必需氨基酸是指动物机体本身不能合成，必须通过从饲粮中摄取以满足机体需要的一类氨基酸。蛋氨酸作为必需氨基酸中唯一的含硫氨基酸，与赖氨酸一起形成玉米-豆粕型饲粮或微生物蛋白合成的第一或第二限制性氨基酸^[1-3]。随着我国羔羊早期断奶技术的推广应用，代乳粉的应用越来越广泛，含有植物蛋白质(尤其是豆类原料)的代乳粉中蛋氨酸往往成为第一限制性氨基酸^[4-5]。如果羔羊机体蛋氨酸缺乏或达不到营养需要，就会影响其正常生命代谢，甚至导致各种疾病的发生。

蛋氨酸作为饲料添加剂能够提高动物机体的生产性能、增强免疫力及预防疾病等^[6-8]。El-Tahawy等^[9]研究发现，饲粮中添加0.33%蛋氨酸能显著提高羔羊的生产性能和增加经济收益。Abdelrahman等^[10]研究报道，饲粮中补充蛋氨酸不仅提高了羔羊对矿物质的生物利用率，还能增加羔羊的生长性能。然而，Obeidat等^[11]研究发现，饲粮中补充蛋氨酸对羔羊采食量、营养物质消化率及生长性能的影响不显著。同样，Hussein等^[12]研究发现，饲粮中补充蛋氨酸不能提高犊牛的平均日增重。这些结果的差异可能与蛋氨酸的用量或羔羊日龄、饲养管理的差异性等因素有关，具体原因还有待于进一步研究证实。另外，内脏器官发育状况对于动物生长发育和新陈代谢具有重要作用，虽然内脏器官仅占到总体重的6%~10%，但却占有机体总蛋白质合成和氧消耗的40%~50%^[13-14]。因此，理论上饲粮蛋氨酸水平限制可能会影响羔羊内脏器官的发育进而影响生长性能，但还缺乏试验验证；同时，饲粮蛋氨酸限制取消后，羔羊内脏器官及生长的发育是否能得到恢复或补偿，还有待进一步研究。因此，本试验从生长性能及内脏器官发育角度，研究饲粮蛋氨酸限制与补偿对湖羊双胞胎断奶羔羊的影响，为羔羊营养参数研究和合理科学饲养提供理论依据。

1 材料与方法 1.1 试验时间和地点

试验于2015年10月2日至2015年12月24日在山东省临清市润林牧业有限公司开展。

1.2 试验设计

试验选取初始体重为(4.93±0.20) kg、发育正常的12对新生湖羊双胞胎公羔羊。所有试验羔羊从出生到1周龄随母哺乳；1周龄后断母乳，人工饲喂代乳粉至8周龄；从2周龄开始补饲开食料，直到12周龄试验结束。

试验采用配对设计，分为2阶段。第1阶段，2~8周龄，分别补充[基础代乳粉+0.70%蛋氨酸，基础开食料+0.40%蛋氨酸，对照(control，CON)组]和限制蛋氨酸[基础代乳粉，基础开食料，限制(restriction，RES)组]；第2阶段，9~12周龄，2组羔羊饲喂相同的饲粮(基础开食料+0.40%蛋氨酸)。

1.3 试验饲粮

试验用蛋氨酸规格：DL-蛋氨酸含量≥99%；干燥减重≤0.5%；砷≤0.002‰；重金属≤0.02‰；硫酸盐≤0.30%；氯化物≤0.20%；灼烧残渣≤0.5%；亚硝基铁氰化钠试验合格；硫酸铜试验合格。

CON组代乳粉中蛋氨酸水平设定参考我国发明专利ZL 02128844.5^[15]；开食料中蛋氨酸水平根据Mirand等^[16]报道设定。基础代乳粉营养水平见表 1，基础开食料组成及营养水平分别见表 2。

