硒作为人和动物所必需的微量元素之一，是一些重要含硒蛋白和抗氧化酶的必需组成部分，能够清理体内活性氧化物质，对机体具有抗氧化、抗应激、提高免疫力等生物学功能^[1-3]。硒具有双面效应，硒的毒性很接近其营养剂量，不同种类和来源硒的生物学利用率和功能有显著差异^[2-3]。因此，探讨适宜剂量和形态硒的摄入，研究硒在畜禽产品中的转化与富集，对科学和安全地使用硒及指导富硒畜禽产品生产有非常重要的意义。目前畜禽饲粮中采用的硒源主要有无机硒(硒酸盐或亚硒酸盐)、有机硒(酵母硒或蛋氨酸硒制剂)和纳米硒^[4]。普遍认为，有机硒对提高家禽机体抗氧化能力的影响要优于无机硒^[5-6]，且对改善种禽的繁殖性能有非常好的作用^{[4, 7]}。孙庆艳等^[8]研究认为，酵母硒和纳米硒对改善蛋鸡抗氧化能力的效果较好，酵母硒对提高鸡蛋硒含量更有效；卢建等^[9]的研究也表明，相对于亚硒酸钠，酵母硒中的硒向鸡蛋中的转移速度更快，效率更高。硒在家禽饲粮中的适宜添加量为0.1~0.4 mg/kg，蛋鸽饲粮中的硒(纳米硒)适宜添加量为0.4 mg/kg^[10]，鹅饲粮中建议添加0.28~0.35 mg/kg的硒^[6]，鹌鹑产蛋后期添加0.2 mg/kg的硒(纳米硒)较为适宜^[11]，蛋鸡饲粮中硒(酵母硒)的适宜添加量为0.10~0.30 mg/kg^[12]。另外，燕磊等^[13]在对樱桃谷鸭种鸭上的研究发现，饲粮中添加0.250 mg/kg硒和200 mg/kg维生素E可获得较佳的生产性能和蛋品质。从上述报道来看，这些研究主要探讨了持续补充外源硒的情况下禽蛋品质和蛋硒含量，而补充硒源一段时间后，再停止补充，蛋硒的沉积与动态变化规律以及不同硒源对蛋硒存留时效的影响尚未见报道，且有关蛋鸭特别是临武鸭饲粮中硒的研究亦不多见。因此，本研究以产蛋高峰期临武鸭为试验动物，在饲粮中补充亚硒酸钠和酵母硒，测定蛋鸭生产性能、蛋品质、血清抗氧化能力，并分析撤除外源硒后的一段时间内，鸭蛋中硒含量的变化，比较酵母硒和亚硒酸钠对蛋鸭生产性能、蛋品质、血清抗氧化能力以及蛋硒存留动态变化的影响，探讨不同硒源在鸭蛋中的沉积和存留规律。

1 材料与方法 1.1 试验材料

酵母硒，硒含量为2 000 mg/kg；亚硒酸钠，饲料级，硒含量为1%。

1.2 试验设计与试验饲粮

选取240羽健康状况良好、产蛋率相近的产蛋高峰期临武鸭(29周龄)，随机分成3组，每组5个重复，每个重复16只，进行为期52 d的试验，其中1~42 d按各自分组饲喂不同饲粮，43~52 d各组均饲喂基础饲粮。对照组饲喂基础饲粮(不补充外源硒，实测硒含量为0.183 mg/kg)，试验组在基础饲粮中分别补充0.3 mg/kg亚硒酸钠或酵母硒(以硒计)。基础饲粮组成及营养水平见表 1。

1.3 饲养管理

试验在湖南省畜牧兽医研究所水禽试验场进行，采用双层金属笼立体笼养，单笼饲养，自由采食和饮水(计量不限量)，按常规方法进行饲养管理。

1.4 测定指标与方法 1.4.1 生产性能

试验期间每天按重复记录产蛋总数、总蛋重、采食量和不合格蛋数(包括软壳蛋、破壳蛋、畸形蛋、沙壳蛋)，以组为单位统计平均蛋重、日产蛋量、产蛋率、合格蛋率、平均日采食量和料蛋比。

1.4.2 蛋品质

在试验第42天时每组抽取接近平均蛋重的鸭蛋15枚(每重复3枚)，在24 h内测定蛋黄比率、蛋白比率、蛋壳厚度(蛋壳厚度测定仪)、蛋形指数(游标卡尺测量)、蛋黄颜色(蛋黄比色卡)及蛋白高度(蛋白高度测定仪)，并计算哈氏单位(HU)，计算公式为：

