亚油酸作为必需脂肪酸具有促进养分吸收的作用，能有效加速动物生长，提高营养物质利用率。
4 结论① 饲粮中适宜的亚油酸水平能够显著提高鹅的体重、ADG、屠宰率和胸肌率，降低F/G、腹脂率。
② 饲粮中适宜的亚油酸水平能够显著提高鹅肌肉L*值和a*值，降低剪切力和失水率。
③ 饲粮中适宜的亚油酸水平能够显著提高CP、EE、钙和磷的利用率，提高沉积氮和氮利用率，降低粪便氮排泄量。
④ 建议5~16周龄肉鹅饲粮亚油酸水平为0.92%~1.12%。
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