2. 江西中医药大学, 南昌 330004
2. Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China
自从抗生素被证实可防控畜禽疾病并促进畜禽生产以来,抗生素在畜禽饲料中得到了广泛的应用。但由于抗生素类饲料添加剂的乱用、滥用,抗生素残留、细菌多重耐药性和环境污染等问题日渐加剧,并直接影响人类健康和环境安全[1-2]。为了避免局势进一步恶化,欧美等大部分国家已禁止在畜禽饲料中使用预防性抗生素,无抗化成为畜牧业发展的必然趋势,抗生素替代物和替代技术的开发研究也因此备受关注。目前,抗生素替代物的关注点主要集中在功能性寡糖、微生态制剂、抗菌肽以及植物提取物等产品上。作为功能性寡糖的酵母壁多糖,其主要成分为β-葡聚糖和甘露寡糖。研究表明,酵母壁多糖可提高畜禽的生产性能和免疫功能[3-6]。但酵母壁多糖是如何发挥促生长作用的,以及其对断奶仔猪肠道形态结构功能的影响研究还很少报道。因此,本试验旨在研究酵母壁多糖对断奶仔猪生长性能和小肠黏膜形态结构的影响,确定其在断奶仔猪中应用的适宜添加量,并为酵母壁多糖在仔猪饲粮中的科学应用提供理论依据。
1 材料与方法 1.1 试验材料酵母壁多糖来源于拓普生物科技有限公司,其主要成分为甘露寡糖(23.45%)和β-葡聚糖(39.24%),粗蛋白质含量为26.30%,粗灰分含量为3.30%,水分含量为5.35%。
1.2 试验动物和分组设计采用单因素试验设计方法,选取180头遗传背景一致、健康状况良好、胎次和体重接近的21日龄断奶仔猪,随机分为4个组,每组5个重复,每个重复9头仔猪。4个组分别饲喂对照饲粮(对照组)、0.15%酵母壁多糖饲粮(0.15%组)、0.30%酵母壁多糖饲粮(0.30%组)和0.45%酵母壁多糖饲粮(0.45%组)。试验期为21 d。
1.3 试验饲粮和营养水平仔猪饲喂玉米-豆粕型饲粮。饲粮配方参照NRC (2012)和我国《猪饲养标准》(NY/T 65-2004)配制,试验饲粮组成及营养水平见表 1。
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表 1 试验饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) |
仔猪饲养于装有高床、漏缝地板及乳头式饮水器的保育舍。试验开始前对猪舍进行彻底清理消毒。试验过程中,每日饲喂仔猪4~5次。所有仔猪自由采食和饮水,其他饲养管理措施、免疫程序按猪场常规管理程序进行。
1.5 样品采集及处理在试验第21天,从每个重复中选取1头接近平均体重且健康状况良好的仔猪,肌注4%戊巴比妥钠溶液进行麻醉。待麻醉完全后,采用颈静脉放血的办法将其处死,剖开腹腔,剪取仔猪十二指肠、空肠和回肠中段各3 cm肠段。用生理盐水洗去肠道内食糜,然后用滤纸轻轻吸干肠道表面水分。将肠道一端结扎后,置于10%甲醛溶液小广口瓶中固定24 h以上,用于制作石蜡切片。
1.6 测定指标及方法 1.6.1 生长性能试验开始后,观察并记录每天仔猪数和采食量,淘汰或者死亡仔猪应及时称重并做好记录。试验第1、21天清晨以组为单位称重记录,仔猪称重前空腹16 h。以每个重复为单位计算平均日增重(ADG),并以组为单位记录相应的饲料消耗量。计算平均日采食量(ADFI)、ADG和料重比(F/G)。
1.6.2 腹泻率试验期间,每天早上和下午定时观察并记录仔猪腹泻情况。腹泻率按Kelly等[7]的方法进行统计:
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取出10%甲醛溶液中固定的肠道组织,经常规脱水、石蜡包埋、切片、苏木精-伊红(HE)染色后,利用Motic Images Advanced 3.2软件,测量十二指肠、空肠、回肠隐窝深度和绒毛高度,每张切片观察10个视野,并计算绒毛高度/隐窝深度(V/C)值。
1.7 数据处理与统计分析所有数据用Excel 2003简单处理后,采用SPSS 17.0软件中单因素方差分析(one-way ANOVA)模型进行方差分析,各组数据以“平均值±标准误”表示。以P < 0.05为显著性判断标准。
2 结果与分析 2.1 酵母壁多糖对断奶仔猪生长性能和腹泻率的影响由表 2可知,与对照组相比:饲粮中添加酵母壁多糖能够显著提高断奶仔猪ADFI (P < 0.05),0.15%、0.30%和0.45%组分别提高了17.42%、20.04%和16.04%(P < 0.05);饲粮中添加酵母壁多糖能显著提高断奶仔猪ADG (P < 0.05),0.15%、0.30%和0.45%组分别提高了21.57%、23.89%和21.20%(P < 0.05);随酵母壁多糖添加量的增加,试验组断奶仔猪F/G和腹泻率有降低的趋势,但各组之间差异不显著(P > 0.05),其中0.30%组断奶仔猪腹泻率降低了31.68%(P > 0.05)。