哈氏单位=100×log (H-1.7W^0.37+7.57)。

其中：H为蛋白高度(mm)，W为蛋重(g)。

1.4.3 血清抗氧化能力

在试验第42天时每个重复随机选取2只体重相近的试验鸭，空腹12 h后，翅下静脉采血5 mL，静置30 min后，3 000 r/min离心15 min，分离血清。用比色法检测血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量，试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。采用氢化物原子荧光光谱法(参照GB/T 13883-2008)测定血清中硒含量。

1.4.4 蛋硒含量测定

在试验第28、35、42天以及撤除外源硒后的1~10 d，每组抽取接近平均蛋重的鸭蛋15枚(每重复3枚)，采用氢化物原子荧光光谱法测定蛋硒含量。

1.5 数据统计与分析

采用SPSS 18.0软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，然后通过Duncan氏法进行多重比较。结果用“平均值±标准差”(mean±SD)表示，P < 0.05为差异显著，P < 0.01为差异极显著。

2 结果 2.1 不同硒源对蛋鸭生产性能和蛋品质的影响

由表 2可知，与对照组相比，饲粮中补充0.3 mg/kg的亚硒酸钠或酵母硒对产蛋高峰期临武鸭的平均日采食量、产蛋率、平均蛋重及料蛋比等生产性能指标均无显著影响(P > 0.05)。

由表 3可知，与对照组相比，饲粮中补充0.3 mg/kg的亚硒酸钠或酵母硒对鸭蛋蛋形指数、蛋壳厚度、蛋白高度、蛋黄比例、壳重比例、哈氏单位、蛋黄颜色等蛋品质指标均无显著影响(P > 0.05)。

2.2 不同硒源对蛋鸭血清抗氧化能力的影响

由表 4可知，饲粮中补充0.3 mg/kg亚硒酸钠或酵母硒42 d后，产蛋高峰期临武鸭血清中硒含量分别提高至0.15和0.14 mg/kg，均极显著高于对照组(P < 0.01)，血清GSH-Px活性分别提高到468.29和469.11 U/mL，均显著高于对照组(P < 0.05)；酵母硒组的临武鸭血清中MDA含量最低，仅为4.46 nmol/mL，显著低于对照组和亚硒酸钠组(P < 0.05)。

2.3 不同硒源对蛋鸭蛋硒含量的影响

由表 5可知，与对照组相比，饲粮中补充亚硒酸钠或酵母硒可极显著提高蛋硒含量(P < 0.01)；连续补充42 d再停止补充后的5 d (43~47 d)，亚硒酸钠组和酵母硒组蛋硒含量仍极显著高于对照组(P < 0.01)；停止补充后的6 d (48 d)，亚硒酸钠组的蛋硒含量与对照组差异不显著(P > 0.05)，但酵母硒组的蛋硒含量极显著高于对照组(P < 0.01)，显著高于亚硒酸钠组(P < 0.05)；停止补充后的7、8 d (49、50 d)，酵母硒组的蛋硒含量极显著高于亚硒酸钠组和对照组(P < 0.01)；停止补充后的9、10 d (51、52 d)，各组蛋硒含量恢复到相同水平，差异不显著(P > 0.05)。

3 讨论 3.1 不同硒源对蛋鸭生产性能和蛋品质的影响

有关饲粮硒源对蛋禽生产性能影响的研究结果存在较大差异。胡华锋等^[14]研究认为，饲粮中添加富硒苜蓿能显著提高罗曼蛋鸡产蛋率和日产蛋量，添加酵母硒可显著提高产蛋率；Laika等^[15]也研究认为，饲粮补充蛋氨酸锌硒复合物可显著提高来航蛋鸡的生产性能。而Chantiratikul等^[16]研究发现，采用富硒羽衣甘蓝作为饲粮中的硒源，对蛋鸡的采食量和生产性能无显著影响。孙庆艳等^[8]和Zduńczyk等^[17]的研究也认为，饲粮补充硒源对蛋鸡生产性能没有显著影响。这可能是家禽的品种、生产阶段、基础饲粮中硒含量以及硒源类型的不同所引起。本研究发现，饲粮补充0.3 mg/kg亚硒酸钠或酵母硒对产蛋高峰期临武鸭的生产性能无显著影响。

本研究发现，饲粮补充0.3 mg/kg亚硒酸钠或酵母硒对鸭蛋哈氏单位等蛋品质指标无显著影响，这与燕磊等^[13]在樱桃谷种鸭上的研究类似。这可能与产蛋高峰期蛋鸭机体免疫和抗氧化功能的调控能力较强有关。Payne等^[18]研究认为，在饲粮中添加酵母硒能够减慢鸡蛋哈氏单位下降速度，延长鸡蛋的货架期。曲湘勇等^[11]在鹌鹑上的研究也表明，饲粮中添加纳米硒和酵母硒能极显著延缓鹌鹑蛋在储藏过程中哈氏单位下降。但本试验未涉及储藏过程中鸭蛋品质的研究，尚不能认为饲粮补充0.3 mg/kg亚硒酸钠或酵母硒对储藏过程中鸭蛋品质无影响。