1.4 饲养管理

试验正式开始之前，用强力消毒灵溶液对整个圈舍进行全面的消毒，之后每周对所有栏位重复消毒1次。同时，试验开始时所有试验羔羊均进行正常的免疫程序。

试验羔羊在1周龄时断母乳，开始饲喂代乳粉。2周龄每天饲喂4次，3~4周龄每天饲喂3次，5~8周龄每天饲喂2次。代乳粉的饲喂方法参照王波等^[17]报道的方法进行。同时，饲喂量根据试验过程中羔羊的健康状况进行适当的调整，以保证羔羊的正常生长。另外，除了每天按要求进行饲喂外，还需保证CON组和RES组羔羊补饲相近量的代乳粉，同时整个过程自由饮水。

1.5 测定指标和方法及样品采集 1.5.1 饲粮营养水平

代乳粉和开食料中营养水平测定方法：氨基酸含量使用A300全自动氨基酸分析仪测定；代谢能使用Parr-6400氧弹量热仪测定；干物质、粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分、钙、磷含量参考《饲料分析及饲料质量检测技术》^[18]测定。

1.5.2 生长性能

体重：准确称量并记录羔羊的1、8和12周龄末晨饲前体重，计算平均日增重。

采食量：开食料每天准确记录饲喂量和剩料量，用以计算羔羊的采食量；同时，饲喂量根据试验过程中羔羊的健康状况进行适当的调整，以准确记录代乳粉的饲喂量。

料重比：根据平均日增重及采食量计算各阶段的料重比。

1.5.3 器官指数及屠宰性能

器官指数：分别在8和12周龄末屠宰6对双胞胎羔羊，CON组和RES组各6只，屠宰前16 h需要禁食、禁水^[19]，屠宰当日08:00称宰前活重(live weight before slaughter, LWBS)。试验羊经二氧化碳致晕后，颈静脉放血致死。之后剥皮，去头、蹄、内脏后称量胴体重。分离内脏，称量心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小肠及大肠重并计算各器官占宰前活重比例；分离瘤胃、网胃、瓣胃及皱胃并称重，计算每个胃占宰前活重比例及占复胃总重(total stomachus compositus weight, TCSW)比例，准确记录相关的数据。

相关指标计算公式：

空体重(empty body weight, EBW, kg)=宰前活重-胃肠道内容物总重；

胴体重(carcass weight, CW, kg)=宰前活重-皮毛、头、蹄、生殖器官及周围脂肪、内脏(保留肾脏及周围脂肪)的重量；

屠宰率(dressing percentage, %)=100×胴体重/宰前活重^[20]。

1.6 数据处理

试验数据经过Excel 2010初步整理后，使用SAS 9.2统计软件Paired t-test进行配对t检验，P < 0.05为差异显著，P < 0.01为差异极显著。

2 结果与分析 2.1 蛋氨酸限制与补偿对羔羊生长性能的影响

蛋氨酸限制与补偿对羔羊生长性能的影响见表 3。CON组和RES组羔羊1周龄体重差异不显著(P>0.05)，而8周龄RES组体重显著低于CON组(P < 0.05)，但12周龄2组体重差异不显著(P>0.05)。2~8周龄，RES组平均日增重极显著低于CON组(P < 0.01)，同时RES组料重比显著高于CON (P < 0.05)。在9~12周龄和2~12周龄2阶段，CON组和RES组的平均日增重和料重比差异均不显著(P>0.05)。

2.2 蛋氨酸限制与补偿对羔羊屠宰性能的影响

蛋氨酸限制与补偿对羔羊屠宰性能的影响见表 4。8周龄，CON组羔羊的宰前活重、空体重和胴体重均显著高于RES组(P < 0.05)，但是2组的屠宰率差异不显著(P>0.05)。12周龄，2组羔羊的宰前活重、空体重、胴体重和屠宰率均差异不显著(P>0.05)。

2.3 蛋氨酸限制与补偿对羔羊内脏器官指数的影响

蛋氨酸限制与补偿对羔羊内脏器官指数的影响见表 5。8和12周龄，CON组和RES组羔羊内脏器官指数均差异不显著(P>0.05)。

2.4 蛋氨酸限制与补偿对羔羊胃肠道指数的影响

蛋氨酸限制与补偿对羔羊胃肠道指数的影响见表 6。8周龄，CON组羔羊的瘤胃重量显著高于RES组(P < 0.05)，2组羔羊其他胃肠道指数上差异不显著(P>0.05)。12周龄，2组胃肠道指数均差异不显著(P>0.05)。