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表 2 酵母壁多糖对断奶仔猪生长性能和腹泻率的影响 Table 2 Effects of yeast cell wall polysaccharide on growth performance and diarrhea incidence of weaned piglets |
由表 3可知,与对照组相比,饲粮添加0.45%酵母壁多糖能够显著提高仔猪空肠绒毛高度(P < 0.05),十二指肠和回肠绒毛高度各组间差异均不显著(P > 0.05)。各组十二指肠、空肠和回肠隐窝深度差异均不显著(P > 0.05)。当酵母壁多糖添加量为0.45%时,十二指肠的V/C值为3.17,与对照组相比,增加了7.82%,差异显著(P < 0.05)。与对照组相比,饲粮添加酵母壁多糖能够显著增加空肠V/C值(P < 0.05),0.15%、0.30%和0.45%组分别增加了5.51%、8.09%和9.93%(P < 0.05)。
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表 3 酵母壁多糖对断奶仔猪小肠黏膜形态结构的影响 Table 3 Effects of yeast cell wall polysaccharide on small intestinal mucosa morphology of weaned piglets |
仔猪出生后的几周内,体内的消化酶和免疫系统发生较大改变。初生仔猪可从初乳中获得极高的被动免疫,但在随后的3周内被动免疫水平迅速下降,而主动免疫需要4~5周后才基本建立。实际生产中,早期断奶的时间点正好处于免疫力薄弱、酶活性相对较低、胃酸分泌不足时期,因此,仔猪易出现“断奶应激综合征”,并出现采食量下降、消化不良、饲料转化率降低、免疫力下降和腹泻等现象[8]。功能性寡糖可有效减缓仔猪因断奶应激导致的生长受阻并促进仔猪的生长。游金明等[9]研究表明,甘露寡糖能够显著提高28~41日龄仔猪的ADG和ADFI,显著降低F/G。段丽娟等[10]探讨了酵母β-葡聚糖对断奶仔猪生产性能的影响,结果显示,0.025%的β-葡聚糖可通过提高ADFI而提高试验期内仔猪的ADG,0.050%β-葡聚糖则能显著降低仔猪的腹泻率。研究还发现,酵母壁多糖能够提高断奶仔猪饲粮中营养成分的利用率[11]。本试验结果表明,与对照组相比,饲粮添加0.15%、0.30%和0.45%酵母壁多糖均能够显著提高断奶仔猪ADG和ADFI,并有降低仔猪F/G和腹泻率的趋势。
酵母壁多糖对断奶仔猪的促生长机理可能在于其含有2种主要活性物质--甘露寡糖和β-葡聚糖。甘露寡糖可以竞争性地与病原菌结合并携带病原菌通过肠道,使病原菌无法结合在肠壁上而失去致病能力。酵母壁多糖还能够促进巨噬细胞释放促炎细胞因子--肿瘤坏死因子-α(TNF-α)[12],并参与细胞因子白细胞介素(IL)-1、IL-2和IL-6的释放[3, 13],从而提高仔猪机体免疫力和抗病力,促进猪只健康。
3.2 酵母壁多糖对断奶仔猪小肠黏膜形态结构的影响小肠是营养物质消化、吸收和转运的主要场所,饲粮被充分消化吸收的前提是小肠黏膜结构和功能的完整。因此,畜禽肠管结构发育状况与生长性能密切相关[14]。仔猪在经受断奶应激时,由于饲粮发生改变,小肠绒毛往往变短、隐窝加深、吸收能力下降。这不仅降低了营养物质的消化利用,而且未消化的食糜在肠道堆积使得肠道内渗透压增加,引发腹泻,随之加剧后肠段中有害菌和腐败菌的增殖[15]。由养分消化率下降导致的腹泻将进一步损伤肠绒毛的结构与功能[16],而小肠黏膜结构和功能的完整主要通过小肠的绒毛高度、隐窝深度和V/C值来衡量。李玉欣等[17]研究发现,添加0.2%毕赤酵母甘露寡糖能够显著提高断奶仔猪空肠绒毛高度和空肠、回肠V/C值,并能显著降低断奶仔猪空肠回肠隐窝深度。郭小云等[18]发现,酵母水解物能够显著降低早期断奶仔猪空肠隐窝深度。张少成[19]在肉鸡饲粮中添加1 000~2 500 mg/kg酵母培养物,结果发现十二指肠、空肠和回肠绒毛高度和V/C值显著提高,小肠各肠段隐窝深度显著降低。但是,当酵母培养物添加过量时,肉仔鸡肠道绒毛高度降低,肠黏膜发育受到影响[20]。此外,酵母培养物和酵母壁多糖能不同程度提高空肠、回肠和盲肠中乳酸杆菌和双歧杆菌数量,降低大肠埃希菌等有害菌数量[19],从而保障仔猪肠道健康发育。本试验研究发现,与对照组相比,饲粮添加0.45%酵母壁多糖能够显著提高仔猪空肠绒毛高度和十二指肠V/C值,且在饲粮中添加0.15%、0.30%和0.45%酵母壁多糖均能够显著增加空肠V/C值,这说明酵母壁多糖能够改善小肠黏膜形态结构,提高肠道对营养物质的消化吸收,促进断奶仔猪的生长发育。
4 结论① 饲粮中添加0.30%酵母壁多糖能够显著提高断奶仔猪ADG和ADFI,并能一定程度上降低仔猪腹泻率。
② 酵母壁多糖能够改善断奶仔猪小肠黏膜形态结构,其中以添加量为0.45%效果较好,但与0.30%添加量差异不显著。
③ 综合生长性能、小肠黏膜形态以及经济成本等指标,酵母壁多糖在仔猪饲粮中的适宜添加量为0.30%。
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