3.2 不同硒源对蛋鸭血清抗氧化能力的影响

硒在十二指肠被吸收进入血液后，与血液中α-球蛋白和β-球蛋白结合，通过血液转运到各组织中^[19]。硒是GSH-Px、硫氧还蛋白还原酶和硒蛋白P等的活性成分，机体通过含硒蛋白或硒酶来调节抗氧化能力^[20-21]。近年来，随着有关硒研究的越来越深入，发现有机硒和无机硒在吸收和转运机制上存在较大差异，有机硒的吸收利用率、生物安全性以及对机体抗氧化能力的提升均高于无机硒^[4]。孙庆艳等^[8]研究表明，与亚硒酸钠和蛋氨酸硒相比，饲粮补充酵母硒和纳米硒对提高蛋鸡血浆GSH-Px活性和总抗氧化能力(T-AOC)的效果更好。Zhang等^[22]研究发现，与亚硒酸钠相比，39周龄岭南黄鸡种鸡饲粮中补充蛋氨酸硒可极显著提高其后代血清和胸肌的GSH-Px活性，血清中GSH的含量以及胰腺的T-AOC。曲湘勇等^[11]研究表明，与对照组相比，酵母硒和纳米硒组血清中GSH-Px、T-SOD活性和T-AOC均极显著提高，MDA含量极显著降低，纳米硒的抗氧化效果高于酵母硒。本研究结果与前人研究结果类似，认为饲粮中补充0.3 mg/kg硒可显著提高临武鸭血清中硒含量，以及血清中GSH-Px活性，饲粮补充酵母硒可显著降低临武鸭血清中MDA含量。

3.3 不同硒源对鸭蛋中硒含量的影响

研究表明，禽蛋硒含量随着饲粮中硒水平的增加而增加^[10]，且有机硒沉积效果优于无机硒^[23-24]。Delezie等^[25]研究发现，饲粮中硒的补充水平会反映在鸡蛋中，补充0.5 mg/kg硒的鸡蛋中硒含量最高，补充0.3 mg/kg的次之，补充0.1 mg/kg的最低；从补充的硒源来看，剂量反映最明显的是蛋氨酸硒，酵母硒次之，亚硒酸钠最低。Jing等^[23]研究发现，有机硒(酵母硒和蛋氨酸硒)可更显著提高鸡蛋中的硒含量，且硒源添加水平较高时，蛋硒含量也较高。卢建等^[9]和蔡娟等^[12]研究表明，酵母硒中硒向鸡蛋中的转移速度比亚硒酸钠更快，效率也更高；且蛋硒含量随着酵母硒补充天数的增加而增加。以上报道都是研究持续补充硒源对蛋硒富集规律的影响，然而持续补充硒源一段时间后撤除外源硒是否会影响蛋硒的存留尚未见报道。本研究表明，饲粮中补充硒源可显著提高蛋硒含量，并将蛋硒含量维持在相对稳定的水平，这与前人研究结果类似。本研究还发现，饲粮中持续补充硒源42 d再停止补充后的5 d内，蛋硒含量均高于对照组；停止外源硒添加，亚硒酸钠组7 d后、酵母硒组9~10 d后蛋硒含量降至对照组水平，酵母硒较亚硒酸钠可延长硒在鸭蛋中的存留时间2~3 d。由此可见，蛋鸭饲粮中补充硒源42 d，可延长撤除外源硒后鸭蛋中硒的存留时间。相对于亚硒酸钠，酵母硒可缓解鸭蛋硒的衰减。这可能是因为饲粮补充硒源可提高鸭血清、肝脏和肌肉中的硒含量^[26]，撤除外源硒后，这些组织中存留的硒逐渐向蛋中迁移富集，使鸭蛋中硒的存留时间更长。具体原因或机理还有待进一步研究。

4 结论

①  饲粮补充0.3 mg/kg酵母硒或亚硒酸钠对产蛋高峰期临武鸭生产性能和蛋品质无显著影响。

②  饲粮中补充硒源能够显著提高临武鸭血清中硒含量和抗氧化能力，以及鸭蛋中硒含量。

③  饲粮中补充硒源，可延长停止补充硒源后鸭蛋中硒的存留时间，相对于亚硒酸钠，酵母硒对蛋硒存留时间的影响更长。