3 讨论 3.1 蛋氨酸限制与补偿对羔羊生长性能的影响

由于早期断奶羔羊胃肠道发育不成熟，断母乳后的羔羊极易受到培育方式^[21-23]、饲粮组成和环境因素的影响。所以，各营养素含量的均衡性是早期断奶羔羊进行新陈代谢的物质基础。而蛋氨酸作为动物生长过程中蛋白质合成的主要限制性氨基酸^[1]，对于提高动物生长性能和饲粮中蛋白质利用率及降低氮排放具有重要作用。Goedeken等^[24]研究发现，反刍动物饲粮补充蛋氨酸可提高动物的生长性能和氮的有效利用率。Mata等^[25]报道，饲粮中每天添加2.5 g蛋氨酸可显著提高美利奴羊羔羊的生长性能，最终有利于羔羊后期的培育。然而，Wiese等^[26]研究发现饲粮中补充过瘤胃蛋氨酸对于美利奴羊的生长性能、饲粮转化率及胴体重的影响均差异不显著。造成不同的试验结果的原因可能在于试验羔羊的品种、饲粮组成和蛋氨酸水平不一致等。从前人研究发现，饲粮中补充蛋氨酸会影响到羔羊的生长性能。因此，我们推断饲粮蛋氨酸水平限制同样会影响羔羊的生长发育。同时，饲粮蛋氨酸限制取消后，给予补偿充足的蛋氨酸，羔羊生长发育是否能得到恢复或补偿，还有待进一步研究。另外，单一补充或限制蛋氨酸水平对羔羊生长发育进行研究，这也将很难建立蛋氨酸前期限制与后期补偿对羔羊生长发育影响的内在联系。

本试验为了排除遗传因素对试验造成的差异，选择初始重相近的双胞胎公羔羊。同时，本试验基础饲粮中蛋氨酸水平通过人为控制在最低水平，以便研究蛋氨酸限制对早期断奶羔羊生长发育的影响。另外，补充蛋氨酸水平最大限度满足羔羊生长的营养需要，以便研究补充蛋氨酸对早期断奶羔羊生长性能的补偿程度。本试验中，8周龄，RES组羔羊的体重显著低于CON组羔羊。在9~12周龄阶段，RES组蛋氨酸补偿后，12周龄2组的体重差异不显著。这说明蛋氨酸限制对羔羊前期生长有抑制作用，通过补充蛋氨酸后羔羊体重有一定的补偿作用。同样，刘小刚^[27]通过研究饲粮不同能氮营养水平营养限制及补偿对羔羊生长发育的影响，结果发现，营养水平限制后通过营养补偿对羔羊生长有一定程度恢复。另外，本试验中在2组羔羊饲喂量保持相近水平的条件下，2~8周龄阶段的CON组羔羊平均日增重极显著高于RES组，进一步说明蛋氨酸限制对早期断奶羔羊的平均日增重有抑制作用。2~8周龄阶段，CON组处于蛋氨酸限制状态，其料重比显著高于CON组，而补充蛋氨酸后，2组料重比差异不显著。说明蛋氨酸限制不利于羔羊的消化吸收，补充蛋氨酸后2组羔羊对饲粮的消化利用率差异不显著。结果提示，蛋氨酸限制降低了早期断奶湖羊羔羊平均日增重，抑制其生长速度，不利于羔羊对饲粮的消化吸收。

3.2 蛋氨酸限制与补偿对羔羊屠宰性能的影响

在8周龄之前，RES组羔羊处于蛋氨酸限制状态，从生长性能可以看出，断代乳粉时，RES组的体重显著低于CON组，屠宰羔羊是随机选取的。本试验结果表明，除屠宰率外，RES组其余屠宰指标(宰前活重、空体重和胴体重)均显著低于CON组，说明蛋氨酸限制不仅影响生长性能，还显著降低了屠宰性能，最终影响羔羊的产肉。而经过4周蛋氨酸补偿后，在12周龄，RES组的屠宰性能与CON组之间差异不显著，这也与12周龄末的生长性能结果相对应，表明8周龄前代乳粉和开食料的蛋氨酸水平限制了羔羊屠宰性能，在9~12周龄阶段蛋氨酸补偿后，RES组在营养恢复阶段其生长速率较快，缩小了与CON组屠宰性能之间的差距，这与12周龄屠宰时2组羔羊的体重状况相符。同样，Galvani等^[28]研究发现，早期断奶羔羊营养物质不足时，影响其后期的饲粮利用，并延迟达到屠宰体重的时间，而充足的营养物质则可以较快地达到屠宰体重要求，并且能够提高经济效益和肉品质。进一步说明动物在营养限制期结束后，通过营养补偿会不同程度地恢复限制阶段失去的体重^[29]。而Obeidat等^[11]通过饲粮中添加不同水平[0、7、14 g/(头·d)]蛋氨酸，研究对Awassi公羊生长性能、屠宰性能及肉品质的影响，结果发现，随着蛋氨酸水平的增加，蛋氨酸对羔羊的生长性能、屠宰性能和肉品质的影响不显著，这可能由于前期补充蛋氨酸的效果在试验的时间内还没有体现出来或者添加量还达不到Awassi公羊的最佳生长需要。

3.3 蛋氨酸限制与补偿对羔羊内脏器官指数的影响

内脏器官的发育情况是由营养状况和生理状况共同决定的，动物内脏器官重量和器官指数反应了动物机体的发育状况^{[19, 30]}。本试验中，8周龄，CON组和RES组在各内脏器官重量及占宰前活重比例上均差异不显著，这与本试验2组羔羊的体重状况不一致。这可能蛋氨酸限制对于羔羊生长抑制首先表现在机体的重量上，对于具体各内脏器官重量差异还没表现出来。在9~12周龄阶段蛋氨酸补偿后，2组在各内脏器官指数上均差异不显著。同样，Atti等^[31]指出，营养限制及营养补偿对动物机体内脏器官影响不显著。而李东^[32]曾报道，蒙古羔羊经过一段时间营养限制后，当营养水平恢复时，其内脏器官可以完全恢复正常。本试验研究结果与其不相符，因为动物的补偿生长不但受到营养限制开始时的日龄、营养限制的程度以及营养限制的持续时间影响，还受其品种、性别、遗传等方面的影响。因此，本试验中蛋氨酸水平前期限制及后期补偿对于羔羊各内脏器官指数影响均不显著。

3.4 蛋氨酸限制与补偿对羔羊胃肠道指数的影响

由于羔羊幼龄期各胃肠道发育还不健全，此时的营养水平对于胃肠道的发育至关重要。营养物质水平的变化不仅影响胃肠道的分化，还能对各胃室、肠道重量及相对比重产生较大影响^[33]。本试验中，8周龄末，RES组羔羊比CON组显著地降低了瘤胃的重量。这可能由于2~8周龄阶段瘤胃还未发育成熟，并且RES组的蛋氨酸水平较低，因而不利于胃肠道的发育，造成胃肠道失重^[34]。随着日龄的增加，在12周龄时羔羊对营养物质消化吸收主要通过瘤胃和小肠，RES组蛋氨酸补偿后，2组之间的胃肠道指数之间差异不显著。而刘小刚等^[35]通过营养限制及补偿研究对羔羊小肠黏膜生长发育的影响，结果发现，前期营养限制对羔羊的小肠黏膜影响较大，通过补偿后期恢复速度较慢，进而降低其发育速度。本试验结果与其报道不相符，这可能由于本试验中2组饲粮中只有蛋氨酸水平不同，前期蛋氨酸限制对羔羊瘤胃发育的抑制可以通过后期补偿得以恢复。

4 结论

① 2~8周龄，蛋氨酸限制对双胞胎羔羊生长发育产生抑制作用，影响了羔羊的生长性能、屠宰性能。

② 9~12周龄，蛋氨酸补偿后，蛋氨酸限制的双胞胎羔羊在生长性能和内脏器官发育得到恢复。